PONTIFÍCIA UNIVERSIDADE CATÓLICA DE MINAS GERAIS

Graduação em Engenharia Mecânica

Adriano Vinícius Silveira Resende

Lucas Alves Salvador

Matheus Pimenta Vidigal

ESPECTROSCOPIA RAMAN

Contagem

2018
Adriano Vinícius Silveira Resende

Lucas Alves Salvador

Matheus Pimenta Vidigal

ESPECTROSCOPIA RAMAN

Trabalho apresentado à disciplina Introdução a

Engenharia, da escola de Engenharia Mecânica
da Pontifícia Universidade Católica de Minas
Gerais.

Orientador: Prof.ª Rosely Maria Velloso Campos

Área de concentração: Ciências dos Materiais

Contagem

2018
 RESUMO

Novas tecnologias vêm sendo cada vez mais empregadas no estudo de

problemas ligados ao patrimônio histórico cultural e entre elas a espectroscopia
Raman ocupa lugar de destaque por se tratar de uma técnica não destrutiva e
bastante específica, que proporciona uma quantidade muito grande de informações
sobre o objeto em análise. Este texto apresenta uma descrição da técnica, suas
principais características e limitações, bem como de suas potencialidades. E ainda
apresentada uma breve revisão sobre suas aplicações.

Palavras chaves: Raman. Espectroscopia.

 Abstract

New more employed technologies come being each time in the study of on
problems to cultural the historic site and between them the Raman spectroscopy
occupies place of prominence for if to deal with one not destructive technique and
sufficient specifies that it very provides a great amount of information on the object in
analyzes. This text presents a discretion of the technique its main characteristics and
limitations as well as its potentialities and still present one brief revision on its
applications.

Key Words: Raman. Espectroscopia.

 LISTA DE IMAGENS

Imagem 1: Conceito Espectroscopia Raman....................................................2

Imagem 2: Microespectroscopia.......................................................................7

Imagem 3: Microscopia confocal.......................................................................8

 LISTA DE SÍMBOLOS

E Energia que aumenta em função da frequência

h Constante de Planck

v Frequência de oscilação

λ Comprimento de onda

c Velocidade da luz no vácuo

 LISTA DE SIGLAS

ADN - É um material biológico que permite que um indivíduo a ser identificado contra
qualquer outra pessoa em qualquer oarte do mundo.

API - ( American Petroleum Institute ), classificam as características de viscosidades

e desempenho dos lubrificantes

CCD ( Charge - coupled device ) é um sensor semicondutor para captação de

imagens formado por um circuito integrado que contém uma matriz de capacitores
acoplados. Sob o controle de um circuito externo, cada capacitor pode transferir sua
carga elétrica para um outro capacitor vizinho.

CNT - São alótropos do carbono com uma nanoestrutura cilíndrica.

DLC -É uma forma metaestável de carbono amorfo que pode melhorar a resistência
de vários materiais quando aplicado como uma película.

DTS - Detecção de temperatura distribuído ao longo de fibras ópticas

ID - É a espectroscopia que é menos sensível do que a superfície camadas de

Raman com tensão aplicada.

NIR - ( Near Infrared Reflectance ) é um equipamento de alta precisão que efetua

análises de amostras orgânicas através do princípio de emissão da radiação
eletromagnética.

NIRS - É uma técnica analítica que usa uma fonte de luz produtora de comprimento
de onda, o que permite a obtencão de um quadro completo da composição orgânica
de uma substância ou material analisado.

PMT - É um dispositivo eletrônico que faz parte dos tubo a vácuo e converte a luz
em corrente elétrica de maneira que se pode saber que a quantidade chega ao
aparelho, sendo assim como multiplicador do sinal luminoso.

SORS - É a espectropia que é menos sensível do que a superfície camadas de

Raman convencional.

UV - É a sigla pra ultravioleta, que é um tipo de radiação eletromagnética.

