Universidade Federal do Ceará

Encontros Universitários
XXXV Encontro de Iniciação Científica
Centro Especializado em Micologia Médica - CEMM

* Determinação da sensibilidade in vitro de Histoplasma capsulatum aos

antifúngicos clássicos
Isis Sousa Bezerra de Menezes¹; Juliana Maria Maciel¹; Janaína Maria Maia Freire¹; Glaucia Morgana de Melo Guedes¹;
Thalita Pereira de Oliveira¹; Raimunda Sâmia Nogueira Brilhante¹
¹ Centro Especializado em Micologia Médica – Universidade Federal do Ceará

INTRODUÇÃO RESULTADOS

Histoplasma capsulatum é um fungo dimórfico causador da

histoplasmose, micose sistêmica endêmica em vários países. No Ceará, a
CIM /MIC - Fase Leveduriforme
doença merece destaque devido ao número crescente de casos e da
Anfotericina B 0,03125 ≤ CIM ≤ 1 μg/mL
elevada taxa de mortalidade em indivíduos com HIV.
Itraconazol 0,001953 ≤ CIM ≤ 0,015625 μg/mL

Fluconazol 4 ≤ CIM ≤ 128 μg/mL

Voriconazol 0,0625 ≤ CIM ≤ 0,25 μg/mL
Caspofungina 0,5 ≤ CIM ≤ 8 μg/mL

CIM/MIC - Fase Filamentosa

Anfotericina B 0,25 ≤ CIM ≤ 0,0625 μg/mL

Figura 1 - Figura 2 -
Histoplasma capsulatum: aspectos Histoplasma capsulatum: aspectos morfológicos da Itraconazol 0,003906 ≤ CIM ≤ 0,007813 μg/mL
morfológicos da fase filamentosa. Fonte: fase leveduriforme. Fonte: CEMM
CEMM Fluconazol 1 ≤ CIM ≤ 4 μg/mL
Voriconazol 0,015625 ≤ CIM ≤ 0,03125 μg/mL
OBJETIVO
Caspofungina 2 ≤ CIM ≤ 4 μg/mL

O estudo objetivou determinar a sensibilidade in vitro das cepas de H.

capsulatum, sendo doze na fase filamentosa e cinco na fase CONCLUSÃO
leveduriforme, ante às drogas anfotericina B, itraconazol, fluconazol,
voriconazol e caspofungina. As drogas antifúngicas testadas foram capazes de inibir o crescimento
das cepas de H. capsulatum, apresentando CIMs semelhantes a
METODOLOGIA estudos anteriores e não havendo variação significativa entre as fases
filamentosa e leveduriforme.

Testes in vitro REFERÊNCIAS

• Laboratório de biossegurança nível 3 - (NB3) • SIDRIM, J. J. J. C.; ROCHA, M. F. G.; Micologia Médica à Luz de Autores Contemporâneos. Guanabara
• 12 cepas na fase filamentosa e 5 na fase leveduriforme (Micoteca do Centro Koorgan. 2003.
• BRILHANTE, R. S. N.; FECHINE, M. A. B.; CORDEIRO, R. A.; ROCHA, M. F. G.; RIBEIRO, J. F.; MONTEIRO,
Especializado em Micologia Médica) A. J.; LIMA, R. A. C.; MESQUITA, J. R. L.; CAMARGO, Z. P.; SIDRIM, J. J. C.; In vitro effect of
• Teste de microdiluição em caldo: adaptações nos protocolos descritos nos sulfamethoxazole-trimethoprim against Histoplasma capsulatum var. capsulatum. Antimicrobial
documentos M38-A2 (CLSI, 2008) e M27-A3 (CLSI, 2008). Agents Chemotherapy. v. 54, n. 9, p.3978-3979, 2010.
• BRILHANTE, R. S. N.; LIMA, R. A. C.; MARQUES, F. J. F.; SILVA, N. F.; CAETANO, E. P.;CASTELO-BRANCO,
D. S. C. M.; BANDEIRA, T. J. P. G.; MOREIRA, J. L. B.; CORDEIRO, R. A.; MONTEIRO, A. J.; CAMARGO, Z.
P.;SIDRIM, J. J. C.;ROCHA, M. F. G.Histoplasma capsulatum in planktonic and biofilm forms: in vitro
• Repique das cepas em BHI ágar ou BHI ágar com 5% de sangue de susceptibility to amphotericin B, itraconazole and farnesol. Journal of Medical Microbiology. v. 64, p.
carneiro por 7 dias 394–399. 2015.
1
• BRILHANTE, R. S.; FECHINE, M. A.; MESQUITA, J. R.; CORDEIRO, R. A.; ROCHA, M. F. et al.
Histoplasmosis in HIV-positive patients in Ceara, Brazil: clinical-laboratory aspects and in vitro
antifungal susceptibility of Histoplasma capsulatum isolates. Transactions of the Royal Society of
Tropical Medicine and Hygiene. v. 106, p. 484–488. 2012a.
Inóculo
• Distribuição do meio: RPMI 1640 • BRILHANTE, R. S. N.; RIBEIRO, J. F.; LIMA, R. A. C.; CASTELO-BRANCO, D. S. C. M.; SOARES, R. M.;
• Preparo das drogas e diluição MESQUITA, J. R. L.; GRANGEIRO, T. B.; CAMARGO, Z. P. de; CORDEIRO, R. A.; ROCHA, M. F. G.; SIDRIM,
2 J. J. C.Evaluation of the genetic diversity of Histoplasma capsulatum var. capsulatum isolates
from north-eastern Brazil. Journal of Medical Microbiology. v. 61, p. 1688–1695. 2012b.
• BRILHANTE, R. S. N; CAETANO, E. P.; RIELLO, G. B.; GUEDES, G. M. M.; CASTELO-BRANCO, D. S. C. M.;
FECHINE, M. A. B.; OLIVEIRA, J. S.; CAMARGO, Z. P.; MESQUITA, R. L.; MONTEIRO, A. J.;CORDEIRO, R.
A.; ROCHA, M. F. G.; SIDRIM, J. J. C.Antiretroviral drugs saquinavir and ritonavir reduce inhibitory
• Preparo do inóculo: 0,5 x 103 e 2,5 × 104 UFC/mL concentration values of itraconazole against Histoplasma capsulatum strains in vitro. The Brazilian
3 Journal of Infectious Diseases. v. 20, n. 2, p. 155-159. 2016.CDC.
• LIMA, R. A. C.Estudo dos fungos dimórficos Coccidioides posadasii e Histoplasma capsulatum var.
capsulatum: caracterização laboratorial com ênfase no perfil de sensibilidade ao sesquiterpeno
farnesol, in vitro.Tese (Doutorado em Microbiologia Médica) –Faculdade de Medicina,
UniversidadeFederal do Ceará, Fortaleza. 2013.
Distribuição na placa
• Incubação a 28ºC (filamentoso) e 35ºC (leveduriforme)
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Controle de qualidade: AGRADECIMENTOS
Candida krusei ATCC 6258
Candida parapsilosis ATCC
22019
• Leitura após 7 dias para filamentoso e 5 dias para leveduriforme
• AMB - Concentração Inibitória Mínima (CIM): 100%
• ITC, FLC, VO - Concentração Inibitória Mínima (CIM): 80%
5 • CAS - Concentração Inibitória Mínima (CIM): 80%