MTODOS DE EXAMES PARASITOLGICO

MTODOS PARA DETECO DE PARASITAS NAS FEZES

a) Hoffmann - baseado na sedimentao espontnea das fezes aps duas horas. um mtodo
especfico para pesquisa de Schistosoma mansoni, porm por mostrar-se altamente eficiente
tambm nas pesquisas de protozorios, este mtodo amplamente utilizado para a pesquisa dos
demais parasitas.
b) Baermann & Moraes - Mtodo baseado no Hidrotermotropismo das larvas de Strogilides
stercoralis.
c) Direto :O mtodo direto especfico para a pesquisa de trofozotos nas fezes (forma adulta dos
protozorios).
d) Kato e Stoll - Mtodos para contagem de ovos de Helmintos.
e) Willis (flutuao em salina saturada)
f) MIF sedimentao
g) Teste da fita adesiva (pesquisa de Oxirus)
So inmeros os mtodos de exames coprolgicos descritos na literatura, os quais podem ser
qualitativos ou quantitativos, apresentando diferentes sensibilidades na deteco de ovos e larvas
de helmintos e cistos de protozorios. Descrevemos a seguir alguns dos mtodos e solues
utilizados de rotina em laboratrios para anlise.
A coleta:
Cada amostra deve conter no mnimo as seguintes informaes: nome do paciente, nmero de
identificao, nome do mdico, data e horrio de coleta.
O recipiente deve ser limpo e seco, com a boca larga, de capacidade aproximada de 250ml para
que possa conter uma amostra significativa e que tenha vedao hermtica
Fezes obtidas de vaso sanitrio no podem ser aproveitadas, porque a gua e a urina poderiam
destruir as formas trofozoticas.
Fezes excretadas no solo no podem ser aproveitadas, porque larvas de vida livre e outros
contaminantes do solo poderiam confundir o diagnstico (principalmente veterinrio).
Os recipientes com amostras fecais de pacientes com AIDS devem ser protegidos por um
invlucro de plstico e identificados com etiqueta vermelha ou HIV positivo.
Os trofozotos de protozorios morrem e se degeneram fora do corpo humano.
O tempo recomendado para amostras lquidas 30 minutos, enquanto das amostras pastosas o
de uma hora aps a evacuao.
Fezes formadas podem ser examinadas aps um dia.

Fixao:
Fixador de Schaudinn:
Usado na preservao de fezes frescas ou amostras da superfcie da mucosa intestinal;
Esta soluo fixadora usada para a preparao de esfregaos permanentes corados para
demonstrao de protozorios intestinais;

Soluo de Lugol:
Lugol
Iodeto de Potssio - KI
gua destilada

2,0 g
4,0 g
Completar para 100 ml

Conservantes de fezes:
MIF (Mertiolato, Iodo e Formaldedo)
Glicerina
Formaldedo (40%)
Mertiolato (ou mercurocromo) 0,1%
gua destilada
Soluo de lugol
Total

5 ml
25 ml
200 ml
200 ml
43 ml
473 ml

Soluo Mertiolato-Iodo-Formaldedo (MIF)

Este mtodo permite obter ao mesmo tempo a preservao e a colorao de quase todos os
estgios dos protozorios, de ovos e larvas de helmintos que se encontram nas fezes.
Este procedimento tambm permite o exame direto a fresco do material fecal ou depois de vrias
semanas, sem a necessidade de outra colorao
Vantagens:

Alm de fixador, corante;

Fcil preparo;
til em trabalhos de campo;
Adequado para os mtodos de concentrao

Desvantagens:

Inadequado para a preservao da morfologia de trofozotos de protozorios.

O iodeto interfere com outros mtodos de colorao;
O iodeto pode causar distoro em protozorios.

SAF (Acetato de Sdio, cido Actico e Formaldedo)