YAG - É um dos tipos mais comuns de laser e é empregado em diferentes

aplicações. Geralmente, emitem luz com um comprimento de onda de 1064 nm.
 SUMÁRIO

1 INTRODUÇÃO ...............................................................................................1
2 ESPECTROSCOPIA RAMAN – CONCEITO ................................................2
3 UTILIZAÇÃO .................................................................................................3
3.1 Área Química .............................................................................................3
3.1.1 Polimerização..........................................................................................3
3.2 Área Física .................................................................................................4
3.3 Áreas Biomédicas......................................................................................4
3.4 Na Arte........................................................................................................5
4 MICROESPECTROMETRIA..........................................................................6
5 MICROSCOPIA CONFOCAL.........................................................................8
6 CONCLUSÃO.................................................................................................9
REFERÊNCIAS...............................................................................................10
 1

1 INTRODUÇÃO

O trabalho a seguir relata sobre a Espectroscopia Raman que foi descoberta

na década de 1920 pelo físico indiano Chandrasekhara Venkata Raman, tornou-se
nos últimos anos uma grande aliada da ciência no Brasil, em diversas áreas. Do alto
de seus 84 anos, ela se mostra essencial em uma das áreas mais novas do meio
científico: a nanotecnologia.

A qual consiste em uma técnica fotônica de alta resolução que proporciona

em poucos segundos informações químicas e estruturais de qualquer material ou
composto orgânico e/ou inorgânico permitindo assim sua identificação. Sua análise
se baseia na luz, monocromática, colimada, coerente e de determinada frequência,
espalhada ao incidir sobre o material a ser estudado, cuja maior parte da luz
espalhada também apresenta a mesma frequência daquela incidente. Somente uma
pequena porção da luz é espalhada inelasticamente frente as rápidas mudanças de
frequência, devido à interação da luz com a matéria, e é uma característica
intrínseca do material analisado e independe da frequência da luz incidente.

A luz que manteve a mesma frequência da incidente não revela qualquer

informação sobre o material e é chamado de espalhamento Rayleigh, mas aquela
que mudou revela a composição molecular deste mesmo e é conhecido como
espalhamento Raman.

Esta técnica é aplicada diretamente sobre a amostra em questão, não sendo

necessário fazer uma preparação especial no material. Além do mais, não há
alteração na superfície que se faz a análise.

Esse fenômeno também serve para auxiliar pesquisadores na identificação,

em poucos segundos, da composição de determinado material indispensável para a
produção de um aparelho de telefone celular ou para datar uma pintura rupestre. Em
Minas Gerais, os acadêmicos não conseguem imaginar mais o setor científico sem a
técnica, que tem ajudado até o Ministério Público estadual a recuperar peças sacras
roubadas.
 2

2 ESPECTROSCOPIA RAMAN – CONCEITO

Tal procedimento é uma técnica que usa uma fonte monocromática de luz a
qual, ao atingir um objeto, é espalhada por ele, gerando luz de mesma energia ou de
energia diferente da incidente. No primeiro caso, o espalhamento é chamado de
elástico e não é de interesse, mas no segundo (espalhamento inelástico) é possível
obter muitas informações importantes sobre a composição química do objeto a partir
dessa diferença de energia. Na prática, um feixe de radiação laser (monocromática,
portanto) de baixa potência é usado para iluminar pequenas áreas do objeto de
interesse e ao incidir sobre a área definida, é espalhado em todas as direções,
sendo que uma pequena parcela dessa radiação é espalhada inelasticamente, isto
é, com frequência (ou comprimento de onda) diferente da incidente (E = hν ou E =
h.c.λ-1). Caso seja utilizado um microscópio óptico convencional no qual a objetiva
tanto serve para focalizar o feixe incidente na amostra quanto para coletar a
radiação que é espalhada por ela, tem-se a Microscopia Raman, a qual permite o
estudo de áreas.

Imagem1- Conceito Espectroscopia Raman

Fonte: Espectroscopia Raman Youtube

 3

3 UTILIZAÇÃO

A espectroscopia Raman é provavelmente a ferramenta analítica mais

importante disponível para investigar as muitas estruturas diferentes, produzidos a
partir de carbono, e para estudar os muitos materiais 2D. Pode-se utilizar o
fenômeno Raman para identificar todas as formas de carbono, incluindo grafeno,
nanotubos de carbono (CNT), grafite, diamante, e de carbono tipo diamante (DLC).
A enorme gama de produtos de consumo que utilizam a base de carbono materiais-
e a promessa de materiais 2D para futuras tecnologias de tornar essas áreas-chave
de aplicação para espectroscopia Raman. É comumente utilizado em química, visto
que a informação vibracional é específica para as ligações químicas e simetria de
moléculas. Por conseguinte, proporciona uma impressão digital através da qual a
molécula pode ser identificada. A região de impressão digital de moléculas orgânicas
é no ( número de onda ) variam 500-2000 cm . Outra forma que a técnica é utilizada
é a de estudar alterações nas ligações químicas, como quando um substrato é
adicionado a uma enzima. Este efeito vem sendo utilizado em várias áreas de
interesse tais como: detecção de narcóticos e explosivos em aeroportos,
caracterização de artefatos arqueológicos, análise de fluídos corpóreos em
investigações forenses e também como ferramenta de pesquisa de vida em Marte.

