BIOFILMES BUCAIS

Page e Korman (1997)

Fatores de Risco Ambientais e Adquiridos Fatores de Risco Genticos

DESAFIO MICROBIANO

RESPOSTA IMUNOINFLAMATRIA

METABOLISMO DO TECIDO SSEO E CONJUNTIVO

SINAIS CLNICOS DA DOENA PROGRESSO

TOLERNCIA AO O 22 TOLERNCIA AO O

Aerbias: bactrias crescem muito bem em Aerbias: bactrias crescem muito bem em atmosfera normal; atmosfera normal; Microaerfilas: bactrias crescem melhor em Microaerfilas: bactrias crescem melhor em atmosfera de O 22 reduzido; atmosfera de O reduzido; Anaerbias: crescimento na ausncia de O 22 ; Anaerbias: crescimento na ausncia de O ;

Anaerbicas facultativas: crescem tanto em Anaerbicas facultativas: crescem tanto em ambiente anaerbio quanto aerbio; ambiente anaerbio quanto aerbio; Capnoflicas: bactrias crescem em ambiente Capnoflicas: bactrias crescem em ambiente com timas concentraes de CO 22.. com timas concentraes de CO

ECOLOGIA BUCAL ECOLOGIA BUCAL

estuda a relao entre a estuda a relao entre a microbiota e a cavidade bucal microbiota e a cavidade bucal
(competio pela sobrevivncia) (competio pela sobrevivncia)
desequilbrio ecolgico desequilbrio ecolgico doena infecciosa doena infecciosa

OBJETIVOS OBJETIVOS

estudo dos mecanismos de estudo dos mecanismos de implantao e de colonizao implantao e de colonizao bacteriana; bacteriana; estudo das influncias da microbiota estudo das influncias da microbiota bucal sobre o hospedeiro; bucal sobre o hospedeiro; estudo das relaes biticas entre os estudo das relaes biticas entre os diversos componentes da microbiota diversos componentes da microbiota bucal; bucal; estudo das influncias do meio estudo das influncias do meio ambiente bucal sobre a microbiota. ambiente bucal sobre a microbiota.

ECOSSISTEMA BUCAL ECOSSISTEMA BUCAL

epitlio bucal; epitlio bucal; dorso lingual; dorso lingual; superfcie dentria supragengival; superfcie dentria supragengival; regio subgengival; regio subgengival; saliva. saliva.

ECOSSISTEMA BUCAL ECOSSISTEMA BUCAL

dorso da lngua dorso da lngua

regio supragengival regio supragengival

MICROBIOTA BUCAL MICROBIOTA BUCAL

Podemos observar: Podemos observar:

500 espcies de bactrias; 1 500 espcies de bactrias; 1 indivduo -150 espcies indivduo -150 espcies 750 milhes de bactrias/ml de 750 milhes de bactrias/ml de saliva; saliva; 160 bilhes de bactrias/g de 160 bilhes de bactrias/g de material do sulco gengival; material do sulco gengival; 200 bilhes de bactrias/g de 200 bilhes de bactrias/g de biofilme. biofilme.

Estgios ecolgicos no estabelecimento Estgios ecolgicos no estabelecimento da comunidade microbiana da comunidade microbiana (nmero de bactrias e freqncia) (nmero de bactrias e freqncia) ((S. salivarius bacteriocinas)) S. salivarius bacteriocinas ((S. oralis e S. sanguis // adesinas) S. oralis e S. sanguis adesinas)

transmisso transmisso

aquisio aquisio espcies pioneiras espcies pioneiras

sucesso sucesso aumento da diversidade microbiana aumento da diversidade microbiana comunidade clmax comunidade clmax

MICROBIOTA BUCAL MICROBIOTA BUCAL

espcies >1% (stio particular) espcies >1% (stio particular) espcies < 1% espcies < 1% Lactobacillus (10-5 10-3 // microbiota vivel) Lactobacillus (10-5 10-3 microbiota vivel) e S. mutans e S. mutans

MICROBIOTA autctone MICROBIOTA autctone

MICROBIOTA suplementar MICROBIOTA suplementar

MICROBIOTA transitria MICROBIOTA transitria

Loesche (1994) Loesche (1994)

ANIMAIS ANIMAIS

germ-free germ-free convencionais convencionais gnotobiticos gnotobiticos

Fatores que influenciam Fatores que influenciam a aquisio ou que a aquisio ou que interferem no equilbrio interferem no equilbrio da microbiota bucal. da microbiota bucal.

