18/01/2021

UNIVERSIDADE FEDERAL DO
TOCANTINS
• A coprologia parasitária põe em
evidência e identifica parasitos que
vivem no tubo digestivo do homem e
DIAGNÓSTICO DE HELMITOSES
de animais, ou aqueles para os quais
Exames Laboratoriais: as fezes constituem o veículo normal
Conceitos Gerais das suas formas de disseminação no
Thássia Reis. meio exterior.

Araguaína 2021

• Aspectos importantes - exame parasitológico de fezes

• Exame macroscópico

• Aspecto microscópico de digestão

• Presença e abundância de certos elementos

EXAME DIRETO
• Presença de parasitos

• Consistência e Cor

• Presença de muco ou sanguinolento

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Exame direto das fezes Exame direto das fezes

Princípio Método Errado!
• Colocar uma pequena quantidade de fezes em uma
lâmina de microscopia.
• O exame direto é utilizado para demonstrar a presença
• Colocar uma gota de líquido nas fezes e misturar bem
de ovos e larvas de helmintos e estágios de Certo
com uma espátula ou bastão.
desenvolvimento de protozoários.
• Cobrir com uma lamínula. A suspensão deve ter
espessura fina o suficiente para permitir a passagem da
luz.

• Inspecionar a lâmina em movimentos de ida e volta

• INDICAÇÕES: Por vezes, é necessário medir as células para precisar o diagnóstico - estão neste

• Suspeita de presença de larvas de parasitos caso certos trofozoitos/cistos de protozoários bem como ovos de helmintos.

Normalmente, utiliza-se a objetiva 10x para ovos de helmintos e a objetiva 40x

• Sempre que necessário.
para cistos de protozoários.

A medição de ovos tem interesse, sobretudo quando há necessidade de

confirmar diagnóstico.

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Exame direto das fezes Resultado:

Exame direto das fezes Exame direto das fezes

Vantagens Desvantagens
• Rápido de preparar
• Não pode ser usado para resultados quantitativos.
•Permite visualizar trofozoítos de Eimeria,Trichomonas e •O método é relativamente insensível - número de ovos da
Giardia (solução salina). amostra.
•Pode ser difícil observar e identificar os ovos na presença de
• Útil para examinar fezes de pequenas aves e répteis (onde muitos debris.
trematóides são comuns) •Areia, sementes e outros debris fecais podem dificultar a
deposição adequada da lamínula.
• Pode requerer muito tempo para um exame adequado.

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Concentração por flutuação

Definição

• Teste qualitativo para a detecção de ovos de

nematóides e oocistos de protozoários.

• Útil para ensaios preliminares visando identificar que

grupos de parasitas estão presentes em uma amostra.

Concentração por flutuação Concentração por flutuação

Princípio Material
• Os ovos e/ou oocistos são separados do material fecal e
•Recipiente plástico (copo) ou vidro (5 cm de altura com
concentrados por uma solução de flutuação em uma
boca larga).
gravidade específica apropriada.
•Tamís (50 – 100 malhas/polegada).
• Ovos leves, por terem densidade menor do que aquela do •Pipeta.
fluido de flutuação tendem a subir e permanecer no topo da •Tubo de ensaio comum e bastão de vidro.
coluna de líquido.
•Lamínula e lâmina.

REAGENTE DENSIDADE
NaCL 1,120 – 1,200

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Concentração por flutuação Concentração por flutuação

Método Método

•2 a 3g de fezes.
•NaCL

Concentração por flutuação Concentração por flutuação

Método Método

•Repouso: 30-40’.
•NaCL 35%
•30 a 40 ‘

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Concentração por flutuação Concentração por flutuação

Método Líquidos de flutuação
• Solução saturada de sal (NaCl)

• Gravidade específica: 1,18 - 1,20.

•Pode distorcer a morfologia (protozoários).

• Solução saturada de açúcar (sacarose)

• Gravidade específica – 1,27.

• Não afeta a viabilidade de ovos – recomendado

para material para cultura.

