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Cultura Documentos
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Tcnicas de
Instituto de Botnica
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INSTITUTODE
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Tcnicas de
BOTNICA
cOleta proservaio'
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e herborizao
de material botnico
C.D.D.580.74202
INSTITUTO
DE BOTANICA
'"
COORDENADORES
Oswaldo Fidalgo
Vera Lcia Ramos Bononi
Cooroeneoone
1-J
da Pesquisa
INSTITUTO
MANUAL
de Becueos
NalUfais
DE BOTANICA
aI'
CONTEDO
APRESENTAAO
INSTRUOES GERAIS.
A. Materiais gerais para coleta
B. Materiais gerais para herborizao
C. Materiais para anotaes.
D. Dados a serem anotados
1. ALGAS
1.1. Introduo
1.2. Algas de guas continentais.
1.3. Algas marinhas bentnicas
5
6
.
.
.
.
.
2. FUNGOS E LfoUENS
2.1. Introduo..
..
.
2.2. Fungos do ar
.
2.3. Fungos de guas continentais
2.4. Fungos de guas marinhas
.
2.5. Fungos microscpicos
do solo e em substratos
orgnicos
.
2.6. Fungos e lquens macroscpicos
.
3. BRIOFITAS
3.1. Introduo
3.2. Tcnicas
.
.
.
4. PTERIDOFITAS
4.1. Introduo
4.2. Pteridfitas
4.3. Fanergamas
4.4. Fanergamas
4.5. Fanergamas
4.6. Fanergamas
4.7. Fanergamas
5
5
.
E FANEROGAMAS
. .. .. ..
.. ............ .. ....
herbceas. . . . . . . . . . .
arbustivas. . . . . . . . . . .
arbreas . . . . . . . . . . . .
suculentas ou volumosas
aquticas. . . . . . . . . . .
.. .. ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . . ..
. . . . . . ..
.......
1
8
8
11
14
15
16
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20
22
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27
28
28
31
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33
34
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38
46
48
APRESENTAAo
5. ORGANIZAAO
6. FORMULAS
7. LITERATURA
8. BIBLIOGRAFIA
DE HERBARIO
..............
E MEIOS DE CULTURA
RECOMENDADA.
52
56
CITADA........
61
. . . . . . . . . . . ..
62
<'
INSTRUES
prensa de madeira
GERAIS
ou pasta de plantas
querosene
Essa relao. destina-se ao. trabalha geral de herbarizaa
para usa na acampamento. au na sede.
Carrespande
atividade que antecede a processo de Incorporao da material no herbria. Todo esse
conjunto
a coletor dever levar em excurses prolangadas ou a locais distantes e mant-Ia na acampamente. Nesse casa a fator limitante
fica restrita s candies de transparte.
de campa
altnetro
D
CONSELHO
NACIONAL
DE DESENVOLVIMENTO
CIENTI"FICO
E TECNOLOGICO
tem
requerido, para cada material coletado,
a preenchimento.
da ficha adiante apresentada. Esse modela deve ser seguida para efeito. de uma padranizaa
nacional. Dadas adicianais relativos consistncia,
textura, odor e outros, devem constar das observaes, Sempre que possrvel, as cores mencianadas devem
ser referidas a uma carta de cores, de preferncia de MAERZ
& PAUL (1930) para fungas, au HORTICULTURAL
COLOUR
CHART
(1938), para as demais grupas de plantas.
Essas anotaes devero, pasteriarmente,
ser transcritas para a rtula e fichas de herbria.
IFAM!UA:
GRUPO:
NOME VUL,I.J'U:Sl.OCAIS,COM
Esse conjunto
de materiais usualmente
carregada pela coletor durante a atividade de coleta.
Em seu todo, recamendvel
para coleta de pteridfitas
ou de plantas faneragmicas,
enquanto. aos demais gruaas, pade atender em parte. Em termas de quantidades,
os materiais devem ser selecionados
pela coletor que dever levar em considerao a valume total da que ser par ele transportado
(Ex. materiais adicionais
de coleta, alimentas,
caixa de primeiras
socorros, etc.), a pesa desse conjunto,
a distncia a ser percarrida
e sua prpria resistncia Usica. A pasta de plantas pade ser feita com dols pedaos de papelo. refarada (ou tbuas finas campensadas) de 45 x 30cm, ligadas entre si par cordas, tenda entre eles as falhas de jornal. Recamenda-se que faco. e faca afiadas devem estar sempre dentro. de
suas bainhas quando. no. em uso, para evitar perdas e acidentes.
ro"u
OETUIIoCIHAOOR:
HBITO DE CRESCIMENTO:
-'-011--00
'111,110 OU 00$
UPOR05:
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l'AEOUlIICIA
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IIIEGI.l:O:
11. .. 1ITUOE:
09SEIIVAOES:
lcool
cam fivela
fsforo. ou isqueiro
jarnal
papel chupo au mata-borro
papel sulfite (40 kg)
papelo. ondulado
ou canelada
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RELAtiVA:
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ILONGITUDE:
ou
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oISPONiv[1,."
AliifififH'frGtRli:
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NOME 00
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SIMILAR:
IALTifUOE:
(,
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(
'.:.'
ALGAS
1.1
Introduo
1;..
ALGAS
Alga hoje um nome popular e, como grupo de vegetais, extremamente heterogneo. Rene
formas encontradas principalmente em ambiente aqutico (marinho ou continental), mas tambm em
solos; que podem viver no in teria r de outros vegetais ou de alguns animais; que podem ser de vida livre
ou fixas sobre cenas animais, vegetais, rochas e outros substratos; que normalmente so capazes de
produzir seu prprio alimento (auttrofas) mas, que tambm incluem alguns organismos saprfitos ou
parasitas (hetertrofas); que podem variar desde seres unicelulados at os multicelulados. Quanto s variaes de forma do corpo e da cor que apresentam, as algas renem a maior gama jamais imaginada pelo homem. Tudo isso conseqncia da primitividade morfolgica e fisiolgica das algas, cuja reunio,
do ponto de vista sistemtico, num nico grupo, forada e decorrente simplesmente da inexistncia
de um envoltrio, constitudo por clulas estreis, que recobrisse seusrgos de reproduo, tanto sexuada como assexuada.
1.2
Algas de guas continentais
1.1. INTRODUO
BENTONICAS
Marilza Gordeiro-Marino
Noemy Yemeuishi- Tomita
Silvia Maria Pita de Beauclair Guimares
A coleta de algas de guas continentais requer, necessariamente, como para qualquer outro qrupo de organismos, resposta a algumas questes preliminares, quais sejam: 1) onde existem algas normalmente? 2) que tipo de trabalho pretende-se realizar? e 3) que material e como se pretende coletar?
A resposta primeira pergunta dada conhecendo-se, previamente, os ambientes naturais onde
vivem as algas e qual dessesambientes se pretende visitar para a coleta,
O meio mais rico em algas , com certeza, o aqutico, a saber: pntanos, empoados, lagoas, lagos, represas e rios. Certas algas, porm, podem ser encontradas vivendo no ar, em locais constantemente umedecidos, tais como: troncos de rvores; paredes, pedras, solos, etc. Isto, sem mencionar os
chamados ambientes "pouco usuais": plantas (algas endofticas ou epifticas), animais (algasentozorias ou epizorias), guas termais, neve, etc.
De um modo geral, mais aconselhvel, quando em excurso, fazer-se uma coleta completa,
com grande nmero de amostras, de algumas poucas localidades, do que apanhar uma ou duas amostras de um grande nmero de reas. Na realidade, nada mais improdutivo do que no se dispor de
quantidade suficiente de material de alguma alga mais rara encontrada, ou dispor de alguns exemplares apenas, imaturos, de uma dada espcie, que no possibilitem sua identificao.
Quanto segunda questo, o trabalho pode ser simplesmente o levantamento das espcies de
algas que ocorrem num determinado corpo d'gua ou numa rea circunscrita. Este um trabalho qualitativo, isto , um catlogo, que deve ser o mais completo possivel. das espciesde algas da rea estudada. Por outro lado, pode-se pretender efetuar, alm do levantamento qualitativo de um local, estudos da variao quantitativa de sua composio ao longo das quatro estaes do ano e do nmero de
individuos por volume, de cada espcie considerada.
Quanto ltima questo, pode-se afirmar que a coleta de algas de guas continentais um
processo relativamente fcil, desde que se tenha os materiais adequados que podem variar dos mais
simples e de fabricao caseira a aparelhamento bastante refinado.
Considerando-se que as algas, em geral, so mais abundantes e diversificadas no meio aqutico, so aqui mencionados apenas os mtodos de coleta, preservao e herborizaro das algas deste ambiente.
1.2.1.
Coleta
A - Materiais
esptula
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
garrafa especial para coleta de gua (Fig. 3)
luva de borracha ou de plstico
papel vegetal cortado em tamanho de 4 x 2cm para rtulo
j
(
(
:<}
B -
(F ig. 1)
Mtodos
a. Qualitativo
B -
partir
tamente
examinada.
A fixao e a preservao da amostra devem ser feitas o mais breve possivel e at 48 horas depois do momento
da coleta, mormente
em se tratando de amostras concentradas
de material.
A soluo ideal para as algas ainda no est bem determinada.
O melhor seria uma soluo de
fcil obteno
e que alterasse o menos possrvel a aparncia da alga. Em vrias alternativas
de chaves dlcotmicas
artificiais
para identificao
de algas, a opo entre uma ou outra alternativa,
a cor ti'pica
dos organismos.
Infelizmente,
a cor de certas algas pode variar com as diferentes solues utilizadas
e,
em geral, a grande maioria das algas desbota com o tempo, ficando at totalmente
esbranquiadas.
. O mtodo mais simples para preservao de algas de guas continentais
usar formalina
em soluo aquosa (1 : 1 O).
Das inmeras solues tentadas, talvez a que melhor
servao seja a adio da soluo de Transeau (ver capo 6)
1.2.3.
Herborizao
A -
Materiais
formalina
I bruto
(= 10(010)
9
(do tamanho
usada
papel manteiga
pina
pincel
tecido de algodo alvejado e lavado (pedaos)
Ver - INSTRUOES
GERAIS
Preservao
Materiais
gua de torneira
bandeja de plstico (F ig. 2)
chapa metlica lisa, usualmente,
de alurrunio
ou ligeiramente
maior) - Fig. 2
mica folheada bem uniforme
(pedaos)
Existem
diversos mtodos para o estudo quantitativo
de algas planctnicas.
O mais simples e
prtico consiste na coleta de gua de superft'cie em frascos com capacidade de 15 litros. Se o material
for pouco concentrado,
recomenda-se
usar umvolume
maior de gua, caso contrrio
usa-se um volurrie
menor.
A -
atenda s caracterlsticas
para melhor congua da prpria amostra na proporo
de
b. Quantitativo
1.2.2.
1:1.
correspondente
ao material a lpis
dentro do frasco contendo o mate-
Posteriormente,
no laboratrio,
deve-se proceder homogeneizao
do plncton coletado (agitao manual cuidadosa]
e transferir
uma subamostra
para uma cubeta ou cmara de contagem (volume de 150ml) para anlise em microscpio
invertido
(maiores detalhes, ver mtodo de Uther ml em
VOllENWEIDER,1971).
