CICLO DE KREBS

Viso Geral
Descaboxilao do piruvato
Etapas intermediarias
Estequiometria do ciclo
Controle do ciclo
Reaes anaplerticas
Ciclo versus linear

DESCABOXILAO DO PIRUVATO
CICLO KREBS
VISO GERAL DO CICLO
RESPIRAO CELULAR
COMO A GLICOLISE SE RELACIONA
COM O CICLO
QUEM ESTE
INDIVIDUO?
1930: Elucidao da Gliclise
Estudo da oxidao de glicose pelos msculos;
adio de malonato inibe a respirao (i.e. O
2
uptake).
Malonato um inibidor da oxidao do succinato a
fumarato
1935: Szent-Gorgyi: demonstraram que pequenas
quantidades (quantidades catalticas) de succinato,
fumarato, malato ou oxaloacetato, aceleracam a taxa
de respirao.
Ele tambm mostrou a inter-converso sequencial :

Succinato --- Fumerato --- malato ---oxaloacetato.
Perspectiva Histrica
Perspectiva Histrica
1936: Martius & Knoop: Encontraram a seguinte seqncia
de reaes:
Citrato a cis-aconitase a Isocitrata a cetoglutarato a
succinato

1937: Krebs:
Converso enzimtica de Piruvato + Oxaloacetate a citrato
e CO
2


Descobriu o ciclo dessas reaes e encontrou que esta
via o principal caminho para a oxidao do piruvato no
msculo
Krebs - Malonato
O esquema bsico de 1937 tem resistido ao teste do tempo. Existem
evidentemente grandes vazios em relao ao mecanismo da formao do
citrato a partir de oxaloacetato e piruvato.
Citado em H. Krebs (1970) The history of the tricarboxylic acid cycle.
Perspect. Biol. Med. 14: 151-170
-H
2
O
+ 2H -2H
OAA Malato


Trioses
CH
2

C= O
COOH
COOH
COOH
CH
2
O
CH
2

COOH
-2H
+2H
Fumarato Succinato
WK
O
2

Oxaloacetato -
OAA
Acetil - CoA
citrato + CoA
Piruvato
Lipman - CoA
Ochoa e Lynem mostraram que a acetil- coenzima A
(acetil-CoA) o intermedirio que reage com o
oxaloacetato para formar citrato.
REAO GERAL
Reao em tres etapas
QUEM CATALIZA?
C1 C2
2 e-
SEMPRE LIGADO ENZIMA
BERI BERI DOENA FALTA
VITAMINA PP (TIAMINA)

PRIMEIRA etapa
Citrato sintase
Quais so as etapas desta reao?
His 274 doa 1 H+ para acetil CoA

H+ metil removido ASP 375
H+ His 320 OAA
ATAQUE ENOLICO
FORMAAO C-C
Sai Co A DEPOIS CITRATO
CITRIL CoA NO
HIDROLISADO POR QUE?
ORDEM DE LIGAO E
FUINDAMENTAL OAA LIGA
PRIMEIRO QUE ACoA
MUDANA DE CONFORMAAO
IMPEDE A HIDROLISE
DESNECESSARIA
SEGUNDA ETAPA
aconitase
Onde citrato se liga na enzima?
CENTRO FERRO ENXOFRE
Etapas seguintes

Descarboxilao oxidativa do isocitrato formando -cetoglutarato
(remoo de um hidreto) seguida por uma descarboxilao)
2 descarboxilao oxidativa
R5: Succinil-CoA Sintetase
FOSFORILAO A NVEL DE SUBSTRATO
GTP+ADP ATP+GDP
ETAPAS FINAIS
R6: Succinato Desidrogenase
: Fumarase
Malato Desidrogenase
NO REVERSSIVEL
EM ANIMAIS
PASSO COMPROMETIDO
ENVENENAMENTO POR ARSENITO/HG
O ciclo do cido Ctrico uma
via anfiblica
Intermedirios para Biossntese
-cetoglutarato transaminado produzindo
glutamato, que pode ser usado pra fazer
nucleotdeos (purinas), Arg e Pro
Succinil-CoA pode ser usado para sntese de
porfirinas
Fumarato e oxaloacetato podem ser usados na
sntese de diversos aminocidos e tambm
nucleotdeos (pirimidinas)
Reaes Anaplerticas
Piruvato carboxilase converte piruvato a OAA
PEP carboxilase converte PEP a oxaloacetato
Enzima Malica converte piruvato em malato
R
e
a

e
s

A
n
a
p
l
e
r

t
i
c
a
s

O ciclo de Krebs Redutivo
O inverso do ciclo poderia assimilar CO
2

Este pode ter sido a primeira via metablica
Qual a fonte de energia para dirigir esta via?
Poderia ser uma reao envolvendo FeS com
H
2
S para formar FeS
2
(pirita de ferro)
pirita de ferro, era abundante na era primitiva e
uma verso antiga dos clusters de ferro-
enxofre!
Bacteria anaerobica usa o CAC incompleto para a produo de
precursores biossinteticos. Elas no tem a alfa-cetoglutarato
desidrogenase.
Regulao do Ciclo
Novamente, 3 reaes do ciclo so chaves
Citrato sintase - ATP, NADH e succinil-CoA
inibem
Isocitrato desidrogenase - ATP inibe, ADP e NAD
+

ativam
-cetoglutarato desidrogenase - NADH e succinil-
CoA inibem, AMP ativa
+
Piruvato desidrogenase: ATP, NADH,
acetyl-CoA inibem, NAD+, CoA ativam

Regulao do Ciclo do cido
Ctrico
Onde? 4 passos regulados
Energtica do Ciclo do cido
Ctrico
NADH = 2.5 ATP
GTP = ATP (NDPK)
FADH
2
= 1.5 ATP
1 volta (1 acetil-CoA) = 12 ATP
eficincia vs. Energia utilizada
Estequiometria da reduo de Coenzimas e
formao de ATP
Transporte por lanadeiras de equivalentes de
reduo NADH do citoplasma para a mitocndria.

A NADH desidrogenase da membrana mitocondria linterna
aceita eltrons apenas do NADH na matriz. Sabendo-se que a
membrana interna no permevel ao NADH citoslico, como
ento o NADH gerado do lado de fora da mitocondriapode ser
reoxidado pela CTE?

Lanadeira glicerol-fosfato: funciona no msculo esqueltico e
no crebro.

*Lanadeira malato-aspartato: funciona nas mitocndrias do
fgado, rim e corao.
Transporte de NADH
lanadeira 1:
Glicerolfosfato
Transporte de NADH Lanadeira 2:
Malato-
aspartato
o citrato mitocondrial pode ser exportado para
ser uma fonte citoplasmtica de acetil-CoA e
OAA
Sites interessantes
http://www.wiley.com/legacy/college/boyer
/0470003790/animations/tca/tca.htm
http://www.brookscole.com/chemistry_d/te
mplates/student_resources/shared_resources
/animations/pdc/pdc.html
http://science.nhmccd.edu/biol/bio1int.htm
http://www.science.smith.edu/departments/
Biology/Bio231/krebs.html
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http://www.wiley.com/legacy/colle
ge/boyer/0470003790/animations/t
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http://http://science.nhmccd.edu/bio
l/bio1int.htm
http://science.nhmccd.edu/biol/bio1
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http://www.science.smith.edu/depar
tments/Biology/Bio231/krebs.html