Nota:

Universidade Estadual de Goiás

Disciplina: Análise Instrumental
Curso: Farmácia
Aluno: Cleonice Beatriz Dias Dos Santos
Estudo dirigido para compor N1 (Valor = 2,0)
DATA PARA DEVOLUÇÃO 15/02/2021
1) Cromatografia é uma técnica utilizada para analisar, identificar ou separar os componentes de uma mistura. A
cromatografia é definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre
fases, uma das quais é estacionária e a outra móvel. A partir dos conceitos estudados para entendermos a
cromatografia responda as seguintes questões:
a) Quando e por que se deve revelar uma placa cromatográfica em uma cuba de iodo ou Câmara com luz
ultravioleta?
b) O que são cromóforos?
são os grupos orgânicos, geralmente insaturados (ex: C=C, C=O, -NO2 ), presentes nas moléculas que absorvem a
radiação eletromagnética nas regiões UV eVIS.

c) Que características devem ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento?

Para ser considerado um bom eluente, o solvente deve ser volatil, apresentar baixa viscosidade
e no interagir com o soluto.

d) Quais os usos mais importantes da cromatografia de camada delgada? Cite a diferença desta técnica com a
cromatografia em papel.

Os usos mais importantes para a cromatografia em camada delgada são para a

separação rápida e análise qualitativa de pequenas quantidades de material.
Cromatografia em papel: é uma técnica para líquido-líquido, no qual um deles é fixo a um
suporte sólido. Recebe esse nome porque a separação e identificação dos componentes da
mistura ocorre sobre a superfície de um papel filtro, sendo essa a fase estacionária.

Cromatografia em camada delgada: é uma técnica para líquido-sólido, na qual a fase líquida
ascende por uma camada fina de adsorvente sobre um suporte, geralmente, uma placa de vidro
colocada dentro de um recipiente fechado. Ao ascender, o solvente arrastará mais os compostos
que interagiram menos na fase estacionária. Isso provocará a separação dos componentes mais
adsorvidos.
e) Qual a finalidade de se obter a “farofa” antes da purificação?

Esse procedimento é particularmente útil quando pelo menos um dos constituintes da amostra se dissolve apenas em
solventes muitos polares.

f) Qual a finalidade do “empacotamento” de coluna? Justifique.

Este procedimento tem como finalidade não permitir a saída das partículas do adsorvente e
permitir o fluxo do eluente.
g) Pesquise sobre pratos teóricos em uma coluna cromatográfica comum.

Um prato teórico é o estágio hipotético no qual duas fases de uma substância (sua fase líquida e de
vapor) estabelecem um equilíbrio. O alto número de pratos (N) fornece: Picos agudos e estreitos

Um prato teórico é definido pela norma ASTM D 2892 (2003) como sendo “a secção de uma coluna

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requerida para conseguir o equilíbrio termodinâmico entre o líquido e o vapor”.

2) Na eluição abaixo considere que o solvente usado foi éter de petróleo. Considerando a fase estacionária como
sendo a sílica, qual dos dois compostos abaixo (componente 1 e 2) é o mais apolar? Por que ele é o mais apolar?
Calcule o Rf de cada composto. Ao trocarmos o solvente de éter de petróleo (apolar) para metanol (polar) o que
acontece com força de eluição? E o que acontece com os deslocamentos dos reagentes?

*fase estacionaria sílica e o solvente utilizado e o eter de petroleo

O componente mais apolar e o eter de petroleo(componente 2), onde ele e uma substancia que
apresenta uma estrutura mais densa e adsorvido devagar no componente 1 (silica), porem pode ser
eluida com facilidade pelo eter de petroleo por ser um composto apolar. Se trocar o eter de petroléo
(apolar) por metanol (polar) , irá ficar dois compostos polares juntos (sílica e metanol) e ocorrerá das
fases serem extremamentes polares e consequentemente iriam arrastar os componentes das
amostras até o topo da placa onde aumentaria a força de eluição. Os reagentes iriam apontar uma
alteração alto no que diz respeito ao RF onde poderia ocasionar em uma única mancha.
Componente 1 Componente 2
RF =22/65 RF =50/65
RF =0,33846 RF =0,76923

3) Um estudante de farmácia encontrou em um laboratório 3 frascos de matéria-prima sem rótulos. Os rótulos

caídos no chão diziam que em um frasco havia mentol, em outro limoneno e o terceiro mentona. O aluno
decidiu então fazer uma placa de cromatografia em camada fina para tentar descobrir qual substância estava
em cada frasco. Como fase estacionária foi usada placa de sílica e a fase móvel escolhida foi tolueno com
acetato de etila (93:7). Após eluir a placa, esta foi revelada com vanilina sulfúrica [WAGNER H.; BLADT S.
Plant drug analysis: a thin layer chromatography atlas. Berlim:Springer Verlag, 1996 (com adaptações)].