ANAEROBIOSE ANAEROBIOSE

Tenses de O22 na cavidade bucal Tenses de O na cavidade bucal

meio ambiente meio ambiente 21% (160mmHg) 21% (160mmHg) cavidade bucal cavidade bucal 12 14% 12 14% bolsa periodontal bolsa periodontal 1 2% 1 2%

Potencial de Potencial de xido-Reduo (Eh) xido-Reduo (Eh)

reflete a quantidade de reflete a quantidade de oxignio oxignio Eh da saliva = +200mV Eh da saliva = +200mV

 O sucesso universal dos O sucesso universal dos anaerbios nas membranas anaerbios nas membranas mucosas indica que esta mucosas indica que esta relao to estvel que deve relao to estvel que deve ser considerada uma relao ser considerada uma relao simbitica. simbitica.
Loesche (1994) Loesche (1994)

 temperatura -- 36C 36,5C temperatura 36C 36,5C

influencia na atividade influencia na atividade enzimtica, pH, solubilidade, enzimtica, pH, solubilidade, crescimento; crescimento; pH ( saliva) = 6,25 -- 7,25; pH ( saliva) = 6,25 7,25;

SALIVA SALIVA
fluxo salivar; fluxo salivar; fatores agregantes - protenas fatores agregantes - protenas Ac; Ac; capacidade tampo; capacidade tampo; atividade antimicrobiana. atividade antimicrobiana.

Aderncia ou Adeso Aderncia ou Adeso

aderncia s superfcies bucais mucosa aderncia s superfcies bucais mucosa e dentes S. salivarius S. sanguis ;; e dentes S. salivarius S. sanguis aderncia interbacteriana aderncia interbacteriana coagregao // coadeso. coagregao coadeso.

Fluido Gengival Fluido Gengival

atividade mecnica atividade mecnica atividade microbiana atividade microbiana

Descamao Epitelial Descamao Epitelial Fatores Sistmicos do Hospedeiro Fatores Sistmicos do Hospedeiro Higiene Bucal Higiene Bucal Uso de Antimicrobianos Uso de Antimicrobianos

FONTE DE NUTRIENTES FONTE DE NUTRIENTES

DIETA DIETA

composio qumica composio qumica consistncia fsica consistncia fsica freqncia freqncia

SALIVA SALIVA
glicoprotenas glicoprotenas sais inorgnicos sais inorgnicos aminocidos aminocidos vitaminas vitaminas glicose glicose

neuraminidase neuraminidase

cido silico cido silico

FLUIDO GENGIVAL FLUIDO GENGIVAL

exsudato srico exsudato srico aminocidos livres aminocidos livres glicose glicose vitaminas vitaminas

CONSIDERAES HISTRICAS CONSIDERAES HISTRICAS

Leeuwenhoek, 1683 Leeuwenhoek, 1683 animlculos animlculos Facinus Facinus pequenas formas de vida pequenas formas de vida Black Black placa microbiana gelatinosa placa microbiana gelatinosa Gibbons, 1970 Gibbons, 1970 conceito da aderncia especfica conceito da aderncia especfica

At a dcada de 60: etiologia obscura -At a dcada de 60: etiologia obscura clculo dentrio como fator irritante; clculo dentrio como fator irritante; Estudos pioneiros da microbiota Estudos pioneiros da microbiota subgengival (Mac Donald et al. ,, 1960; Socransky subgengival (Mac Donald et al. 1960; Socransky
et al ,, 1963); et al 1963);

Estudos pioneiros da etiologia infecciosa Estudos pioneiros da etiologia infecciosa Dcada de 70 -- consenso da etiologia Dcada de 70 consenso da etiologia infecciosa (Genco et al .,1969; Ellison, 1970; infecciosa (Genco et al .,1969; Ellison, 1970;
Keyes, 1970; Socransky, 1970). Keyes, 1970; Socransky, 1970).

(Jordan & Keyes, 1964; Keyes & Jordan, 1964; Le (Jordan & Keyes, 1964; Keyes & Jordan, 1964; Le et al ., 1965; Theilade et al ., 1966). et al ., 1965; Theilade et al ., 1966).