Mtodos
B -
Mtodos
Muitas algas podem ser preservadas como espcimes secos de herbrio. Em se tratando
de algas
microscpicas,
pinga-se 1-3 gotas da amostra contendo material vivo e concentrado
(ou mesmo morto,
fixado e concentrado)
sobre uma ficha de cartolina branca, deixando-se secar espontaneamente.
A cartolina, com o borro seco, poder ser guardada em envelope, num fichrio. Quando se desejar estudar
esse material, basta raspar um pouco do borro sobre uma lmina de microscopia
contendo
uma gota de
soluo aquosa 4% de hidrxido
de potssio. O hidr6xido
limpa o material e facilita a penetrao
de
solues corantes que sejam necessrias a seu estudo. Muitas vezes, em vez de cartolina branca, preferlvel usar folhas bem uniformes
e delgadas de mica como substrato da preparao.
A mica permite o
exame direto do material
ao microscpio,
ernpreqando-se
o hidrxido
de potssio, no havendo n10
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cessidade de danificar a exsicata a cada utilizao, como acontece quando se raspa o borro da cartolina. Procedimento semelhante usado para cianofl'ceas.
o material macroscpico, principalmente de carceas. deve ser distendido e seco em uma folha
de papel resistente. Para isto, deve-se: 1) escolher o espcime da alga que se deseja distender; 2) colocar
uma folha de papel sulfite sobre uma chapa de alumlnio lisa e mergulhar ambas em um recipiente contendo gua de torneira (Fig. 2); 3) deixar flutuar na gua do recipiente o exemplar escolhido da alga e,
em seguida, elevar cuidadosamente a chapa metlica com o papel at que a alga assente sobre este; 4)
distender, arrumando, as vrias pores do talo da alga, utilizando um pincel fino e macio, trabalhando
sempre com o material sob a gua, para obter uma preparao que assemelhe o mais possrvel planta
viva; 5) tomar o material distendido e fazer o seguinte conjunto:
folha
folha
folha
folha
folha
folha
de
de
de
de
de
de
papelo ondulado
papel mata-borro ou chupo
papel com a alga distendida
papel manteiga ou tecido de algodo alvejado
papel mata-borro ou chupo
papelo ondulado
]~
I:,
Depois de feitos vrios desses conjuntos, os mesmos so colocados entre duas prensas (tbuas
de madeira) e amarrados firmemente com cordo resistente, para secar. O material pode ser colocado
ao sol, tendo-se, porm, o cuidado de trocar diariamente as folhas mais midas de papel chupo ou de
mata-borro, at que se apresente bem seco. Tambm pode ser seco em estufa temperatura de
40-500C.
Os exemplares mais delicados de algas podem ser distendidos sobre folhas de rnica, em vez de
papel.
~r
1.3
Algas marinhas bentnicss
As algas marinhas bentnicas ocorrem no litoral, desde a zona das mars at profundidades limitadas pela penetrao da luz. A ocorrncia dessas algas sempre condicionada existncia de substrato slido, de natureza variada, para sua fixao,
Na faixa litornea, os costes rochosos propiciam uma diversificao de ambientes onde as algas ocorrem, incluindo locais sujeitos arrebentao violenta, locais protegidos e ernpoados em depresses de 'rochas. Nas balas calmas, alm de crescerem nos costes rochosos, podem ser encontradas
sobre conchas, pedras soltas, pedaos de madeira, etc. depositados no fundo. Os mangues constituem
outro ambiente onde as algas so encontradas, sendo o substrato representado por troncos e raizes de
rvores que vivem nesselocal. Em cada um dessesambientes h uma diversificao muito grande quanto ao tipo, forma e tamanho das algas. Nesses locais as algas esto sujeitas ao periodismo das mars,
sendo que, as condies de mar baixa, so as mais adequadas para sua coleta.
Por outro lado, algas tambm so encontradas submersas, em diferentes profundidades, crescendo fixas a substratos rochosos, recifes de corais e outros materiais slidos. Sua coleta feita por
mergulho ou dragagem.
~i
1.3.1. Coleta
A - Materiais
balde plstico
draga
equipamento de mergulho
esptula
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
martelo (para algas incrustantes)
talhadeira (para algas incrustantes)
Ver-INSTRUOES
GERAIS
Figura 1. Rede de plancton de nilon ou seda. Figura 2. Bandeja de plstico + chapa lisa de aluminio + papel sulfite +
material coletado. Figura 3. Garrafa especial para coleta de gua: cilindro de Kemmerer.
11
12
r .
B - Mtodos
As algas que crescem na zona das mars, podem ser coletadas rnanualmente, com auxilio de
esptula, tendo-se o cuidado de retirar as plantas inteiras. Estas so mantidas midas, acondicionadas
em sacos plsticos, sendo as menores e as mais delicadas colocadas em frasco com tampa. Deve-se
tomar o cuidado de no colocar muitas plantas juntas, evltendo-se, assim, danos e facilitando sua poso
terior separao. Os frascos e sacos contendo o material coletado devem ficar protegidos do calor in
tenso e da luz solar.
A coleta de algas, que crescem em profundidades no muito grandes, feita manualmente por
mergulhadores com equipamentos adequado. munidos de sacos plsticos presos cintura, com pequenos furos. para transporte do material. Em profundidades maiores, essa coleta requer o auxlio de
barcos e dragas.
Para a coleta de algas incrustantes h necessidadedo emprego de martelo e talhadeira.
1.3.2.
Preservao
FUNGOS
A - Materiais
2.1. INTRODUO
brax
etiqueta
formalina (=formoI40%)
frasco de vidro com tampa (vrios tamanhos)
microsc6pio estereosc6pico
papel chupo ou mata-borro
pina
pipeta graduada (vrios tamanhos)
placa-de-petri
proveta (vrios tamanhos)
2,2. FUNGOS DO AR
Sandra Farto Botelho Trufem
2.3. FUNGOS DE GUAS CONTINENTAIS
Adauto Ivo Milanez
2.4. FUNGOS DE GUAS MARINHAS
Rosely Gomes da Silva
2.5. FUNGOS MICROSCOPICOS DO SOLO E EM SUBSTRATOS ORGNICOS
B - Mtodos
Herborizao
A -
Materiais
Mtodos
metodologia idntica de 1.2.3. (B)
13
Oswaldo Fidalgo
Vera Lcia Ramos Banam'
LfaUENS
2.2
Fungos do ar
2
FUNGOS
LfaUENS
2.1
Introduo
O ar um repositrio natural, sob a forma de esporos, dos mais diversos tipos e grupos de funqos, O isolamento de esporos depender do local, do tempo de exposio e do substrato empregado.
Oescrever-se-oapenas mtodos qualitativos e no quantitativos para o isolamento de fungos do ar.
2.2.1.
Complexo tuno-subtreto:
Como organismo heterotrfico, todo fungo depende, direta ou indiretamente, de outro ser vivo, para sua alimentao. A condio saprbia bastante evidente quando o fungo encontrado sobre
troncos, ramos, folhas, restos ou partes de vegetais ou animais mortos. O predatismo leva ao abate sumrio do hospedeiro, enquanto o parasitisrno o tipo de associao em que o fungo provoca srie gradativa de danos ao hospedeiro que, eventualmente, podem provocar sua morte. Entre os fungos, o parasitismo pode ser facultativo ou obrigatrio.
Nos casos de fungos saprbios e parasitas, a ateno ao complexo fungo-substrato de grande
valia nas iniciativas de coleta. E oportuno chamar a ateno para a ocorrncia de fungos com desenvolvimento intramatrical, cujo ciclo se passa inteiramente no interior do hospedeiro e o extramatrical, que
se desenrola em seu exterior.
E como se tudo isso no bastasse, h determinadas estruturas, como esporas e suas variaes
morfolgicas e funcionais, que efetivamente no exibem qualquer manifestao de relacionamento f(sico e biolgico a substrato orgnico, at o momento em que iniciam o processo de germinao.
Coleta
A - Materiais
A classificao dos grandes grupos de fungos tem sido baseada no tipo e complexidade da rnorfologia, nas caracterrsticas das estruturas de reproduo e no padro de comportamento exibido nos
processos sexuais.
Inmeros botnicos e, seguramente, poucos micologistas podem, ainda hoje, 'admitir os fungos
como plantas. Por revelarem estruturas espec/ficas. exibirem comportamento diferenciado e serem incapazes de realizar a fotossintese. os fungos tornam-se organismos distintos dos demais seresvivos.
A situao dos h'quens mais complexa, uma vez que constituem produto da associao simbintica entre fungo e alga. Alm de revelarem caractenstica metablica e, de certa forma, estrutura
prpria, os integrantes liqunicos mantm sua individualidade biolgica.
.Exposio
ao ar, r'lO ambiente selecionado, da lmina corri leve camada de graxa desilicone ou
glicerina, ou ainda da placa-de-petri com meio de cultura, onde os esporos existentes no ar, por ao da
fora da gravidade, iro depositar-se e aderir-se s superfcies expostas. O tempo de exposio pode variar de 30 segundos a 15 minutos a critrio do interessado, em funo das condies ambientais (DAVIES,1971).
2.2.2.
Preservao
A - Materiais
agulha de repicagem (Fig. 4)
lmina e larmnula para microscopia (Fig. 10)
placa-de-petri
B-
Nunca ser demasiado alertar o coletor para o fato de que as estruturas mais visrveis de um fungo no representam, necessariamente, todas as suas partes, nem tudo o que constitui o ciclo do organismo coletado. Grande parte do seu ciclo ou dos remanescentes estruturais poder estar sendo perdida
no interior do substrato ou, simplesmente, j ocorreu em outro lapso de tempo, em outro hospedeiro,
ou em partes distintas do mesmo substrato.
Resultado: o que se coleta de um fungo constitui, em geral, um momento, no ciclo biolgico
da espcie.
As condies ideais para o estudo e compreenso dos fungos reside no isolamento de organismos, a partir de diferentes substratos e nos diversos ambientes em que os fungos ocorrem: ar, gua e
solo.
As partes mais evidentes, nos fungos, constituem, como regra geral, o que mais resiste ao manuseio e ao tratamento que leva constituio da amostra do material (a exsicata) a ser incorporado
ao herbrio. Os espcimes podem ser preservados pela simples secagem; em meios Ii'quidos, o picles;
em lminas, para exame ao microscpio, sob forma desidratada e liofilizada; em nitrognio h'quido, e
por outros processos.
Isolamento e cultivo de fungos
A obteno de culturas de fungos, a partir dos substratos onde ocorrem, requer o dorruno de
tcnicas e o emprego de cuidados especiais. Os procedimentos, as frmulas, as receitas e as prticas so
variadrsslrnos, dependendo do tipo de fungo, da natureza do substrato e do ambiente no qual se trabalha.
imprescindrvel levar em considerao a assepsia e selecionar o meio mais indicado para isolamente.
