MICROSCOPIA

Profa. Núbia Pereira da Costa

 MICROSCOPIA
É a ciência que estuda os métodos e aplicações
do microscópio para observações de objetos
menores que o limite de resolução do olho
humano (0,1mm)

MICROSCÓPIO – Instrumento óptico que

serve para o estudo de objetos pequenos,
menores que o limite do olho humano.
 MEDIDAS EM MICROSCOPIA
Olho humano=0,1mm = 100µm ; Microscópio óptico = 0,2µm; M. eletrònico = 0,1nm

DIMENSÕES RAMO ESTRUTURA MÉTODO

>0,1mm Anatomia Órgãos Olho e lentes

100-10µm Histologia Tecidos Vários microsc.

ópticos
10-0,2 µm Citologia Células , Vários microsc.
Bactérias ópticos
200-0,4nm Morfologia Componentes Microscópio
submicroscópica celulares eletrônicos
<1nm Estruturas Posição dos Difração de raios X
molecular átomos
1mm = 1.000 µm; 1 µm = 1.000nm
 CONTEXTO HISTÓRICO

 - MICROSCÓPIO - APÓS 4 SÉCULOS DA

DESCOBERTA DAS LENTES

 - 1590 CRIAÇÃO MICROSCÓPIO POR HANS E

ZACHARIAS JANSEN

 - 1665 OBSERVAÇÃO DA CÉLULA ROBERT

HOOKE

 -1930 DESENVOLVIMENTO MICROSCÓPIO

ELETRÔNICO.
 TIPOS DE MICROSCÓPIO

MICROSCÓPIO SIMPLES – 1 SISTEMA LENTES

* LUPA OU MICROSCÓPIO ESTEREOSCÓPICO
MICROSCÓPIO COMPOSTO – 2 SISTEMAS LENTES

SIMPLES COMPOSTO
 MICROSCÓPIO COMPOSTO
PRINCÍPIO DE ILUMINAÇÃO:

# MICROSCÓPIO ÓPTICO OU LUMINOSO

# MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
 MICROSCÓPIO ÓPTICO -
COMUM

- MECÂNICA
CONSTITUIÇÃO
- ÓPTICA ÓPTICO DE OBSERVAÇÃO
SISTEMA ILUMINAÇÃO
 OCULAR

TUBO OU PRISMA
CANHÃO
REVOLVER

OBJETIVAS

BRAÇO
ESPÉCIME

PLATINA

CONDENSADOR

DIAFRAGMA
PARAFUSO CONTROLE
PLATINA CHARRIOT
PARAFUSO MACRO
E MICROMÉTRICO

BASE
LÂMPADA ESPELHO

JUNQUEIRA & CARNEIRO, 2004

CONSIDERAÇÕES E CARACTERÍSTICAS
DO MICROSCÓPIO ÓPTICO COMPOSTO
 - COMO SE FORMA O OBJETO

 - IMPLICAÇÕES DA IMAGEM INVERTIDA

 - OBJETOS EM TRÊS DIMENSÕES

 - AMPLIAÇÃO E VISUALIZAÇÃO
 CONCEITOS IMPORTANTES EM
MICROSCOPIA
 PODER DE RESOLUÇÃO DO MICROSCÓPIO
 É A CAPACIDADE QUE O MICROSCÓPIO TEM DE VISUALIZAR
BEM DOIS PONTOS PRÓXIMOS NO OBJETO OBSERVADO

 LIMITE DE RESOLUÇÃO DO MICROSCÓPIO

 É A MENOR DISTÂNCIA QUE PODE EXISTIR ENTRE DOIS
PONTOS PARA SER VISUALIZADO E APARECEREM
INDIVIDUALIZADOS NA IMAGEM DO SISTEMA ÓPTICO
K= 0,61
λ= 0,55 (comprimento onda verde amarelo)
 LR = K x λ
AN AN= abertura numérica da lente

5x AN=0,12 → LR= 0,61 x 0,55 = 2,8μm

0,12 LR NO MOC =0,2
MICRAS
100x AN=1,3 → LR= 0,61 x 0,55 = 0,26μm
1,3
 CONCEITOS IMPORTANTES EM
MICROSCOPIA
 DISTÂNCIA FOCAL

