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REVISTA GESTO & SADE (ISSN 1984-8153)

ANLISE IN VITRO DA ATIVIDADE ANTIBACTERIANA DE TRS COMPMEROS


IN VITRO EVALUATION OF ANTIBACTERIAN ACTIVITY OF DIFFERENTS COMPOMERS
Priscila Paiva PORTERO 1 Veridiana CAMILOTTI 2 Joo Luiz Neves PEREIRA 3 Rafael Gomes DITTERICH 4 Elizabete Brasil dos SANTOS 5 Osnara Maria Mongruel GOMES 6

Resumo: A infeco bacteriana tm sido considerada a principal causa da inflamao pulpar aps a confeco das restauraes, sendo a utilizao de materiais que inibam seu crescimento um importante mecanismo contra a invaso bacteriana. Este estudo avaliou in vitro a atividade antibacteriana dos compmeros: Dyract (Dentsply), Freedom (FDI), e F2000 Compomer (3M/ESPE) sobre os microorganismos da Saliva Total, Streptococcus mutans, Staphilococcus aureus e Escherichia coli, atravs do mtodo da difuso em gar. De acordo com os resultados obtidos concluiu-se que os materiais apresentaram variada atividade in vitro antibacteriana, sendo o Freedom o material que apresentou os melhores resultados. Palavras-chave: Compmeros; Microbiologia; Streptococcus mutans

Abstract: The bacterial infection has been considerated as the principal of pulpar inflamation after the cavities preparation, on the utilization of material that inhibit their growth is an important mechanism against the bacterial invasion. This study evaluated the antibacterial activity of three compomers: Dyract (Dentsply), Freedom (FDI), e F2000 Compomer (3M/ESPE) against microorganisms of total saliva: Streptococcus mutans, Staphilococcus aureus e Escherichia coli using the agar diffusion test. According to results was conclude that the materials presented different antibacterial in vitro activity, been the Freedom the material that presented better results. Keywords: Compomers; Microbiology; Streptococcus mutans

Mestre em Odontologia (Clnica Integrada) pela Universidade Estadual de Ponta Grossa (UEPG), Doutoranda em Dentstica Restauradora pela UNESP - Araraquara). e-mail: priscis.portero@ig.com.br 2 Mestre em Odontologia (Clnica Integrada) pela UEPG. 3 Mestre em Odontologia (Clnica Integrada) pela UEPG. 4 Mestre em Odontologia (Clnica Integrada) pela UEPG. Doutorando em Sade Coletiva pela PUCPR. 5 Doutora em Biologia e Patologia Buco-dental pela FOP-UNICAMP. Professora de Microbiologia e Imunologia da UEPG. 6 Doutora em Dentstica Restauradora pela UNESP-Araraquara. Professora de Dentstica Restauradora da UEPG.
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INTRODUO Os cimentos de ionmero de vidro foram inicialmente divulgados por Wilson & Kent, em 1971, sendo lanados no mercado odontolgico no final da dcada de 70. Os primeiros cimentos ionomricos comercializados eram na forma de p e lquido e apresentavam vrios problemas, pois no eram considerados estticos e havia uma dificuldade acentuada de manipulao: o tempo de trabalho era curto e o tempo de endurecimento final demorado (WILSON, 1996). Os compmeros so basicamente resina modificada por policido, e a reao de endurecimento ocorre atravs da polimerizao dos componentes resinosos. Procurando melhorar as propriedades dos cimentos convencionais, foram introduzidos no mercado os ionmeros de vidro fotoativados, que apresentam como vantagens: alta lisura superficial, tima esttica, no h necessidade do controle da reao de endurecimento, tempo de trabalho e tempo de presa menores (em comparao aos cimentos ionomricos convencionais), necessitam de adesivos para sua unio estrutura dental e liberam flor. Os cimentos de ionmero de vidro tornaram-se importantes como material restaurador principalmente por sua ao cariosttica (MC LEAN et al., 1988). Os ionmeros de vidro tm sido associados aos componentes das resinas compostas com Bis-GMA. Tanto os cimentos restauradores como os cimentos de base e cimentos para cimentao tm resultados positivos com essa associao entre esses dois materiais, ionmero e resina Bis-GMA e HEMA. A quantidade de resina BisGMA/HEMA adicionadas a esses ionmeros varia entre 4,5 a 6,0%. Assim, tecnologias como ionopsitos, ionofotos ou compmero tm sido empregadas para novos produtos com essa associao. Esses materiais tm sua presa associada luz ou quimicamente, ou seja, se polimerizam qumica ou fisicamente pela luz. Os ionofotos, por exemplo, tem na composio do lquido o cido poliacrlico, gua e o HEMA (GALAN JNIOR; NAMEM, 1998). Esta pesquisa in vitro avaliou a atividade antibacteriana de trs marcas comerciais de compmeros: Dyract (Dentsply), Freedom (FDI) e F2000 Compomer (3M/ ESPE). MATERIAIS E MTODOS Os materiais utilizados para avaliar a atividade antibacteriana neste estudo: Dyract (Dentsply), Freedom (FDI), e F2000 Compomer (3M/ESPE) esto apresentados no Quadro 1.

