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FIXADORES
60 mL metanol
30 mL clorofrmio
10 mL cido actico glacial
[guardar na geladeira]
20 mL gua destilada
PM = 138 g - 1 L 1M
x g - 1L 0,05 M
90 mL gua destilada
x = 6,9 g - 1 L
(1%) *4
x = 27,6 g - 1L
PM = 141,96 g - 1 L 1M
x g - 1L
- 0,05 M
x = 7,098 g - 1 L
(1%) *4
x = 28,392 g - 1L
- Bouin (imuno): p/ 1 L
714,3 mL cido pcrico saturado
238,1 mL formal 40%
47,6 mL cido actico glacial
60 mL gua destilada
[guardar na geladeira]
19 mL gua destilada
81 mL gua destilada
PROCESSAMENTO
* Preparao da resina
50 ml resina = 1 g ativador (p/ infiltrao)
15 ml resina de infiltrao = 1,2 ml endurecedor (p/ incluso)
obs: para incluso deve-se trabalhar em capela, pois o endurecedor cancergeno
COLORAO
- Azul de toluidina-Borax
1g azul de toluidina dissolvido em 4 ml lcool absoluto
4g borato de sdio dissolvido em 400 ml gua destilada
Juntar as solues
* Procedimento
Pingar o corante sobre todos os cortes e flambar em bico de bulsen.
Em seguida lavar os cortes em gua e fazer a bateria de desidratao para montagem de
lminas (3 minutos em cada banho para material processado em parafina e 30 segundos para os
processados em resina).
- Hematoxilina-Eosina
* Hematoxilina de Harris
5g hematoxilina cristalizada
100 mL lcool 95%
20g sulfato de alumnio
1000 mL gua destilada
2-4 mL cido actico
3g xido de mercrio amarelo
Obs: o cido actico aumenta a especificidade do corante em corar o ncleo; esse corante estvel (filtrar
antes de usar por causa do xido de mercrio.
* Eosina de Putt
1g eosina
0,5g bicromato de potssio
10 mL cido pcrico saturado
10 mL lcool absoluto
80 mL gua destilada
1 gota de cido actico
* Procedimento
Desparafinizar e hidratar as lminas em: xilol 1, xilol 2, lcool absoluto, lcool 95%, lcool
70% (banhos de 3 minutos, sendo que o material includo em resina no passa pelas etapas de xilol)
Lavar em gua corrente de torneira por 5 minutos
Corar com hematoxilina por 2-5 minutos (parafina) / 15-20 minutos (resina)
Lavar em gua corrente de torneira por 5 minutos
Contracorar com eosina por 1-2 minutos (parafina) / 8-10 minutos (resina)
Desidratar na bateria de: lcool 95%, lcool absoluto, xilol+lcool (1:1), xilol 1, xilol 2, xilol
final para montagem (banhos de 3 minutos para material includo em parafina, e de 30 segundos para os
includos em resina)
Na montagem, limpar as lminas com cuidado em volta do corte, deixando o tecido mido
para uma melhor aderncia da goma na lamnula e no corte
Colocar a Goma de Damar, montar e deixar secar temperatura ambiente ou na estufa
37C
* cido peridico 1%
1g cido peridico dissolvido em 100 mL gua destilada
* Reativo de Schiff
1,5g fucsina bsica
9g metabissulfito de sdio
3 mL cido clordrico
200 mL gua destilada
* Metanil Yellow
SOLUO A: 0,01g metanil yellow dissolvido em 10 mL gua destilada
Separar 10 mL desta soluo
SOLUO B: 0,25 mL cido actico global diludo em 50 mL gua destilada
Separar 25 mL desta soluo
Obs: no desidratar o material corado com lcool, pois o Metanil yellow solvel no mesmo e pode sair da
lmina
PROCESSAMENTO