Placa (biofilme) bacteriana (o) Placa (biofilme) bacteriana (o)

1,7 X 10 por grama 1,7 X 10 por grama de peso seco de peso seco
11 11

Socransky et al.. (1963) Socransky et al (1963)

POTENCIAL POTENCIAL PATOGNICO PATOGNICO DO BIOFILME DO BIOFILME

hiptese do biofilme nohiptese do biofilme noespecfico especfico hiptese do biofilme especfico hiptese do biofilme especfico

HIPTESE HIPTESE DOS DOS SURTOS CASUAIS SURTOS CASUAIS

MATRIA ALBA MATRIA ALBA

microrganismos microrganismos clulas epiteliais descamadas clulas epiteliais descamadas restos alimentares restos alimentares componentes salivares componentes salivares

IMPORTNCIA CLNICA IMPORTNCIA CLNICA

Estudos Epidemiolgicos; Estudos Epidemiolgicos; Animais Germ free sinais de DP; Animais Germ free sinais de DP; Gengivite Experimental Gengivite Experimental (Le et al., 1965; Theilade et al., 1966); (Le et al., 1965; Theilade et al., 1966); Periodontite Experimental (Lindhe, 1976); Periodontite Experimental (Lindhe, 1976); Estudos Longitudinais. Estudos Longitudinais.

BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO

Agregado estruturado e no Agregado estruturado e no calcificado de microrganismos calcificado de microrganismos contguos em matriz orgnica, contguos em matriz orgnica, constituda por polmeros constituda por polmeros bacterianos e por substncias da bacterianos e por substncias da saliva e da dieta do hospedeiro. saliva e da dieta do hospedeiro.

BIOFILMES BUCAIS (Darveau et al., 1977) BIOFILMES BUCAIS (Darveau et al., 1977)

comunidades ecolgicas de bactrias comunidades ecolgicas de bactrias desenvolvidas p/ permitir a desenvolvidas p/ permitir a sobrevivncia da comunidade; sobrevivncia da comunidade; exibe cooperatividade metablica; exibe cooperatividade metablica; sistema circulatrio primitivo; sistema circulatrio primitivo; numerosos microambientes com numerosos microambientes com diferentes pHs, tenso de oxignio, diferentes pHs, tenso de oxignio, potencial eltrico; potencial eltrico; comportamento total/ diferente do que comportamento total/ diferente do que em culturas planctnicas, em culturas planctnicas,

BIOFILMES BUCAIS BIOFILMES BUCAIS

Mais de 65 novas protenas interligadas entre si; Mais de 65 novas protenas interligadas entre si; Resistentes a resposta imuno-inflamatria; Resistentes a resposta imuno-inflamatria; PMNs no podem c/ agregados superiores a 5 PMNs no podem c/ agregados superiores a 5 bactrias; bactrias; Concentrao de antibiticos superior 1500X; Concentrao de antibiticos superior 1500X; Anticorpos so efetivos dentro de um campo Anticorpos so efetivos dentro de um campo eltrico. eltrico.

Biofilme Supragengival Biofilme Supragengival Biofilme Subgengival Biofilme Subgengival associado ao dente associado ao dente associado ao epitlio associado ao epitlio associado ao conjuntivo associado ao conjuntivo microbiota mvel microbiota mvel intra-sucular intra-sucular

FORMAO DO FORMAO DO BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO SUPRAGENGIVAL SUPRAGENGIVAL

PELCULA ADQUIRIDA PELCULA ADQUIRIDA

grupamentos sulfatos e grupamentos sulfatos e carboxila orientados para saliva carboxila orientados para saliva protenas (albumina), lisozima, lactoferrina, protenas (albumina), lisozima, lactoferrina, amilase, IgA, IgG, fosfolipdios, glicoprotenas amilase, IgA, IgG, fosfolipdios, glicoprotenas

espessura 0,01m -- 1m espessura 0,01m 1m

COMPOSIO QUMICA COMPOSIO QUMICA

PELCULA ADQUIRIDA PELCULA ADQUIRIDA

FUNES BIOLGICAS FUNES BIOLGICAS
proteo da superfcie do esmalte proteo da superfcie do esmalte confere permeabilidade seletiva ao esmalte confere permeabilidade seletiva ao esmalte interfere na aderncia dos microrganismos interfere na aderncia dos microrganismos superfcie dentria superfcie dentria nutre e serve de substrato p/ os nutre e serve de substrato p/ os microrganismos microrganismos

BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO FASE DE FASE DE COLONIZAO INICIAL COLONIZAO INICIAL (DE 0 A 8 HORAS) (DE 0 A 8 HORAS) MECANISMOS DE MECANISMOS DE ADESO E ESTRUTURAO ADESO E ESTRUTURAO

superfcie dentria superfcie dentria

Streptococcus mutans Streptococcus mutans S. sanguis S. sanguis Lactobacillus Lactobacillus A. viscosus A. viscosus

dorso da lngua dorso da lngua

S. salivarius S. salivarius A. naeslundii A. naeslundii

FORMAO DO BIOFILME FORMAO DO BIOFILME

fase reversvel fase reversvel

adsoro de bactrias livres adsoro de bactrias livres
S.sanguis; A.viscosus; S. mitis;; S.sanguis; A.viscosus; S. mitis

adeso bacteriana superfcie adeso bacteriana superfcie dentria dentria

fase irreversvel fase irreversvel

((S. sanguis, A. viscosus, A. naeslundii, S. mutans)) S. sanguis, A. viscosus, A. naeslundii, S. mutans

interaes hidrofbicas (LTA) interaes hidrofbicas (LTA)

lecitina (fibrila) X carboidrato (receptor) lecitina (fibrila) X carboidrato (receptor)

((S. sanguis, S. oralis)) S. sanguis, S. oralis especificidade galactose e ao cido silico especificidade galactose e ao cido silico ((S. mutans)) S. mutans

interaes eletrostticas Ca++salivar interaes eletrostticas Ca++salivar interao envolvendo IgAs interao envolvendo IgAs
((S. sanguis)) S. sanguis

interao c/ protenas salivares ricas em interao c/ protenas salivares ricas em prolina prolina ( A. viscosus, S. mutans )
( A. viscosus, S. mutans ) ( S. gordonii )

interaes com amilase interaes com ) amilase ( S. gordonii interao c/ protena salivar interao c/ protena salivar submandibular e sublingual submandibular e )sublingual ( S. mutans
( S. mutans )

interaes com glicosiltransferase e interaes com glicosiltransferase e glucanos glucanos ( S. mutans, S. sobrinus ) (Rlla et al ., 1984) (Rlla et al ., 1984)
( S. mutans, S. sobrinus )

predominam mecanismos de predominam mecanismos de aderncia interbacteriana aderncia interbacteriana

FASE DE FASE DE CRESCIMENTO RPIDO CRESCIMENTO RPIDO (DE 4 A 48 HORAS) (DE 4 A 48 HORAS)

MATRIZ MATRIZ INTERMICROBIANA INTERMICROBIANA

25% do volume do Biofilme 25% do volume do Biofilme

((S. mutans, sanguis, mitis, salivarius e S. mutans, sanguis, mitis, salivarius e Lactobacillus)) Lactobacillus

por meio de polissacardeos por meio de polissacardeos

por meio de constituintes da saliva por meio de constituintes da saliva e do fluido gengival e do fluido gengival
((S. sanguis, S. oralis, A. naeslundii)) S. sanguis, S. oralis, A. naeslundii

PEC PEC
S. mutans S. mutans enzima invertase enzima invertase s a c a rr o s e saca ose glicosiltransferase // frutosiltransferase glicosiltransferase frutosiltransferase polmero de glicose polmero de glicose (glucan binding proteins GBP) (glucan binding proteins GBP)
glucanos (mutano e dextrano) glucanos (mutano e dextrano) levano (frutano) levano (frutano)

GLICOGNIO GLICOGNIO

PIC PIC

fermentadoras de cido lctico fermentadoras de cido lctico modifica o pH final do biofilme modifica o pH final do biofilme

Veillonella e Veillonella e Neisseria Neisseria

((A. viscosus ou A. naeslundii e Estreptococos orais) A. viscosus ou A. naeslundii e Estreptococos orais) ((S. sanguis e S. oralis e F. nucleatum)) S. sanguis e S. oralis e F. nucleatum ((S. sanguis e P. gingivalis)) S. sanguis e P. gingivalis ((Capnocytophaga gingivalis e A. israelli)) Capnocytophaga gingivalis e A. israelli ((C. ochracea e A. naeslundii)) C. ochracea e A. naeslundii ((Prevotella loeschei e S. oralis)) Prevotella loeschei e S. oralis

por meio de constituintes de superfcie por meio de constituintes de superfcie de bactrias de diferentes espcies de bactrias de diferentes espcies

FASE DE REMODELAO FASE DE REMODELAO

produtos extracelulares produtos extracelulares reaes de co-agregao reaes de co-agregao ecologia da placa ecologia da placa mudanas na dieta mudanas na dieta (ingestao de sacarose) (ingestao de sacarose) oxignio no ambiente oxignio no ambiente interaes nutricionais interaes nutricionais produo de bacteriocinas produo de bacteriocinas

O22 Carboidratos O Carboidratos

Saliva Saliva

Streptococcus / Actinomyces Streptococcus / Actinomyces

Lactato Acetato Lactato Acetato Formiato Formiato

Lactato Lactato

Veilonella Veilonella

Acetato Acetato Formiato Formiato Menadiona Menadiona Pi / Pg Pi / Pg

H22 H Campylobacter Campylobacter

tiamina, putrescina, isobutirato tiamina, putrescina, isobutirato

Formato Formato

Fusobacterium // Eubacterium Fusobacterium Eubacterium Bacteroides // Micromonas Bacteroides Micromonas