Quadro 1 - Compmeros: resinas compostas modificada por policidos Cdigo Produto Fabricante Apresentao

Dyract

Dentsply

Pr-encapsulado

Freedom

FDI

Pr-encapsulado

F2000

3M/ESPE

Bisnaga

O mtodo empregado foi difuso em gar Muller Hinton Mdium (M.H.) e Brain-Heart Infusion gar (B.H.I.) e semeadura em superfcie das culturas puras de Saliva Total, Streptococcus mutans, Staphilococcus aureus, Escherichia coli, em suspenso bacteriana de 105 UFC/mL. Aps serem semeadas, as placas de Petri foram levadas estufa a 37C /10 minutos. Foram realizados 3 poos com 5 milmetros de dimetro em cada placa atravs de tubos de Duhram onde foram acomodados os compmeros (A, B, C). Os corpos-de-prova (n=18) foram acomodados e fixados nas perfuraes com cianocrilato (Super Bonder/Loclite).

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As placas foram semeadas em duplicatas para cada microrganismo. Confeccionou-se matrizes de teflon de 5 milmetros de espessura por 3 milmetros de dimetro, nas quais os compmeros foram manipulados de acordo com as instrues dos fabricantes. As placas contendo Streptococcus mutans foram incubadas em microaerofilia e deixadas em estufa a 37C/24 horas, enquanto que as placas contendo Escherichia coli foram levadas estufa a 37C/48 horas. Os halos inibitrios formados foram medidos atravs de rgua milimetrada. Novos corpos-de-prova (n=12) foram armazenados em tubos de ensaio contendo 2 mL de gua destilada e deixados durante 72 horas a 37C. Aps 72 horas de hidratao os corpos-de-prova foram fixados nos poos atravs de cianocrilato (Super Bonder / Loctite), nas placas em que foram semeados os microrganismos da Saliva Total e Escherichia coli. Em seguida, essas placas foram incubadas a 37C/72 horas, observados os resultados e medidos os halos de inibio. Os corpos-de-prova foram removidos aps 7 dias, reinseridos em novas placas de Petri e incubados a 37C/72 horas, para verificar a presena ou ausncia de halos de inibio . RESULTADOS No houve formao de halo inibitrio para nenhuma das bactrias testadas aps 48 horas da manipulao e fotoativao dos materiais. Observou-se a formao de halos inibitrios para as bactrias Escherichia coli, aps hidratao dos compmeros, sendo que para o Freedom SDI (A) a mdia dos halos inibitrios foi de 12 0,1 milmetro e para o Dyract Dentsply (B) e F2000 - 3M/ESPE (C) as mdias coincidiram e foram de 10 0,1 milmetros (Figura 1).

Figura 1 Formao de halos inibitrios apo 72 h (Escherichia coli).