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figura abaixo apresenta o resultado da cromatografia, assim como as estruturas moleculares das substâncias em
questão.

A análise deste cromatrograma permite afirmar que

A) as amostras A e B são, respectivamente, a mentona e o mentol.
B) as amostras B e C são, respectivamente, o limoneno e o mentol.
C) as amostras A e B são, respectivamente, a mentona e o limoneno.
D) as amostras A e C são, respectivamente, a mentona e o mentol.
E) as amostras B e C são, respectivamente, a mentona e o limoneno.
Justifique a sua escolha.
Pois cada substancia citada acima mentol,mentona e limoneno possui caracteristicas nas
suas estruturas, analisando cada uma observa-se que o composto mais polar e o mentol pois
na sua estrutura apresenta um grupamento hidroxila(grupamento representado pelo OH), a
mentona por sua vez apresenta um grupamento cetona em sua composição se transformando
menos polar que o mentol, e o limoneno apresenta uma estrutura quimica com caracteristica
apolar, sendo assim a resposta e a letra E pois o limoneno e a mentona e corresepondente
com as amostras B e C por possuir as caracteristicas estruturais.
4) Quais as diferenças entre cromatografia gás-líquido e gás-sólido?

Diferenças entre cromatografia gás líquido e gás-sólido

Cromatografia Gás líquido
cromatografia em gás líquido a fase
estacionária e um líquido imobilizado em
um suporte sólido onde ocorre o processo
de partição.
-A fase estacionária e uma pelicula
delgada líquida, a qual recobre um sólido
inerte denominado suporte. A base para
essa separação está entre a partição da
amostra entre a fase movél e a fase
estacionária.
-e mais versátil e seletiva forma de
cromatografia em fase gasosa, pois
podem analisar amostras sólidas, líquidas
ou gasosas deste de sejam voláteis ou
Cromatografia Gás-sólido
Cromatografia em gás sólido a fase
estacionária e um sólido onde a retenção
das substancias analisáveis e tem como
resultado o processo de adsorção.
-A fase estacionária e um sólido de grande
área superficial,um adsorvente como
carvão vegetal, sílica gel ou peneira
molecular(zeolita sintética)
- Usada na separação de gases como
nitrogênio,oxigênio...
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 possam ser volatizadas sem sofrer
decomposição no cromatógrafo.
-Fase estacionária e um filme fino - Análise de gases fase estacionária é um
depositado na superfície do sólido sólido ativo
-A escolha da fase líquida e mais difíceis -A escolha do suporte sólido e menos
difíceis

b) Quais os tipos de misturas são separados por cromatografia gás-sólido?

A cromatografia gás sólido serve para separar gases como nitrogênio, oxigênio, monóxido
de carbono, e outros
Cromatografia gás sólido tem como principio de retenção a adsorção, um exemplo de
misturas que e separada por essa cromatografia e as máscaras contra gases venenosos
possuem carvão ativo que adsorve os gases poluentes, essas mascaras contra gases
venenosos usada por soldados utiliza o principio de adsorção.
Por que este tipo de cromatografia não é tão utilizado quando a gás-líquido?
Esse tipo de cromatografia não e tão utilizada como a cromatografia gás-líquido pois pode
ocorre de haver retenção permanente de moléculas ativas
5) Quais são as vantagens das colunas capilares de sílica fundida comparadas com colunas de metal ou de
vidro?
As colunas capilares de sílica fundida auxilia na solução deste problema de diferentes
formas. Em primeiro lugar, o tubo é de diâmetro menor, a parede muito mais fina e a
transmissão de calor mais homogênea e rápida.
As colunas de metal ou de vidro são baratas, fáceis de preparar e inertes à maioria dos
compostos. *Limitação: Fragilidade
6) Indique quais são os fatores e de que modo eles podem influenciar na eficiência de uma coluna em uma
análise de CG?
7)
Os fatores que auxiliam na eficiencia do processo de separação são:
-Tempo de retenção
-Comprimento da coluna
-Temperatura da coluna
-Pressão do gás de arraste
-Complexidade da amostra
-Técnica de injeção
-reducao do tempo de analise pode ser obtida atraves da utilização de colunas de
dimensões reduzidas e com o aumento da pressão ou aplicação de vácuo na saída do
sistema

8) O que são pratos teóricos e como determiná-los?