Co22 Co
Aa, Capnocytophaga,, Ec Aa, Capnocytophaga Ec

SADE PERIODONTAL SADE PERIODONTAL

Clulas bacterianas aderentes, Clulas bacterianas aderentes, predomnio de cocos Grampredomnio de cocos Grampositivos; positivos; Baixo nmero de Gram-negativos; Baixo nmero de Gram-negativos; Ausncia de Espiroquetas; Ausncia de Espiroquetas; Ausncia de bactrias com flagelos. Ausncia de bactrias com flagelos.

Listgarten, 1976 Listgarten, 1976

FORMAO DO FORMAO DO BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO SUBGENGIVAL SUBGENGIVAL

Cemento Radicular Cemento Radicular

Capnocytophaga sp. Capnocytophaga sp.

Clulas Epiteliais Clulas Epiteliais

Eikenella corrodens Eikenella corrodens

BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO SUBGENGIVAL SUBGENGIVAL associado ao dente associado ao dente formao do clculo formao do clculo cries radiculares cries radiculares

BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO SUBGENGIVAL SUBGENGIVAL associado ao epitlio associado ao epitlio bastonetes e cocos Gbastonetes e cocos Gbactrias flageladas bactrias flageladas espiroquetas espiroquetas

BIOFILME DENTRIO BIOFILME DENTRIO SUBGENGIVAL SUBGENGIVAL associado ao conjuntivo associado ao conjuntivo GN / PJL GN / PJL

Invaso Bacteriana
Espiroquetas - GUNA (Listgarten, 1965) Espiroquetas e bastonetes fusiformes - epitlio gengival vital (Listgarten, 1965; Heylings, 1967) Bastonetes; filamentosos; cocos espaos intercelulares e epiteliais da bolsa periodontal (Frank & Voegel, 1978; Frank, 1980)

Invaso Bacteriana
Cocos; bastonetes; filamentosos; espiroquetas epitlio das bolsas periodontais profundas. Aa.; C. sputigena; Mycoplasma; Espiroquetas - PJL (Saglie, 1982) Invaso X translocao - gengivite induzida em ratos (Sanavi et al. - 1985) Invaso bacteriana gengival - stios recorrentes (Pertuiset et al. - 1987)

Infeces periodontais: crescimento de bactrias Infeces periodontais: crescimento de bactrias comensais ou transmisso de bactrias ? comensais ou transmisso de bactrias ? Transmisso de Aa e Pg: membros da famlia Transmisso de Aa e Pg: membros da famlia (Petit et al. ,, 1993; Alaluusua et al ., 1993; Di (Petit et al. 1993; Alaluusua et al ., 1993; Di Rienzo et al ., 1990). Rienzo et al ., 1990). Transmisso de Aa e Pg: casais (Saarela et al ., Transmisso de Aa e Pg: casais (Saarela et al ., 1993; Van Stenhbergen et al ., 1993). 1993; Van Stenhbergen et al ., 1993). Ausncia de evidncias de transmisso de Aa: Ausncia de evidncias de transmisso de Aa: famlias com -- PJL (Tinoco et al ., 1998). famlias com PJL (Tinoco et al ., 1998). Ausncia de evidncia de transmisso de Pg: Ausncia de evidncia de transmisso de Pg: populao (Indonsia) (Van Winkelhoff et al ., populao (Indonsia) (Van Winkelhoff et al ., 1996). 1996).

Principais Bactrias Bucais G+ Principais Bactrias Bucais G+

Staphylococcus cocos, anaerbios facultativos, Staphylococcus cocos, anaerbios facultativos, S. aureus e S. epidermidis -- saliva e biofilme S. aureus e S. epidermidis saliva e biofilme supra e subgengival; supra e subgengival; Streptococcus cocos, anaerbios facultativos, Streptococcus cocos, anaerbios facultativos, metabolismo predominante/ fermentativo, metabolismo predominante/ fermentativo, gnero predominante na cavidade bucal. gnero predominante na cavidade bucal. S. oralis bactria pioneira na formao do S. oralis bactria pioneira na formao do biofilme, IgA1-protease, produz PEC a partir biofilme, IgA1-protease, produz PEC a partir de sacarose; de sacarose;

