Acetil CoA e Ciclo de Krebs

Prof. Henning Ulrich

Glicose + Consumo de 2 ATP
2 cidos Pirvicos + 4H
+
+ Produo de 4 ATP
(2C
3
H
4
O
3
)
2H
+
so Transportados pelo NAD passando
Para o estado reduzido de NADH
Obs: Consumo de 2 ATP e Produo de 4ATP

(RENDIMENTO ENERGTICO: 2 ATP)
C
6
H
12
O
6
+ 2ADP + 2P + 2 NAD = 2C
3
H
4
O
3
+ 2ATP + 2NADH
EQUAO GERAL DA GLICLISE
Na mitocndria
No citossol

3 NAD
+
+FAD +GDP + P
i
+ acetil CoA + 2 H
2
O 3 NADH + 3H
+
+ FADH
2
+GTP + CoA + 2CO
2
Ciclo de Krebs:

A oxidao da acetil CoA fornece 8 eltrons para a reduo de 3 NAD+ e de 1
FAD
Descarboxilao do piruvato:


Piruvato Coenzima A Acetil CoA

Reduo de 1 NAD
+

Formao de acetil CoA (rica em energia)
O poder redutor ser usado para gerar um gradiente eletroqumico atravs da membrana da
mitocndria
H
3
C-
+ H
+
A energia qumica ganha na oxidao da glicose utilizada para
reaes endergnicas de sntese de molculas estruturais da clula
Oxidao de glicose
O acetil CoA produzido atravs de piruvato, amino-
cidos e cidos graxos oxidado no ciclo de
Krebs em CO
2
, obtendo-se como produtos
NADH, FADH
2
e GTP (ATP).

Paralelamente a esta oxidao, o ciclo de Krebs
produz compostos utilizados como precursores
para biossntese.

Como um ciclo, uma molcula de oxalacetato
poderia, em principio, oxidar uma quantidade
indefinida de acetil CoA.

1. Complexo multi-enzimtico piruvato desidrogenase
2. Ciclo de Krebs
3. Regulao do ciclo de Krebs
4. Reaes anablicas e transporte de metablitos
Ciclo de Krebs (cido Ctrico)
A hidrlise da ligao de tioester (rico em energia; delta G0= -34 KJ/mol)
Acetil-CoA (acetil-coenzima A)
CH3-COO- + CoASH CH3-CO-SCoA
ATP AMP + PPi
Dois complexos multi-enzimticos

- Piruvato desidrogenase
(Piruvato acetil CoA)
a-cetoglutarato desidrogenase
(a-cetoglutarato succinil CoA)

Os dois so membros da famlia de 2-cetocido desidrogenases
A acetil-CoA formada a partir da descarboxilao oxidativa do piruvato,
realizada sequencialmente pela piruvato desidrogenase PDH (complexo
multienzimtico de 3 enzimas), na matriz mitocondrial:
Desidrogenase pirvica (grupo prosttico TPP)
Dihidrolipoiltranscetilase (grupo prosttico Lipoamida)
Dihidrolipoildesidrogenase (grupo prosttico FAD)
e 5 coenzimas:
Tiamina pirofosfato (TPP) reage com o piruvato
Lipoamida aceita grupo acetil e transfere-o para o CoA
CoA aceita grupo acetil
FAD aceita equivalentes redutores
NAD+ aceita equivalentes redutores
Sntese de Acetil-CoA:
1-Descarboxilao oxidativa do piruvato
O complexo multi-enzimtico de piruvato desidrogenase:
Formao de acetil-CoA

Piruvato + coenzima A + NAD
+
AcetilCoA + NADH + CO
2

Piruvato desidrogenase (E1)
Diidrolipoil transacetilase (E2)
Transferncia do grupo
hidroxietil para E2 e oxidao
do hidroxietil carboniono para
um grupo acetil.
Dihidrolipoil
desidrogenase (E3)
E3 reducido
oxidado por NAD+
Reaco global:
Os reagentes que iniciam o ciclo de Krebs so acetyl-CoA e oxalacetato.
O ciclo renova o oxaloacetato. A concentrao de oxaloacetato determina a
velocidade do ciclo.
8 reaes enzimticas:

1. Citrato sintase: Acetil CoA + oxalo-acetato+ H
2
O Citrato + CoA-SH
(Condensao)
2. Aconitase: Citrato Isocitrato (Isomerizao)
3. Isocitrato desidrogenase:
Isocitrato + NAD
+
a-Cetoglutarato + CO
2
+ NADH + H
+
(descarboxilao
oxidativa)
4. Complexo de a-Cetoglutarato desdrogenase:
a-Cetoglutarato + CoA-SH +NAD
+
Sucinil CoA + CO
2
+ NADH + H
+
(descarboxilao oxidativa)
5. Succinil CoA + GDP Sucinato + GTP + CoA-SH (Fosforilao
(succinil CoA sintase) ao nvel de substrato)
6. Succinato +FAD Fumarato + FADH
2
(succinato desidrogenase )
7. Fumarato + H
2
O Malato (Hidratao) fumarase
8. Malato + NAD
+
Oxalacetato + NADH +H
+
malato desidrogenase

3 NAD+ +FAD +GDP + Pi + acetil CoA + 2 H
2
O 3 NADH +H
+
+ FADH
2
+GTP + CoA + 2CO
2
Os passos do ciclo de Krebs
a-cetoglutarato desidrogenase complexo multi-enzimtico funciona como
piruvato desidrogenase

a-cetoglutarato desidrogenase (E1) Piruvato desidrogenase (E1)
Diidrolipoil transuccinilase (E2) Diidrolipoil transacetilase (E2)
Diidrolipoil desidrogenase (E3) Diidrolipoil desidrogenase (E3)

1.