Concentração por flutuação Concentração por flutuação

Líquidos de flutuação Gravidade específica
Gravidade específica de alguns ovos de helmintos, conforme determinada
• Solução de sulfato de zinco (ZnSO4) utilizando-se centrifugação em gradiente de densidade de sacarose*
• Gravidade específica: 1,18
Gravidade
• Melhor solução para ovos de Fasciola Espécie
Específica Média
Faixa

• Reagente caro Ancylostoma caninum 1,0559 1,0549 – 1,0573

Toxocara canis 1,0900 1,0791 – 1,0910
Toxocara cati 1,1005 1,1004 – 1,1006
Taenia spp. (cestóide) 1,2251 1,2244 – 1,2257
Solução de ZnSO4 1,18 -
Solução saturada de sal ou
1,20 -
açúcar
* David and Lindquist, 1982. J. Parasitology 68:916-919.

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Flutuação em NaCl ou açúcar Flutuação - Desvantagens

Vantagens
• A técnica não flutua ovos de trematóides e ovos de alguns
vermes chatos (ordem Pseudophyllidea – Ex.
• Técnica flutua os ovos mais comuns de helmintos e
Diphyllobothrium).
oocistos de coccídios.
• Distorce a morfologia de cistos de Giardia.
• Soluções empregadas são baratas.
• Pode ser demorada se não for feita com centrifugação.
• Há poucos debris para dificultar a visão dos parasitos.
• Amostras de fezes contendo gordura.

Flutuação em sulfato de zinco Flutuação em sulfato de zinco

Vantagens Desvantagens
• Flutua a maior parte dos ovos de helmintos.
• Não flutua ovos de alguns trematóides e vermes chatos
• Melhor método para cistos de protozoários, especialmente (ordem Pseudophyllidea – Ex. Diphyllobothrium).
Giardia e para ovos de Trichuris. Na maioria dos casos
recupera larvas de nematóides.
• ZnSO4 é caro (gravidade específica de 1,18).

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PRINCIPAIS PARASITOS - OVOS

Ordem Superfamilia Espécie

Haemonchus sp., Trichostrongylus spp., Ostertagia sp.

Trichostrongyloidea
Nematodirus sp., Cooperia sp., Oesophagostomum
Strongyloidea
Strongylida spp.
Ancylostomatoidea
Ancylostoma spp.
Metastrongyloidea
Metastrongylus sp.

Ascaridida Ascaridoidea Toxocara spp., Ascaris suum, Neoascaris vitulorum.

Oxyurida Oxyuroidea Oxyuris equi

Rhabditida Rhabditoidea Strongyloides stercoralis

• Protozoários: Eimeria spp.

Técnica de Hoffman Técnica de Hoffman

•Sedimentação de ovos densos: •Sedimentação de ovos densos:
•Taenia spp. – ovos e proglótides: Taenia solium, T. saginata, T.
psiformis, T . ovis, Hydatigera taeniaeformis, Diphyllobothrium •Material:
latum.
• Fasciola sp., Eurytrema sp. •Cálicede sedimentação e gaze.
•Tamís metálico arredondado.
• Espátula
•Lâmina e lamínula

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Técnica de Baermann
•Larvas de 1ºestágio de vermes pulmonares:
•Dictyocaulus, Protostrongylus, Muellerius.

•Material:

•Funilde vidro e gaze.

•Tamís metálico arredondado.
•Tubo de centrífuga e suporte.

Técnica de Baermann Técnica de Baermann

•Larvas de 1ºestágio de vermes pulmonares: •Larvas de 1ºestágio de vermes pulmonares:

•TÉCNICA: •TÉCNICA:

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Técnica de Baermann Técnica de Baermann

•Larvas de 1ºestágio de vermes pulmonares: •Larvas de 1ºestágio de vermes pulmonares:

•TÉCNICA: •TÉCNICA:

•Água – 40 a 50ºC •Fezes: 1cm margem. •3-5mL

•Repouso: 1-2 horas. •2-3 horas – refrigerado.

