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Introdução à

Biologia Celular e do
Desenvolvimento
Aula Prática 01

Prof. Dra. Ana Paula Scaramal Ricietto


 Conhecer e manipular o microscópio óptico.

 Reconhecer e identificar as diferenças


estruturais entre células procariontes e
eucariontes.

 Observar a organização hierárquica das células


eucariontes quanto a formação de tecidos e
órgãos.
Microscopia
óptica
Tubo ou canhão
Oculares

Microscópio óptico
Revólver
Braço

Objetivas

Mesa ou platina
Parafuso macrométrico

Condensador com
Parafuso
diafragma
micrométrico

Fonte de luz
Charriot

Base

Fonte: PublicDomainPictures / Pixabay. Disponível em https://pixabay.com/pt/photos/branco-qu%C3%ADmica-isolado-microscopia-219983/. Acesso em 16 jul. 2020.


Cálculo da ampliação total (Microscopia óptica)
Ocular Objetiva Aumento Total

10x 4x 40x

10x 10x 100x

10x 40x 400x

10x 100x 1000x

Fonte: Autora, 2021.


Fonte: Wikimedia Commons / CNX OpenStax. Disponível em https://commons.wikimedia.org/w/index.php?curid=49923763. Acesso em 21 mai 2021.
Coloração HE
 Corantes ácidos: interagem com estruturas
básicas das células, geralmente do citoplasma,
corando-as.
• Eosina (coloração rósea)
• Fucsina (coloração vermelha)

 Corantes básicos: coram estruturas ácidas


(núcleo)
• Hematoxilina (coloração azul)
Microscopia
 Recortar uma pequena letra de jornal;

 Colocar uma gota de água sobre a lâmina, com auxílio de um conta-gotas


ou pipeta;

 Colocar a letra de jornal (na posição de leitura) sobre a gota de água;

 Colocar a lamínula na posição de 45º em relação à lâmina, abaixando-a


suavemente;

 Caso haja excesso de líquido (fora da lamínula), retirá-lo com papel


absorvente;

 Seguir as etapas de focalização indicadas pelo professor;

 Desenhar nos aumentos de 40x, 100x, 400x e 1000x.

 Esquematizar após a observação.


Formação de imagem
microscopia óptica

Ampliada Invertida de Invertida da


cima para esquerda
baixo para direita

Fonte: Leite, C. M. Adaptada; JUNQUEIRA, LUIZ CARLOS UCHOA; CARNEIRO, JOSÉ. Biologia celular e molecular. 9. ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2012.
Eucariontes:
animal
Eucariontes

Fonte: Adaptado de Madigan et al. Brock biology of microoganisms. 13 ed. Pearson, 2012.
Eucarionte animal:
mucosa bucal
 Raspar levemente, com o auxílio da espátula, a mucosa bucal.

 Espalhar o material da espátula na lâmina.

 Adicionar uma gota do corante sobre a lâmina e aguardar 2’.

 Com o auxílio de uma almotolia/piseta, remover o excesso do corante.

 Cobrir a lâmina com uma lamínula.

 Retirar as bolhas de ar pressionando a pinça levemente sobre a


lamínula.

 Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a


imagem com o auxílio do micrométrico.

 Esquematizar as estruturas observadas.


Observação
comentada
Eucariontes:
vegetal
Núcleo RER
REL

Ribossomos

Golgi Vacúolo central

Microfilamentos
Microtúbulos

Fonte: Raven et al. Biologia Vegetal . 8 ed. Guanabara Koogan, 2014.

Mitocôndria
Peroxissomos Cloroplastos
Membrana celular
Parede celular
Plasmodesmos

Fonte: Adaptado de Reece et al. Biologia de Campbell. 10 ed. Artmed, 2015.


Eucarionte vegetal:
cebola
 Com a pinça, retire a epiderme da cebola colocando-a na lâmina sobre
uma gota d’água. Cubra-a com a lamínula.

 Retirar as bolhas de ar pressionando a pinça levemente sobre a


lamínula.

 Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a


imagem com o auxílio do micrométrico.

 Retire a lâmina da platina para a coloração com azul de metileno.

 Colocar o papel-filtro ao lado da lamínula.

 Adicionar uma gota de corante ao lado oposto do papel (o papel


absorverá o excesso de água-corante).
 Observar no microscópio, nos aumentos de 10x e 40x focalizando a
imagem com o auxílio do micrométrico.

 Esquematize as estruturas observadas salientando as diferenças


proporcionadas pela coloração.
Observação
comentada

Fonte: Wikimedia Commons. Disponível em https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Onion_Cells.jpg#/media/File:Onion_Cells.jpg. Acesso em 22 mai 2021.


Procariontes
Fímbrias Procariontes
Membrana Citoplasma
celular
Ribossomos
Parede
celular
Nucleoide
Cápsula
Inclusões

Pili Plasmídeo

Flagelo

Fonte: Adaptado de Lumen Microbiology. Disponível em https://courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/unique-characteristics-of-prokaryotic-cells/. Acesso em 21 mai 2021.


Parede celular

Fonte: Adaptado de Lumen Microbiology. Disponível em https://courses.lumenlearning.com/microbiology/chapter/unique-characteristics-of-prokaryotic-cells/. Acesso em 21 mai 2021.


Fonte: Madigan et al. Microbiologia de Brock. 14 ed. Artmed, 2016.
Procarionte
 Com o auxílio de uma espátula, em uma lâmina com uma gota d’água,
adicionar uma pequena porção do iogurte natural.

 Secar levemente à chama da lamparina.

 Corar o esfregaço com duas gotas de azul de metileno deixando reagir


durante cerca de 3’.

 Lavar a lâmina com água destilada e deixar secar naturalmente.

 Observar ao microscópio utilizando a objetiva de menor aumento.

 Colocar uma gota de óleo de imersão e observar na objetiva de maior


aumento (100x).

 Esquematizar as células observadas.


Observação
comentada

Fonte: Josef Reischig / Wikimedia Commons. Disponível em


https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Lactobacillus_acidophilus_(259_08)_Lactobacillus_acidophilus_(D%C3%B6derlein_bacillus).jpg. Acesso em 22 mai 2021.
 Verificar se todos os alunos conseguiram observar as lâminas especificas;

 Verificar se os alunos esquematizaram as estruturas;

 Verificar se os alunos conseguiram identificar as principais características


estruturais das células estudadas;

 Esclarecer as possíveis dúvidas dos alunos quanto as características de cada


lâmina observada.

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