Procedimento Analítico – Matéria Insaponificável

POP-LAB-003 Revisão 02

Introdução

Matéria insaponificável inclui aquelas substâncias que frequentemente encontradas dissolvido

em gorduras e óleos, que não podem ser saponificados pelo tratamento cáustico habitual, mas
são solúveis em solventes comuns de gordura e óleo. Estão incluídos neste grupo de compostos
hidrocarbonetos, esteróis, pigmentos e álcoois alifáticos superiores, é determinada gravimetria
após a saponificação da amostra com KOH em etanol e extração líquido-líquido.

1. Escopo

Aplicáveis aos óleos e gorduras animais e vegetais normais. Este método não é adequado para
gorduras e óleos que contêm uma quantidade excessiva de matéria insaponificável, tais como
os óleos marinhos. Este método não se aplica a gorduras para alimentação animal.

2. Referencias

AOCS Official Method Ca 6a-40, revised 2011, Unsaponifiable Matter.

3. Materiais

• Balança analítica;
• Balão volumétrico 100 mL;
• Balão volumétrico 500 mL;
• Banho-Maria;
• Béquer 100mL;
• Béquer 300mL;
• Dessecador;
• Erlenmeyer 125 mL;
• Estufa;
• Extrator Soxhlet 250mL;
• Funil de Separação 500 mL;
• Manta de aquecimento;
• Pipeta de Pasteur;
• Provetas de 50 mL;

4. Reagentes

• Água Destilada;
• Álcool Etílico 95%;
• Éter de Petróleo;
• Hidróxido de Potássio;
• Hidróxido de Sódio;
• Fenolftaleína;

5. Soluções

Elaborado em: 29/11/2010 Revisado em: 15/12/2021 Aprovado em: 15/12/2021

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1. Solução de hidróxido de potássio 50% – pesar 15 g de KOH e diluir em 10 mL de água

destilada.
2. Solução de hidróxido de sódio 0,02 M – pesar 0,4 g de NaOH e transferir para um balão
volumétrico de 500 mL contendo uma dada quantidade de água destilada; homogeneizar
cuidadosamente até a completa dissolução e completar o volume com água destilada.
Padronização: Em um erlenmeyer de 125 mL, pesar aproximadamente 0,1 g de
biftalato de potássio previamente seco em estufa 105 ºC por 2 horas; adicionar 75 ml
de água e agitar até a dissolução; adicionar 3-5 gotas de fenolftaleína e titular com a
solução de hidróxido de sódio 0,02 M até aparecer coloração levemente rosada,
persistente por 30 segundos.

Molaridade real (mol/L -1) = massa (g) C8H5KO4

/ mL NaOH
0,2042 (g/mL)

3. Solução álcool 10% - preparada pela mistura de 10 mL de álcool etílico com 90 mL de

água destilada.
4. Solução de Fenolftaleína a 1 % (m/v) - pesar cerca de 1 g de fenolftaleína e transferir
para um balão volumétrico de 200 mL contendo 100 mL de álcool etílico; homogeneizar
cuidadosamente até a completa dissolução e completar o volume com água destilada.

6. Procedimento

1. Pesar 5 g de amostra em um balão de Soxhlet 250 mL. Adicione 30 mL de álcool etílico

e 5 mL de solução de hidróxido de potássio, conectar o tubo no extrator de Soxhlet e levar
à fervura por 1 hora, ou até completamente saponificada. Saponificação completa é
essencial;
2. Transferir a amostra ainda quente para um funil de separação de 500 mL; lave o balão
de Soxhlet com 40 mL com álcool etílico. Completar o transferência com 40 mL água
destilada quente e depois 40 mL de água fria . Lavar o balão com um pequeno volume (5
mL) de éter de petróleo e adicionar ao funil. Arrefecer o conteúdo do funil à temperatura
ambiente (20-25º c) e em seguida adicionar 50 mL de éter de petróleo.
3. Tapar o funil e agitar vigorosamente durante pelo menos 1 min; aguardar a separação
de fases, retirar a porção aquosa (inferior), tão completamente quanto possível, sem
incluir qualquer porção da camada superior;
4. Proceder à extração da fase aquosa por mais 61 vezes, utilizando porções de 50 mL de
éter de petróleo;
5. Lave os extratos combinados no funil de separação três vezes, usando porções de 25 mL
da solução de álcool etílico a 10%, agitando vigorosamente e retirando a camada aquosa
de álcool após cada extração. Evite remover qualquer camada de éter de petróleo;
Continuar a lavar com a solução de álcool etílico até que a solução de lavagem não fique
mais rosada após a adição de uma gota de solução de fenolftaleína;
6. Transferir o extrato de éter de petróleo para um béquer tarado e aquecer em banho-maria
até a evaporação completa do solvente; completar a secagem em estufa a 105 ºC por 1
hora;
1
Existem alguns casos em que seis extrações podem não ser suficientes. É melhor julgá-lo fazendo outra extração e evaporando
separadamente esse extrato, conforme observado no procedimento, 6. Não deve haver matéria insaponificável nesse extrato. Se
houver, dissolva em um pequeno volume de éter de petróleo e adicione novamente aos extratos combinados. Continue com as
extrações até que não exista matéria inaplicável no extrato.