Mtodos
Os esporos do ar, depositando-se na lmina com silicone ou glicerina, ficaro a ela aderidos. A
observao direta da lmina ao microscpio ptico comum poder, em muitos casos, permitir a identificao do fungo. Estudos mais acurados requerem a tcnica de exposio de placa-de-petri com meio
de cultura. O esporo, em contato com o meio de cultura adequado germinar, dando origem a uma colnia. No momento oportuno, as diversas colnias da placa-de-petri exposta, devero ser individual
mente repicadas, por meio de agulhas apropriadas (Fig. 4-5), em outras placas tambm com meio de
cultura, para o crescimento de culturasaxnicas, que so as indicadas para estudos mais minuciosos. A
preservao dessascolnias feita atravs de repicagens peridicas das colnias em novos meios, acondicionados em tubos de ensaio inclinados (Fig. 7), tamponados com algodo e gaze. A periodicidade
das repicagens em funo do tipo de fungo, do meio de cultura e das condies ambientais em que
so mantidos, mas de modo geral variam de 1-4 meses. Um dos meios de cultura mais utilizados o
BOA (ver capo 6), A manuteno de culturas em geladeiras, a temperaturas de 4100C, acarreta baixa
no metabolismo do fungo e menor dessecaodo prprio meio, possibilitando maior intervalo entre as
repicagens (6 meses).
Mtodos mais sofisticados de preservao de fungos (miclio ou esporos) podem ser a liofilizao, imerso da cultura em leo mineral, utilizao de nitrognio lquido e outros (ONI ONS, 1971).
2.2.3.
Herborizao
A - Materiais
t:
15
Mtodos
estufa
formo I
16
I.
"
glicerina
lactofenol com azul de algodo (ver capo 6)
lmina e laminula para microscopia (Fig. 10)
luto ou esmalte incolor para unhas
papel de filtro
place-de-petri de vidro ou de plilstico (polietileno ou policarbonato)
Ver - INSTRUOES GERAIS
B-
b. Para isolamento
Mtodos
2.3
Fungos de guascontinentais
Os fungos encontrados' em ambientes aquticos podem ser divididos em dois grandes grupos:
zoospricos (planospricos) - Fig. 8
no zoosprieos (aplanospricos)
Fungos zoospricos soaqueles realmente adaptados ao ambiente aqutico, pois possuem estruturas mveis de reproduo - zoosporos (Fig. 8) - dotados de um ou dois flagelos. O tipo, nrnero e modo de insero dos flagelos constituem importantes parmetros para a delimitao de grupos texonmieos.
Fungos no zoospricos so aqueles cujos esporos no apresentam flagelos.
Os fungos aquticos podem ser tambm encontrados no solo, atravs de estruturas de r esistncia, necessitando de gua apenas para completar seu ciclo de vida. Para a observao dessesfungos torna-se necessrio coletar amostras de gua e de solo, s quais adicionam-se iscasespeciais. amostra de
solo junta-se ainda gua requerida Pelo fungo.
2.3.1.
Coleta e Isolamento
A -
Materiais
a. Para iscagem
cido clondrico a 1%
frasco de 100ml, de boca larga e com tampa de polietileno
hidrxido de potssio a 2"10
hipoclorito de sdio (gua sanitria) a 10%
isca: asa de inseto (siriri); celofane; ecdise de cobra; epiderme de cebola; exoesqueleto
de camaro, lagosta ou siri; folha descorada ou fervida (gramineas); fruto (ma,
pera, ameixa, tomate verde, caqui, carambola, etc.): gro de plen (Liquidambar
sp, Pinus spp, Araucaria angustifo/ia, milho e outras gram(neas, etc.): graveto; inseto (inclusive larvas); semente (cnhamo, Grota/aria spp, laranja, melancia, etc.l
papel alumnio
.
papel encerado
saco de tela de nilon ou lata de alimento
17
B-
Mtodos
tampa.
Fungos que aparecem crescendo em outros substratos, como gros de plen, quitina e queratina, so de diversas naturezas e, devem ser isolados. Os substratos contendo os espcimes devem ser se
parados, lavados em gua destilada e, em seguida, colocados em placas-de-petri esterilizadas, adicionando-se mais substrato da mesma natureza e gua destilada esterilizada. Espera-se que haja invaso dos
novos substratos e produo de grande nmero de zoosporos que podero ser apanhados com uma pio
peta de Pasteur ou uma agulha com ponta em lao (Fig. 5) e inoculadas em meio prprio para cultivo.
Para observao dos flagelos, coloca-se i2 gotas de Karo na montagem, que pela sua maior
densidade diminui a mobilidade dos zoosporos facilitando a observao.
Alguns fungos, no entanto, no aparecem nas iscas colocadas nas amostras, em laboratrio.
Neste caso, as iscas, geralmente constituidas de frutos e gravetos, so colocadas em SdCOS feitos de tela
de nilon, com malha fina, ou ento, utilizam-se latas de alimentos, tais como, de leite, de chocolate
em p, etc., perfuradas com pregos em todas as suas faces. As latas ou sacos so amarrados a fios de
plstico e imersos nos corpos de gua, proteqendo-os adequadamente da curiosidade popular. Depois
de 2.3 semanas, as iscas so retiradas e lavadas em gua corrente, por cerca de 30 minutos. Jatos fortes devem ser utilizados para a remoo de detritos, bactrias, protozorios e pequenos invertebrados.
Se os fungos estiverem presentes, pequenas pstulas esbranquiadas aparecero, firmemente aderidas
epiderme do fruto. Cada pstula contm numerosos espcimes de fungos. Isolada uma pstula em
lmina, esta deve ser dissociada com agulhas histolgicas, sob microscpio estereoscpico, a fim de
separar os espcimes que, uma vez isolados, so colocados em gua destilada, entre lmina e laminula
para exame.
.
.
18
\.
;,
(
I.
2.3.2.
Preservao
A -
Materiais
gua desti lada ester iIizada
agulha histolgica
esmalte incolor
FAA (ver capo6)
frasco Pyrex de boca larga (60-200mll
lactofenol com azul de algodo (ver capo6)
lmina para rnicroscopia
Iam(nula
meio: extrato de malte a 2%, fub-de-milho (ver capo 6)
pipeta de Pasteur esterilizada
semente de cnhamo
][
.,..:(::.:.;~:,
7'l:::"<:.:~
:::.:y ':::'~~:.'.>:-:'~"".
J,
8 -
Mtodos
~':'fj."=
11
1I
C/I'
~III
I]
j:l:t::
;[
11
I, I. ~,;1'1 1'1I'" I
I,.:
..
III1
10
2.4
2.4.1.
<0'f\
Coleta e isolamento
A -
I:
Vltl)\i
Materiais '
J]
08S.
Figura 4. Agulha de repicagem. Figura 5. Agulha com ponta em lao. Figura 6. Lmina de barbear. Figura 7. Tubc de
ensaio com tampo de gaze e algodo e com meio de cultura solidificado inclinado. Figura 8. Fungos aquticos zoospricos com 1-2 flagelo,. Figura 9. Corpo de frutificao de basidiomlceto estipitado (Agaricale,).
19
I. para isolamento de fungos que atacam raizes de plantas relacionadas com a orla marrtirna deve-se preparar 45 vidros com 20ml de gua do mar esterilizada.
11. para obteno de fungos que crescem na areia deve-se levar:
papel celofane
20
,
placa-de-petri
p len de Pinus sp.
Ver - INSTRUOES
B -
Fungos microscpicos
GERAIS
Mtodos
Coletar
pedaos
de madeira
em processo de decomposio,
com dimenso
em torno
de
1O-15cm de comprimento,
obtidos de ambientes. como: parte alta, mdia e baixa da regio intertidal,
em rea acima da mar alta, dunas e entre rochas.
Para o exame dos fungos existentes nesses substratos, efetua-se o isolamento
por observao direta, sob lupa.
Em seqnia,
procede-seao
exame microscpico,
com o material
entre lmina e laminula
(Fig. 10). Para posterior
identificao,
pode-se inocular as estruturas
encontradas
em places-de-pstri
com meio de cultura,
Tubaki ou BOA (ver capo 6), contendo gua do mar e antibitico,
que fornecer
os nutrientes
bsicos para o desenvolvimento
do fungo e impedir o crescimento
de bactrias,
Folhas cardas e em estado de decomposio
tambm podem ser coletadas e estudadas aplicando-se este mesmo mtodo.
Outra tcnica consiste em recolher as amostras e di.stribu-Ias em garrafas escuras com boca lar.. gq (em posio hor izontal}
acomodadas
em toalha de papel dobrado e embebido
em gua'do mar este-
de dinmica e viva.
Para isolar fungos
cos) que impeam
2.5.1.
Coleta
A -
microscpicos
o crescimento
precisa-se
dos organismos
a. Coleta
lcool comum
algodo
esptula ou colher
(vrios
etiqueta
pina
Ver - INSTRUES
b. Isolamento
estante
estiete
lmina
para microscopia
laminula
meio de cultura
meio de cultura:
Ou
solidificado:
BDA
Czapek (ver capo 6)
Czapek, com antibiticos
(ver capo 6)
microscpio
astereoscpico
papel alurrunio ou pano de algodo limpo
papel de filtro ou outro papel absorvente
pina (vrios tamanhos)
pipeta de 0,5-1 ,Oml esterilizada
B -
para microscopia
B -
de gua destilada
com tampo
de gaze e al-
Mtodos
esterilizado
As amostras de solo, para anlise, devem ser coletadas com uma esptula ou colher, tomanco-se
o cuidado de esteriliz-Ia
parcialmente
com algodo embebido
em lcool, antes de cada coleta. Colo-
(ver capo 6)
larnnula
tubo
e rosa-de-bengala
bico-de-Bunsen
ou lamparina
bisturi ou lmina de barbear (Fig. 6)
cristalizador
ou recipiente grande de-vidro
Materiais
lmina
tamanhos)
GERAIS
godo hidrfobo
e isolamento
Preservao
lactofenol
indesejveis.
Materiais
A -
2.5
orgnicos
O solo um ambiente
muito complexo.
Est longe de ser um simples amontoado
de matria
inorgnica
sem vida, como costuma parecer. ~ na verdade habitado por bactrias, fungos, algas, pretozorios, artrpodos
(caros,
insetos), aneldios.
nematides.
moluscos e outros organismos
que. na
maioria das vezes, no se percebe por serem diminutos
ou microscpicos.
Todos esto em ntimo contato com minerais, razes, matria orgnica mona, etc. existentes no solo. H, portanto.
uma interao
muito grande entre todos esses componentes
do solo. fazendo com que ocorram transformaes
constantes. de natureza fsica. qumica e biolgica.
~ importante,
pois. considerar o solo como uma entida-
2.4.2.
do solo e em substratos
meios de cultura
(ver capo 6)
(Fig.
7),
crito
o.
21
no for
imediata,
mas, exigem
tratamento
mais rpido possrvel, devido perda da viabilidade
de hifas e esporas.
.
A coleta de substratos orgnicos como folhas, frutos. raizes, troncos. em diferentes estgios de
decomposio
ou no, insetos e outros pequenos animais feita com a mo usando-se os saquinhos de
plstico pelo avesso como luva ou com auxilio
de uma pina. Utilizam-se
saquinhos plsticos individuais para cada tipo de substrato. As regras de assepsia parcial e colocao de etiquetas, tal como des
Mtodos
de 25 x 12cm.
se a utilizao
22
para coleta
de solo, so idnticas
coleta.
r-
e colocado
em sacos pls-
B -
solidificado',
sem antibitico
Mtodos
2,6
Fungos e l/quens macroscpicos
contaminar.
