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Eletroforese
Rafael Rodrigues
Rafael Rodrigues
Histrico
1902 - 1971
Rafael Rodrigues
O que eletroforese?
a migrao de espcies qumicas ionizadas, de acordo com suas cargas e massas molares, atravs da aplicao de um campo eltrico.
Rafael Rodrigues
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LEI DE COULOMB:
I+ plo negativo (ctodo)
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LEI DE COOPER:
F = Vq/d
F fora que atua sobre o on V voltagem entre os eletrodos q carga lquida do on d distncia entre os eletrodos
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LEI DE STOKES:
f = 6..r.n.v
f fora que se ope migrao r raio do on
n viscosidade da soluo
v velocidade de migrao do on
Rafael Rodrigues
F=f
V.q/d = 6..r.n.v
v = Vq/6rnd
Rafael Rodrigues
LEI DE OHM:
V = RI
V voltagem em Volts R resistncia em Ohms () I intensidade da corrente eltrica em ampares.
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Princpio do Mtodo
QUANTITATIVO X QUALITATIVO
Rafael Rodrigues
Princpio do Mtodo
QUALITATIVO
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Princpio do Mtodo
QUANTITATIVO
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Na eletroforese temos:
V ~I~P
Voltagem constate; Corrente constate; Potncia constate ;
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MEIOS DE SUPORTE
Qumico e fsico:
Papel de filtro Gel de Agar Acetato de celulose Gel de amido Gel de poliacrilamida
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aumento da resistncia:
e reduo de I
I = V/R
V: 100 200 v
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ATENO
O gel de poliacrilamida usado para protenas; O gel de agarose usado para cidos nuclicos; Caractersticas gerais dos gis
1. Funciona como uma peneira molecular, separando por tamanho e massa molecular;
1. Inibe a propagao do calor , proveniente do atrito do deslocamento das partculas e o calor produzido pelo campo eltrico;
Rafael Rodrigues
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Anlise da eletroforese
Rafael Rodrigues
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Tipos de eletroforese
1. Eletroforese em Gel; 2. Eletroforese com SDS em gel de poliacrilamida; 3. Focalizao isoeltrica de protenas em gel SDS( eletrofocalizao); 4. Eletroforese bidimensional ou 2D; 5. Imunoeletroforese; 6. Eletroforese de alta voltagem;
ATENO
Para que serve o SDS?
Possui ima parte hidrofbica e outra hidroflica!
uma molcula anfiflica usada como desnaturante, ou seja, um detergente que adicionado a soluo com o objetivo de proporcionar uma carga liquida negativa para a biomolcula de interesse, de modo que ele agrega-se ao redor desta.
Rafael Rodrigues
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Eletroforese bidimensional ou 2D
Rafael Rodrigues
Valeu
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