FIBRAS ELÁSTICAS

PRESENTADO POR:
o QUISPE ALFARO, KELLY
o CAHUANA ORIHUELA, LIZ
 FIBRAS ELÁSTICAS
• Son mas delgadas que las fibras colágenas
• Estas fibras se encuentran en el tejido conectivo laxo y se
ven como filamentos cilíndricos o planos largos que se
ramifican para formar redes.
• En contraste con las fibras al microscopio electrónico
presenta un aspecto homogéneo y fibrilar.
 FIBRAS ELASTICAS
Fibras elásticas son haces compuestos de microfibrillas
(glicoproteína) que durante su desarrollo incorporan elastina
(proteína polimérica) hasta que finalmente se forman fibras y
membranas elásticas bastas.
Las microfibrillas en la superficie de las fibras elásticas exponen
una elevada proporción de grupos disulfuro químicamente
detectables, siempre que se disponga de una cantidad suficiente
de material para realizar exámenes de microscopía óptica.
Además son fuertemente ácidas, por lo que ligan el colorante de
resorcina-fucsina de manera electro polar a través de la adsorción
de superficies límite.
 METODOS DE TINCIÓN PARA FIBRAS
ELASTICAS:
ORCEINA.
◦ Es un colorante de color rojo violáceo (púrpura) que se extrae de forma
natural de diversos líquenes (orchella).
◦ Es una sustancia que se utiliza para teñir y ver las distintas fases de los
cromosomas en división celular. Con esta técnica de tinción se pueden
ver los cromosomas impregnados por la orceína acética en color
morado y de esta manera poder observar las diferentes etapas de la
mitosis. Su composición no está muy clara actualmente.
• Los componentes químicos de la orceína se elucidaron en la
década de 1950 por Hans Musso. Uno de sus componentes el
Orcinol se extrae del liquen archil denominado Roccella
tinctoria.
• La orceína A es un colorante que reblandece las membranas
celulares, mata las células y detiene el proceso de división. La
orceína B completa el proceso de tinción.
• Se usa con frecuencia para las fibras elásticas, este tiñe el núcleo
de color azul intenso, los eritrocitos rojo brillante, las fibras de
colágeno rosa, este tiñe específicamente las fibras elásticas
(pardo oscuro), gránulos de mastocitos (púrpura), músculo liso
(azul/claro).
Cubierta fibrosa de la zona de trabajo condilar (CF).
Presenta mediana cantidad de fibras elásticas (flechas).
Sobre esta cubierta se muestra el compartimento
infradiscal (CID) y el cóndilo mandibular (CM), al cual
reviste. Tinción Orceina 40x.
Tejido fibroso de la zona anterior del disco
articular (DA). Presenta abundante cantidad
de fibras elásticas (flechas).
Tinción Orceina 10x.
Muestra la distribución de fibras elásticas en el tejido
retrodiscal del disco articular. Se observan manojos fibrilares
elásticos café oscuro en el tejido y algunas fibras elásticas
en la pared de los vasos sanguíneos. Tinción Orceina. 40x
LA TINCIÓN DE RESORCINA-FUCSINA
Es una tinción regresiva. Para la tinción nuclear en cortes de
tejido se podrá utilizar una solución de rojo nuclear sólido -
sulfato de aluminio al 0,1 % si, aparte de las fibras elásticas,
también se desea teñir en tonos rojizos los núcleos y el fondo.
Se consiguen brillantes resultados a través de la
representación de estas fibras mediante la solución de
resorcina-fucsina (elastina) según Weigert en combinación
con la picrofucsina en solución según van Gieson y la tinción
nuclear con solución de hematoxilina férrica según Weigert o
rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1%.
Las fibras elasticas se tiñen irregularmente con la eosina, pero
se pueden teñir de manera selectiva.

Con fucsina resorcina(azul oscura

Con orceina (café) o purpura)
  TINCIÓN DE VERHOEFF
 La tinción de Verhoeff o también de Verhoeff-Van Gieson (VVG) es una técnica
utilizada en histología. Fue desarrollada por el cirujano, oftalmólogo y patólogo
estadounidense Frederick Verhoeff en 1908 Se utiliza para evidenciar las fibras
elásticas en un tejido biológico y en especial las enfermedades que lo afectan.
 Forma enlaces catiónicos, aniónicos y no iónicos con la elastina, el constituyente
principal del tejido elástico fibroso. La elastina tiene una afinidad fuerte por el
complejo hierro-hematoxilina formado por los reactivos en la tinción y por lo tanto
la retendrá mucho más tiempo que otros componentes del tejido, por lo que
aparecerá teñida, mientras los otros elementos aparecen poco coloreados.
 El uso de tiosulfato de sodio remueve el exceso de iodo y se utiliza una
contratinción (mayoritariamente tinción de Van Gieson) para dar contraste a la
tinción principal. Las fibras elásticas y los núcleos celulares se tiñen de negro, las
fibras de colágeno de rojo y otros elementos del tejido incluyendo el citoplasma se
tiñen de amarillo.
 Reactivos
La tinción de Verhoeff es una combinación de los siguientes
reactivos:
Hematoxilina
Cloruro de hierro (III)
Lugol
tinción de Van Gieson
Fucsina ácida
Ácido pícrico
tiosulfato de sodio
 Procedimiento:
1. Desparafinar e hidratar
2. Colorear con solución de trabajo Verhoeff elástica (15 min).
3. Lavar en agua corriente (20 min).
4. Diferenciar con solución de cloruro férrico al 2%. Controlar al microscopio fibras
elásticas negras. El fondo es gris.
5. Colocar en solución de tiosulfato de sodio al 5% (1 min).
6. Lavar en agua (5 min).
7. Lavar en agua destilada.
8. Contrastar con solución de Van Gieson (1 min).
9. Deshidratar rápidamente en alcohol de 95 % (dos cambios), alcohol absoluto,
aclarar en xilol.
10. Montar.
 WEIGERT PARA ELASTINA.

 Se usa con mayor frecuencia en las fibras elásticas, este tiñe el núcleo de
color azul/negro, y las fibras elásticas igual de un color azul /negro.
 Es utilizada para el diagnóstico celular en la medicina humana y se
emplea en el examen histológico de muestras de origen humano.
 Se trata de una solución de colorante lista para el uso que, junto con
otros materiales de diagnóstico in vitro, evaluables para el diagnóstico
de estructuras (mediante fijación, inclusión, tinción, contratinción,
montaje) en material de examen histológico humano.
Material de las muestras
Como material de partida se usan cortes de tejido
fijados con formalina o solución de Bouin, e incluidos en
parafina (cortes de parafina con 3 - 5 μm de espesor).
REACTIVOS
ELASTINA solución de tinción según Weigert 500 ml para
microscopía.
Necesario además:
Rojo nuclear en solución de aluminio sulfato al 0,1% 500ml
para microscopía.
Alternativamente:
• En vez de la combinación de los reactivos individuales, se
podrá emplear el kit de tinción.
• Kit de tinción de fibras elásticas según van Gieson 4 x 500
ml para tinción conjuntivo.
 Técnica
Desparafinar de forma habitual los preparados histológicos y
rehidratar en serie descendente de alcohol.
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo
después de los diferentes pasos de tinción, de esta manera se
podrá evitar el innecesario arrastre de soluciones.
Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían
respetarse los períodos indicados.
Resultado
oFibras elásticas negro
oNúcleos celulares rojo
oCitoplasma rojo claro