CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA

CROMATOGRAFIA EM COLUNA
DEFINIÇÃO
 Conjunto de técnicas de separação cujo
princípio depende da distribuição
diferenciada dos componentes de uma
mistura entre duas fases, uma
considerada estacionária, e a outra,
móvel.

KROMA + GRAPH
(COR) (ESCREVER)
DEFINIÇÃO
 Diferenças nas propriedades das fases móvel e
estacionária possibilitam com que os componentes da
amostra se desloquem através do material
cromatográfico com velocidades desiguais, gerando a
separação
ANÁLISE CROMATOGRÁFICA
 AFINIDADE  SEPARAÇÃO
 PRINCIPAIS FATOS HISTÓRICOS
Separação de pigmentos;
proposição do termo Cromatografia em Primeira publicação
cromatografia papel em fase gasosa
Mikhail Tswett Izmailov e Shraiber Martin e Synge
1903-1906 1938 1952

1897-1903 1930 1941

1958
David Kuhn e Lederer Martin e Synge
Egon Stahl
Talbot Day
Cromatografia Particição em
Cromatografia em
Separação em coluna cromatografia
camada delgada
de HC do líquida;
petróleo Princípios de
fase gasosa
 CROMATOGRAFIA

PLANAR COLUNA

LÍQUIDA GÁS FLUÍDO LÍQUIDA

SUPERCRÍTICO

Líquida (CP) Líquida (CGL)

Sólido (CSS) Ligada (CSFL)
Sólida (CCD) Sólida (CGS)

Ligada (CCD) Ligada (CGFL) Líquida (CLL)

Sólida (CLS, CE)

Ligada (CFLF, CTI e CB)

TIPOS DE CROMATOGRAFIA
SIGLA NOME TIPO DE SEPARAÇÃO
CP Papel Partilha
CCD Camada Delgada Partilha
CCD-FL Camada Delgada com Fase Quimicamente Ligada Partilha e Adsorção
CGL Gás-Líquido Distribuição
CGS Gás-Sólido Adsorção
CGFL Gasosa com Fase Quimicamente Ligada Adsorção
CSS Sólida com Fase Móvel Super-crítica Adsorção
CSFL CSS com Fase Quimicamente Ligada Adsorção
CLL Líquido-Líquido Partilha
CLS Líquido-Sólido Adsorção
CE Exclusão Permeação
CLFL Líquida com Fase Quimicamente Ligada Partilha e Adsorção
CTI Troca Iônica Interações Polares
CB Bioafinidade Bioatividade
TIPOS DE SEPARAÇÃO
 Os princípios físico-químico básicos de separação
são:
 Adsorção: O soluto é retido pela superfície da fase estacionária
através de interações químicas ou físicas.
 Partição: O soluto se dissolve na parte líquida que envolve a
superfície do suporte sólido.
 Troca iônica: O íon da amostra se liga à carga fixa (grupo
funcional) da fase estacionária.
 Exclusão moléculas: As moléculas são separadas por
tamanho, havendo retenção das maiores.
 Bioafinidade: Ocorre uma ligação molecular específica e
reversível entre o soluto e o ligante fixado à fase estacionária.
CROMATOGRAFIA PLANAR
CROMATOGRAFIA PLANAR
CROMATOGRAFIA PLANAR
CROMATOGRAFIA PLANAR
CROMATOGRAFIA PLANAR
CROMATOGRAFIA PLANAR
ANÁLISE CROMATOGRÁFICA
 Separação em colunas
convencionais

 Considere a aplicação de
uma mistura de compostos
orgânicos no topo de uma
coluna cromatográfica
ANÁLISE CROMATOGRÁFICA
 Separação em
colunas
convencionais
 Estabelecida a percolação da FE
com o eluente (FM), os
componentes da mistura passarão
a migrar com velocidades desiguais
caso o sistema seja adequado para
a separação
ANÁLISE CROMATOGRÁFICA
 Separação em colunas
convencionais
 Uma boa seletividade
cromatográfica garantirá uma
boa separação entre os
componentes da amostra
ANÁLISE CROMATOGRÁFICA
 Separação em
colunas
convencionais
 Cada componente da amostra
poderá ser coletado isoladamente,
através de um coletor de frações
(neste caso, um simples frasco
coletor)
 COLUNAS CROMATOGRÁFICAS

SÍLICA (suporte + usado):

- Resistência mecânica
- Variedade de forma, tamanho de partículas e
poros

- Instabilidade frente a fases móveis ácidas ou

básicas
- Superfície não homogênea
 SÍLICA – GRUPOS SILANÓIS

OH
OH OH
HO OH
Si Si Si Si

LIVRES GEMINAL VICINAIS

influenciam no grau de acidez da sílica

 Processo de Eluição
Definição:
 Pode ser descrita como deslocamento do soluto na
fase estacionária.
Série eluotrópica
 Ordena os solventes de acordo com suas habilidades
relativas de deslocar soluto de um dado adsorvente.
Força eluente:
 É uma medida da energia de adsorção do solvente

Cromatografia com fase normal:

 Utiliza uma fase estacionária polar e um solvente
menos polar.
Cromatografia com fase reversa:
 Utiliza uma fase estacionária apolar ou fracamente
polar e um solvente polar.