ANÁLISE INSTRUMENTAL APLICADA A

PROCESSOS QUÍMICOS

Docente:

Graduação:
Engenheira Química
Cronograma de aulas
• 22/08 – cromatografia liquida
• 23/08 - exercícios cromatografia liquida
• 24/08 - Cromatografia gasosa
• 25/08 –Lab prática cromatografia
• 26/08 - exercícios cromatografia gasosa

• 29/08 – Exercício
• 30/08 - Apresentação de seminários (3 equipes)
• 31/08 - Revisão
• 01/09 – Avaliação 2 – Cromatografia

• 05/09 – Entrega de provas

Introdução

• A CROMATOGRAFIA É UM MÉTODO DE SEPARAÇÃO

FÍSICO-QUÍMICO NA QUAL OS COMPONENTES DE
UMA MISTURA SÃO DISTRIBUIDOS EM UMA FASE
ESTACIONÁRIA E UMA FASE MÓVEL
 Introdução

Durante a passagem da fase móvel sobre

a estacionária, os componentes da
mistura são distribuídos pelas duas fase
onde cada um deles é seletivamente
retido pela fase estacionária, resultando
em migrações diferenciais desses
compostos.
 Introdução

•A separação ocorre porque os

componentes têm diferentes afinidades
com as fases estacionária e móvel

• Deslocam-se com diferentes

velocidades pelo sistema
 Polaridade
Quando um átomo atrai um par eletrônico para si com mais
“força” do que outro dizemos que ele é mais eletronegativo.
• Esta propriedade aumenta quando mais para a direita e para cima
estiver o elemento na tabela periódica

Polaridade: Característica de uma

ligação ou molécula que possua o
momento de dipolo diferente de zero.
Polaridade
• Água é polar
• Alcool é polar
• Gasolina é apolar

Questão 1 - Explique por que é possível extrair o etanol da gasolina

usando uma solução aquosa. Que tipo de interação intermolecular
ocorre entre o etanol e os componentes da gasolina e entre o etanol e
a água?
Introdução - histórico
O botânico russo Mikhael Tswett em 1906 utilizou o termo cromatografia
pela primeira vez, para descrever a separação de um extrato vegetal,
utilizando colunas de vidro recheadas com partículas sólidas, arrastando
os componentes com éter de petróleo.

A época moderna da cromatografia iniciou em 1930, quando Kuhn e

Lederer, aperfeiçoaram as experiências do botânico russo, separando e
identificando as xantófitas da gema do ovo, usando coluna preenchida
com carbonato de cálcio pulverizado com fase estacionária e éter de
petróleo com fase móvel.
 Introdução

Chrom = cor + graphe = escrever

O processo não é totalmente dependente da cor, mas em alguns casos pode basear a
identificação dos constituintes separados.

Separação Identificação

Quantificação
Classificação
Quanto a forma física:

• Fase estacionária depositada em uma superfície planar

• Cromatografia planar

• Fase estacionária depositada em um tubo cilíndrico

• Cromatografia em coluna
 Classificação
• Quanto a fase móvel:
• Gás inerte: cromatografia gasosa

• Líquido: cromatografia líquida

• Clássica: em colunas de vidro, onde a fase móvel e deslocada sobre a fase
estacionaria pela força da gravidade;
• Alta eficiência: em colunas metálicas, onde a fase móvel é deslocada por pressões
elevadas, obtidas com auxilio de uma bomba de alta pressão.

• Vapor pressurizado: cromatografia supercrítica

 TIPOS DE MECANISMOS
Transferência dos componentes da fase móvel para a fase
estacionária
Depende do tipo de fase estacionária

• Adsorção: (interação intermolecular com a superfície de um

sólido.

• Partição: soluto particiona entre a fase móvel e estacionária

 PRINCÍPIO BÁSICO
Separação de misturas por interação diferencial dos seus
componentes entre uma FASE ESTACIONÁRIA (líquido ou sólido)
e uma FASE MÓVEL (líquido ou gás).
PRINCÍPIO BÁSICO

Cromatografia Cromatografia
Líquida Gasosa
Cromatografia de Papel (CP)

Cintia
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
Técnica simples;

Pequena quantidade de amostra;

Separação e identificação de compostos polares;

 antibióticos hidrossolúveis;

 ácidos orgânicos; e

 íons metálicos.
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
É classificada como de partição líquido-líquido;

Separação e distribuição depende da solubilidade;

Geralmente água é utilizada como fase móvel e papel

(celulose) como fase estacionária.
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL

• A forma mais simples de CP é a cromatografia ascendente

(por capilaridade).
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
Mistura de componentes coloridos;
Separação de corante em doces
https://www.youtube.com/watch?v=gQq3NXXOzqA