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7. Resfriar em dessecador até temperatura ambiente e pesar; após a pesagem, dissolver o

resíduo em 50 mL de álcool etílico, previamente neutralizado e aquecido a 50 ºC;
8. Transferir para um erlenmeyer de 125 ml, adicionar 3-5 gotas de solução de fenolftaleína
e titular com NaOH 0,02 M até a viragem para coloração rósea;

7. Cálculo

7.1 – Massa de ácido graxo:

Corrija o peso do resíduo para obter o teor de ácidos graxos livres, usando a seguinte relação:

1 mL de NaOH 0,02 M é equivalente a 0,0056 g de ácido oleico.

B2 (gramas de Ác. Oleico) = V x 0,0056

Onde:
V = volume gasto na titulação da amostra (mL)

7.2 – Teor de Matéria Insaponificável:

% Matéria Insaponificável = (A – B) x 100

P

Onde:
A = massa do resíduo após secagem em estufa (g);
B = massa de ácidos graxos determinado por titulação (g);
P = massa da amostra (g)

8. Notas de Precaução

1. Álcool etílico (etanol) é inflamável. Use exaustor ao aquecer ou evaporar este solvente.
2. Hidróxido de potássio, como todos os álcalis, pode queimar a pele, olhos e vias
respiratórias severamente. Use luvas de borracha e protetor facial para proteção contra
líquidos alcalinos concentrados. Use o dispositivo eficaz de remoção de fumaça ou
máscara de gás para proteger as vias respiratórias contra vapores alcalinos.
Ao trabalhar com materiais extremamente cáusticos, tais como o hidróxido de potássio,
sempre adicione o alcali em água e não o inverso. Alcalis são extremamente exotérmicas

2
As gramas de ácido graxo determinados por titulação tornam-se "B" no cálculo para determinar a porcentagem de matéria
insaponificável.
A correção da titulação para ácidos graxos livres extraíveis e outras impurezas insaponificáveis extraíveis (ambas relatadas como
ácido oleico) tenderá a aumentar à medida que a natureza da amostra bruta aumenta. Por exemplo, seria esperado que a alta
energia (usada na alimentação animal), a alimentação rápida, o óleo alto proporcionassem uma titulação de ácido graxo livre mais
alta do que o óleo relativamente puro refinado, branqueado e desodorizado (RBD).
Historicamente, no método AOCS, a correção de ácidos graxos livres extraíveis foi determinada por titulação do resíduo
insaponificável. Há uma indicação de que a quantidade de ácidos graxos livres determinada dessa maneira pode ser menor que a
quantidade real presente, devido ao fato de que alguns dos ácidos graxos livres podem ter sido convertidos em sabões e, portanto,
não seriam titulados. Isso pode ser verificado através da determinação do total de ácidos graxos livres no resíduo insaponificável
por GLC, como AOCS Recommended Practice Cd 5d-01. Se houver sabões, eles podem ser eliminados por lavagem repetida dos
extratos combinados (Procedimento 5) com água até que sejam obtidas lavagens neutras.

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quando misturado com água. Tome precauções para conter a solução cáustica no caso
em que o recipiente de mistura quebre, por causa do extremo calor gerado.
3. Éter de petróleo é extremamente inflamável. Evite a eletricidade estática. Os limites
explosivos no ar são 1-6%. Uma exaustor deve ser usada em todos os momentos quando
usado éter de petróleo.

9. Histórico de versões/revisões

Data Histórico de versão / revisão

15.jan.2020 Revisão 01 – Adequação ao novo layout de documento.
Correção do procedimento e cálculos
15.dez.2021 Revisão 02 – Correção da solução de KOH.

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