Licenciatura

Enfermagem Veterinária 2º ano

2022/23

Doenças Parasitárias

Métodos coprológicos
Esfregaço fecal
Método de Willis
Sedimentação Natural
Método de McMaster
17 março 2023
Filipa Teixeira Rodrigues
filipatr@ipb.pt
Coprologia Porque se analisam as fezes para pesquisa de parasitas?
Exame coprológico

Possível identificar maior a parte das formas parasitárias de vermes

gastrointestinais e respiratórios, assim como alguns parasitas de outros
sistemas.

- Parasitas gastrointestinais: ovos/larvas/adultos de helmintes, ou seus

fragmentos, e oocistos de protozoários intestinais

- Parasitas respiratórios: ovos/larvas são deglutidos e encontrados nas fezes

- Parasitas do sistema circulatório: larvas são deglutidas e encontrados nas fezes

- Outros (ex: cavidade nasal, vias biliares)

EXAME COPROLÓGICO

A – Colheita da amostra de fezes

C – Identificação da amostra

B – Conservação da amostra

D – Envio da amostra ao Laboratório

E – Exame parasitológico
Colheita, Identificação e Conservação

Amostras trazidas pelo tutor

Fezes recentes
(prevenção do desenvolvimento embrionário
e eclosão da larva, ou esporulação dos oocistos)

Refrigerar

Recolha da ampola retal

Recolha do “bolo fecal” (do solo, ao defecar)

Usar luvas / lavagem com água e sabão / regras de biossegurança

Recipiente estanque (vidro, plástico, luva)

Identificação da amostra (nome animal, espécie, data de recolha, idade)

D – Envio da amostra ao laboratório

✓ Enviar nas 24 horas pós-colheita

✓ Manter refrigerado (acumuladores)

✓ Embalagem protegida com amostra bem acondicionada

✓ Preenchimento da Ficha de Requisição do Laboratório

✓ Parasitas adultos: colocar primeiro em água, e depois em álcool a 70%

E – Exame parasitológico

Antes de começar com os métodos coprológicos…

Avaliação macroscópica:

Consistência (moles, líquidas, duras….)

Cor

Presença de sangue

Presença de muco

Hidratadas / secas

Presença de parasitas adultos ou

formas parasitárias
E – Exame parasitológico – MÉTODOS COPROLÓGICOS

Métodos Qualitativos
✓ Apenas permitem avaliar a presença ou ausência
Macroscópicos
de formas parasitárias (ovos, larvas, oocistos)

✓ Amostras positivas: animal parasitado

Microscópicos:
✓ Amostras negativas: repetir o exame
▪ Diretos
(2 a 3 vezes com 2 a 3 semanas de intervalo)
▪ Indiretos (de concentração)

✓ Permitem observar o grau de infeção parasitária

✓ Conhecer o número médio de elementos parasitários

Métodos Quantitativos
por grama de fezes (OPG)

✓ Avaliar a evolução das infeções parasitárias

E – Exame parasitológico – MÉTODOS COPROLÓGICOS

Métodos Qualitativos

Macroscópicos
Esfregaço fecal
Microscópicos:

▪ Diretos
Método de Willis
▪ Indiretos (de concentração) …

Sedimentação Natural

Métodos Quantitativos
Método de McMaster
…
 Métodos coprológicos

Esfregaço fecal

Método coprológico qualitativo, microscópico, direto

▪ Rápido, simples, prático, barato

▪ Quando positivo (100% fiável – especificidade 100%)
▪ Permite identificar formas de protozoários intestinais com mobilidade (ex.
trofozoítos Giardia spp.; Tritrichomonas foetus; …)

▪ Amostra pequena / falsos negativos/ baixa sensibilidade

▪ Muitos detritos
▪ Não é conclusivo Necessário recorrer a outras técnicas
 Métodos coprológicos

Esfregaço fecal - coloração

Giardia spp
 Esfregaço fecal

Execução do método
Métodos coprológicos

Método de Willis
 Métodos coprológicos

Método de Willis

Método coprológico qualitativo, microscópico indireto, que utiliza a flutuação

Objetivo
Concentrar as formas parasitárias aumentando a sensibilidade

Princípio
Diferentes gravidades específicas: ovos de parasitas, formas larvares, oocistos e
detritos fecais

Método de flutuação
 Métodos coprológicos

Método de Willis

Gravidade específica:
Água: 1
Ovos de nematodes e cestodes: 1.10 – 1.20

Quando as fezes são

suspendidas num líquido
de gravidade específica
maior que a das formas
parasitárias, estas flutuam
à superfície
 Métodos coprológicos

Método de Willis

Utilização de soluções com gravidade superior

Pesquisa de ovos de
à das formas parasitárias a pesquisar
nematodes e cestodes
(1.10-1.20)
> 1.20

Solução saturada de:

❖ cloreto de sódio (NaCl)

❖ nitrato de sódio (NaN)

❖ sulfato de magnésio (MgSO4)

❖ sulfato de zinco (ZnSO4)