Principais Bactrias Bucais G+ Principais Bactrias Bucais G+

S. mutans alta/ acidognico e acidrico, sua S. mutans alta/ acidognico e acidrico, sua colonizao e sua cariogenicidade so colonizao e sua cariogenicidade so principal/ determinadas pela produo de principal/ determinadas pela produo de PEC, que esta diretamente relacionada PEC, que esta diretamente relacionada ingesto de sacarose, isolado de casos de ingesto de sacarose, isolado de casos de endocardite; endocardite; S. salivarius :: colonizador inicial da cavidade S. salivarius colonizador inicial da cavidade bucal, alta afinidade de ligao s clulas bucal, alta afinidade de ligao s clulas epiteliais bucais, lngua e saliva; epiteliais bucais, lngua e saliva; S. vestibularis :: coloniza mucosa, no produz S. vestibularis coloniza mucosa, no produz PEC. PEC.

Principais Bactrias Bucais G+ Principais Bactrias Bucais G+

S. sanguis espcie predominante no S. sanguis espcie predominante no biofilme, parece ser adaptado biofilme, parece ser adaptado colonizao de superfcies lisas, colonizao de superfcies lisas, produz H 22O 22, ,,, papel protetor nas produz H O papel protetor nas doenas periodontais, produz IgA1doenas periodontais, produz IgA1protease e PEC, tem sido isolado de protease e PEC, tem sido isolado de casos de endocardite; casos de endocardite;

Principais Bactrias Bucais G+ Principais Bactrias Bucais G+

Lactobacillus -- bacilos regulares, Lactobacillus bacilos regulares, anaerbios facultativos, metabolismo anaerbios facultativos, metabolismo oxidativo e fermentativo, acidricos, oxidativo e fermentativo, acidricos, crescimento timo em anaerobiose, crescimento timo em anaerobiose, mas se desenvolvem bem em 5-10% mas se desenvolvem bem em 5-10% CO 22;; encontrados na saliva, cavidades CO encontrados na saliva, cavidades de crie e biofilme dentrio de crie e biofilme dentrio cariognico; cariognico;

Principais Bactrias Bucais G+ Principais Bactrias Bucais G+

Actinomyces bacilos irregulares curtos ou longos, Actinomyces bacilos irregulares curtos ou longos, anaerbios facultativos, biofilme dentrio supra e anaerbios facultativos, biofilme dentrio supra e subgengival; subgengival; A. israelli o principal causador de actinomicose, e a A. israelli o principal causador de actinomicose, e a espcie de Actinomyces dominante no biofilme dentrio espcie de Actinomyces dominante no biofilme dentrio maduro; maduro; A. viscosus -- associado a gengivite e presente em alta A. viscosus associado a gengivite e presente em alta prevalncia no biofilme dentrio; prevalncia no biofilme dentrio; A. odontolyticus habitat principal o clculo dentrio, A. odontolyticus habitat principal o clculo dentrio, placa dentria e cavidades profundas de crie. placa dentria e cavidades profundas de crie.

Principais Bactrias Bucais GPrincipais Bactrias Bucais GVeillonella cocos pequenos, anaerbios Veillonella cocos pequenos, anaerbios estritos, no fermentam carboidratos, estritos, no fermentam carboidratos, utilizam principal/ piruvato e lactato, utilizam principal/ piruvato e lactato, produzindo acetato, propionato, CO 22 , H 22 , produzindo acetato, propionato, CO , H , assim, reduz o potencial cariognico do assim, reduz o potencial cariognico do biofilme dentrio, no so consideradas biofilme dentrio, no so consideradas patognicas; patognicas;

Principais Bactrias Bucais GPrincipais Bactrias Bucais GActinobacillus actinomycetemcomitans Actinobacillus actinomycetemcomitans

anaerbio facultativo, imvel, bacilo anaerbio facultativo, imvel, bacilo pequenos, retos ou encurvados, possuem pequenos, retos ou encurvados, possuem vesculas de membrana, com vrios sorotipos; vesculas de membrana, com vrios sorotipos; sorotipos mais comuns: sorotipos mais comuns: periodontite do adulto -- a periodontite do adulto a PJL b PJL b
(Aa 97% EUA, 50% So Paulo Genco et al. ,, 1986) (Aa 97% EUA, 50% So Paulo Genco et al. 1986)

anaerbio estrito, Gram -, imvel, anaerbio estrito, Gram -, imvel, cocobacilo, assacaroltico cocobacilo, assacaroltico

Porphyromonas gingivalis Porphyromonas gingivalis

Prevotella espcies Prevotella espcies

Prevotella intermedia -- bacilos curtos, Prevotella intermedia bacilos curtos, sacarolticos, pigmentados em negro ou sacarolticos, pigmentados em negro ou no anaerbios estritos no anaerbios estritos