 AUMENTO

OCULAR OBJETIVA AMPLIAÇÃO

12 5x 60x

12 10x 120x

12 40x 480x

12 100 1.200x
 TIPOS DE MICROSCÓPIO
ÓPTICO
 MICROSCÓPIO DE * MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA
FLUORESCÊNCIA COMUM CONFOCAL

Foto de Shirlei
Pimentel(Unicamp) Foto de Shirlei
Pimentel(Unicamp)

Foto da Profª Adelina Ferreira

(UFMT)
Foto de Maria Júlia (Unicamp)
 MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO

Microscopia de luz polarizada,

revelando os grânulos de enxofre no
interior da bactéria Thiomargarita
namibiensis.
www.portalsaofrancisco.com.br
MICROSCÓPIO COMPOSTO

 MICROSCÓPIO ÓPTICO
 MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
 MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
 PRINCÍPIO FUNDAMENTAL ~ ÓPTICO

 # LENTES ELETROMAGNÉTICAS
 # FEIXES ELETRÓNS DE ALTA VELOCIDADE
CANHÃO DE TUNGSTÊNIO
↓
ELÉTRONS SÃO ABSORVIDOS PELOS ÁTOMOS
↓
FONTE - TELA VÁCUO
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE
TRANSMISSÃO
MICROSCOPIA ELETRONICA
TRANSMISSÃO - MET
FILAMENTO DE
TUNGSTÊNIO (CATODO)
ANODO
FEIXE DE ELÉTRONS
LENTES CONDENSADORA

ESPÉCIME PODER DE RESOLUÇÃO DO MET

-TEÓRICO: 40.000x
LENTES OBJETIVAS
ELETROMAGNÉTICAS -EFETIVAMENTE: 2.000x MOC

LENTE PROJETORA

TELA DE VISUALIZAÇÃO
OU PELÍCULA FOTOGRÁFICA
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE
VARREDURA
MICROSCOPIA ELETRONICA
DE VARREDURA - MEV
FILAMENTO DE
TUNGSTÊNIO (CATODO)
ANODO
FEIXE DE ELÉTRONS
LENTES CONDENSADORA

BOMBINAS DE
VARREDURA

ESPÉCIME

LENTES OBJETIVAS
ELETROMAGNÉTICAS

LENTE PROJETORA

TELA DE VISUALIZAÇÃO
OU PELÍCULA FOTOGRÁFICA
 MICROGRAFIAS - MET E MEV

Micrografia de vaso do xilema Figura 11 - Tricomas Figura 12 - Tricoma

www.passeiweb.com/.../conducao tectores (MEV). Foto secretor (MEV). Foto
_da_seiva de Barthlott, W. - de Peterson , L.
Nultsh, W. Botânica (www.uoguelp.ca/bot
geral. Editora any/courses/ BOT
ArtMed 2000. 3410).
 ALGUMAS CARACTERÍSTICA DOS
PRINCIPAIS TIPOS DE
MICROSCÓPIO
CARACTERÍSTICAS
MOC MET MEV
TIPOS DE LUZ ELÉTRONS ELÉTRONS
RADIAÇÃO
TIPO DE LENTES DE VIDRO ELETRO - ELETROMAGNÉTICA
MAGNÉTICA
PODER DE 1.500x 250.000x 25.000x
AMPLIAÇÃO
LIMITE DE 0,5nm 200nm 10nm
RESOLUÇÃO
IMAGEM (COR) GERALMENTE PRETO E BRANCO PRETO E BRANCO
COLORIDA
MATERIAL VIVO OU NÃO VIVO NÁO VIVO, IDEAL TOPOGRAFIAS
OBSERVADO LÂMINA VIDRO DESIDRATADOS DE SUPERFÍCIE DE
MUITO FINO OBJETOS NÃO
SECCIONADOS
 APLICAÇÕES DE CADA TÉCNICA
M. ÓPTICO M. ELETR. M. ELETRÔNICO
TRANSMISSÃO VARREDURA

- CÉLULAS INTRACELULARES SUPERFÍCIES DIVERSAS

- CÓRTES MORFOLOGIA CELULAR CLASSIFICAÇÃO E

HISTOLÓGICOS ORGANELAS PEQUENAS TAXONOMIA INSETOS,
FUNGOS

- INTERAÇÕES MORFOLOGIA DE
PARASÍTAS CÉLULAS PÓLEM
 BIBLIOGRAFIA
RECOMENDADA:

LODISH et al., 2002