09/03/2019

➢Diagnóstico laboratorial

Exame Parasitológico ▪ INDIRETO: reações antígeno/anticorpo

(PCR, Elisa)
de Fezes (EPF) ▪DIRETO: visualizar o causador da patologia
MACROSCÓPICO e MICROSCÓPICO
César G. Trojahn Filho
Curso de Biomedicina
Aula 07 Evidencia vermes Ex. direto, Prep. salinas,

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Características físicas Coloração, Temperatura. 2

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➢ Amostras mucosas, liquefeitas ou pastosas

➢ Exame de fezes a fresco trofozoítas

Esfregaços corados: Hematoxilina férrica protozoários

Ziehl Nelseen mod. intestinais

➢Amostras formadas técnicas de concentração

Exame de fezes coradas pelo lugol
oocistos, cistos,
ovos, larvas

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Os principais processos de enriquecimento são:

✓Sedimentação espontânea: método de Hoffman, Pons e Janer
EPF > diagnosticar o parasita por (HPJ), também conhecido como método de Lutz. Permite o encontro
diferentes métodos de ovos e larvas de helmintos e de cistos de protozoários;
✓Sedimentação por centrifugação: método de Blagg (também
conhecido por método de MIFC), método de Ritchie, Coprotest.
Exame macroscópico: consistência das fezes, odor, Usados para a pesquisa de ovos e larvas de helmintos, cistos e
elementos anormais (muco e sangue), vermes alguns oocistos de protozoários;
✓Flutuação espontânea: método de Willis. Indicado para a pesquisa
adultos ou parte deles; de ovos leves (principalmente ancilostomídeos);
✓Centrífugo-flutuação: método de Faust. Usado para a pesquisa de
Exame microscópico: ovos, larvas, cistos, cistos e alguns oocistos de protozoários, permitindo, também, o
trofozoítos. encontro de ovos leves.
✓Concentração de larvas de helmintos por migração ativa, devido
Métodos quantitativos: pouco utilizado, ao hidrotropismo e termotropismo positivos: método de
medicamento pelo peso não carga (Kato-Katz) Baermann-Moraes e método de Rugai. Indicados para a pesquisa de
larvas de Strongyloides stercoralis.
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Coleta e conservação das amostras

Escolha do método
✓ Coleta, armazenamento e conservação são
fundamentais;
➢Não existem método capaz de diagnosticar
✓ Frascos, amostra não contaminada
todas as formas com o mesmo desempenho;
✓ Recomendado: três amostras em dias
➢ Existem métodos específicos e sensíveis;
alternados;
➢ Existe hoje muita dificuldade em relação a
✓ As amostras são mantidas sob refrigeração
informação e indicação do EPF;
(5 a 10º C) ou conservante.
➢ Logo deve haver uma padronização no
Laboratório em relação ao número de
técnicas padrões.
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Coleta e conservação das amostras Coleta e conservação das amostras

> Cuidados com parasitas eliminados ou - Contrastes: bário, magnésio
encontrados com as fezes ∗ aguardar coleta de 5 a 10 dias
> Amostras múltiplas: como proceder, intervalos
de tempo entre as coletas, e entrega da amostra - Outros:
(sempre definir). Óleo mineral, bismuto, antimaláricos,
> Esclarecimentos para exames específicos, como antibióticos, e antidiarreicos não absorvíveis
Anal Swab (fita adesiva) ∗ os parasitas não são recuperados durante
> Uso de laxantes: fosfato de sódio e sulfato de
uma a várias semanas.
sódio tamponado, magnésio - não utilizar os
oleosos.
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Coleta e conservação das amostras Número de amostras

- Coleta de 03 amostras: dias alternados ou - Antes e após o tratamento: 03 amostras
dentro de 10 dias - Sendo:
∗ 3 a 4 semanas para protozoários
- Coleta de 06 amostras: dias alternados ou ∗ 5 a 6 semanas para Taenia
não, até 14 dias Ex: Entamoeba histolytica/dispar, 6 amostras
Portanto:
• Com um só método: direto – detecção de cerca de 40%
∗ uma série de 03 amostras é considerado o
• Dois métodos: direto e com lugol – 58%
mínimo para um exame adequado. • Três métodos: direto, com lugol e concentração -78%
∗ recomenda-se que haja intervalo de 1 a 2 • Quatro métodos: direto, com lugol, concentração e
dias entre as coletas coloração permanente- 98%
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Estabilidade das amostras Preservação de Amostras –