Técnica de Gordon & Whitlock - OPG

Princípio
• Técnica quantitativa.

• Utiliza uma câmara de contagem (McMaster) que permite examinar

microscopicamente um volume conhecido de suspensão fecal.

• Utiliza-se uma solução de flutuação para que os ovos ou oocistos

permaneçam aderidos à superfície superior, facilitando a contagem.

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• Contar o número de ovos dentro de cada retícula quadrada

• Ignorar os ovos presentes nas áreas externas
• Usou-se 2 gramas de fezes para 28 ml de solução (total 30 ml)
• Cada compartimento possui 0,15 ml (total 0,3 ml)
• Multiplicar o valor total por 50
• O número resultante é o número de ovos por grama (o.p.g.) de fezes
• Ex. 12 ovos no compartimento 1 e 15 ovos no 2
• = (12 +15) x 50 = 1.350 o.p.g.

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Contagem de ovos
Vantagens

• Não requer nenhum equipamento especializado.

• Permite quantificar o número de parasitas eliminados

pelo hospedeiro.

Contagem de ovos
Desvantagens

• A contagem pode ser demorada, especialmente se

houver grande quantidade de debris.

• Não aplicável em amostras de fezes contendo gordura.

• Não flutua alguns tipos de ovos.

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Técnica de Roberts & O’Sullivan

Técnica de Roberts & O’Sulivan
Coprocultura
Coprocultura
•MATERIAL
• Cultivo de larvas de nematóides gastrintestinais de
•Recipiente de vidro com tampa (250-300mL).
ruminantes.
•Serragem.

•Tubo de ensaio.
•Espátula e bastão de vidro.
•Placas de Petri e pipeta.
•Cordões de algodão
•Estufa.

Técnica de Roberts & O’Sullivan Técnica de Roberts & O’Sullivan

Coprocultura Coprocultura
•MÉTODO •MÉTODO

•20 a 30g fezes

•2 serragem:1 fezes

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Técnica de Roberts & O’Sullivan

Técnica de Roberts & O’Sullivan
Coprocultura
•MATERIAL •IDENTIFICAÇÃO •CORRELAÇÃO OPG E COPROCULTURA

•Lâmina e lamínula •Tamanho da larva •OPG x (%) espécie de coprocultura.

•PipetaPasteur •Forma da região anterior
•Solução de lugol. •Nº e tipo de cell intestinais

Interpretação do número de Interpretação do número de

helmintos e carga patogênica helmintos e carga patogênica
•Padrão: 1 carga patogênica = 500 Haemonchus •Ovipostura diária estimada:
•Cálculo do nº de fêmeas:
Parasito Ovipostura
OPG x qt. Fezes/dia
Haemonchus 5000
------------------------- Trichostrongylus 200
Cooperia 200
postura/fêmeas/dia
Strongyloides 3000
Bunostomum 1200
•Cálculo do nº de machos: 70% fêmeas. Oesophagostomum 3000
Ostertagia 200

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Interpretação do número de helmintos

e carga patogênica
Haemonchus sp./ Ostertagia sp.
•Equivalência patogênica estimada: / Trichostrongylus sp.
Ancylostoma caninum

•Ovinos:500 Haem = 100 Oesop =

3000 Oster = 4000 Tricho/Coop = 200 Bun.

•Bovinos: 2x.

•Carga Patogênica: 2 = doença.

Ovos elípticos, de casca fina, com
Ovo elíptico, de casca fina e tamanho médio e com muitas mórulas.
•Eliminação de fezes/dia:
mede 55 a 77 µm de
•Ovinos: 5% PV. comprimento por 34 a 45 µm
Haemonchus e Ostertagia são os mais
•Bovinos: 10% PV. de largura. patogênicos.

MORFOLOGIA DOS PRINCIPAIS HELMINTOS MORFOLOGIA DOS PRINCIPAIS HELMINTOS

NEMATODA Toxocara canis NEMATODA

Strongyloides papillosus
Ascaris suum Trichuris sp.