O mtodo de diluio
do solo consiste em esterilizar
alguns tubos de ensaio com 9ml de gua
destilada cada um. Pesar 1,Og de solo da amostra e colocar em um dos tubos. Agitar bem. Este o tubo
da soluo inicial, o qual dever ser etiquetado
e marcado 1 :10. Com uma pipeta, retirar 1,Oml deste
tubo, e colocar em outro, marcando
1: 100, Do tubo 1: 100 retirar 1,Oml e colocar n tubo seguinte,
marcando
1: 1000. E assim sucessivamente,
usando uma pipeta esteril izada para cada transferncia,
marcando
as diluies e agitando os tubos a cada nova diluio. Transferir
1,Oml de cada tubo de diluio para placas esterilizadas
marcando-as
com a diluio
correspondente.
Verter o meio de cultura
(Czapek)
com antibiticos
(estreptomicina
+ rosa-de-bengala), ainda liquido, sobre as' placas e agitar
para espalhar a soluo no meio, Deixar solidificar
e observar o aparecimento
de colnias. Isolar as colnias, seguindo as recomendaes
para placa de solo, no esquecendo de anotar a que diluio pertencern.
Para isolamento
de fungos de substratos orgnicos usar o mtodo de presso de folhas que consiste em pressionar com a pina uma folha sobre a superfcie do meio de cultura com antibitico,
e retir-Ia em seguida. Deixar temperatura
ambiente e observar diariamente
o aparecimerito
de colnias,
Isolar as colnias
de aspectos diferentes,
seguindo as recomendaes
para placa de solo. Pode-se
pressionar, desta maneira, folhas em diferentes estgios de decomposio
ou recm-caldas.
O plaqueamento
de partes do substrato feito colocando,
numa placa-de-petri
esterilizada,
pequena subamostra
da coleta. Com o bisturi, cortar osubstrato
em pedacinhos.
Depositar
1-3 pedacinhos no centro
de uma placa com meio de cultura com antibiticos.
Verter pequena quantidade
de
gua esterilizada
sobre o substrato, .fazer movimentos
circulares para espalhar a gua e deixar temperatura ambiente,
Isolar as colnias em crescimento
seguindo as recomendaes
para placa de solo. Cuidar para que os instrumentos
sejam esterilizados
parcialmente
com lcool, a cada mudana de substrato, mesmo pertencente
mesma amostra, Se a amostra for de insetos muito pequenos, coloc-tos nas
placas sem cortar.
Para isolamento
de fungos do esterco de herbivoros,
preparar o cristalizador,
colocando
dentro
papel de filtro embebido
em gua. Introduzir
o esterco e tampar. Se for outro tipo de recipiente,
tampar com papel aluminio
ou amarrar um pano limpo. Deix-to temperatura
ambiente
e ao abrigo do
sol, porm, com iluminao.
Cuidar para que insetos e outros artrpodos
no penetrem no recipiente.
Observar macroscopicament
os fungos que aparecero. Tentar isol-los, tal como em placa de solo,
mas no colocar esterco na placa com meio, pois, outros microrganismos
podero crescer. Se tomado
esse cuidado,
isso acontecer,
isolar o fungo novamente. Observar os fungos ao microscpio,
entre lmina e laminula.
Para o isolamento
de fungos "aquticos"
do solo, ver item 2.3.1.
2_5.2.
Preservao
A -
Materiais
gua destilada ou meio de montagem
blsamo-do-Canad
benzina
bico-de-Bunsen
ou lamparina
esmalte incolor
estante para tubo de ensaio
Existe uma variao muito grande de fungos e liquens macroscpicos. Para coleta, preservao
e herborizao
levam-se, especialmente,
em considerao,
o tamanho e a consistncia,
Alguns, aps coleta, decompem-se
rapidamente,
tomando-se
impossivel
reconhec-tos, Nas tcnicas recomendadas,
procurou-se
abranger o maior nmero de fungos, embora, alguns, exijam procedimentos
especiais que
fogem ao objetivo deste manual.
.
Uquens ocorrem tanto sobre madeira como sobre rochas e folhas vivas. Ouando sobre pedra,
necessrio equipamento
especial, como martelo e talhadeira
usados pelos gelogos,
So relacionados
materiais considerados
ideais embora, algumas vezes, dispensveis ou substituiveis.
Em qualquer
2_6.1.
caso, cuidado
A -
Materiais
carta de cores
cristalizador
esptula
folha de papel com uma das metades branca e outra
frasco de vidro com tampa de plstico ( 200m!)
preta,
B -
ou l-
Mtodos
Coletar preferencialmente
pela manh para dispor do resto do dia para o preparo e secagem do
mas, no muito cedo, pois o orvalho deixa o material muito molhado e fcil de embolorar.
Retirar, com faca ou esptula, o material por inteiro com cuidado, afofando em volta do subsevitando quebra ou esfarelamento.
Trazer junto parte do substrato.
material
trato,
especifico
Coleta
as atividades de intercmbio
da instituio,
de cinco duplicatas. A coleta de material fi-
Acomodar
com cuidado
e convenientemente
o material
coletado dentro da cesta ou sacola.
Proteger com folhas de jornal. Ouando muito grande embrulha-se
em jornal amarrarido com barbante.
Quando muito pequenos e frgeis (mixomicetos),
fixa-se o material com cola plstica no fundo de uma.
caixa de fsforo,
24 .
23
1.
! ,
"~o
No caso de fungos e liquens de textura crostosa procurar sobre o solo e outros substratos, como tambm em qualquer superf(cie voltada para o solo.
.
Na coleta de fungos de textura carnosa ou macia (delicada) aconselhvel fotografar ou desenhar o material no local, assim como anotar suas cores, utilizando para tanto uma carta de cores, pois
podem mudar muito de aspecto depois de secos. Em seguida, colocar em saco de papel ou plstico
acompanhado de pedaos de folhas verdes para preservar umidade.
To cedo quanto possivel, separar os prleos (Fig. 9) para coleta de esporas (excludos gasteromicetos cujos esporas se acumulam no interior e em seguida: a. separar o estipe do pileo; b. colocar o
pi'leo sobre o meio da folha de coleta de esporas com as lamelas, dentes, poros ou a parte frtil, voltadas para o papel; metade deve ficar sobre a parte branca e metade sobre a parte negra; c. colocar em
cmara mida (recipiente coberto - cristalizador - contendo em seu interior papel de filtro ou algodo para manter a umidade); d. aguardar 12 horas; e. retirar o fungo, dobrar as falhas, sec-Iase guardar no mesmo saco de coleta. Os esporas sero utilizados para identificao da espcie.
Para fungos deliqescentes, como por exemplo Coprinus, melhor trazer em saco aberto para
diminuir a autodigesto ou colocar diretamente em frasco contendo fixador.
2.6.2.
Mtodos
Preservao
A - Materiais
i.:'
...!
ver
Mtodos
Para preservao de material seco em herbrio, coletar cuidadosamente com a esptula o material de interesse, se possvel com parte do substrato. No caso de fungos de aspecto pulverulento, acondicionar os diferentes espcimes em caixas de fsforo ou papelo, de acordo com a convenincia e dimenses do material.
Como geralmente os fungos pulverulentos so frgeis, liberando com facilidade grande quantidade de esporas, sugere-se, no momento da coleta, fixar o material nas caixas, com o auxilio de cola
plstica. Esta mais indicada, por ser menos susceptvel ao ataque por outros fungos e insetos e por secar rapidamente.
.
No caso de fungos crustosos a secagem pode se processar ao solou em estufa por cerca de 24
horas a uma temperatura de aproximadamente 400C.
Os demais fungos so secados ao sol, ou em estufa, no prprio saco de coleta, temperatura
entre 50600C. No caso de material carnoso muito espesso ou quando conveniente, cortar em fatias,
dispor sobre cartollnaenvolver
com diversas camadas de jornal, prensar e secar.
'
Quando um material, aps a secagem, se torna muito r(gido e quebradio, recomenda-se deix-Ia absorvera umidade do ar por 24 horas antes de guard-Ia.
Para preservao em meio I(quido coloca-se o material em frasco com fixador. Isso pode ser
feito no momento da coleta ou depois.
Outros tipos de preservao so a liofilizao (ONIONS, 1971) e preservao em meio de cultura por inoculao de esporas ou por pedaos do corpo frutifero.
2_6.3_ Herborizao
A.-
Materiais
caixa de papelo (tamanhos diversos - so mais usadas as caixas de 10 x 12 x 5cm,
10 x 12 x 15cm, 14 x 22 x 15cm, respectivamente, de largura, comprimento e altura)
25
26
r';'
r'
3
BRIFITAS
3.1
Introduo
A diviso Brifita constituda de trs classes: musgos, hepticas e antceros. No entanto, o
nome musgo aplicado pelo leigo tanto a representantes das trs classes,como tambm, a Iquens, algumas pteridfitas (Lycopodium, SelaginellaJ e, at mesmo, a algumas fanergamas da farrn lia bromelicea (Tillandsia usneoides, conhecida como "musgo espanhol" ou "barba-de-velho").
Na colorao, as brifitas so na maioria verdes, variando do verde escuro ao verde-amarelado,
exceto os "musgos brancos" e os "musgos de turfeiras" que so paleceos, rseos e vinosos.
As brifitas crescem nos mais variados substratos tais como: tronco vivo, ou em decomposio,
humus, superfl'cie de rochas, solo arenoso, argiloso, calcreo. folhas vivas, conchas e outros materiais
orgnicos.
As brifitas so encontradas tanto em florestas de regies midas, como tambm no cerrado,
na caatinga e mesmo no deserto, onde a umidade relativa muito baixa.
3.2
Tcnicas
3.2.1.
Coleta
A -
Materiais
BRIOFITAS
caixa de papelo grande
leno de papel macio
saco confeccionado com jornal (19 x 12,5cm)
tesoura pequena
Ver - INSTRUOES GERAIS
Diga Yano
B-
Mtodos
Quase no existe tcnica especial para a coleta de brifitas, porque o material de fcil conservao; raramente embalara e quase no atacado por insetos, quando seco. Como conseqncia, os
amadores tm coletado as brifitas desde tempos remotos.
O material, sempre coletado com um pouco do substrato, deve ser secado temperatura ambiente ou levemente prensado entre jornal ou papel chupo, mas nunca colocado em prensa. Quando a
brifita possui caulrdio ereto (Ex.: Polytrichum) os indivduos devem ser arrumados todos numa mesma posio, para evitar o emaranhamento. Sempre que for o caso, deve-se coletar tanto os gametfitos
masculinos como os femininos. Havendo poucos esporfitos, estes so separados e colocados juntos,
no saco original, com o mesmo nmero, para evitar que se percam ria meio do material. Recomenda-se
que o material coletado seja mantido temperatura aproximada de 230C. Em se tratando de brifita
aqutica ou muito mida, retira-se o excesso de gua, comprimindo-a levemente entre papel chupo,
sem espremer e, em seguida, para reduzir a umidade, coloca-se em saco de papel comum ou confeccionado com jornal evitando seu estiolamento ou emboloramento. Permanecendo o material coletado em
recipiente, apenas por 1-2 dias, pode-se usar saco plstico, evitando-se excesso de gua e compresso.