Conservadores
-Trofozoitas – amostras líquidas, recentes- 30min
-Trofozoitas e cistos – amostras pastosas - 60min
-Ovos, larvas, cistos – amostras fecais formadas - Dificuldade de transporte até o laboratório:
(24h) trânsito, distância, custo, tempo
∗ não se recomenda guardar amostras recentes - Grande volume de amostras no laboratório;
em estufas e geladeiras;
- Controle da qualidade;
∗ rejeitar amostras coletadas sem as
especificações solicitadas;
- Ensino e Pesquisa;
-Amostras com conservador - 4 semanas ou mais. - Arquivo de parasitas.

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❖ Formol 10% (formalina): conserva por um mês;

Formol 10mL + sol. salina 0,85% 90 mL Solução de Lugol:
❖ MIF (Mertiolato, Iodo, Formol) Os cistos de protozoários e as larvas de helmintos
Glicerina 5 ml necessitam ser corados para uma correta identificação
Formaldeído (40%) 25 ml
Mertiolato (ou mercurocromo) 0,1% 200 ml
na microscopia. Para essa finalidade utilizamos a
Água destilada 200 ml solução de lugol, cuja fórmula é a seguinte:
Solução de lugol 43 ml
Total 473 ml
Iodo 2g
❖ SAF (Acetato de Sódio, Ácido Acético e Formaldeído) Iodeto de potássio 4g
Acetato de Sódio 15 g Água destilada 100 mL
Ácido Acético 20 ml
Formadeído (40%) 40 ml
Água destilada 925 ml
Total 1.000 ml

Observação: Os trofozoítos de amebas e Giardia não se conservam no

formol 10% ou MIF, dois conservadores muito utilizados. 15 16

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Principais helmintos encontrados no EPF e

Métodos de Diagnóstico os Métodos de EPF mais indicados para o
EXAME DIRETO seu diagnóstico
Utilizado para pesquisa de cistos de protozoários e ovos
de helmintos.
Método pouco sensível
e só apresenta
resultados positivos
em infecções massivas.
Em fezes diarreicas,
deve-se observar três
lâminas de cada
amostra.
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Apresentação dos resultados Laudos finais

Todos os parasitos encontrados no EPF deverão ser
relatados, sejam eles patogênicos ou não. Deverão ser
citados a forma parasitária observada (ovo, larva, cisto,
trofozoíto, oocisto, verme adulto) e o nome científico do
parasito, incluindo o gênero e espécie, sempre que
possível. Também deverá constar o(s) método(s)
executado(s) e a consistência das fezes, tendo em vista
que os métodos rotineiramente empregados não
permitem o encontro de trofozoítos de protozoários em
fezes diarréicas. Observações sobre o número de
amostras colhidas devem ser relatadas.
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- Fornecem informações úteis para o
diagnóstico;
- Servem como guia para o tratamento;
- Acompanham e determinam a eficiência do
tratamento;
- Trazem informações de valor para estudos
epidemiológicos;
- Fornecem elementos básicos para corrigir
deficiência nos programas de profilaxia do
meio ambiente
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Laudos finais Laudos finais

- Reportar todos os parasitas encontrados;
- Sempre com os nomes científicos: grifados, ou
em itálico, ou em negrito
-Colocar o estágio de diagnóstico identificado
- Ex. POSITIVO
- Foram observados...
Ovos de Hymenolepis nana Larvas de Strongyloides stercoralis
Ovos de Hymenolepis nana Larvas de Strongyloides stercoralis
Ovos de Hymenolepis nana Larvas de Strongyloides stercoralis
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-Para ausência de parasitos, reportar:
- Ex. “Negativo - Não foram visualizadas
formas diagnósticas de parasitas”
Ou
- “Negativo - Não foram visualizadas
formas diagnósticas de parasitas, na
amostra enviada”
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Controle Interno de Qualidade Programas de CIQ que poderão ser

●Envolva TODOS OS COLABORADORES
●Implemente o Programa que mais se
adapte ao Laboratório;
●Realize treinamentos periódicos de todos
os funcionários;
●Análise e estabeleça ações para todas as
atitudes fora de controle.
implantados:
● Amostra cega
● Pool de amostras positivas ( COCOTECA® )
● Amostras conservadas com parasita único
● Lâminas com coloração permanente
● Lâminas da rotina.

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