2.





3.
As reaes exergnicas ajudam a catalisar reaes endergnicas
Aumento da concentrao de
citrato
Diminuio da concentrao de
isocitrato (formao de a-
cetoglutarato)


K ([produto/reagente]) longe do
equilbrio e reao acontece
Regulao da velocidade do ciclo de cido ctrico
Por qu ?

Ciclo acoplado a reoxidao do NADH + H
+
e FADH
2
,
consumo de oxignio e a produo de ATP.
Cadeia de transporte de eltrons diretamente acoplada
ao ciclo de cido cclico.

H 3 reaes extremamente exergnicas, com DGo negativos, catalisadas por:
- Citrato sintase
- Isocitrato desidrogenase
a-cetogluatarato desidrogenase

que funcionam longe de equilbrio.



Regulao da velocidade do ciclo de cido ctrico
Regulao da velocidade do ciclo de cido ctrico
Velocidade regulada por disponibilidade de acetil CoA, oxaloacetato e NAD+
Na mitocndria, as concentraes desses substratos so menores que a concentrao da
citrato sintase.

2. Inibio da reao pelo produto
O produto da reao catalisada pelo citrato sintase, o citrato um inibidor competitivo pela
ligao do oxalacetato ao centro cataltico da enzima.

3. Inibio alostrica
Altas concentraes de ATP inibem a isocitrato desidrogenase.

4. Inibio do tipo feed-back:
Altas concentraes de succinil-CoA (downstream no ciclo) competem com acetil CoA
para ligao ao centro cataltico da piruvato desidrogenase.

5. Fosforilao ao nivel do substrato:
O complexo de piruvato desidrogenase inativo quando fosforilado. A contrao do
msculo induzida pelo aumento de clcio intracelular. O clcio liberado ativa uma
fosfatase que desfosforila e ativa a enzima.


1. Disponibilidade de substrato
Regulao da atividade da piruvato desidrogenase por fosforilao
Inativo
Ativo
Inativo
Formao dos metablitos do ciclo de Krebs
1. Aumento da concentrao de oxaloacetato, aumento da velocidade, mais NADH + H
+
e
FADH
2
produzida, porm mais ganho de ATP.
2. Metablitos utilizados para sntese de compostos de armazenamento de energia.
3. Sntese de elementos estruturais da clula, como cidos nuclecos.

Alguns passos do ciclo so reversveis
Reaes reversveis do ciclo de cido ctrico
Funes anfiblicas do ciclo de Krebs
Vias anaplerticas fornecem intermedirios do ciclo.
Vias anablicas removem intermedirios do ciclo para sntese de glicose, cidos graxos,
aminocidos e porfirinas.
Aumento da concentrao dos reagentes do ciclo


Piruvato carboxilase - converte piruvato para oxaloacetato
Piruvato + CO
2
+ATP oxaloacetato + ADP + P
i

PEP carboxiquinase (no musculo)


Piruvato + CO
2
+ GDP oxaloacetato + ADP + Pi


PEP (fosfoenolpiruvato) carboxilase - converte PEP para
oxaloacetato (em plantas )
Fosfoenolpiruvato + CO
2
oxaloacetato + P
i
Enzima mlica converte piruvato para malato
Piruvato + CO
2
+NAD(P)H +H
+
malato + NAD(P)
+

Aumento da concentrao de oxaloacetato
Transporte atravs da Membrana
Gliclise / gliconeognese /
Sntese de cidos graxos
Ciclo de Krebs /
b-oxidao
Aproveitamento do Lactato no ciclo
de Krebs e na gliconeogenese
Resumo

1. O complexo multienzimtico de piruvato desidrogenase que contm trs
enzimas e cinco cofatores que produz acetil-CoA a partir do piruvato.

2. O grupo acetato da acetil-CoA oxidado a duas molculas de CO2, com
gerao de 3 NADH, 1 FADH2 e 1 GTP. A energia liberada quando as
coenzimas so reduzidas armazenada na forma de ATP com reduo do
oxignio.

3. O ciclo regulado nas 3 enzimas que catalisam reaes exergnicas:
citrato sintase, isocitrato desidrogenase, e a-cetoglutarato desidrogenase.
(disponibilidade de substrato; inibio da reao enzimtica pelo produto).

4. Ativao e inibio alostrica (NAD, NADH, ADP, ATP e clcio).