❖ açúcar
 Métodos coprológicos

Método de Willis

Permite observar formas parasitárias gastrointestinais:

Ovos – Nematodes e Cestodes

Oocistos - Protozoários

O sedimento do método de
Willis também permite a
pesquisa de ovos densos
(ovos de Trematodes)
15-20 minutos
 Métodos coprológicos

Método de Willis

Inconvenientes do uso de soluções concentradas:

 Deformação dos ovos (elevada pressão osmótica) quando permanecem tempo de

mais na solução saturada

Nematodes e Cestodes (o.k.); Trematodes (rápida deformação)

 Não permite observar formas vegetativas protozoários (Giardia, Entamoeba)

 Flutuação dos detritos fecais: objetivo separar formas parasitárias dos detritos fecais

 Amostra pequena
 Método de Willis

Execução do método
 Método de Willis

Execução do método
Métodos coprológicos

Método de Willis
 Métodos coprológicos

Método de Flutuação com

centrifugação
100x
400x
100x
400x
400x
100x
Ancylostoma caninum
400x
 Ancylostoma caninum

Toxascaris leonina
Cystoisospora spp.

não esporulado

esporulado

400X
Ancylostomídeo

Cystoisospora spp.
C

Toxascaris leonina (canídeo e felídeos)

Diferentes planos de focagem

400x 400x
Diferentes planos de focagem

400x
400x
Pseudoparasitas

Teresa Coutinho
100x
100x
 Métodos coprológicos

Sedimentação Natural

● Utilização de líquidos com gravidade específica inferior à da formas

parasitárias (água – densidade específica 1)
Gravidade específica:
Água: 1
Ovos de nematodes e cestodes: 1.10 – 1.20

Ovos de trematodes: 1.30 – 1.35

● Método que consiste num ciclo de lavagens da massa fecal e

decantação do sobrenadante até clarificação do sedimento
Métodos coprológicos

Sedimentação Natural
 400x
Ovo de Paramphistomídeo
100x
400x
100x
400x
100x

100x
100x
 Métodos coprológicos

Métodos de McMaster

Métodos quantitativos

✓ Conhecer o número médio das formas parasitárias por grama de fezes

✓ Conhecer o grau de infeção/infestação parasitária

(COF)
Contagem de ovos fecais

Número de ovos por grama de fezes

(OPG) (opg)

Correlação com número de parasitas

adultos no hospedeiro

Observação de ovos:
✓ Nematodes gastrointestinais (NGI)
✓ Cestodes
✓ Trematodes (-)

Observação de oocistos de Protozoários

 Contagem de ovos fecais (COF) – Métodos Quantitativos

MÉTODOS e sensibilidade analítica - OPG (EPG – eggs per gram)

50-100

Fator de
multiplicação
 Método de McMaster
Quantitativo
Simples

Rápido (15 minutos)

Exige material especializado – Câmara de McMaster (câmara

de contagem)

Sensibilidade analítica de 100 opg / 50 opg

Volume de
contagem
0,15 ml
Câmara o de McMaster

Volume de
contagem
dentro da
grelha
0,15 ml
Método de McMaster

Execução do método
 Método de McMaster

Observar ao microscópio em baixa ampliação (10x)

Contagem dos ovos/oocistos

A grelha tem retículos (“corredores”)

Contar todos os ovos que estão nos retículos

Contagem dos ovos/oocistos em cima das linhas exteriores

A grelha tem retículos (“corredores”)

Ou Contar apenas os ovos que se sobrepõem à

linha direita e de cima
Contagem dos ovos/oocistos em cima das linhas exteriores

A grelha tem retículos (“corredores”)

Ou Contar apenas os ovos que se sobrepõem à

linha esquerda e de baixo
 Começar por focar as linhas!!!!

Ovos tipo tricostrongilídeo ou estrongilídeo

100x
100x
100x
100x
100x
 Ex:
Método de McMaster – Cálculo de OPG Observei 4 ovos (1 grelha)
Equivale a 4 x 100 = 400

Resultado da análise = 400 OPG

Nº de ovos da grelha (0,15 ml suspensão fecal)

Definir o volume de suspensão fecal que contém 1 g de

fezes (OPG) 100 x mais
75 ml – 5 g
X–1g 1 ovo ( 0,15 ml)
=
X = 1 g x 75 ml / 5 g = 15 ml 100 ovos (15 ml = 1 g)
ovos por grama (OPG)

Diluição = 1:15
Volume de leitura = 0,15 ml
Factor de multiplicação = 15/0,15 = 100

Fator de multiplicação = Sensibilidade analítica = 100

1 ovo obs. = 100 opg (100 ovos por grama de fezes)
 Nº de ovos nas 2 grelhas

Qual o fator de multiplicação?

100?
200?
50?

Diluição = 1:15
Volume de leitura = 0,15 ml x 2 = 0,30 ml
Factor de multiplicação = 15/0,30 = 50

Fator de multiplicação = Sensibilidade analítica = 50

1 ovo obs. = 50 opg (50 ovos por grama de fezes)