Fenobarbital: Determinao em

Sangue, Plasma ou Soro por

Espectofotometria
Lais Brito Ferreira RA: 6814015176
Rosalia Palm RA: 1299520036

QUESTES
1) O efeito depressor que o fenobarbital
promove esta relacionado a quais
neurotransmissores ?
R: Os neurotransmissores so o GABA, pois o frmaco
potencializa e imita sua funo inibitria no SNC e o
glutamato, inibindo esse neurotransmissor, pois sua
funo no SNC excitatria

2) Em relao a concentrao sangunea de

fenobarbital, qual a quantidade de frmaco
que se encontra dentro da faixa
teraputica?
R: A concentrao dentro da faixa teraputica 15 a 40
ug/ml.

O que Fenobarbital
O
fenobarbital

um
barbitrico sintetizado no
comeo do sculo XX por
Emil Fischer.
um frmaco
anticonvulsivante e
sedativo, assim como a
carbamazepina, primidona e
fenitoina.

Ao
Os barbitrico tem ao depressora e
isso ocorre devido a ativao da
sinapses gabargicas;
Seu efeito depressor tambm
devido a capacidade inibitria sobre
efeitos despolarizantes de glutamato.

Efeitos Adversos

Sedao;
Ataxia;
Fadiga;
Disfuno cognitiva;
Disartria;
Nistagmo;
Cefaleia.

Disposio no organismo
Absoro rpida e quase completa;

(Tmax

=0.5 a 4h)

Biodisponibilidade de 95 a 100% em
adultos;
Baixa ligao de protenas plasmticas;
30 a 35% da dose do fenobarbital
recuperada na urina
A principal via metablica a
hidroxilao aromtica.

Finalidade da Analise em
Espectofotometria

Importante para auxilio no

diagnstico de intoxicao aguda e
para acompanhar a evoluo desses
casos;

Mtodo
Feito com amostra de sangue total,
plasma (oxalato de sdio), soro,
lgrimas, suor, fludo cerebrospinal
(lquor) e saliva;
Baseia-se nas diferenas de
absortividade que as formas dos
barbitricos apresentam quando em
solues alcalinas sob diferentes pH.
Essas diferenas podem ser vistas
em diversos comprimentos de onda.

Equipamentos
Espectrofotmetro de duplo
feixe
Comprimento de onda:
260nm

Reagentes e Solues
Soluo padro de fenobarbital
5ug/ml (5mg + 50ml de gua destilada+ 0,5ml de NaOH e
completar para 100 ml com agua destilada);

NaoH 0,45N (1.8g + 1L gua destilada);

NH4Cl 16% (16g + 100ml gua destilada);
HCl 0,5N (42ml concentrado + 1L gua destilada);
Clorofrmio p.a;
Sulfato de sdio anidro p.a.

Metodologia
Transferir de 1 5 ml da amostra para funil de
separao, ajustar PH para 6 a 7,5 *(usar
soluo HCL 0,5 N ou NaOH 0,45 N)
Adicionar 50ml de clorofrmio e agitar
vigorosamente por 3 min.
Centrifugar por 5 min. A 3.000 rpm
Descartar a fase aquosa e filtrar a fase
orgnica sobre sulfato de sdio anidro,
recolhendo e anotando o volume total obtido
em proveta graduada.

 Transferir volume total do clorofrmio obtido

para funil de separao e adicionar 5ml da
soluo NaOH 0,45 N. Agitar vigorosamente
por 3 min.
Centrifugar por 5 min. a 3.000 rpm
Transferir 2 ml da fase aquosa alcalina para
duas cubetas de quartzo e adicionar 1ml da
soluo de NH4Cl 16% a uma das cubetas (A) e
1 ml de NaOH 0,45 N outra cubeta (B)
Efetuar a leitura da absorvncia em 260 nm
utilizando a cubeta A contra B para obter a
leitura diferencial
Fazer o mesmo procedimento analtico para a
soluo padro de fenobarbital

Clculo da concentrao de
Fenobarbital na amostra
utilizada

Fenobarbital (ug/ML): A x B x C x D
ExFxG
A= Absorbncia diferencial da amostra desconhecida
B= Concentrao do padro de fenobarbital utilizado como
referncia em ug/ml
C= Volume do extrato clorofrmio coletado da soluo padro
de fenobarbital (ml)
D= Volume da soluo padro de fenobarbital utilizada no
procedimento analtico (ml)
E= Volume do extrato clorofrmio coletado da amostra
desconhecida (ml)
F= Absorbncia diferencial do padro de fenobarbital
G=Volume da amostra utilizada no procedimento analtico
(ml)

Interpretao analtica
Concentraes sanguneas:
15 a 40 ug/ml
Dentro da faixa
teraputica
> 60ug/ml
Casos graves de
intoxicao aguda
100 a 150ug/ml
Potencialmente
letais

Outro mtodos
Monitoramento teraputico:
Utiliza tcnicas cientficas como
Cromatografia
lquida de alta eficincia (CLAE) com
detector de
ultravioleta visvel (CLAE UV/Vis) ou
acoplado ao
espectrofotmetro de massas (CLAE-EM),
cromatografia gasosa (CG), eletroforese

Referencias
MOREAU, Regina Lucia de Moraes;
SIQUEIRA, Maria Elisa Pereira Bastos
de.Cincia
Farmacuticas:Toxicologia
Analtica. 2. ed. So Paulo:
Guanabara Koogan, 2015. 352 p.