3.1 Áreas Químicas

Na química de estado sólido e a indústria bio-farmacêutica, a espectroscopia

de Raman pode ser usada para identificar não só (ID) ingredientes farmacêuticos
ativos (API), mas no caso de várias formas polimórficas, isto também pode ser
utilizado para identificar a forma polimórfica da API. Tanto a espectroscopia de
infravermelho como de Raman podem ser utilizadas para identificar e caracterizar o
API, que é usado na formulação de Cayston . Em formulações bio-farmacêuticas,
deve-se usar não só a molécula correta, mas a forma polimórfica correta, como
diferentes formas polimórficas têm diferentes propriedades físicas, por exemplo, a
solubilidade, ponto de fusão, espectros de Raman e / infravermelhos. Vários projetos
de investigação demonstraram o uso da espectroscopia Raman como um meio para
detectar explosivos usando feixes de laser a uma distância segura.

3.1.1 Polimerização

Técnicas de fluorescência, de reflexão ultravioleta (UV), de espectroscopia

de Raman, de espectroscopia do infravermelho próximo (NIRS), quando
implementadas via sonda de fibras óticas, são ferramentas poderosas para o
monitoramento in situ de reações de polimerização. Os processos de polimerização
são caracterizados por apresentarem fortes não linearidades, significativos demora
no tempo das medidas das propriedades a serem controladas e existência de
perturbações não medidas, dada a enorme sensibilidade de certas reações à
presença de impurezas.
 4

3.2 Áreas Física

Em física do estado sólido, espectroscopia Raman espontâneo é usada para,

entre outras coisas, caracterizar materiais, medir temperatura, e encontrar a
orientação cristalográfica de uma amostra. Tal como acontece com moléculas
individuais, um determinado material sólido tem características fônons modos que
podem ajudar um experimentador identificá-lo. Além disso, a espectroscopia de
Raman pode ser utilizada para observar outras excitações de baixa frequência dos
sólidos, tais como plasmons, magnons, e excitações no gap (salto) de
supercondutor. O sinal de Raman espontânea dá informação sobre a população de
um determinado modo de fonão da relação entre o Stokes (downshifted) intensidade
e anti-Stokes (upshifted) intensidade. Espalhamento Raman por um anisotrópico
cristal dá informações sobre a orientação de cristal. A polarização da luz difusa de
Raman no que diz respeito ao cristal e a polarização da luz de laser podem ser
utilizadas para encontrar a orientação do cristal, se a estrutura do cristal (para ser
mais específico, o seu grupo de pontos ) é conhecido. A espectroscopia de Raman é
a base para a detecção de temperatura distribuída (DTS) ao longo de fibras ópticas,
que utiliza a retro difusão em Raman deslocado de impulsos de laser para
determinar a temperatura ao longo de fibras ópticas. Fibras ativas Raman, tais como
aramida e carbono, têm modos de vibração que mostram uma mudança na
frequência Raman com tensão aplicada. Polipropileno fibras também apresentam
mudanças semelhantes. O modo de respiração radial é uma técnica utilizada para
avaliar o diâmetro dos nano tubos de carbono. Em nanotecnologia, um microscópio
de Raman pode ser utilizado para analisar os nano-fios de compreender melhor a
composição das estruturas.