Sendo a expedio muito longa, as colees de um mesmo local ou do mesmo dia so colocadas em
saco plstico grande ou em caixa de papelo com as respectivas data de modo a evitar mistura. Material
vivo pode ser assim conservado sob refrigerao (2-30C), desde que a planta permanea apenas mida
e fique solta no saco.
Sempre que possrvel, coleta-se quantidade suficiente de material para estudos posteriores e para a confeco de duplicatas. Quando muito misturado, o material deve ser dissociado e deixado dentro do mesmo saco. Se em grande quantidade, distribui-se em sacos diverssos, sempre com o rnesmo
nmero, mas diferenciados por letras. Em cada pacote so escritos os nomes das espcies associadas.
Tambm importante o uso de sacos pequenos para manter as espcies delicadas, em boas cond ies
ou para estudo microscpico, com a proteo adicional de leno de papel macio. No prprio saco de
papel so feitas as anotaes.
28
!~
".
3.2.2.
Preservao
A - Materiais
FAA (ver capo 6)
formalina (= formal 40%) a 1%
soluo de Transeau (ver capo 6)
B -
Mtodos
Preservao somente usada para as estruturas delicadas, como por exemplo, talo, espor6fitos
e anteridios de hepticas e ant6ceros, que so fixados-em FAA, soluo de Transeau ou em formalina
a 1%.
3.2.3.
Herborizao
A -
Materiais
envelope padronizado (12,8 x 9,5cm) de papel sulfite (28 x 21 ,5cm)
B -
Para a secagem de bri6fitas, coloca-se o material entre jornais, espalhando-o e depois apertando-o levemente. Depois de secado temperatura ambiente ou em estufa (nas regies tropicais midas)
o material colocado em sacos de papel e, em seguida, dentro de um envelope padronizado (12,8 x
9,5cm). confeccionado com papel sulfite, (28 x 21 ,5cm), conforme modelo indicado (Fig. 11). Esses
envelopes so rotulados e colocados em caixas de tamanho padro ou em gavetas.
1
1
1
Q~~_----------------
1
1
'1
o
ai
- - - ~- - - r
_J_ - - - ~ - -
12.8
em
4.1Icm
l~
4
3l~
f---..!
4.11em
21.5 em
2 I
I,
.. ,....
11
'~
Mtodos
de envelope padro
29
30
(;
,"
I,'
4
PTERIDOFITAS
(-
FANEROGAMAS
4.1
Introduo
4
PTERIDFITAS
FANEROGAMAS
4.1. INTRODUO
De autoria dos responsveis pelas partes deste captulo
4.2. PTERIDOFITAS
Amaldo
c-
Tosta Silva
4.3. FANEROGAMAS
Sempre que possivel deve-se colher um minimo de cinco exemplares (espcimes ou ramos) de
uma planta, em seu estado mais perfeito e completo. Na coleta de uma planta intelra aconselha-se o
uso de desplantador que permitir a retirada do sistema subterrneo sem grandes danos e no arranc-Ia do solo, puxando-a por qualquer de suas partes. Os exemplares no devem ultrapassar 3O-40cm.
Caso, entretanto, isto venha a acontecer com uma planta inteira, o que ultrapassar deve ser dobrado
em V ou N (F ig. 12). de forma a caber na cartolina padro de herbrio. Quando o tamanho do exem
piar, espcime ou' parte dele (ramos, folhas, etc.) ultrapassar em demasia as dimenses desejadas, recomeada-se seu corte no tamanho adequado e no, quebr-to ou rasq-10. Cada segmento deve receber,
ento, a indicao da frao que representa do todo (Ex.: "Parte um de cinco partes"). O conjunto
de fraes relativas a um mesmo exemplar deve permanecer sempre junto e sob o mesmo nmero de
herbrio. Os ramos so cortados, sempre que possvel, junto com folhas, flores e frutos, indispens
veis que so, em geral, identificao das plantas. Sendo vivel, o espcime a ser conservado em her
brio, deve incluir tambm, raiz e caule. No caso de plantas monicas di'clinas ou de plantas diicas,
especial cuidado deve ser tomado na obteno de flores de ambos os sexos. Para evitar que flores se:
jam danificadas por aderncia s asperezas do jornal, recomendado, quando necessrio, proteq- Ias
com papel manteiga. Tanto quanto possivel, deve evitar-se o corte da extremidade das inflorescncias. Frutos secos, que pelo seu tamanho no possam ficar presos aos respectivos ramos, ou frutos caro
nosos, so colocados em sacos de papel, devidamente rotulados, com numerao igual a do ramo, do
qual foram destacados.
Obs.: Evita-se colher material muito mido, pois, alm de dificultar a secagem, propicia orpido apodrecimento e o emboloramento. Tambm, no se recomenda coletar frutos e sementes que
estejam no cho sob uma rvore, j que podem no pertencer mesma e terem sido trazidos por enxurradas ou por qualquer outro meio.
'
HERBCEAS
ARBUSTIVAS
ARBOREAS
Alcebiades Custodio
Waldir Mantovani
4.6. FANEROGAMAS
Filho
SUCULENTAS OU VOLUMOSAS
('
AQUTICAS
,'I
('
32
I
!
-e
~'.'
minuio do volume. A fim de acelerar a secagem pode-se transferir o material para estufa com circulao de ar quente, onde permanecer por 10-12 horas ou mais, dependendo de sua consistncia. Antes
de levar a prensa estufa, coloca-se uma chapa de alumt'nio corrugado entre as folhas de papelo canelado com o sentido do corrugado acompanhando o dos canais do papelo enquanto as prensas so colocadas na estufa em posio tal que favorea a circulao de ar. Evita-se o ressecamento excessivo
pois. as plantas perdero muito do colorido, alm de se tornarem quebradias. Uma vez secosos exemplares, deles se retira todo material inaproveitvel e que no oferea qualquer informao cientfica
adicional (Ex.: excesso de ramagem, materiais estranhos, folhas secas,partes corrodas ou semi-decompostas, etc.) tornando-os, assim, mais fceis de serem examinados, mais limpos e em condies de ofecerem melhor apresentao exsicata. Esta montada sobre cartolina cortada no tamanho padro utilizado no herbrio (no Brasil, o tamanho mais econmico e usual o ele 42 x 2Bcm) e qual o espcime preso, usualmente costurado, enquanto, materiais delicados ou de pequeno porte so colocados
elentro de envelope resistente que colado cartolina. Rtulo, contendo os dados de coleta, igualmente colado. Em seguida registra-se a exslcata apondo sobre a mesma o nmero de herbrio a ela
correspondente, bem como, sobre a capa que ir revesti'-Ia. Esta, em bom nmero de herbrios, de
papel pardo resistente, enquanto, em outros usam-se capas diferenciadas em suas cores, de acordo
com a correlao estabelecida com sua procedncia geogrfica.
Obs.: Alguns rgos vegeiais (espatas, frutos e estrbilos) ou amostras de madeira que so de
difl'cil herborizao por sua constituio e tamanho, podem ser guardados em colees separadas, em
carpotecas ou xilotecas, mantendo-se no registro o nmero da exsicata de herbrio . qual se relacionem.
Todas as partes de uma pteridfita so necessrias taxonomia, portanto, cada planta deve ser
coletada inteira. A ausncia de qualquer parte, desvaloriza e, s vzes, at impossibilita uma identificao precisa, razo pela qual se recomenda o emprego de desplantador, tesoura de poda e estopa para a
coleta, sem causar grandes danos, e a necessria proteo do material.
No caso das psilotceas, himenofilceas e outras que possuem rizoma muito incrustado em seus
substratos, parte deste deve ser removido junto com a planta.
Das arbreas, coleta-se a fronde toda, inclusive as escamasda base da raque, se for o caso.
4.2.2.
Preservao
A - Materiais
Conforme requeridos pelo mtodo escolhido (ver 4.2.2.B)
B-
Mtodos
H grande diversidade de porte e de habitar entre as pteridfitas. Assim sendo, possivel encontrar-se pteridfitas herbceas, arbustivas, arbreas e aquticas. As tcnicas de preservao diferem
entre si, mas, equivalem-se s utilizadas para plantas fanerogmicas em condies equivalentes, onde essastcnicas so descritas.
4.2.3.
4,2
Herborizao
A - Materiais
Pteridfitas
B-
Mtodos
Ver 4.1:
4.2.1.
herbceas
Coleta
A -
Materiais
desplantador (ou outro implemento que sirva para a remoo das plantas) - Fig. 31
estopa
tesoura de poda
Ver - INSTRUOES GERAIS
B-
Mtodos
Ver 4.1. PADRO GERAL DE COLETA
As plantas destinadas ao cultivo devem ser coletadas quando ainda jovens, isto , em forma de
"mudas". Quando novas, as plantas apresentam maior viabilidade para adaptao nos ambientes em
que so cultivadas. Contudo, algumas espcies de pteridfitas, so pouco prejudicadascom o transplante.
Os rizomas tambm podem brotar e constituir novas plantas.
Para fins taxonmicos, aspteridfitas, devem ser coletadas apenas quando frteis, ou seja, quando possuem rgos de reproduo assexuada. Nas pteridfitas, estes rgos no formam flores, e sim
soros, conjunto de esporngios, visrveis com auxlio de uma lupa ou mesmo a olho nu, dentro dos
quais se acham os esporos.
33
Em qualquer ecossistema, observa-se a presena de plantas de pequeno porte, com rgos epgeos ou subterrneos com pouca ou nenhuma lignificao. Estas so plantas herbceas,geralmente de
caule fino e delicado, no qual o meristema do cmbio vascular acha-se ausente ou com desenvolvimento. No entanto, em certas famlias ocorrem herbceas de grande porte, tais como: musceas, gramneas, marantceas, etc.
As plantas herbceas so comuns em monocotiledneas e em vrias famlias de dicotiledneas.
Das angiospermas que possuem bulbos ou colmes. a maioria monocotilednea, especialmente da ordem Liliales.
As herbceas so em g'eral anuais, isto , florescem e frutificam em um ano; mas h, tambm,
representantes bienais, que completam seu ciclo vital em dois anos, ou as perenes, que continuam indefinidamente o processo biolgico, em geral com florao anual.
Adaptaes morfolgicas ou fisiolgicas existentes em vrias plantas herbceaspossibilitam que
sobrevivam em habitats desfavorveis. O grupo das plantas efmeras, xerfitas, resiste seca, porque
completa seu ciclo de vida, enquanto h gua disponvel no ambiente (plantas anuais); outras herbceas adaptadas a ambientes ridos so as portadoras de sistema subterrneo, com reservas nutritivas,
que Ihes permitem suportar a seca ou o frio. comum tambm, em muitas gramneas e ciperceas de
campos cerrados, a presena de restos de bainhas foliares (tnicas), protegendo as partes vivas da planta na poca das queimadas. Certas qramneas. convolvulceas, malpiguiceas, amarantceas, etc. contribuem, com seus estoles e rizomas para reduzir a movimentao de dunas.
4.3.1.
