LUISA QUEIROZ

técnicas
espectroscópicas.
1º Apresentação
conteúdo.
01 INTRODUÇÃO

02 ABSORÇÃO

03 FLUORESCÊNCIA
 01

introdução.
 introdução
A espectroscopia é utilizada de maneira geral para
estudar as interações entre matéria e radiação
eletromagnética. Ela permite analisar e caracterizar
propriedades das substâncias, desde moléculas
individuais até materiais complexos.
 espectro
eletromagnético
 02

absorção
absorção
A espectroscopia de absorção é uma técnica que
mede a quantidade de luz absorvida por uma amostra
em função do comprimento de onda ou da frequência.
Ela é usada para estudar as transições eletrônicas e
vibracionais de moléculas e é amplamente empregada
na química analítica, bioquímica e física.
Como funciona?
Na espectroscopia de absorção, uma fonte
de luz emite um feixe de radiação que
passa por uma amostra. A amostra absorve
parte da radiação, e a radiação restante é
transmitida a um detector. A quantidade de
radiação absorvida pela amostra é medida
em função do comprimento de onda ou da
frequência, resultando em um espectro de
absorção.
 Instrumentação
Em uma típica operação, é feita uma
medição da luz transmitida somente pelo
solvente, seguida por uma medição da luz
transmitida pela amostra quando
dissolvida no mesmo solvente.
A absorvância do soluto é obtida ao
subtrair o primeiro valor do segundo.

As medidas de absorvância são

ESPECTROFOTÔMETRO
feitas em um espectrofotômetro
 03

fluorescência
 Fluorescência no Estado
Estacionário
Quando a absorção de um fóton é seguida por
emissão de luz de um comprimento de onda maior,
esta emissão é chamada de fluorescência.

Quando a energia da luz é A molécula excitada, Como parte da energia é

absorvida, a molécula então, retorna a G pela perdida para o nível mais
passa de um nível de emissão de luz baixo de S1, a luz emitida
energia mais baixo para (fluorescência) ou por terá menos energia
um mais alto uma transição não-
radiativa.
instrumentação.
Um feixe de luz de alta intensidade passa através de um monocromador
para a seleção de um comprimento de onda de excitação. O feixe de luz
de excitação passa através de uma célula contendo a amostra.

MONOCROMADO
R
 Tipos de fluoróforos
Dois tipos de fluoróforos são usados em análise
de fluorescência de macromoléculas –
fluoróforos intrínsecos e fluoróforos
extrínsecos

Medidas de Para proteínas

fluorescência intrínseca Há somente três fluoróforos intrínsecos –

triptofano, tirosina e fenilalanina (em ordem

para estudo de proteínas. de maior para menor Q).

A fluorescência de cada um deles pode ser
distinguida pela excitação e observação em
comprimentos de onda apropriados.

disc.
A principal razão para estudar a fluorescência
intrínseca de proteínas é obter informações

5%
sobre sua conformação.

for this month

referências.
2.ESPECTROSCOPIA (PDF)

HTTPS://EDISCIPLINAS.USP.BR/PLUGINFILE.PHP/7838937/
MOD_RESOURCE/CONTENT/1/SLIDES_AULA_EA.PDF

HTTPS://WWW.MAXWELL.VRAC.PUC-RIO.BR/
17692/17692_4.PDF

HTTPS://JASCO.COM.BR/PRINCIPIOS-DE-ESPECTROSCOPIA-
DE-FLUORESCENCIA-2/

Fim!