3.3 Área Biomédica

Espectroscopia Raman espacialmente deslocamento (SORS), que é menos

sensível do que a superfície camadas de Raman convencional, pode ser utilizado
para descobrir fármacos falsificados sem abertura respectivos embalagens, e para
monitorização não invasiva de tecido biológico. [2] espectroscopia de Raman pode
ser utilizada para investigar a composição química de documentos históricos, como
o Livro de Kells e contribuir para o conhecimento das condições sociais e
económicas, no momento, os documentos foram produzidos. [3] Isto é
especialmente útil porque espectroscopia Raman oferece um modo não-invasivo
para determinar a melhor curso de preservação ou conservação de tratamento para
tais materiais. O espalhamento inelástico também pode ser utilizado na área
biomédica, pois permite caracterização dos componentes celulares normais e
alterados, podendo identificar núcleos, nucléolos, organelas, e tecidos patológicos
como: desorganização epitelial, tanto na sua arquitetura ou orientação celular bem
como composição bioquímica, Portanto, é uma arma importante para diagnóstico de
lesões neoplásicas, e atualmente as assinaturas bioquímicas de alguns tipos de
câncer já foram estabelecidas e vêm sendo utilizadas na prática clínica, podemos
citar: Câncer de pulmão, cerviz uterino, colón retal, esôfago, tireoide, pele.
 5

Analisadores de gases Raman têm muitas aplicações práticas. Por exemplo, eles
são utilizados na medicina para a monitorização em tempo real de misturas de
gases anestésicos respiratórios e durante a cirurgia. 8 Espectroscopia Raman
também tem sido utilizada para confirmar a previsão da existência de fonões de
baixa frequência em proteínas e ADN estimular grandemente os estudos de baixa
frequência movimento coletivo em proteínas e ADN e as suas funções biológicas.
[Moléculas repórter Raman com olefinas ou alcino porções estão a ser
desenvolvidos para permitir a imagiologia do tecido com SERS marcado com
anticorpos espectroscopia Raman também tem sido usada como uma técnica não-
invasiva para em tempo real, na caracterização bioquímica de cura de feridas in situ
e análise multivariada dos espectros Raman permitiu uma medida quantitativa da
ferida progresso de cicatrização. espectroscopia Raman tem uma vasta utilização
em estudos de biominerais.

3.4 Na Arte

Na Escola de Belas Artes da UFMG a técnica Raman é usada para ajudar na

conservação e preservação de bens culturais do patrimônio brasileiro. Segundo o
diretor da escola e coordenador do Laboratório de Ciência da Conservação, Luiz
Antônio Cruz Souza, o efeito Raman vem sendo usado na área de preservação de
peças. “Uma identificação que fizemos, em fevereiro do ano passado, foi nos painéis
de Guerra e Paz de Candido Portinari. Com a técnica Raman, descobrimos que o
pintor usou nas pinturas o elemento químico titânio.” Segundo a pesquisadora
associada ao grupo coordenado por Luiz Antônio Isolda Maria de Castro Mendes,
uma outra aplicação do método é a análise de livros antigos. “Ao conhecermos quais
os pigmentos que foram usados, temos uma informação a mais para relacionar
técnicas e materiais usados pelos artistas da época”, diz Isolda. O método tem
ajudado também a equipe da Belas Artes a produzir provas para os casos de peças
históricas roubadas, principalmente as sacras, levadas de igrejas do interior de
Minas Gerais. “Colaboramos com o Ministério Público Federal e estadual nas
investigações. Se for achada uma peça que se assemelha a outras mineiras,
aplicamos a técnica para identificar o tipo de material que têm aquelas e se os
materiais são iguais, o que vai significar que foram feitas pelo mesmo artista em
determinada época. Daí, o diagnóstico é apresentado ao juiz. Usando essa técnica
conseguimos que muitas obras achadas voltassem para o local de sua origem”,
comemora Luiz Antônio. de até 1 μm (10-6 m) de diâmetro.
 6

4 MICROESPECTROMETRIA

Espectroscopia Raman oferece várias vantagens para uma análise

microscópica. Uma vez que é uma técnica de espalhamento, as amostras não
precisam ser fixos ou seccionados. Os espectros de Raman podem ser recolhidos a
partir de um volume muito pequeno (<1 um de diâmetro); estes espectros de permitir
a identificação de espécies presentes nesse volume. Água geralmente não interfere
com a análise espectral Raman. Assim, espectroscopia de Raman é adequado para
o exame microscópico de minerais, materiais tais como polímeros e cerâmicos,
células , proteínas e vestígios de provas forenses. Um microscópio de Raman
começa com um microscópio óptico comum, e adiciona um laser de excitação, um
monocromador, e um detector sensível (tal como um dispositivo de carga acoplada
(CCD), ou fotomultiplicador tubo (PMT)). FT-Raman também tem sido utilizada com
microscópios, microscópios ultravioletas e ópticos UV melhorada deve ser usado
quando uma fonte de laser de UV é usada para micro espectroscopia Raman.