Acetato de Sdio
cido Actico
Formadedo (40%)
gua destilada
Total

15 g
20 ml
40 ml
925 ml
1.000 ml

MTODO DIRETO
Utilizado para pesquisa de cistos de protozorios e ovos de helmintos. mtodo pouco sensvel e s
apresenta resultados positivos em infeces massivas. Procedimento: Adicionar soluo de lugol
s fezes, preparar a lmina e observar direto ao microscpio em aumento de 100X e 400X.
Especfico para a pesquisa de Trofozotos em fezes frescas.
MATERIAL
1. Fezes recm emitidas
2. Lmina e lamnula de vidro
3. Esptula de madeira
4. Soluo de NaCl a 0,85%
Aplicar diretamente na lmina de vidro pequena quantidade de fezes frescas fazendo misturar com
algumas gotas de soluo salina fisiolgica, homogeneizando suavemente. Cobrir com lamnula e
observar imediatamente ao microscpio.
MTODO DE HOFFMAN, PONS & JANER ou HPJ (Sedimentao espontnea)
Utilizado na pesquisa de cistos de protozorios e ovos de helmintos.
Mtodo baseado na sedimentao espontnea, especfico para a pesquisa de ovos de
Schistosoma mansoni, porm altamente eficiente e amplamente utilizado para a pesquisa de
todos os parasitas.
MATERIAL NECESSRIO
1. Clice de decantao
2. Peneira
3. Gaze dobrada em 4
4. gua corrente ou destilada
5. Esptula de madeira (tipo abaixador de lngua)
6. Lmina e lamnula
Tomar cerca de 4 g de fezes recm emitidas, dissolv-las no prprio recipiente de coleta (frasco
padro para coleta de amostra) utilizando um pouco de gua. Transferir o material dissolvido para
um clice de decantao fazendo filtrar em peneira contendo gaze em 4. Completar at do
volume de gua e deixar repousar em superfcie firme e livre de vibraes por no mnimo 2 horas.

Retirar o sedimento com um canudo ou pipeta Pasteur e transferir para lmina de vidro
adicionando 2 gotas de soluo de Lugol e cobrindo com lamnula. Observar ao microscpio em
objetiva de 10x.
Tcnica Prtica:
1. Dissolver cerca de 4g de fezes em 10 ml de H2O em frasco pequeno
2. Filtrar em gaze dobrada em quatro, utilizando um clice de sedimentao
3. Completar o clice com gua e homogeneizar com basto de vidro.
4. Deixar em repouso de 2 a 24 horas.
5. Com uma pipeta de pasteur, retirar uma amostra do fundo do vrtice do clice.
6. Examinar ao microscpio, adicionando uma gota da soluo de lugol.

MTODO DE WILLIS
FLUTUAO SIMPLES (flutuao em salina saturada)
Essa tcnica se baseia na propriedade que alguns ovos de helmintos apresentam de flutuarem na
superfcie de uma soluo de densidade elevada e de aderirem ao vidro. Este procedimento
especfico para a pesquisa de ovos de Ancilostomdeos.
1. A soluo saturada de cloreto de sdio feita adicionando aproximadamente 40g de NaCl a
100mL de gua sob aquecimento at o ponto em que o sal no se dissolva mais na gua. A
densidade desta soluo deve ser de aproximadamente 1,20g/mL.
2. Colocar uma quantidade de fezes coletadas de vrias partes do bolo fecal em uma pequena
cuba contendo uma parte de soluo saturada de cloreto de sdio, dissolver as fezes nesta
soluo e acrescentar gua at a borda.
3. Colocar sob a borda da cuba uma lmina de vidro quase tocando a soluo saturada e deixar de
30 a 45 minutos . Aps este tempo, inverter a lmina rapidamente e observar ao microscpio.
Tcnica Prtica:
1. Dissolver cerca de 5g de fezes em uma soluo saturada de NaCl.
2. Filtrar em gaze dobrada em quatro em frasco de Borrel (frasco comum)e completar com a
soluo saturada de NaCl at formar um menisco convexo na boca do frasco.
3. Colocar uma lmina por sobre as bordas do frasco para uq efique em contato com o lquido ao
menos por 5 minutos.
4. Retirar a lmina sem escorrer o lquido e examinar ao microscpio.

MTODO DE FAUST (Centrfugo-flutuao)

Utilizado na pesquisa de cistos de protozorios e ovos de helmintos.
1. Dissolver cerca de 5g de fezes em 10ml de gua e filtrar em gaze dobrada em quatro.
2. Depositar o material em tubo cnico de centrfuga e centrifugar a 1500 rpm por 2 minutos.
3. Desprezar o sobrenadante e ressuspender novamente em 10 ml de gua.
4. Repetir os passos 2 e 3 at que o sobrenadante apresente-se claro.
5. Adicionar 10 ml de sulfato de zinco (ZnSO2) 33 %, densidade 1.180, homogenizar e centrifugar
a 1500 rpm por 2.
6. Recolher com ala de platina a pelcula superficial, adicionar uma gota da soluo de lugol e
observar ao microscpio.
MTODO DE RITCHIE
Utilizado na pesquisa de cistos de protozorios.
1. Idntico ao mtodo de FAUST at o tem 4.
2. Adicionar cerca de 8 ml de formol a 10%, homogenizar, descansar por 10 a 20.
3. Adicionar cerca de 2 ml de ter, agitar vigorosamente e centrifugar a 1500 rpm por 2.
4. Desprezar o sobrenadante e examinar o depsito ao microscpio adicionando uma gota da
soluo de lugol.
MTODO DE BAERMANN-MORAES
O mtodo de Baermann baseia-se no Hidrotermotropismo positivo das larvas de Strongyloides
stercoralis. Utilizado na pesquisa e isolamento de larvas de Strongyloides sp. de fezes e de larvas
de nematides do solo.
MATERIAL NECESSRIO