DISCUSSO A ao cariosttica dos compmeros um aspecto importante de ser avaliado, pois est diretamente relacionado com a longevidade das restauraes. A liberao de flor atua na paralisao ou inibio de cries secundrias (SERRA; CURY, 1992; PEREIRA et al.,1998). sabido que o flor liberado pelo material restaurador promove uma ao tpica contnua sobre a estrutura dental adjacente, diminuindo a solubilidade e, conseqentemente podendo reduzir a incidncia ou a severidade de eventuais leses recorrentes de crie (SERRA; CURY, 1992). A variao no comportamento dos compmeros depende do tipo de material e da formulao de cada marca comercial (PEREIRA et al., 1998). Nogueira et al. (2001), em estudo semelhante avaliaram in vitro a ao cariosttica de hbridos de ionmero de vidro/resina composta, aps a simulao de uma situao de alto desafio cariognico. Foram utilizados 105 fragmentos dentrios divididos aleatoriamente em cinco grupos, para serem restaurados com diferentes resinas compostas modificadas com policidos (Compoglass, F2000, Freedom, Resinomer) ou resina composta (Z100). Leses artificiais de crie adjacentes s restauraes foram induzidas por um modelo dinmico de ciclagens trmicas e de pH. Os fragmentos dentrios foram avaliados individualmente por trs examinadores previamente calibrados, que atribuam escores representativos da presena e da severidade das leses. Atravs dos resultados
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pde-se observar que as resinas ionomricas no apresentaram o potencial cariosttico esperado. Silva et al. (2001), avaliaram a atividade antibacteriana das resinas compostas contendo flor, utilizando 105 fragmentos dentrios aleatoriamente divididos em cinco grupos para serem restaurados com diferentes materiais: Z-100 (3M), Tetric Ceram (Vivadent), Degufill Mineral (Degussa), Wave (SDI), Solitaire (Heraeus Kulzer). Leses secundrias de cries foram induzidas atravs de um modelo dinmico de ciclagens de desmineralizao e remineralizao, aliado as ciclagens trmicas. Os fragmentos dentrios foram avaliados individualmente por diferentes examinadores previamente calibrados, que atriburam escores representativos da presena e da severidade das leses. Os resultados obtidos mostraram que os compsitos contendo flor no apresentaram ao cariosttica. Utilizando uma metodologia semelhante usada em nosso trabalho, Candido et al. (2003) avaliaram a atividade antibacteriana de diferentes materiais restauradores. Foram avaliados o Vitremer (3M), Dyract AP (Dentsply), F2000(3M), Freedom (SDI), Compoglass (Vivadent) e Permite (SDI), os quais foram manipulados de acordo com as recomendaes do fabricante para confeco de corpos- de- prova padronizados com 2mm de espessura e 3mm de dimetro com auxlio de matrizes de teflon. Para avaliao da atividade antibacteriana dos materiais foi empregada a tcnica do poo empregando o Mtodo de Difuso em gar Muller-Hilton Medium DFCO (MHM) e Brain-Heart Infusion gar DFCO (BHIA) e o Mtodo Pour Plate frente s culturas puras de Streptococcus mutans, Lactobacilus acidophilus, Actnomiceis viscosus e culturas mistas coletadas na cavidade oral. As placas de Petri foram deixadas em temperatura ambiente para permitir a ao antibacteriana dos materiais testados, antes da multiplicao bacteriana, e posteriormente foram incubadas em posio invertida numa jarra com vela (microaerofilia) a 35-37C em estufa bacteriolgica por 48h. A leitura dos halos de inibio foi realizada aps 24 e 48h. Baseados na metodologia empregada, foi concludo que somente o Vitremer e o Permite apresentaram comportamento antibacteriano homogeneamente inibitrio frente aos microrganismos testados. Conseguindo diferentes resultados, Perez et al. (2003), avaliaram a atividade antibacteriana de materiais que liberam flor em presena de Streptococcus mutans usando um novo mtodo in vitro, usaram microplacas para as clulas de cultura. Os corpos-de-prova foram feitos com Cimento de ionmero de vidro (CIV) convencional (Ketac Cem), CIV fotoativado (Vitremer) e Compmero Dyract (Dentsply). Trs grupos foram confeccionados, cada grupo com diferentes caractersticas, sendo no primeiro grupo a atividade antibacteriana testada depois da polimerizao. No segundo grupo a liberao de flor foi verificada aps 14 dias. Para o terceiro grupo o flor foi reincorporado com uma aplicao tpica de fluoreto de sdio a 2% por 4 minutos. Os resultados mostraram que o CIV fotoativado teve melhor atividade antibacteriana, seguido pelo CIV convencional e pelo compmero. Todos os materiais utilizados apresentaram atividade antibacteriana em todas as etapas, o que foi confirmado estatisticamente pelo teste T Student. Com resultados semelhantes ao acima descrito, Kawai e Takaoka (2001), investigaram o potencial patognico da placa (glucano