Na imagem direta, todo o campo de visão é examinado para dispersar sobre

uma pequena gama de números de onda (Raman muda). Por exemplo, um número
de onda característico para o colesterol pode ser utilizado para registar a distribuição
de colesterol dentro de uma cultura de células.

A outra abordagem é imagem hiperespectral ou imagem química, em que

milhares de espectros Raman são adquiridos de todo o campo de visão. Os dados
podem então ser usados para gerar imagens que mostram a localização e
quantidade de componentes diferentes. Tomando como exemplo a cultura de
células, uma imagem hiperespectral poderia mostrar a distribuição de colesterol,
bem como proteínas, ácidos nucleicos, e ácidos gordos. Técnicas de sinalização e
de processamento de imagens sofisticadas podem ser usadas para ignorar a
presença de água, meios de cultura, tampões, e outras interferências.

Microscopia de Raman, e em particular, microscopia confocal , tem muito alta

resolução espacial. Por exemplo, as resoluções foram laterais e profundidade de
250 nm e 1,7 mm, respectivamente, usando um micro espectrômetro de Raman
confocal com a linha de 632,8 nm de um laser de hélio-néon com um orifício de 100
um de diâmetro. Uma vez que as lentes objetivas de microscópio focar o feixe de
laser para vários micrómetros de diâmetro, o fluxo de fótons resultante é muito mais
elevado do que os obtidos em instalações convencionais de Raman. Isto tem a
vantagem de uma maior extinção da fluorescência. No entanto, o elevado fluxo de
fotões pode também causar degradação da amostra, e por esta razão algumas
configurações necessitam de um substrato termicamente condutor (que atua como
um dissipador de calor), a fim de atenuar este processo.

Outra abordagem chamada de imagem Raman mundial usa imagens

monocromáticas completas em vez de reconstrução de imagens de espectros
adquiridos. Esta técnica está a ser utilizado para a caracterização de dispositivos de
grande escala, mapeamento de diferentes compostos e dinâmica estudo. Ele já tem
 7

sido utilizado para a caracterização de grafeno camadas, [15] corantes dentro J-

agregados nano tubos de carbono e vários outros materiais 2D como MoS2 e WSe2.
Uma vez que o feixe de excitação é dispersa ao longo de todo o campo de vista,
estas medições podem ser feitas sem danificar a amostra.

Através da utilização de Raman micro espectroscopia, in vivo tempo e

resolvido-espaço espectros Raman de amostras microscópicas de regiões pode ser
medido. Como resultado, a fluorescência da água, mídia e buffers pode ser
removida. Consequentemente in vivo tempo e espectroscopia Raman resolvida no
espaço é adequado para examinar a proteína, células e órgãos.

Microscopia Raman para os espécimes biológicos e médicos geralmente usa

infravermelho próximo (NIR) lasers (785 diodos nm e 1064 nm Nd: YAG são
especialmente comuns). Isto reduz o risco de danificar a amostra mediante a
aplicação de comprimentos de onda mais elevados de energia. No entanto, a
intensidade da NIR Raman é baixa (devido à ω 4 dependência de espalhamento
Raman intensidade), e a maioria dos detectores requerem tempos de coleta muito
longos. Recentemente, detectores mais sensíveis tornaram-se disponíveis, tornando
a técnica mais adequada para uso geral. Microscopia Raman de espécimes
inorgânicos tais como pedras e cerâmicas e polímeros, pode usar uma ampla gama
de comprimentos de onda de excitação.

Imagem 2: Micro espectrometria

Fonte: Medical Expo

 8

5 MICROSCOPIA CONFOCAL

A microscopia confocal de Raman refere-se à capacidade de filtrar o volume

espacialmente análise da amostra, no XY (lateral) e Z (profundidade) dos eixos.
Para um design confocal verdade, os limites de resolução espacial é definida
principalmente pelo comprimento de onda do laser e a qualidade do feixe de laser
que é usado e do tipo de objectivo microscópio selecionado e assim por diante. Para
a mais alta resolução espacial, um bem adaptado alta ampliação da objetiva e visível
excitação laser, muitas vezes, produzem os melhores resultados. Resolução
espacial típica é da ordem de 0,5-1 uM.

