Procedimento Analítico - Ácido Graxo Total e Oxidado

POP-LAB-010 Revisão 01

Ácidos Graxos Totais, Ácidos Graxos Oxidados, Método de Extração Úmida

Introdução

O procedimento para ácido graxos totais deste método determina o total de ácidos graxos na
amostra de teste, presente como óleo neutro ou saponificado. Qualquer matéria insaponificável
na amostra também é incluída. O procedimento para ácidos oxidados desse método determina
materiais insolúveis em éter de petróleo, mas solúveis em éter etílico, normalmente referidos
como ácidos graxos oxidados.

1. Escopo

Aplicável ao sabão neutro cru e acidulado, exceto óleo de coco, palmiste e óleos semilares do
tipo láurico.

2. Referencias

AOCS Official Method G 3-53, reapproved 2009, Total Fatty Acids, Oxidized Fatty Acids, Wet
Extraction Method.

3. Materiais

 Béquer 100 mL;

 Banho-Maria;
 Erlenmeyers 250 mL com tampa;
 Estufa;
 Funil;
 Funil de Separação 250 mL;
 Papel filtro;
 Pipeta de Pasteur;
 Provetas de 50 mL;
 Proveta de 100 mL;
 Proveta de 250 mL;
 Vidro relógio;

4. Reagentes

 Ácido Clorídrico concentrado;

 Água destilada;
 Álcool Etílico 95%;
 Éter de Petróleo;
 Éter etílico;
 Hidróxido de Potássio;
 Solução indicadora de alaranjado de metila 1%;

Elaborado em: 30/11/2010 Revisado em: 27/12/2019 Aprovado em: 02/01/2020

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5. Soluções

1. Hidróxido de potássio alcoólico – pesar 5 g de KOH e diluir em 100 mL de álcool etílico.

2. Solução ácido clorídrico (1:1) – diluir 1 parte em volume de HCl em 1 parte em volume
de água destilada.

6. Procedimento

6.1 Procedimento para determinação de Ácido Graxo Total

1. Homogeneizar a amostra e pesar imediatamente;

2. Pesar 8-12 g de amostra em bruto (4-5 g de amostra acidulada) em um Erlenmeyer de
250 mL. Adicione 50 mL de solução alcoólica de hidróxido de potássio, cubra com um
vidro relógio e aqueça em banho-maria para saponificar. Agitar frequêntemente e aquecer
durante 30 minutos ou até a saponificação estar completa;
3. Remova o vidro relógio e continuar aquecendo em banho-maria com agitação ocasional
para evaporar o álcool. Para evitar a oxidação da amostra adicionar pequenas
quantidades de água destilada enquanto o álcool é evaporado;
4. Adicionar 100 mL de água destilada e aquecer até que a amostra se dissolva
completamente.
5. Adicionar 3-5 gotas de indicador de alaranjado de metila e neutralizar com solução de
HCl 1:1 até obter uma coloração rósea. Em seguida, adicionar 1 mL de excesso da
solução HCl. Tampar o erlenmeyer e misturar suavemente o conteúdo;
6. Resfriar a temperatura a pelo menos 35 °C e adicionar 125 mL de éter de petróleo. Os
ácidos graxos não precisam se separar completamente antes de adicionar o éter. Tampar
o erlenmeyer agitar suavemente e deixe repousar até a separação da fase com éter (fase
superior);
7. Envie a camada de éter de petróleo para um funil de separação de 250 mL, certificando-
se de que o mínimo possível de matéria insolúvel que se acumula na interface éter-água
seja transportado para o funil de separação. Se qualquer quantidade apreciável de
matéria insolúvel for introduzida no funil de separação, ela geralmente se assenta no
fundo e pode ser drenada de volta para a proveta. Fazer pelo menos mais quatro
extrações, usando 25-30 mL de éter de petróleo por vez e agitando vigorosamente por
30 segundos a cada extração. As extrações devem continuar até que a camada de éter
de petróleo seja praticamente incolor. Guardar a água ácida no erlenmeyer para
determinar os ácidos graxos oxidados (conforme observado no procedimento 6.2);
8. Diluir as extrações obtidas em 225 mL éter de petróleo e misture bem, agitando
suavemente o funil de separação.
9. Filtrar a fase diluída com éter de petróleo, através do papel filtro, para um erlenmeyer
previamente tarado. Lavar o papel filtro com 75 mL de éter de petróleo, removendo o anel
amarelo de ácidos graxos, que geralmente se forma perto da borda superior do papel de
filtro. Esse procedimento pode ser realizado lavando o papel enquanto a borda superior
é levantada do funil de filtragem por uma pequena espátula ou pinça.
10. Evaporar o éter de petróleo utilizando banho-maria. Finalmente secar os ácidos graxos
totais na estufa a 105 ± 2oC por 30 minutos. Resfriar em dessecador até atingir
temperatura ambiente e pesar. Repetir o procedimento até obter massa constante. Esta
é a massa de ácidos graxos totais.

6.2 Procedimento para determinação de Ácidos Oxidados

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1. Adicionar 25-30 mL de éter etílico no erlenmeyer (item 7 do procedimento 6.1), agitar

cuidadosamente e esperar a separação das fases.
2. Filtrar a fase com éter etílico através de um papel filtro e transferir para erlenmeyer de
250 mL, tarado. Realizar pelo menos mais quatro extrações com 25–30 mL de éter etílico
por vez, agitando o erlenmeyer vigorosamente por 30 segundos por extração. A última
extração deve ser praticamente incolor.
3. Filtrar todas as extrações através do mesmo papel filtro e finalmente lavar o papel filtro
com 75 mL de éter etílico a fim de reunir todos os ácidos oxidados.
4. Evaporar o éter etílico cuidadosamente, utilizando banho-maria. Finalmente, secar os
ácidos graxos oxidados na estufa a 105 ± 2oC por 30 minutos. Resfriar em dessecador
até atingir temperatura ambiente e pesar. Repetir o procedimento até obter massa
constante. Esta é a massa de ácidos graxos oxidados.

7. Cálculo

% Ácido Graxos Totais = M1 x 100

M

% Ácidos Graxos Oxidados = M2 x 100

M

Onde:
M = massa de amostra (g);
M1 = massa de ácidos graxos totais (g);
M2 = massa de ácidos graxos oxidados (g);

8. Histórico de versões/revisões

Data Histórico de versão / revisão

02.jan.2020 Revisão 01 – Adequação ao novo layout de documento.
Correção do procedimento e cálculos

Elaborado em: 30/11/2010 Revisado em: 27/12/2019 Aprovado em: 02/01/2020

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