e Streptococcus sobrinus) em aderir-se aos materiais que liberam flor. Para isso, foi utilizado trs CIV modificados com resina composta e uma resina fotoativada como controle. Os corpos-de-prova foram confeccionados seguindo as recomendaes dos fabricantes e a superfcie dos mesmos foram polidas. Streptococcus sobrinus foi selecionado como bactria cariognica e a quantidade de bactrias e de glucano foram medidos aps 3, 8 e 24h de incubao com bactria cariognica e sacarose. Aps esse perodo a quantidade de bactrias e glucano aderidos foi pequena, e no houve diferenas significantes entre os materiais restauradores, com exceo da resina composta. Depois de 24h de incubao a quantidade de bactrias e glucano aumentaram significativamente nos CIV modificados com resina composta e compmeros, porm continuaram menores que o grupo controle. Utilizando a mesma metodologia empregada em nosso estudo Fraga et al. (2000) realizaram uma pesquisa in vitro da atividade antibacteriana do compmero Dyract AP (Dentsply), tendo como grupo controle a resina composta Tetric Ceram (Vivadent). Constatou-se que, quando testado durante a reao de presa, o material teve atuao semelhante ao grupo controle, no apresentando atividade antibacteriana contra as 5 espcies (Streptococcus mutans, Streptococcus sobrinus, Streptococcus sanguis, Streptococcus salivarius e Lactobacillus casei). Aps a hidratao, o Dyract AP passou a apresentar ao antimicrobiana. CONCLUSES Baseados nos resultados obtidos concluiu-se que: 1) Os materiais avaliados: Freedom (SDI), Dyract (Dentsply) e F2000 (3M/ESPE) no apresentaram ao antimicrobiana aps 48 horas.reaes adversas.
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2) Os materiais apresentaram ao antibacteriana aps serem hidratados por 72 horas. 3) No houve diferena na ao antimicrobiana entre os compmeros Dyract e F2000 contra a bactria Escherichia coli, e o material Freedom apresentou maior ao antimicrobiana. REFERNCIAS CANDIDO, M.S.M.; PIZZOLITTO, A.C.; BANDEIRA, M.F.C.L.; SANTANA, I.L.; BORDIN, MM. Ao antibacteriana de diferentes materiais restauradores. JBC Jornal Brasileiro de Clnica e Esttica em Odontologia, v. 4, n.22, p. 49-52, 2003. FRAGA, R.C.; MARTINS, L.M.R.; SIQUEIRA JNIOR, J.F.; FRAGA, L.R.L.; UZEDA, M. Atividade antimicrobiana de um compmero. JBC Jornal Brasileiro de Clnica & Esttica em Odontologia, v.4, n.3, p. 33-9, 2000. GALAN JNIOR, J.G.; NAMEM, F.M. Dentstica Restauradora - O Essencial para o Clnico. Ed.1. So Paulo: Santos; 1998. p.163. HERRERA, M.; CASTILLO, A., BRAVO, M.; LIBANA, J., CARRIN, P. Antibacterial activity of resin adhesives, glass ionomer and resin-modified glass ionomer cements and a compomer in contact with dentin caries samples. Oper. Dent., v.25, n.4, p.265-9, 2000. IMAZATO S.; KURAMOTO, A.; KANEKO, T.; EBISU, S.; RUSSELL, R.R. Comparison of antibacterial activity of simplified adhesive systems. Am. J. Dent., v.15, n.6, p.356-60, 2002. KARANIKA-KOUMA, A; DIONYSOPOULOS, P., KOLINIOTOU-KOUBIA, E., KOLOKOTRONIS, A. Antibacterial properties of dentin bonding systems, polyacid-modified composite resins and composite resins. J. Oral Rehabil.; v.28, n.2, p.157-60, 2001. KAWAI K.; TAKAOKA T. Inhibition of bacterial and glucan adherence to various light-cured fluoride-releasing restorative materials. J. Dent., v.29, n.2, p.119-22, 2001. NOGUEIRA, E.C.; SERRA, M.C.; MORAIS, P.M.R.; MARCHI, G.M. Avaliao in vitro da ao cariosttica de hbridos de ionmero de vidro/resina composta. Rev. Paul. Odontol.,; v.23, n.3, p.30-3, 2001. PEREIRA, P.N.R.; INOKOSHI, S.; TAGAMI, J. In vitro secundary caries inhibition around fluoride releasing materials. J. Dent., v.26, n.5/6, p.505-10, 1998. PEREZ, R.C.; HIRATA, R.J.; SRGIO, P.P. Evaluation of antimicrobial activity of fluoride-releasing dental materials using a new in vitro method. Quintessence Int., v.34, n.6, p.473-7, 2003. SCHMALZ, G.; ERGC, Z.; HILLER, K.A. Effect of dentin on the antibacterial activity of dentin bonding agents. J. Endod., v.30, n.5, p.352-8, 2004. SERRA, M.C.; CURY, J.A. The in vitro effect of glass ionomer cement restoration on enamel subjected to the demineralization and remineralization model. Quintessence Int., v.23, n.2, p.143-47, 1992. SILVA, R.S.; MARCHI, G.M.; SERRA, M.C.; MORAIS, P.M.C. Avaliao da ao cariosttica in vitro de resinas compostas contendo flor. Rev. Paul. Odontol., v. 23, n. 4, p.22-5, 2001. UEMATSU, N.M.; MYAKI, S.I.; RODRIGUES, C.R.M.D.; RODRIGUES FILHO, L.E.; ANDO, T. Avaliao in vitro da liberao de flor de cimentos de ionmero de vidro utilizados na Tcnica de Restaurao Atraumtica, antes e aps a aplicao tpica de NAF 2%. JBP Jornal Brasileiro de Odontopediatria & Odontologia de Beb. v. 2, n. 8, p.269-73, 2000.

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