O primeiro microscópio confocal foi inventado em 1955 e patenteado em 1957

por Marvin Minsky, estudante de pós-doutorado da Universidade de Harvard (USA).
A microscopia confocal pode ser associada com diferentes técnicas, tal como:
Absorção, Reflexão, Transmissão, Emissão, Fotoluminescência, Fluorescência ou
Espectroscopia Raman. A sonda Microscópica Confocal é composta por fibras,
lentes, espelhos, câmera e por uma objetiva. As fibras são responsáveis por guiar o
laser até a sonda e também levar o sinal espalhado da amostra até o espectrômetro.
As lentes e os espelhos são necessários para fazer o caminho óptico dentro do
microscópio e o acoplamento dos sinais nas fibras e objetiva. A câmera serve para
visualizar a superfície da amostra em análise.

Um exemplo utilizado é uma micro-sonda acoplada em que fibra óptica é um

laser de 633 nm. Examinaram mudanças na composição molecular e na estrutura do
estrato córneo, a partir de diferentes sítios anatômicos e camadas da pele. Principais
variações espectrais foram detectadas nas seguintes regiões: 800-900 cm-1
(aminoácidos); 1200-1290 cm-1 (proteínas); e de 1030 a 1130 cm -1, 1300-1450 cm-
1, e 2800 a 2900 cm-1 (lipídios). Esses achados resultam de alterações no estrato
córneo nos componentes naturais tais como hidratação, lipídios, proteínas.

A junção do microscópio confocal ao sistema Raman, permite em tempo real

e com elevada especificidade, detectar alterações bioquímicas presentes em tecidos
vivos, sem a necessidade de dissecação. Com isso, o espectro obtido fornece
informações moleculares sobre a composição estrutural e bioquímica da amostra em
estudo, assim fornecendo espectros característicos que podem ser utilizados tanto
para fins diagnósticos como terapêuticos.

Imagem 3: Microscopia confocal

Fonte: EsteticDerm
 9

6 CONCLUSÃO

O fenômeno descoberto por Raman demonstra claramente que mesmo

sendo uma técnica descoberta a cerda de quase 90 anos ela ainda é de suma
importância nas diversas áreas de conhecimento como física, química, biomedicina,
arte e história. Uma vez que o mesmo consegue evidenciar elementos químicos,
características e propriedades estruturais de qualquer material que precisa ser
analisado e não se possui muitas informações sobre o mesmo. Assim como também
oferece várias vantagens para microscópico análise que é uma técnica de
espalhamento, onde as amostras não precisam ser fixos ou seccionado.
 10

REFERÊNCIAS

Desconhecido. Carbon, 2D materials and nanotechnology. Disponível em: <

http://www.renishaw.com.br/pt/ciencia-dos-materiais--7978>. Acesso em: 24/09/2016

EVANS, Luciane. Espectroscopia - Técnica de quase 100 anos ajuda a ciência

moderna. Aos 84 anos, técnica Raman se mostra mais do que atual. Em Minas, ela
é aplicada em estudos para datar obras de arte, na construção de dispositivos
eletrônicos e na identificação de novos materiais. Publicado em 26 de março de
2012. Disponível em: < http://www.gem.infis.ufu.br/raman>. Acesso em: 20/09/2016

FARIA, Dra. Dalva. Entenda o que é espectroscopia Raman. Publicado em 1 de

julho 2011. Disponível em: <
http://crq4.org.br/sms/files/file/Espectroscopia_Raman_4.pdf>. Acesso em:
22/09/2016

LUCAS, Vitor. Espectroscopia Raman. Disponível em: <

https://pt.wikipedia.org/wiki/Espectroscopia_Raman>. Acesso em 20/09/2016

MACHADO, Fabrício. Uma Revisão Sobre os Processos de Polimerização em

Suspensão. Polímeros: Ciência e Tecnologia, vol. 17, nº 2, p. 166-179, 2007.
Disponível em: < http://www.scielo.br/pdf/po/v17n2/a16v17n2>. Acesso em:
20/09/2016

MARIA, Andrea. Espectroscopia de Raman no diagnóstico do Câncer de Mama.

Publicado em: 18 de dezembro de 2015. Disponível em: < http://biomedica-
univapuespi.blogspot.com.br/2015/12/v-behaviorurldefaultvmlo.html>. Acesso em:
24/09/16

http://www.medicalexpo.com/pt/prod/molecular-devices/product-84611-830774.html