Genética Básica – Módulo Molecular - Estudo Dirigido 3 -2022-1 prof Ana Coelho

aluno: ______________________________

1) Complete a tabela abaixo com + e -, mostrando se em cada situação as enzimas β- galactosidade e

permease são sintetisadas ou não.
Induzido e não Induzido se referem à presença ou não de lactose no meio.
Estamos supondo que não temos glicose no meio, ou seja o controle positivo está presente.

β- galactosidase Permease
Linhagem Genótipo Não-induzido Induzido Não-induzido Induzido
1 I+ Z+ Y+
2 I- Z+ Y+
3 I+ Z- Y+/ F I- Z+ Y+
4 I -Z- Y+ /F I+ Z+ Y-
5 I- Z- Y+ / FI- Z+ Y+
6 Δ(I,Z,Y) /FI- Z+ Y+

2)Explique porque mutações I- são normalmente recessivas em relação ao tipo selvagem (I+), e porque o
alelo selvagem I+ é recessivo em relação a mutantes IS (super repressor).

3) Quantos sítios Shine-Dalgarno (RibosomeBindingSite) possui o Operon Lac? Esquematize.

4) Se adicionarmos lactose ao meio de cultura onde crescemos E. coli mutante onde o repressor lacI é
insensível à lactose, o que ocorrerá?
a) A lactose irá induzir a expressão do repressor.
b) A lactose irá reprimir a expressão do repressor.
c) A lactose não será utilizada porque o repressor não se desligará do operador.
d) A lactose será imediatamente quebrada porque o repressor estará sempre inativo.

5) Quais são os papéis da desacetilação e da acetilação de histonas na regulação gênica,

respectivamente?

6) Os nucleossomos são:
a. compostos por DNA e proteína.
b. necessários para condensar o DNA/os cromossomos.
c. essenciais para a correta regulação da expressão gênica eucariótica.
d. Todas as anteriores são verdadeiras.

7) Alelos de VNTR são regiões hipervriáveis do DNA humano que diferem uns dos outros
a) pela localização de sítios internos reconhecidos por enzimas de restrição
b) por um número variável de mutações pontuais
c) pelo número de cópias de uma sequencia interna de DNA repetitiva
d) pela localização variável em diferentes cromossomos
e) pela habilidade de hibridizar com uma sonda específica do locus

8) Explique porque podemos dizer que o sequenciamento de DNA pelo método de Sager é um
“sequenciamento por término” e o sequenciamento Illumina é um “sequenciamento por síntese”.
9) São apresentados a seguir alguns sítios de enzimas de restrição

Kas I (G^GCGCC)
Nar I (GG^CGCC)
Ehe I (GGC^GCC)
Bbe I (GGCGC^C)
HaeII (RGCGC^Y)

O ^ está marcando a posição de corte da enzima, e é apresentado só um feixe, de 5’ para 3’,

Sendo que o DNA a ser cortado é feixe duplo. O que você imagina que seja R e Y na sequência do
sítio de HaeII?

A mesma sequência é reconhecida e cortada pelos 4 primeiros isoesquisômeros que quebram no

entanto o DNA de forma diferente:

Kas I NNNNNG GCGCCNNNNNN

NNNNNCCGCG GNNNNNN

Nar I NNNNNGG CGCCNNNNNN

NNNNNCCGC GGNNNNNN

Ehe I NNNNNGGC GCCNNNNNN

NNNNNCCG CGGNNNNNN

Bbe I NNNNNGGCGC CNNNNNN

NNNNNC CGCGGNNNNNN

Neste exemplo, um DNA cortado com Kas I não seria compatível para se ligar com um produto de
digestão com Nar I, pois eles não vão fazer as ligações hidrogênio corretas.

Kas I NNNNNG CGCCNNNNNN Nar I

NNNNNCCGCG GGNNNNNN

Bbe I forma uma ponta coesiva GCGC-3', e, de forma similar, não pode se parear com os términos
produzidos pelos outros 3 isoesquisômeros. No entanto a ponta produzida pode se parear com
pontas produzidas pela enzima HaeII. Por exemplo:

Hae II NNNNNAGCGC CNNNNNN Bbe I

NNNNNT CGCGGNNNNNN

Após o pareamento as ligações fosfodiester podem ser feitas com T4 DNA ligase.

a) A sequência religada NNNNNAGCGCCNNNNN ainda contem um sítio Bbe I?

b) Esta mesma sequência ainda é um sítio para Hae II?
c) Existe alguma fusão de sítios Hae II- Bbe I que preserve os sítios de ambas as enzimas no produto
ligado?

https://www.youtube.com/watch?v=nBiE6aiHRok youtube sobre STR, com cálculo de frequências.