Bacteroides espcies Bacteroides espcies

B. forsythus (T. forsythensis) sacarolticos, B. forsythus (T. forsythensis) sacarolticos, no pigmentados, bacilos com no pigmentados, bacilos com extremidades afiladas extremidades afiladas

Espiroquetas Espiroquetas

so microrganismos mveis, helicoidais, so microrganismos mveis, helicoidais, anaerbios estritos e Gram anaerbios estritos e Gram so categorizadas baseado no dimetro so categorizadas baseado no dimetro celular (pequeno,mdio e grande); celular (pequeno,mdio e grande); todas as espiroquetas cultivadas da todas as espiroquetas cultivadas da cavidade bucal so do gnero cavidade bucal so do gnero Treponema Treponema 30% nas leses de GN com evidncias de 30% nas leses de GN com evidncias de invaso tecidual invaso tecidual

PRINCIPAIS FATORES PRINCIPAIS FATORES DE VIRULNCIA DOS DE VIRULNCIA DOS ORGANISMOS ORGANISMOS PERIODONTOPATOGNICOS PERIODONTOPATOGNICOS

Fatores de Virulncia

Propriedades que permitem uma Propriedades que permitem uma espcie bacteriana colonizar um espcie bacteriana colonizar um rgo alvo, defendido pelo rgo alvo, defendido pelo hospedeiro, causando dano hospedeiro, causando dano tecidual. tecidual. Socransky e Haffajee Socransky e Haffajee (1991) (1991)

ENZIMAS DE AGRESSO DIRETA ENZIMAS DE AGRESSO DIRETA PROTEASES PROTEASES

colagenases (Pg, Pi, Aa, Td) colagenases (Pg, Pi, Aa, Td) ao semelhante tripsina (P, Bf,Td) ao semelhante tripsina (P, Bf,Td) aminopeptidases (C, Pg) aminopeptidases (C, Pg) gelatinases (Pg, Pi) gelatinases (Pg, Pi)

FOSFOLIPASE A FOSFOLIPASE A

precursores da prostaglandina precursores da prostaglandina (Pg, Pi) (Pg, Pi)

FOSFATASE ALCALINA E CIDA FOSFATASE ALCALINA E CIDA

(Pg, Pi, C, Aa) (Pg, Pi, C, Aa) PRODUTOS TXICOS PRODUTOS TXICOS EPITELIOTOXINA EPITELIOTOXINA (Pg, Pi, Aa, C) (Pg, Pi, Aa, C)

Fator inibidor da proliferao de Fator inibidor da proliferao de fibroblastos suprime sntese de DNA e fibroblastos suprime sntese de DNA e RNA dos fibroblastos (Pg, Pi, C, Aa, RNA dos fibroblastos (Pg, Pi, C, Aa, Td) Td) Toxina de distenso citoletal Toxina de distenso citoletal efeito txico sobre os fibroblastos e efeito txico sobre os fibroblastos e clulas epiteliais (algumas cepas -- Aa) clulas epiteliais (algumas cepas Aa) Endotoxinas -- LPS Endotoxinas LPS

Toxina indutora de reabsoro ssea Toxina indutora de reabsoro ssea (microvesculas de Aa) (microvesculas de Aa) Butirato e Propionato substncias Butirato e Propionato substncias txicas txicas Catablitos de Protelise Catablitos de Protelise substncias ftidas indol, NH 33 e substncias ftidas indol, NH e compostos sulfurosos volteis compostos sulfurosos volteis aumentam a permeabilidade das mucosas aumentam a permeabilidade das mucosas e reduzem a sntese protica (Pg, Pi) e reduzem a sntese protica (Pg, Pi)

Fatores de evaso das defesas do Fatores de evaso das defesas do hospedeiro hospedeiro Fibrinolisina invaso (Pg, Pi, Td) Fibrinolisina invaso (Pg, Pi, Td) Inibio da atividade de LPMNs Inibio da atividade de LPMNs substncias que competem com as substncias que competem com as quimiotticas // bloqueio dos receptores de quimiotticas bloqueio dos receptores de LPMNs (Pg, Pi, C, Aa, Td) LPMNs (Pg, Pi, C, Aa, Td) Leucotoxina (Aa) Leucotoxina (Aa)