34
Coleta
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A -
Em plantas muito altas, a superposio de folhas e ramos deve ser evitada, cortando-se a planta
em pores menores, ou herborizando apenas as partes basal, mdia eterrninal. como em certas qr arruneas. Neste caso, no esquecer de numerar a folha onde cada parte foi colocada, segundo a ordem na
Materiais
desplantador (F ig. 31)
picaretinha (camartelo)
tesoura de poda
Mtodos
4.4
Ver 4.1: PADRO GERAL DE COLETA
Fanergamas arbustivas
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4.3.2.
Preservao
Define-se arbusto como vegetal lenhoso, de menos de 5m de altura, sem um tronco pr eponde-
A - Materiais
lcool
gua desti lada
FAA (ver capo6)
frasco' de vidro com tampa (vrios tamanhos)
glicerina pura
parafina ou cera de abelha ou breu
pina
Sulfato de cobre
Coleta
Mtodos
Herborizao
A -
Materiais
Ver -INSTRUES
B-
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4.4.1.
A - Materiais
B-
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j-
cajado de corda
frasco de vidro com tarnpa (vrios tamanhos)
gancho para abaixar e/ou cortar galhos (forrnatos diversos) - F ig. 13-16
tesoura de alto-poda com cabo de encaixe (Fig, 1719)
tesoura de poda manual
Ver - INSTRUES GERAIS
B-
GERAIS
Mtodos
Cabe chamar a ateno para o fato de que muitas plantas possuem flores minsculas que so-
Mtodos
4.4,2,
Preservao
A -
Caso os espcimes herbceos, de 1,Om a 1,5m (como certas gramineas), tenham tendncia de se
desdobrarem, devem ser amarrados levemente ou presos com a segunda capa colocada dentro da primeira pasta em posio oposta, para que no se soltem pelas laterais do invlucro. Ao arnarr-los, no
se utiliza esparadrapo ou fita adesiva.
35
Materiais
36
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lquido
soluo
soluo
soluo
soluo
B-
Mtodos
Algumas plantas devem ser preservadas em meio lquido. Frutos carnosos ou flores muito tnues so colocados em tubos ou frascos de tamanhos variveis.
As recomendaes descri tasem 4.3.2.8 para o uso de lquido conservador, aqui tambm se aplicam. Para conservao da cor verde do material, adiciona-se sulfato de cobre soluo de FAA (ver
capo 6). Depois de retirado o excesso de sulfato do material por lavagem, a planta transferi da definitivamente para a mesma soluo sem sulfato. Em se tratando de partes suculentas, acrescenta-se, soluo, definitiva, at 20% de glicerina. As plantas submetidas a estes diversos lquidos, podero ser novamente preparadas a seco na prensa, depois de lavadas e enxutas.
Alm deste processo, o mais usado o emprego de lcool a 70%, 85% e mesmo 90%, conforme
o caso. Quanto aos inconvenientes que determina, veja 4.3.2.
Outra soluo conservadora a de formal comercial (formalina), que no aqeto violentamente como o lcool na descolorao dos tecidos.
Para partes vegetais que se tornaram quebradias, em especial as carnosas, recomenda-se uma
mistura, em partes iguais, de gua destilada, lcool a 900 e glicerina pura.
Esta mistura poder ser usada tambm como amolecedor de material seco de herbrio.
Excelentes resultados na conservao de cores naturais das plantas so obtidos pelo emprego
do processo de Orummond edo lquido de Hammarlund (ver capo 6.1, b-c).
4.4.3.
Herborizao
A -
Materiais
Ver - INSTRUOES GERAIS
B-
Mtodos
Ver 4.1: PADRO GERAL DE HERBORIZAO
4.5
Fanergamas arbreas
As rvores so plantas lenhosas perenes que apresentam um caule principal, sem ramificaes,
que se distingue da copa. So os maiores vegetais existentes, atingindo vrios metros de altura.
O principal problema na coleta das amostras para herborizao de espcies arbreas a localizao dos ramos frteis, geralmente nas partes mais altas do vegetal. Alm disto, freqente enoontrar-se rvores em formaes densas, com suas copas entrelaadas, aumentando a dificuldade da amostragem.
4.5.1.
Coleta
A -
o tamanho
da folha de herbrio,
mostrando
Materiais
::
1
peso de chumbo (50,300g)
serra, serro te ou motosserra
serra articulada (Fig, 27)
tesoura de alto-poda com cabo de encaixe (Fig, 17-19)
tesoura de poda manual
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Mtodos
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Um dos mtodos mais simples para a coleta de plantas arb6reas o do uso de ganchos (Fig,
13-16) presos numa extremidade de varas de altura desejada, fixa, ou num lance encaixvel de aturrunio ou de bambu, Por trao ou empuxo os ramos florlsticos e/ou frutiferos so derrubados,
Utiliza-se, tambm, tesoura de alto-poda que elevada at o ramo desejado, atravs de lances
encaixveisde alurru'nio ou bambu de fcil transporte e manuseio (Fig, 17-19). A tesoura acionada
,mecanicamente por um cordel.
,
'Em certos casos emprega-se espingarda de calibre 22 a 45 alvejando' o' ramo desejado,
A escalada de rvores, para coleta, pode ser feita com auxilio de esporas que se prendem ao calado e se fixam nos troncos e de correias presas a uma cinta e passadasao redor do tronco, segurando
o coletar (F ig, 20 -22, 241, Neste processo recomenda-se um bom treinarriento prvio,
Diferentes tipos de escadas podem ser utilizadas na coleta de plantas arbreas. A escada articulada encontrada no mercado com lances de 2m, de alurnrnio, de fcil manuseio, bem como, resistente e leve para o transporte, Cada lance provido de uma correia de couro pela qual se prende ao
tronco do vegetal e com encaixes para o lance seguinte, A escada de corda (KUHLMANN, 1947), consiste de uma corda com ns simples, espaados de aproximadamente 30cm entre si. Esta corda tem
presa na sua extremidade um gancho de ferro que a fixar num ramo capaz de suportar o peso do coletar (Fig, 231. A fixao da escada de corda feita com o arremesso de um peso amarrado a uma linha
de nilon (ver forma de arremesso - Fig, 251, que alm de servir para o posicionamento da escada, servir tambm para sua retirada (Fig, 25), A extremidade da corda que fica no solo presa a um toco,
raiz ou pino (Fig. 231. a fim de evitar oscilaes, Para sua utilizao so necessrios dois ganchos, ajustados ao calado por meio de correias, que serviro para o apoio nos ns. Por segurana, usa-seum gancho preso a um cinturo de couro, que tambm se apoia na escada por um n e libera as mos do coletar para manejo dos instrumentos de corte, Em ambas as escadas, ao atingir o ioeal adequado a, conforme a disposio e/ou resistncia do material a ser coletado, o coletar usar tesoura manual ou de
alto-poda, serra, serrote ou motosserra.
Outra tcnica que pode ser utilizada para a coleta consiste no arremesso manual de uma pea
de metal pintada (branca ou vermelha) de 200-3009, presa a uma linha de nilon, que deve passar sobre o ramo desejado (Fig, 25). O arremesso pode ser feito tambm por meio de estilingue usando-se
uma pea de 50-1 OOg,A linha de nilon prende-se a uma corda na outra extremidade que assim passada sobre o ramo, Juntando-se as duas pontas da corda e tracionando-a, o ramo deve partir-se e vir ao
solo, Neste processo pode-se acrescentar as tcnicas descritas por KUHLMANN (19471 que incluem o
uso de serra articulada ou fixa na parte mediana da corda (Fig, 26-271, serrando-se o ramo desejado.
4,5,2,
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Preservao
A -
21
Materiais
etiqueta
formalina (= formal 40%) ou FAA (ver capo6)
frasco de vidro coni tampa (vrios tamanhos)
lpis ou caneta a prova d'gua
parafina
.
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B --Mtodos
Figuras 13-16, Ganchos, Figuras 1719. Tesouras de alto-poda, Figuras 2021, Espora especial. Figuras 22, Cinto de se.
gurana,
.
39
Consiste em colocar a planta ou partes da planta em frascos contendo fixador (FAA ou formalina),
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19471.
44
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Os dados sobre a planta, devem ser escritos a lois ou a caneta prova d'gua numa etiqueta de
papel e colocados dentro de um vidro com o material. Deve-se cuidar para que a concentrao
inicial
do preservado no seja alterada por evaporao ou por diluio, em conseqncia
de perda de gua peIa prpria planta.
Os frascos tampados devem ser calafetados com parafina.
4.5.3.
Herborizao
A -
Materiais
Ver -
B -
INSTRUES
GERAIS
Mtodos
Ver
4.1.
PADRAO
GERAL
DE HERBORIZAAO
4.6
Fanergamas suculentas ou volumosas
Materiais
botnicos
muito volumosos,
como grandes frutos, flores carnosas, plantas suculentas,
ou mesmo, caules e raizes muito desenvolvidos,
apresentam dois grandes problemas
na herborizao:
precisam ser mantidos
durante mais tempo na secagem e, ao serem prensados perdem muitas das formas primitivas
da planta viva por amassamento
ou enrugamento.
Alm disso. muitas plantas suculentas, como crassulceas e partes vegetativas de orqurdeas, resistem muito aos mtodos usuais de secagem
e no morrem,
podendo
continuar
seu crescimento,
perdendo as folhas e adquirindo
uma aparncia
anormal.
(.
As orqudeas
normalmente
apresentam
um acentuado contraste entre a suculncia das partes
vegetativas e a tenuidade
das flores, 'de forma que, ao serem secas segundo as tcnicas usuais, as flores
tornam-se ressecadas, enquanto
as partes vegetativas mal comeam a secar. So, portanto,
necessrias
precaues especiais.
4.6.1.
Coleta
A -
Materiais
desplantador
(F ig. 31)
tesoura de poda
Ver -INSTRUES
GERAIS
B -
Mtodos
Ver
4.1.
PADRAO
GERAL
DE COLETA
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Figura
27,
Serra
articulada
Kuhlmann,
materiais.
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4.6.2.
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Preservao
A -
Materiais
lcool 50% a 70%
etiqueta
FAA (ver capo 6)
formalina
(= formal
glicerina
1947),
46
45
40%)
(,
rparafina
sulfato de oxiquinolina
vidraria
B-
Mtodos
Herborizao
A -
Materiais
gua
areia
caixa ou frasco com tampa (vrios tamanhos)
faca com bainha (Fig. 32)
formo I
naftalina
sal
vinagre (cido actico)
Ver - INSTRUES GERAIS
B-
palhar um pouco de naftalina sobre o material mido, que alm de absorver a umidade funciona tambm como fungicida (JOHNSTON, 1939), Como alternativa, coloca-se o material entre duas folhas de
papel absorvente e passa-secuidadosamente com ferro eltrico, completando-se a secagem em estufa
(BIMONT, 1945) Um procedimento pouco conhecido, mais trabalhoso, mas que traz bons resultados,
o "banho de areia" (HARRIS, 1977), A planta deitada num recipiente em cujo fundo tenha sido
colocada uma fina camada de areia lavada; areia intensamente aquecida, ento despejada sobre a
planta. Deixa-se esfriar o conjunto e, posteriormente, retira-se o material para prens-to e sec-Io em
estufa. Plantas excessivamente suculentas, especialmente certos pseudobulbos de orqudeas
(a maioria
dos Catasetum, Cycnoches e Cyrtopodiuml.
vrias bromeliceas e cactceas. podem receber talhos nas
regies carnosas, o que facilita a evaporao da gua durante a secagem. tambm comum fazer-se um
corte longitudinal por onde se retira parte do tecido interno. Plantas com formas excntricas, so encontradas com certa freqncia entre euforbiceas e cactceas. No caso dos cactos, pode-se utilizar
apenas algumas costela, ou apenas uma costela florida, acompanhada por uma seco transversal da
planta, para mostrar o nmero de costelas que a compem. Aconselha-se anotar no rtulo, que acompanha o espcime de herbrio, o procedimento adotado para orientar estudos futuros.
preciso salientar que, para todas as plantas ou partes de plantas volumosas citadas anteriormente, deve-se tomar o cuidado de suplementar as informaes, com anotaes pormenorizadas, fotografias e/ou bons esquemas. a fim de que, o aspecto geral da planta no seja perdido.
