Instruções de uso do COLItest®

I - USO 3- PROVA DE FLUORESCÊNCIA (presença de E.coli)

·Análise de água de qualquer procedência. Transferir para um tubo de ensaio 5-10ml do caldo positivo, O teste será
·Teste para detecção de coliformes totais e Escherichia coli. POSITIVO (presença de E.coli) quando:
* Houver fluorescência azul sob luz ultravioleta (lâmpada de luz negra de 3 a 6w,
II - PRINCÍPIO DO TESTE ondas longas de 365nm)
O COLItest® foi desenvolvido para determinar a presença ou a ausência de
coliformes totais e Escherichia coli através da técnica da cultura, sendo validado
frente a APHA/AWWA/WEF, descrito no Standard Methods for the Examination 4- PROVA DE INDOL (teste opcional para identificação e/ou confirmação
of Water and Wastewater, pelo ITAL do Estado de São Paulo. presença de E.coli)
O meio de cultura COLItest® possui em sua formulação substâncias, nutrientes Após a leitura de fluorescência adicionar ao mesmo tubo com caldo positivo 3-5
e MUG que, devidamente balanceados, inibem o crescimento de bactérias Gram- gotas de reativo de kovacs (indol) ou 0,2 ml de reativo de kovacs (indol) quando
positivas, favorecem o crescimento de bactérias do grupo Coliformes e facilitam este não for adquirido em frasco conta-gotas. O teste será POSITIVO (presença
a identificação de E.coli através da fluorescência e indol. de E.coli) quando:
- Crescimento (turbidez) e mudança de cor para amarelo : * Houver formação de um anel vermelho na superfície do meio.
Na presença de coliformes totais e de E. coli, o pH do meio se altera, devido à
fermentação da lactose, isso faz com que o meio de cultura COLItest® mude PAINEL DE INTERPRETAÇÃO DE RESULTADO
sua cor inicial de púrpura para amarelo. Reativo
Crescimento Mudança de cor
- Fluorescência COLItest® Fluorescência de kovacs
(turbidez) para amarelo
O produto contém em sua formulação MUG que quando hidrolisado libera um (Indol)
fluoróforo, que apresenta fluorescência azul visível na luz ultravioleta, quando Negativo - ou + - - -
positivo para E. coli. Coliformes totais + + - -
- Teste do Indol
Escherichia coli + + + +
A produção do indol é característica de E.coli e pode, portanto, ser usada na sua
identificação presuntiva e/ou em sua confirmação.

III - SENSIBILIDADE DO TESTE X - DESCARTE DO MATERIAL

.A sensibilidade do teste é de 1(uma) U.F.C. por 100 ml.
IV - APRESENTAÇÃO DO PRODUTO
.Sachê individual com meio de cultura COLItest®.
V - ARMAZENAGEM/CONSERVAÇÃO
.O sachê COLItest® deve ser armazenado em local seco, fora do alcance de
crianças e animais em temperatura ambiente e mantido na sua embalagem
original.
VI - ESTABILIDADE
.O sachê COLItest® deverá ser usado até a data de validade (vide embalagem).
·Não utilizar o sachê COLItest® caso o mesmo apresente qualquer sinal de
deterioração e/ou violação.
Após o uso descartar em um recipiente com Hipoclorito de Sódio a 2% em cloro
ativo, por pelo menos 30 minutos ou autoclavar por 15 minutos a 120º C.
XI - CONTROLE DE QUALIDADE
Vide certificado
XII-TERMO DE GARANTIA
Este produto tem total garantia desde que seja seguida corretamente as
instruções de uso e aplicada as boas práticas laboratoriais, observando
conservação, o número do lote e o prazo de validade.
XIII-EQUIPAMENTOS NÃO FORNECIDOS
- Frasco para coleta; - Estufa bacteriológica; - Leitor de Fluorescência; - Reativo
de kovacs (Indol)

VII - CUIDADOS E PRECAUÇÕES XIII - REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS

·Aplicar boas práticas laboratoriais e seguir um rigoroso controle de qualidade.
·A análise da água deverá ser iniciada até 6 (seis) horas após a coleta, caso não
seja possível, guardar a amostra em temperatura entre 2 a 8ºC por no máximo
24 horas.
VIII - COLETA E PROCEDIMENTO
1- Coletar assepticamente a água a ser analisada até 100 ml;
2- Adicionar o meio de cultura COLItest® e homogeneizar;
(ATENÇÃO: Quando analisar água clorada adicionar inativador de cloro
conforme orientação técnica do fornecedor)
3- Incubar o frasco em estufa bacteriológica a 35 + 2°C entre 18-48h. A partir de
18h pode-se interpretar os resultados dos frascos POSITIVOS e aguardar até
48h de incubação para os casos negativos e duvidosos. Evitando assim falsos
resultados.
IX - INTERPRETAÇÃO DO RESULTADO (após período de incubação 18-48h)
O teste é considerado:
1- NEGATIVO (ausência de coliformes totais e E.coli) quando:
* Não houver alteração de cor púrpura para amarelo
Obs.: Nestes casos não há necessidade de realizar a prova de fluorescência.
2- POSITIVO (presença de coliformes totais) quando:
* Houver alteração de cor púrpura para amarelo
Obs.: Nestes casos há necessidade de realizar a prova de fluorescência e/ou
indol para identificação de presença de E.coli.
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Ilustração de forma de uso do COLItest®

1 - Presença / Ausência

Coletar a amostra de água de Adicione o meio de cultura COLItest® e leve ao Interpretação resultado:
qualquer procedência até 100ml incubador por 18 a 48 horas a uma temperatura de Púrpura = Negativo
35 + 2°C Amarelo = Positivo para Coliformes totais
Fluorescência = Positivo para Escherichia coli

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