Ovo de coloração castanha e Ovo bioperculado, de casca Nematóide parasito de

de casca espessa e espessa, em forma de limão e intestino delgado, pode ser
com coloração castanha,
mamilonada. Mede cerca de Ovo de casca espessa, finamente transmitido pela via cutânea e
devido a impregnação dos
50 a 80 µm por 40 a 60 µm transmamária.
corrugada, de coloração acastanhada, e pigmentos biliares.
medem de 85 a 90 µm por 75 µm.

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Moniezia sp. Eurytrema sp. Fasciola hepatica

Dipylidium caninum Taenia spp.

Os ovos são esféricos,com

casca espessa, de coloração
acastanhada e com estrias Trematódeo das vias biliares e vesícula biliar,
Cápsula ovígera contendo Ovo de formato irregular, acastanhado e radiais. No interior dos ovos tendo como vetor um molusco aquático.
cerca de 20 ovos encontra-se o embrião
apresentando aparelho piriforme. hexacanto com três pares de
Parasito do intestino delgado, transmitido acúleos ou ganchos

por ácaros oribatídeos.

• O exame parasitológico de fezes (EPF) – diagnóstico de parasitos intestinais.

• Ovos e larvas de helmintos, cistos, trofozoítos ou oocistos de protozoários.

• Amostra pequena: processos de enriquecimento para concentrá-las. Os

PRINCIPAIS EXAMES COPROPARASITOLÓGICOS principais processos de enriquecimento são:

HUMANOS

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• Método de Baermann-Moraes e método de Rugai.

• Sedimentação espontânea
• Strongyloides stercoralis. Concentração de larvas - hidrotropismo e
• Método de Hoffman, Pons e Janer, também conhecido como método de Lutz.
termotropismo positivos.
Permite o encontro de ovos e larvas de helmintos e de cistos de protozoários.

• Método de Blagg (também conhecido por método de MIFC), método de Ritchie,

• Método de Kato-Katz
Coprotest. Usados para a pesquisa de ovos e larvas de helmintos, cistos e
alguns oocistos de protozoários.

• Fezes frescas ou conservadas (M.I.F.)

• Verde malaquita
• X 24

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• Flutuação espontânea • Centrífugo-flutuação - FAUST

• Método de Willis. Indicado para a pesquisa de ovos leves

(principalmente ancilostomídeos).

• Centrífugo-flutuação

• Método de Faust. Sulfato de zinco. Oocistos de protozoários e ovos

leves.

Ancylostoma duodenale Ascaris lumbricoides Trichuris trichiura

• Escolha do método:

•NEVES, D. P. Parasitologia Humana. Editora Atheneu.

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Taenia saginata
Schistosoma mansoni
T. solium

• O intestino não é a via normal de eliminação dos elementos de

diagnóstico dessa parasitose
• A postura do helminto ocorre na região perianal
• O parasito é ainda jovem ou imaturo
• O número de parasitos é reduzido (mas tenderá a aumentar)
• A infecção é recente
• A colheita é feita num período negativo

• Gota espessa e delgada

• Fixação – Álcool absoluto
• Coloração – GIEMSA

• Técnica de Knott
• Diagnóstico de microfilárias circulantes:
Dirofilaria spp e Dipetalonema spp.
• Técnica: 1mL Sangue –anticoagulante – 9mL
formalina 2%
• Centrifugar 1200rpm 5’ – desprezar
sobrenadante – (corar ou não com azul de
metileno 0.1%) – sedimento entre lâmina e
lamínula.

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DIAGNÓSTICO DE HELMINTOSES - RELEVÂNCIA

AÇÕES: DIRETA E INDIRETA - HOSPEDEIROS

•Bem estar animal

•Produção animal
•Zoonose:
• Dipetalonema reconditum
• Antropozoonose
• Dirofilaria immitis
• Zooantroponose
• Anfixenose
•Saúde pública

• Babesia spp.

thassiareis@veterinaria.med.br

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