4,7
Fanergamas aquticas
Os limites do conceito de planta aqutica variam de um autor para outro.
Em termos gerais so considerados, como "planta aqutica", os vegetais que, para sua sobrevivncia e propagao, necessitam mais da gua do que do solo ou que; mesmo quando fixos neste, no a
dispensam, pois tanto para germinao como para o crescimento exigem que pelo menos suas ra(zes
nela fiquem imersas (THEOPHRASTUS in SeUL THORPE, 1967; HOEHNE, 1948; FASSETT, 1957)
Muitos autores no enquadram entre "plantas aquticas", as de brejo, de quedas d'gua, ou de guas'
salgadase salobras.
..
.
Para efeito de tcnicas de coleta, preservao e herborizao, o que realmente importa so os
cuidados especiais que esse agrupamento venha requerer, em funo da estrutura de seus 6rgos e do
excesso de gua acumulado nos tecidos.
O cultivo de plantas aquticas no pede muitos cuidados. Espcies flutuantes, dado o colorido
e beleza de suas folhas e flores, so muito utilizadas como ornamento em lagos, tanques, represas, etc.,
enquanto as subrnersas so usadas tanto para embelezar aqurios como para suprr-ios de oxignio.
Plantas aquticas so muito procuradas, pois, suas folhas servem como esconderijo para peixes
e outros animais contra seus predadores e como fonte de alimento para seresde vida aqutica.
Mtodos
4.7.1.
Coleta
A - Materiais
Os frutos, tubrculos, bulbos, razes tuberosas grandes e xilop6dios podem ser cortados em
seces longi tudinais e transversais com espessurade 0,5-1 ,Ocme secosna prensa, juntamente com as demais partes da planta. O aspecto externo do material importante, sendo aconselhvel que se herborize, juntamente, um trecho da estrutura de revestimento. Essasestruturas tambm podem ser penduradas intactas na estufa e, aps secagem, guardadas em coleo parte. No caso de flores grandes, como
as de certas cactceas, parte-se uma flor longitudinalmente ao meio, utilizando-se apenas uma metade,
a fim de que as estruturas internas sejam facilmente observadas.
'
As plantas com rgos suculentos, como pseudobulbos de orqudeas, folhas de babosa (Aloe},
pita (Fourcroye}, foiha-da-fortuna (Ketenchoe}, necessitam de muito tempo para secar, pois a gua
fortemente retida pelo tecido vivo. Para contornar este problema, mata-se a planta antes de prens-Ia,
o que torna a perda da gua mais rpida. O mtodo consiste em rnerqulbar-se a planta ernvinagre, lcool, formal ou numa mistura dos dois ltimos por algum tempo (cerca de uma hora, variando com a
suculncia da mesma) ou ento, em gua fervente durante cerca de um minuto (TOLEDO, 1942). Neste ltimo caso, desejando-se manter a cor verde natural sem grande alterao acrescenta-se um pouco
de sal gua, evitando-se o excesso, pois o sal, sendo higr6filo, pode ocasionar problemas de umidade
nos espcimes de herbrio. Nunca se deve colocar as flores em gua quente. Aps mergulhar os materiais em lquidos, deve-se enxu-los. em papel absorvente, antes de coloc-tos na prensa: Pode-se es-
balde
balsa com dois varejes
bota de borracha de cano mdio e longo
camartelo
desplantador (F ig. 31)
enxada (F ig. 29)
luva de borracha
p
peneira de tamano mdio com malha fina
picaretinha
tesoura de poda
Ver - INSTRUES GERAIS
B-
47
Mtodos
f-
No caso detransporte da plaina viva, usam-sesacos plsticos ou baldes com um pouco de gua.
Coloca-se a planta juntamente com um papel contendo o nome elo coletar e nmero de coleta e data
escritos a lpis, fechando-se os sacos com barbante ou cordinha.
Costuma-se usar binculo em excurses para localizao de reas de coleta distantes e mquina
fotogrfica quando documentao complementar se fizer necessria.
As anotaes, em caderneta de campo, devem ser feitas no local.
4.7.2.
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321;";:-.:
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30
Preservao
A -
36
Materiais
]J
lcool a 70%
durex
escova de tamanho mdio com cerdas duras (Fig, 34)
FAA (ver capo6)
frasco elevidro com tampa (vrios tamanhos)
isopor
pina
pincel (F ig. 35)
proveta graduada com basto de vidro (F ig. 36)
recipiente de plstico (cubas, bacias, etc.)
tesoura comum
tesoura de poda
B-
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Mtodos
28
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o estudo da planta viva o ideal, mas isto, nem sempre posslvel. Pode-se, quando a viagem
no for muito longa, trazer alguns exemplares vivos, acondicionados em sacos plsticos, contendo um
pouco de gua. Este mtodo usado tambm quando no h possibilidade de colocar-se as plantas em
soluo preservadora no local da coleta.
Quando a planta est muito suja como o caso das plantas submersas, costuma-se deix-Ia por
mais ou menos 24 horas em recipientes de plstico ou similares contendo gua limpa. Sua limpeza dependendo da planta, efetuada com escova ou pincel, e em seguida remove-se a gua antes de colocar
a planta em frasco contendo soluo preservadora.
O isopor usado para o transporte das solues preservadoras.
4.7.3.
Herborizao
A - Materiais
gua de torneira
banheira de fotgrafo
bisturi ou lmina de barbear
cartolina branca - tamanho 28 x 42cm
chapa metlica
durex ou fita crepe de 25mm x 55m
escova mdia de cerda dura (F ig. 34)
faca com bainha (Fig. 32)
papel celofane
pina
pincel (F ig. 35)
recipiente de plstico (Ex: cubas, bacias)
rtulo - tamanho 12,5 x 8cm - papel fino
tesoura comum
tesoura de poda
Ver -INSTRUOES
ORGANIZAO
GERAIS
Maria Sakane
B-
Mtodos
Ver 4.1: PADRO GERAL DE HERBORIZAO
Deve-se ter bastante cuidado com as flores das plantas aquticas que, em geral, so muito delicadas, necessitando tratamento especial. Assim, sua herborizao deve ser feita no local da coleta, pois
murcham com facilidade. Muitas plantas aquticas fecham suas flores, por volta de 15:00 horas da tarde, tornando a desabrochar somente no dia seguinte com a luz do sol, razo pela qual no se recomenda coletar nesseperodo.
Separam-se as partes vegetativas e reprodutivas das plantas com tesoura de poda, No caso de
plantas frgeis, a separao deve ser feita com o auxilio de bisturi ou lmina de barbear. aconselhvel
distender as partes das flores com pincel ou pina, conforme o caso, envolvendo-as em papel celofane,
chupo ou papel sulfite de 40kg, fixando-o ao jornal com durex ou fita crepe. Se for necessrio, por
causa da sua fragilidade, as flores, devidamente numeradas, devem ser preparadas parte, evitando-se
que sequem em demasia na estufa, at esperar que a parte vegetativa correspondente, mais consistente,
seque. Depois de prontas, devero ser colocadas juntamente com o resto do material a que pertencem.
As plantas aquticas submersas, em geral muito delicadas, devem ser transportadas em sacos
plsticos para o laboratrio, onde precisam ser colocadas em recipientes com gua limpa; necessitam
limpeza com pincel ou pina. Para herborizao, coloca-se uma folha de cartolina branca sobre uma
chapa de alumnio, num vasilhame raso, como bandeja de fotgrafo, com pouca gua e em seguida as
plantas so limpas. Depois levanta-se lentamente a chapa metlica, dispondo a planta com pincel ou
pina para que adquira o aspecto natural. Feito isto, vai-se retirando com cuidado a cartolina da gua
para evitar que a planta saia do lugar. Retoca-se o que for necessrio e deixa-se escorrer a gua remanescente. Se for o caso, cobre-se ou envolve-se a planta com papel adequado e coloca-se dentro de jornal para secagem. Depois de seca, caso haja necessidade, troca-se a cartolina. O material ento montado na forma usual (Fig. 38) - ver 4.1. PADRO GERAL DE HERBORIZAO.
52
51
DE
HERBRIO
/'
I
I
I
I
i-
ORGANIZAO
DE
HERBRIO
Herbrio
uma coleo de plantas mortas, secas e montadas de forma especial, destinadas a
servir como documentao
para vrios fins, O herbrio utilizado
nos estudos de identificao
de ma.
terlal desconhecido,
pela comparao
pura e simples com Outros espcimes da coleo herborizada;
no
levantamento
da flora de uma determinada
rea; na reconstituio
do clima de uma regio; na avalia.
o da ao devastadora do homem ou da ao deletria da poluio;
na reconstituio
do caminho se.
guido por um botnico
coletor, etc, Muito possrvs] conseulr-ss
pelo simples manusear de exsicatas
de um herbrio.
Um herbrio tambm o centro de treinamento
e capacitao de pessoal especializado
em taxinomia vegetal. A metodologia
proposta no presente trabalho a adotada no Herbrio do Estado "Maria Eneyda P. Kauffmann
Fidalgo", do Instituto
de Botnica de So Paulo.
Para a profilaxia
dos insetos de modo geral, coloca-se naftalina em bolas ou cnfora cristalizada
em contato com os espcimes montados. Sempre que possivel, usa-se, preferencialmente,
em substituio, mistura de naftalina
triturada com paradiclorobenzeno
em partes iguais. Para evitar que o material
profilatizante
entre em contacto
direto com as exsicatas de herbrio, costuma-se guardlo em pequenos sacos costurados
de pano de algodo cru alvejado. O contato direto pode provocar a cristalizao
do material qurrnico sobre as exsicatas e prejudic-Ias em maior ou menor extenso,
Mais recentemente,
em alguns herbrios, as exsicatas recebem apenas o tratamento
trmico,
isto , as plantas so colocadas a uma temperatura
determinada,
50BOo
varivel conforme
o tipo de
material,
por cerca de 34 horas, eliminando,
assim, os insetos e suas larvas, bem como a umidade.
