Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
2. Prova da Coagulase
A prova da coagulase é utilizada para identificar Staphylococcus aureus e diferenciá-
lo de outras espécies do gênero. A enzima coagulase está presente em duas formas: na form a
livre e na forma ligada à célula. A coagulase ligada à célula é detectada pelo método da lâmina
e a livre pelo método do tubo.
Procedimento: Prova em lâmina
1. Colocar uma gota de água destilada estéril ou solução fisiológica estéril sobre uma
lâmina de vidro;
2. Emulsionar a colônia suspeita na gota de salina ou água (fazer uma emulsão densa);
3. Colocar um a gota de plasma sobre a emulsão e homogeneizar;
4. Observar a formação de grumos brancos imediatamente (5 a 20 segundos).
Procedimento: Prova em tubo
1. Colocar 0,5 m l de plasma sem diluição no tubo de vidro;
2. Colocar um a alçada do crescimento bacteriano diretamente no plasma contido no
tubo;
3. Homogeneizar com a própria alça, não agitar;
4. Incubar em banho-maria a 37ºC por 4 horas;
5. Não agitar o tubo, apenas incliná-lo suavemente para verificar a formação de
coágulo. Se não houver formação de coágulo em 4 horas, incubar por 24 horas em banho-maria
a 35ºC.
3. Teste da DNase
Verificar se o microrganismo possui a enzima desoxiribonuclease, a qual degrada o
ácido nucléico (DNA).
Procedimento:Fazer um inóculo denso de forma circular em uma pequena parte do
meio; Incubar a 35±2ºC por 18 - 24 h. (A placa pode ser inoculada com várias cepas);
Decorrido o período de incubação, realizar a leitura: Formação de um halo transparente
ao redor do crescimento bacteriano.
Interpretação:
Formação de halo transparente identifica Staphylococcus aureus;
Ausência de formação de halo transparente identifica Staphylococcus coagulase
negativa.
Interpretação:
Formação de halo amarelo ao redor das colônias, identifica Staphylococcus aureus;
Meio permanece inalterado ao redor das colônias, identifica Staphylococcus coagulase
negativa.