Componentes antifagocitrios de superfcie Componentes antifagocitrios de superfcie ligao de LPMNs (Pg, Aa) ligao de LPMNs (Pg, Aa) Resistncia a digesto intracelular Resistncia a digesto intracelular superoxidodismutase (Pg, Pi) superoxidodismutase (Pg, Pi) catalase (Aa) catalase (Aa) Proteases para IgA e IgG (Pg, Pi, Bf, Aa, Proteases para IgA e IgG (Pg, Pi, Bf, Aa, TD) TD) Resistncia s aes opsonizante e ltica do Resistncia s aes opsonizante e ltica do sistema C sistema C proteases para C3b e C5b (Pg) proteases para C3b e C5b (Pg)

Fatores de virulncia das Fatores de virulncia das Porphyromonas gingivalis Porphyromonas gingivalis hematoglutinina hematoglutinina
Clulas endoteliais e musculares Clulas endoteliais e musculares lisas da artria coronria humana lisas da artria coronria humana Progulske-Fox et al. (1999) Progulske-Fox et al. (1999)

Postulados de Koch p/ especificidade Postulados de Koch p/ especificidade bacteriana (clssico): bacteriana (clssico): o agente (bactria) deve ser isolado em o agente (bactria) deve ser isolado em todos os casos da doena; todos os casos da doena; culturas puras da bactria causadora da culturas puras da bactria causadora da doena podem ser obtidas; doena podem ser obtidas; quando inoculada em animais quando inoculada em animais experimentais, a bactria causa a doena; experimentais, a bactria causa a doena; a bactria deve ser isolada dos tecidos a bactria deve ser isolada dos tecidos doentes do animal experimental. doentes do animal experimental.

Socransky (1977) Socransky (1977)

presena de patgenos putativos nas leses presena de patgenos putativos nas leses periodontais e em concentraes elevadas periodontais e em concentraes elevadas comparados tambm c/ a ausncia da comparados tambm c/ a ausncia da bactrias ou a presena em concentraes bactrias ou a presena em concentraes muito menores em indivduos saudveis; muito menores em indivduos saudveis; pacientes infectados c/ esses patgenos pacientes infectados c/ esses patgenos periodontais, freqente/ desenvolvem altos periodontais, freqente/ desenvolvem altos nveis de anticorpos no soro, saliva e fluido nveis de anticorpos no soro, saliva e fluido gengival e podem tambm desenvolver uma gengival e podem tambm desenvolver uma resposta imune. resposta imune.

Socransky (1977) Socransky (1977)

essas bactrias podem muitas vezes essas bactrias podem muitas vezes demonstrar in vivo ,, produo de fatores de demonstrar in vivo produo de fatores de virulncia que podem ser correlacionados c/ virulncia que podem ser correlacionados c/ a histopatologia clnica; a histopatologia clnica; a implantao experimental da bactria em a implantao experimental da bactria em um modelo animal deve conduzir pelo menos um modelo animal deve conduzir pelo menos a algumas caractersticas que ocorrem a algumas caractersticas que ocorrem naturalmente com o aparecimento da doena naturalmente com o aparecimento da doena periodontal; periodontal; tratamento clnico que elimina essas tratamento clnico que elimina essas bactrias das leses periodontais devem bactrias das leses periodontais devem resultar em melhora nos sinais clnicos da resultar em melhora nos sinais clnicos da doena. doena.

Complexidade da microbiota Dificuldades na coleta: 1. Atividade de doena no stio selecionado 2. Representatividade do material coletado 3. Dimetro do sulco gengival Dificuldades no cultivo e caracterizao bacteriana.

Diluies Diluies
0,5ml 0,5ml 0,5ml 0,5ml

VMGAIII

10-1

10-2

10-3

10-4

Semeadura em Meio Semeadura em Meio Seletivo Seletivo

100L 100L

pura

10-2

Incubao Incubao

Biofilmes Biofilmes
O TOOLE, G. et alli. Biofilms formation as microbial O TOOLE, G. et alli. Biofilms formation as microbial

development. Annu. Ver. Microbiol., 54:49-79 2000 development. Annu. Ver. Microbiol., 54:49-79 2000 KOLENBRANDER, P. Oral Microbial Communities: KOLENBRANDER, P. Oral Microbial Communities: Biofims, interactions, and Genetic Systems Annu. Rev. Biofims, interactions, and Genetic Systems Annu. Rev. Microbiol., 54:413-37 2000 Microbiol., 54:413-37 2000 STOODLEY, P. et alli. Biofilms as complex STOODLEY, P. et alli. Biofilms as complex differentiaied communities Ann. Rev. Microbiol., 56:1877differentiaied communities Ann. Rev. Microbiol., 56:1877209 2002 209 2002