Obviamente,
o tempo acima mdio, pois material muito delicado necessita um tempo sensivelmente
menor de exposio
trmica, bem como, plantas suculentas ou mais espessas demandam
maior tempo
de secagem. Na prtica, o tempo de secagem determinado
pelo acompanhamento
peridico do material na estufa, o que deve ser providenciado
pelo prprio especialista. Somente este capaz de identificar o melhor tempo de secagem para o seu material, atravs de exames sucessivos e peridicos dos es-
e,
pcimes
5.1.
Montagem
A -
na estufa.
Materiais
(formol
agulha
5.3.
Organizao
10% de formalina
,
cartolina
branca - fls. 42 x 28cm
cola tipo Cascolar hidrossolvel
linha branca
rtulo em cartolina
Ver -INSTRUOES
B -
A -
Materiais
caixa de papelo em tamanhos diversos
cartolina
dobrada para o tamanho de 42 x 28cm, em cores diversas
havana, verde, preta, azul, amarela e vermelha)
'fichaem
cartolina
branca de 12,5 x 8cm.
frasco com tampa de plstico
papel Kraft em folhas dobradas para o tamanho de 42 x 28cm
Mtodos
B -
Embora
ruvel de ordem
tes sistemas:
ALGAS:
Preservao
A -
Materiais
armrio
formalina
(= formol
40%)
recomenda-se
pelo menos at o
orientao
sugerem-se os seguin-
Cyanophyceae,
Rhodophyceae,
Chlorophyceae,
Euglenophyceae,
Chloromonadophyceae,
Charophyceae,
Dinophyceae,
Xantophyceae,
Chrysophyceae,
Cryptophyceae,
Bacillariophyceae e Phaeophyceae.
Sistemas recomendados:
SMITH (1950) e para as Chloromonadophyceae, PRESCOTT
(1969).
FUNGOS:
Plasmodiophoromycetes,
Myxomycetes,
Acrasiomycetes,
Labyrinthulomycetes,
Chvtr idiomycetes, Oomycetes,
Trichomycetes,
Zygomycetes,
Ascomycetes,
Basidiomycetes
e Deuteromycetes.
Sistema recomendado:
ALE XOPOU LOS (1962).
U'OUENS:
Ascolichenes
fi Hymenolichenes.
Sistema recomendado:
HALE (1961).
GIMNOSPE'RMAS:
(1968).
ANGIOSPERMAS:
existam
maneiras diversas de organizar um herbrio,
a adoo de um sistema de classificao. Para melhor
BR IOFITAS:
Hepaticopsida,
Anthocerotopsida
PTER IDOFITAS:
Psilophytinae,
Lycopodinae,
do:VERDOORN
(1967).
caixa de madeira
estufa
rosa, marrom,
Mtodos
42 x 28cm, ou colada com cola tipo Cascolar, solvel em gua, sobre a folha de cartolina. A primeira
forma permite um manuseio mais seguro do material, pois retir-Io da cartolina torna-se tarefa relativamente fcil e oferece menor risco de dano para o material do que quando colado. Esta diferena especialmente
significativa
com materiais delicados.
5.2.
(
(branca,
Cycadae,
Sistema
Coniferae,
recomendado:
e Bryopsida.
Psilotinae,
Sistema recomendado:
Articulatae,
Filicinae.
Chlamydospermae.
CRONOUIST
Sistema
t"
PARIHAR
(1972).
Sistema recomenda-
recomendado:
CRONOUIST
(1968).
cristalizada
cru
Mtodos
53
54
\.-
da vlvula, lentamente. O meio poder caramelizar-se se o tempo for muito longo ou o fogo for muito forte.
Retirados os frascos da panela de presso, ou da eutoclsve, esperar que a temperatura abaixe. Quando o calor do frasco puder
ser tolerado pela mo, transferir o meio para plsces-de-petri previamente esterilizadas (por aquecimento no forno do fogo, durante 30-45 minutos ou em estufa ou em autoc/ave a seco),
flambando a boca do frasco Erlenmeyer na chama de gs ou
lmpada de lcool.
Deixar que o meio se solidifique. Formando-se gua de condensao na tampa das placas, vira-se as mesmas para que o excesso
de umidade desaparea. O meio, pronto para uso, deve ser preferencialmente conservado em geladeira ou lugar fresco, protegido do sol direto e da exposio poeira e levado novamente
temperatura ambiente no momento de usar.
100ml
500ml
actico
lodo.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . .
KI .
gua destilada.
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . .
cido actico
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . .
20g
20g
200ml
20g
Usado para evidenciar a presena de material aucilide, bem como, para preservar cillos e flagelos.
i. Transeau
(6/3/1)
b.
100ml
300ml
600ml
...................................
Meios de cultura
Utilizados
samente
descrito
a.
para isolamento
e crescimento'
de fungos.
a seguir:
'.
'.
Czapek
gua destilada.
. . . . . . . . . . . . . . . . . .
N itrato de sdio (NaNO)}
Fosfato de potssio bibsico (K2 HP04)
Sulfato de magnsio (MgSO 7H2 O)
Cloreto de potssio (KCI) . . . . . . . . . .
Sulfato ferroso (FeS04 7H2 O) ... _ .
Sacarose . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
gar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
....
.
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'.'
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.
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.
.
1000
1.0 9
0,5 9
0.5 9
O.Olg
30
9
15
9
.
.
.
.
ml
3,0 9
.
.
.
.
140g
10g
20g
1000ml
Czapek modificado
Adicionar.
ao meio Czapek: 5g de extrato
de levedura, 0,5g de sulfato
0,05g de rosa-de-bengala para cada 1.000ml de meio de cultura.
c.
Extrato de malte a 2%
Extrato de malte (comercial).
gar
gua destilada
de estreptomicina
. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
_. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
_
: . . . .. . . . . . . . . . . .
20g
20g
1000ml
Fundir o gar, juntar os demais componentes e autoclavar conforme indicado para BOA.
d.
Fub-de-rnilho
Fub
gar
_
gua destilada
Oextrose . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
o
'
.20g
20g
1000ml
20g
Glicose-glutamato
EOTA
_ .............................
K2HPO . ,
KH2 PO ..............................................
MgC/2 6H2 O
_
CaCI2 .........
o
58
57
. . . . . . . . . . . . . .. . . . . . . . . . . . . . . .
:
: . .
200
o.
- .....
87
68
160
66
mg
mg
mg
mg
mg
"
~
-r
6
rtulos e dados, a ser guardada no lugar devido na coleo geral, contendo a anotao: espcime em
,caixa ou espcime em vidro.
Rtulos e fichas devem conter: nome da instituio, da cidade, do pas; sigla do herbrio conforme registrada no Index Herbariorum; nome da famlia; nome cientltico da espcie; nome do determinador e data da determinao; procedncia, nome e nmero do coletor e data da coleta; outras
observaes (ver -INSTRUES
GERAIS).
Em adio, podem ainda ser organizados fichrios diversos para garantia de maior facilidade de
trabalho, a saber: a. numrico (de acesso); b. de distribuio geogrfica; c. de coletor; d. em ordem sistemtica.
FRMULAS
6.1.
MEIOS
DE
CULTURA
F rrnu Ias
Sob este ttulo, incluem-se lquidos e processos de preservao, assim como, solues outras
com finalidades diversas.
A.
, ...................
630ml
270ml
100ml
, .....
: ........................
',,'
750ml
50ml
250ml
Coloca-se a planta neste l/quido durante o periodo de uma semana, e transfere-se depois para uma soluo de formalina a
10%. Se o material contiver muito leo essencial, tanino, resina,
latex, etc., submete-se por duas vezesseguidas a 10 minutos numa mistura de: lcool-e ter e duas horas em gua.
c. Processo de Drummond
Sulfato de cobre em soluo aquosa a 5%
cido sulfuroso em soluo aquosa a 5-6%
Glicerina
Coloca-se a planta na soluo de sulfato de cobre por 6-24 horas, dependendo do tempo da fixao, da consistncia e do volume do tecido a ser impregnado. Em seguida o material lavado
durante umas duas horas para tirar o excesso de sulfato de cobre, trensierindo-se depois asplantas para a soluo de cido sulfuroso. Acrescenta-se a essa soluo 50ml de glicerina, no caso
de frutos ou tubrculos suculentos.
d. FAA + Sulfato de Cobre
cido actico glacial .... ' .............
_...............
lcool comercial (98oG.L.) ...................................
gua destilada
Sulfato de cobre em soluo saturada
_.....
.
.
300ml
500ml
300ml
50ml
5ml
5ml
gOml
t.
56
55
Lactofenol
Fenol cristalizado. ,
' ,
,
,
,
,
cido ltico .............................
,
Glicerina. , .......
, . , ...
, ....
,
, .. , ,
gua destilada ................
, ............................
.
.
,,.
20g
20g
40g
20ml
, 1
I
MnCl, . 4H,O
ZnCl,
FeCI3 6H, O. . . . . . . . . . .
DL-metionina . . . . . . . . . . .
Glutamato de sdio (mono)
Dglicose . . . . . . . . . . . . . . .
" ..
.
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..
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.
.
.
75 mg
40 mg
1,3mg
50 mg
500 mg
3 mg
b.
f.
GY5
KH, P04 .................................
Na, HP04 ...................
MgS04 7H, O
Extrato de levedura
Glicose
Bromarosol purpreo aquoso a 0,04%
gua destilada
:
.
.
.
.
;
c.
MHU
Extrato de malte. . . . . . .
Peptona
Glicose . . . . . . . . . . . . . .
Penicilina. . . . . . . . . . . . .
Sulfato de estreptomicina
gar . . . . . . . . . . . . . . . .
gua destilada .... , . . . .
l,4g
0,6g
O,lg
1,Og
3,Og
5 ml
1000 ml
d.
.
.
.
.
.
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,.
.......... ..................
.............................
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..
..
..
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.
3,Og
l,Og
1,Og
O,3g
O,3g
10,5g
1000 ml
e.
Mp5
Maltose. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Peptona
'.'
gar . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
gua destilada
" ...........
..
'.
..
..
.
.
.
.
4g
19
. 1520g
1000ml
Tubaki
Glicose . ................................................
Extrato de levedura.............................................
Agar
,.,
,
:. . . . . . . . . . . .
gua do mar esterilizada. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
1,09
0,19
15 9
1000 .ml
Fundir o meio, juntar os demais ingredientes e autoclavar conforme indicado para o BOA. Se necessrio, para evitar crescimento de bactrias, adicionar, aps autoclavagem do meio:
Estreptomicina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
Penicilina .. : . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .
6.3.
O,5g
O,2g
Descolorao de folhas
Coletar folhas com poucas camadas de clulas (ex.: gramineas). Coloc-Ias
em soluo 10%
60
59
Sementes de cnhamo
Devem, antes de tudo, ser fervidas em gua destilada, por cerca de um minuto. Secar temperatura ambiente e armazen-Ias
em frascos bem fechados. Cort-Ias transversalmente ao
meio, antes do uso.
Fundir o gar,juntar os demais ingredientes e autoclavar cantorme indicado para o BOA. Dependendo da pureza do gar, a
quantidade para o meio ficar slido varia entre 15 e 20g.
i.
Epiderme de cebola
Retirar a epiderme interna da cebola. Lav-ta cuidadosamente. Coloc-ta
c-Ia ao ar. Cort-Ia em pedaos e utiliz-Ia.
"
'r
I{
-c i
8
7,
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