1. Estante para Baermann

2. Tubos de Hemlise
3. Peneira e gaze
4. Lminas e lamnulas
5. Tubo de ltex e pina de Mohr
6. Funil
7. gua aquecida a 45C

Colocar a gua aquecida no funil com o tubo de ltex vedado pela pina de Mohr, quantidade
suficiente para tocar a extremidade inferior da peneira contendo as fezes.
Depositar pequena quantidade de fezes sobre a peneira contendo gaze e deixar em repouso por
45 a 60 minutos.
Aps este tempo, soltar a pina de Mohr e deixar que o material escorra para um tubo de hemlise.
Centrifugar o material em baixa rotao e observar o sedimento em objetiva de 10x. Este mtodo
especfico para a pesquisa de larvas de S. stercoralis.
MTODO DE KATO - KATZ
Utilizado principalmente na pesquisa de ovos de S. mansoni e outros helmintos.
Utilizao do Kit (quantitativo - OPG):
1. Depositar uma pequena quantidade de fezes sobre uma folha de papel higinico colocando a
tela por cima e pressionando com a paleta.
2. Colocar sobre uma lmina de vidro a placa de plstico e depositar no centro do orifcio as fezes
que ultrapassaram as malhas da tela (40 - 60 mg).
3. Comprimir as fezes no orifcio da placa at complet-lo.
4. Sobrepor a lamnula de celofane (embebida em verde malaquita) e inverter a preparao
realizando presso com o polegar sobre a lmina at obter uma uniformidade do material.
5. Deixar em repouso por cerca de 60 minutos a temperatura ambiente.
6. Contar todos os ovos encontrados e multiplicar o total por 24, resultando em ovos/grama de
fezes.

MIF SEDIMENTAO ESPONTNEA

1. Misturar o material fecal fixado pelo MIF.
2. Filtrar a suspenso atravs de gaze dobrada em 4 e colocar o filtrado em tubo cnico de
sedimentao com capacidade de 125mL.
3. Adicionar gua corrente, se necessrio, at completar do volume do copo cnico . Deixar a
suspenso em repouso durante 1 a 2 horas.
4. Decantar com cuidado 2/3 do sobrenadante sem perder o sedimento. Ressuspender o
sedimento com gua corrente e deixar em repouso por mais uma hora.
5. Esse procedimento de lavagem pode ser repetido at que o sobrenadante fique relativamente
claro.
6. Colher o sedimento e deposit-lo em uma lmina, fazendo a observao em microscpio.

MTODO DE GRAHAM (Mtodo da fita adesiva)

COLETA PARA PESQUISA DE ENTEROBIUS VERMICULARIS
(TCNICA DA FITA ADESIVA OU SWAB PERIANAL NOTURNO)
Utilizado na pesquisa de ovos de E. vermicularis
Tcnica
1. Colocar um pedao de fita adesiva transparente em uma esptula de madeira
tipo abaixador de lngua com a parte adesiva voltada para fora
2. Pressionar firmemente a esptula contendo a fita adesiva contra as pregas
anais e perianais
3. Colar a fita adesiva em lmina devidamente identificada
4. No momento da execuo do exame, levantar cuidadosamente a fita da lmina
e pingar uma gota de toluol ou xileno e pressionar novamente a fita contra a
lmina. A preparao ficar clara ou levemente corada, tornando os ovos bem
visveis.
S analisar o material imediatamente..
Referncias bibliogrficas:
AMATO NETO, V. & CORRA, L.L., 1991. Exame parasitolgico das fezes. 5a edio. Sarvier,
So Paulo, SP. 92p.
CIMERMAN, B. & CIMERMAN, S., 1999. Parasitologia Humana e seus fundamentos gerais.
Editora Atheneu, Belo Horizonte, MG. 375 p.
DE CARLI, G.A. 2001. Parasitologia Clnica: Seleo de Mtodos e Tcnicas de Laboratrio para o
Diagnstico das Parasitoses Humanas. Editora Atheneu, Rio de Janeiro, RJ. 810 p.
FERREIRA, A.W. & VILA, S.L.M., 1996. Diagnstico laboratorial das principais doenas
infecciosas e auto-imunes. Editora Guanabara-Koogan, Rio de Janeiro, RJ. 302 p.
NEVES, D.P. et alli, 1998. Parasitologia Humana. 10a edio. Editora Atheneu, Belo Horizonte,
MG. 524 p.
REY, L., 1991. Parasitologia. 2a edio. Editora Guanabara-Koogan, Rio de Janeiro, RJ. 731 p.
WHO World Health Organization, 2000. Pranchas para o Diagnstico de Parasitas Intestinais.
Livraria Editora Santos, So Paulo, SP. 12 p.
WHO World Health Organization, 1999. Procedimentos Laboratoriais em Parasitologia Mdica.
Livraria Editora Santos, So Paulo, SP. 114 p.