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 Pratos teóricos são definidos como sendo a secção de uma coluna requerida para conseguir o
equilíbrio termodinâmico entre o líquido e o vapor. Para determinar a quantidade de pratos teoricos
utiliza-se a equação de Fenske essa equação e utilizada quando nenhum produto e retirado da coluna.
Essa equação e muito utilizada para determinar o numero de pratos teóricos em uma coluna de
destilação de petróleo e com isso determina a eficiência de separação.

9) O que é o índice de Kovats. Detalhe com exemplos.

O indice de kovats e um metodo utilizado para padronizar os valores do tempo de retenção

para cada substância,chamado tambem de índice de retenção linear onde e calculado sob
condições isotérmica de temperatura. Quando se utiliza temperaturas programaticas de
colunas, um valor similar pode ser calculado utilizando os valores de seu algoritismo, e esse
valor e chamado de indice de retenção. Esse indice foi introduzido em 1958 era utilizado em
separações isotérmica, e foi realizadas pesquisas sobre as composições dos óleos
essenciais. Na cromatografia o índice de kovats e usado por exemplo no comprimento da
coluna, a espessura da pelicula, diametro...

10) Defina os seguintes termos: Eluição isocrática; Eluição com gradiente; Fase estacionária peculiar; detector
de propriedades do sistema.
Eluição isocrática: constituição do solvente permanente constante,(quanto uma
eluição com fase movél formado por um único solvente ou por uma mistura de solventes de
composição constante).

Eluição com gradiente: composição do solvente é alterada,(eluição com fase movél formado
por uma mistura de solventes, com composição variável ao longo da separação)

Fase estacionária peculiar: definida como a fase fixa onde a substância que esta sendo
separada ou indentificada fixa-se na superficie de outro material.

Detector de propriedades do sistemas:Os detectores são os responsáveis pela detecção dos

componentes de uma amostra durante a sua eluição. Eles medem e indicam a variação da
composição da fase móvel ao sair da coluna cromatografica, através de um sinal elétrico. Para
a escolha dos detectores tem que saber as caracteristicas presentes no material analisado
como: sensibilidade, repetibilidade, forma de pico... os detectores universais são o detectores
de índice de refração.

11) O que é e para que serve uma pré-coluna em um CLAE?

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 O CLAE (cromatografia liquida de alta eficiência) e um método que utiliza fases estacionárias de
particulas menores responsáveis pela alta eficiência, sendo necessário o uso de uma bomba de alta
pressão para a eluição da fase móvel, método de separação de compostos químicos em solução, a qual
e utilizada na química analítica para identificar e quantificar cada componente de uma mistura. As
colunas utilizadas nessa técnica são geralmente de aço inoxidável com diametro interno com cerca de
0,45 cm e 10-25 cm de comprimento para separação analítica, e na faixa de 2,2 cm de diametro interno
e 25-30 para preparativas. Essas colunas são reaproveitáveis, sendo empacotadas com suportes de
alta resolução, não sendo necessária sua regeneração após cada separação.

12) Os dados abaixo foram obtidos por uma CGL em uma coluna empacotada de 40 cm:
Composto tR, min W1/2, min
Ar 1,9 -
Metilcicloexano 10,0 0,76
Metilcicloexeno 10,9 0,82
tolueno 13,4 1,06
Calcule:
i) O número de pratos teóricos a partir destes dados
ii) A altura média do prato para a coluna
iii) o fator de resolução para metilcicloexano e tolueno
iv) Para se obter resolução de 1,5 na separação de metilcicloexano e metilcicloexeno, quantos pratos
teóricos são necessários e qual o comprimento que a coluna deveria ter?

i) O número de pratos teóricos a partir destes dados

Formula: N=5,545*(tR/W1/2)

N1=5,545*(10/0,76)2
N1=960,00679

N2=5,545*(10,9/0,82)2
N2=979,77593

N3=5,545*(13,4/1,06)2
N3=886,13391

Nt=N1+N2+N3 / 3
Nt=941,97216

ii)A altura média do prato para a coluna

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H=L/N
H=40/941,97216
H=0,0424641 cm

iii)o fator de resolução para metilcicloexano e tolueno

Rs=2Δh/wa-wb

Rs=2 (13,4-10) / (1,06+0,76)

Rs=2(3,4 / 1,82)
Rs=3,7362

iv)Para se obter resolução de 1,5 na separação de metilcicloexano e metilcicloexeno, quantos pratos

teóricos são necessários e qual o comprimento que a coluna deveria ter?

RΔ1/RΔ=√N1 /√N2 R=2 (10,9-10) / (0,82+0,76)

1,1392/1,5=√941,97216/√N2 R=2(0,9) / (1,58)

N2= 941,9721(1,5/1,1392)2 R=1,1392

N2=1633,1291

L=H*N
L=0,0424641*1633,1291
L=69,35 cm