COPROPARASITOLÓGICO

Sacarose saturada ou Sal (Técnica de Willis)

Principio:
Em uma solução saturada de sal ou açúcar os ovos dos helmintos
tendem a subir, aderindo-se a parte inferior de uma lamínula
colocada na superfície do líquido. É uma técnica qualitativa ou seja,
serve para ver se há ou não ovos ou oocistos de protozoários. Usada
principalmente em fezes de pequenos animais.
Vantagens:
-Procedimento de flutuação dos ovos de helmintos mais comuns e
oocistos de coccídios.
-Soluções são baratas.
-Há pouca sujeira para obscurecer a visão do parasita.

Desvantagens:
-Neste procedimento não flutuam ovos de trematódeo e alguns ovos
de vermes chatos
-Distorce cisto de Giardia.
-Inadequado para amostras de fezes gordurosas.

Técnica:
· Encher um tubo de ensaio com solução saturada (20ml)
· Pesar duas gramas de fezes e colocar em um copo
· Acrescentar um pouco de solução hipersaturada nas fezes
· Homogeneizar com um bastão
· Acrescentar o restante da solução, coar e encher um tubo de ensaio
até formar um menisco.
· Colocar uma lâmina de vidro e deixar por 15 minutos.
· Retirar a lâmina e inverte-la bruscamente sem deixar cair a gota de
solução.
· Pôr uma lamínula e levar ao microscópio usando objetiva de 10x.

Técnica de Sedimentação pelo Acetato de Etila

Método:
Passe uma porção de fezes (aproximadamente 5x5 mm) por uma
peneira adicionando aproximadamente 9 ml de água, despeje essa
solução em um tubo de centrífuga de 15ml.
Adicione 3 ml de acetato de etila, e tampa o tubo com um rolha de
borracha. Sacuda vigorosamente o tubo, e então centrifugue.
Usando uma vareta, " retire " o anel de gordura que se formou entre
a água e o acetato de etila (a tampa adere ao lado do tubo e deve ser
separado antes do conteúdo líquido do tubo poder ser decantado).
Decante o sobrenadante cuidando para manter o sedimento do fundo
do tubo intacto.
Transfira algum sedimento do fundo do tubo para uma lâmina e
examine. O sedimento pode ser transferido de vários modos:
1)Se algum líquido permanecer, o sedimento pode ser
homogeneizado e uma gota transferida com um pipeta para uma
lâmina de microscopia.
2)Adicione uma gota de iodo ao tubo, mexa com uma vareta e então
transfira com uma pipeta para a lâmina.
3) Use uma vareta para remover algum sedimento. Faça um
esfregaço e cubra isto com uma lamínula como você faria em um
esfregaço direto.

NOTA: Quando remover da centrífuga, seu tubo terá claramente

camadas definidas:

A. Uma camada de acetato de etila em cima.

B. Um anel de gordura dissolvida no meio.

C. Uma camada de água.

D. Uma porção de sedimento ao fundo.

A formalina utilizada para fixar ovos e cistos pode fazer estes não
flutuarem (eles podem ter uma gravidade específica agora maior que
1.2 ) então esta técnica é preferida quando temos amostras de fezes
fixadas em formalina.

NOTA: Se você quiser usar esta técnica somente para remover

gordura, você pode homogeneizar o sedimento com uma solução de
flutuação (hipersaturada), centrifugar, e remover o material do topo
do flutuador para examinar ovos.

Técnica de Faust e cols, 1939 - Centrífugo flutuação em

Sulfato de Zinco
Método:
1-Encha um tubo de centrífuga de 15 ml com solução de ZnSO4
(1.18 gravidade específica) * e verta em recipiente.
2- Usando um abaixador de língua, passe as fezes (2 a 3 gramas -
aproximadamente 1 cm em diâmetro) por um coador na solução de
ZnSO4 do recipiente.
3-Usando um funil, verta a mistura de fezes e ZnSO4 para o tubo de
centrífuga.
4- Centrifugue durante 2 minutos a velocidade alta (1500 - 2000
rpm).
5-Usando uma vareta ou alça de platina remova uma amostra da
superfície da solução e coloque em uma lâmina de microscopia. Você
pode ter que fazer várias amostras com a vareta para adquirir
bastante material para examinar - tem que ter o equivalente a uma
gota grande na lâmina. Adicione uma gota de iodo (cora os cisto e os
óvulos) e uma lamínula. Examine na objetiva de 10X

Nota: Se a amostra contém uma quantia grande de gordura ou outro

material que flutuam em água, você, pode lavar a amostra antes de
fazer a flutuação.Quando você centrifugar a mistura água (sem
ZnSO4) -fezes, os ovos afundarão mas a gordura permanecerá
flutuante. Depois da centrifugação decante o sobrenadante e some
solução de ZnSO4 - misture bem. Centrifugue como no passo 4.

* ZnSO4 solução (1.18 gravidade específica) é feito somando 386

gramas de ZnSO4 a 1 litro de água. A mistura deve ser conferida com
um hidrômetro e deve ser ajustada a uma gravidade específica de
1.18. A ZnSO4 solução deve ser armazenada em vidros bem fechados
para prevenir evaporação (e conseqüente mudança na gravidade
específica da solução).