Quadro comparativo com as principais caractersticas dos parasitos mais

comuns encontrados em exames de fezes humanas
Parasito

Foto

Caractersticas
Protistas

Trofozoto de

Entamoeba
histolytica

12-60 , assimtrico, um ncleo

esfrico e com cariossoma central.

Trofozoto de

Esfrico, 10-20 , 4 ncleos com

Entamoeba

cariossoma central e delicada

histolytica

cromatina perifrica. Alguns cistos

podem apresentar cromtides.

Trofozoto de

Giardia lamblia

Cisto de

Giardia lamblia

Cistos de

Entamoeba coli

9-21x5-15 , com formato de pra,

movies, com inmeros flagelos, com
dois ncleos centrais caractersticos.
Oval, 8-12 de comprimento e 7-10
de largura. Dois ncleos, que tendem a
se posicionar fora do centro da clula.
Um espao claro entre a parede celular
e o citoplasma.
10-35 , normalmente esfrico,
contm 8 ou mais cistos (nem sempre
todos so vistos). Cariossoma
excntrico, cromatina perifrica
grosseira e irregular. Raramente
apresentam cromtides.

Ovos frteis de

Ascaris
(Famlia Ascarididae)

Helmintos - Nematoda
60x45 , Arredondado ou ovide, com
uma casca espessa. Coberto com uma
camada espessa e irregular chamada
camada mamilonada. Normalmente de
cor marrom.

Ovo decorticado de

Perdeu a camada mamilonada. As

Ascaris

outras caractersticas so as mesmas

do ovo frtil.

Ovos frteis de

Ascaris
(Famlia Ascarididae)

60x45 , Arredondado ou ovide, com

uma casca espessa. Coberto com uma
camada espessa e irregular chamada
camada mamilonada. Normalmente de
cor marrom.

Ovo decorticado de

Perdeu a camada mamilonada. As

Ascaris

outras caractersticas so as mesmas

do ovo frtil.

Ovo infrtil de

Ascaris

Ovos de
Ancilostomdeos
(Famlia

90x40 , alongado, casca mais fina e

material interno formado por uma
massa de glbulos.

Oval, elipside, 60x40 . Casca muito

fina e transparente. Podem apresentar
uma mrula (esq) ou podem estar
larvados (dir).

Ancilostomidae)
Ovos de Enterobius
(Famlia Oxyuridae)

Ovos de

Trichuris trichiura

55x26 , Alongado, no formato de um

D ao contrrio. Casca fina e regular.
So normalmente encontrados
larvados.

54-22 , alongado, em forma de barril,

com oprculo polar.

Ovos de Taenia

Ovos de Hymenolepis

Helmintos - Plathyhelminthes
Ovos redondos ou sub-esfricos, com dimetro de
31 to 43 m, com uma espessa casca radialmente
estriada, normalmente de cor marrom. Dentro de
cada ovo h um embrio (oncosfera) com 6
ganchos.

Ovos arredondados ou um pouco ovais, medindo

60 to 80 m, com uma membrana interna estriada
e uma membrane externa fina, com um grande
espao entre elas. Possui uma oncosfera com 6
ganchos.

Ovos de

Ovos grandes (114 a 180 m) com um espinho

Schistosoma mansoni

lateral proeminente na sua poro final. Sua

extremidade inicial suavemente encurvada.
Quando maduro contm um miracdio em seu
interior.