• Solvente: água (polar)

• Mistura a separar: corantes azul, amarelo e vermelho (polar)
• Papel (celulose): hidroxilas

• Amarelo possui menor massa molar, mais leve

• Vermelho é mais leve que o azul, porém tem hidroxila que interage mais
fortemente com o papel
• Azul, menor interação com o papel que o vermelho.
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
 Procedimento
 CROMATOGRAFIA EM PAPEL
A análise qualitativa de uma substância realiza-se através da
cor da mancha e de seu fator de retenção, Rf, determinado
através da expressão:

Movimento relativo de um tipo

 Rf= fator de retenção; de composto em relação ao
solvente
 da= distância (cm, mm) percorrida pela substância;

 ds= distância (cm, mm) percorrida pela fase móvel.

Para casa
Questão 2. a) Considerando a combinação fase estacionária/fase móvel
utilizada no experimento de cromatografia em papel, fase móvel
apolar, obteve-se um cromatograma em que o beta-caroteno se moveu
praticamente com a mesma velocidade que o solvente, e na seqüência
a clorofila-a e depois a clorofila-b. Explique essa ordem de eluição
baseado na estrutura e polaridade das substâncias. Que ordem de
eluição você esperaria se fosse utilizada uma fase uma fase móvel
polar? Explique.
Para casa
Questão 2. b) Determine o fator de retenção (Rf) para os compostos,
quando a distância percorrida para o solvente foi de 2,8cm.
• da beta-caroteno = 2,1cm  0,75
• da clorofila-a = 1,9cm  0,68
• da clorofila-b = 1,7cm  0,61
Cromatografia de coluna
 Cromatografia em coluna

Utilizada quando
se quer separar
grandes
quantidades de
substâncias.
 Cromatografia em coluna
Citada como o mais antigo
procedimento cromatográfico;

Utilizada para isolamento de

produtos naturais;

Purificação de produtos de reações

químicas;

Fundamenta-se basicamente na
polaridade relativa das moléculas
envolvidas.
 Cromatografia líquida clássica
Consiste em uma coluna de vidro, metal ou
plástico, de diâmetros variados;

Possuem uma torneira em sua extremidade

inferior;

Esses cilindros são preenchidos por um

adsorvente;
 Colocado na coluna diretamente ou suspendido
em um solvente adequado.
Cromatografia líquida clássica - Conceitos
Fase móvel (Eluente)

• A fase móvel é o líquido que percorre no sistema (coluna

cromatográfica)

• Fase Móvel: Solução salina, solução tampão ou solvente

orgânico
Cromatografia líquida clássica - Conceitos
Fase estacionária

• A fase estacionária é um gel/resina que preenche a coluna

cromatográfica

• Fase Estacionária: composição diversificada

 Cromatografia em Coluna
O adsorvente é adicionado lentamente à coluna fixada na
posição vertical de modo a se obter uma compactação uniforme.

A fase estacionária é mantida em um tubo estreito e a fase

móvel, forçada através do tubo sob pressão ou por gravidade.

A substância a ser separada ou analisada é colocada na coluna na

parte superior.
Cromatografia de Coluna
A velocidade na qual um composto
passa pela coluna depende:
 Da polaridade da fase estacionária

Do solvente utilizado como eluente

 Se o composto é mais atraído pela fase
estacionária do que pelo solvente, ele
migrará mais lentamente da coluna

 Se composto tiver maior afinidade pelo

solvente ele migrará mais rapidamente na
coluna
 Cromatografia de Coluna
Uso do solvente adequado;

É possível visualizar a separação

dos componentes de uma mistura
observando o desenvolvimento de
manchas coloridas diferentes na
coluna
Representação gráfica da concentração com o tempo
Coeficiente de partição (KD)

Quanto maior KD, maior a concentração na fase estacionária

Fração de tempo na fase móvel (DTm)

• A fração de tempo total que

a molécula passa na fase
móvel está diretamente
relacionada com a fração da
população total presente na
fase móvel
?
Fator de capacidade (K´)

• Comportamento do soluto no
processo cromatográfico
Velocidade de eluição
Tempo de retenção (tR)
• O tempo que um soluto leva
para atravessar uma coluna de
comprimento, L, é o tempo de
retenção, tR.
Volume de retenção (VR)
• Uso por conveniência em alguns momentos
Questão 3 - Considere as seguintes condições cromatográficas em
HPLC: Coluna de sílica (polar), eluente tolueno. O cromatograma
apresentou 3 picos: Pico 1 Tr = 1 mim Pico 2 Tr = 3 mim Pico 3 Tr = 5
mim. Qual dos três compostos deve apresentar menor polaridade ?