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2, 259-267, 2015
http://dx.doi.org/10.5935/0100-4042.20140293
Carolina Zanon Costaa,b, Marcos de C. C. de Albuquerquea,b, Maria Cristina Brumb e Aline Machado de Castrob,*
a
Universidade Federal do Rio de Janeiro, Escola de Qumica, 21945-970 Rio de Janeiro RJ, Brasil
b
PETROBRAS, Centro de Pesquisas e Desenvolvimento da Petrobras, 21941-909 Rio de Janeiro RJ, Brasil
Recebido em 25/07/2014; aceito em 17/09/2014; publicado na web em 24/10/2014
Reviso
MICROBIAL AND ENZYMATIC DEGRADATION OF POLYMERS: A REVIEW. Polymer recycling has been one of the most
important trend in the petrochemical area. Among different technologies, biotechnological (enzymatic and/or microbial) degradation
of polymers for the recovery of monomers and oligomers is environmentally-friendly and meet some green chemistry principles. In
this work, conditions for the biotechnological degradation of some industrially-relevant polymers (e.g. poly(ethylene terephthalate)
and polyethylene) were revised, and the main biocatalysts were identified. In most cases, biodegradation mechanisms are still unclear,
thus being necessary more studies to unravel these promising bioprocesses. Polymer biodegradation studies also present considerable
importance for other fields, including biomedical and agricultural.
Keywords: enzyme; biological degradation; lipase.
INTRODUO
Com o aumento da conscientizao mundial em relao
necessidade de preservao dos recursos naturais e principalmente
com a previso de escassez dos recursos fsseis dentro de algumas
dcadas, houve a intensificao de pesquisas para a obteno de processos industriais mais ambientalmente amigveis. Em decorrncia
disso, reas que utilizam processos menos intensivos em energia e
fontes renovveis, como a biotecnologia, tm se destacado, com a
implementao de novas vertentes em substituio aos processos
qumicos.
Uma das reas da biotecnologia que vem se destacando nos
ltimos anos a biocatlise, na qual enzimas so utilizadas como
uma alternativa verde sntese orgnica tradicional, apresentando
algumas vantagens frente aos processos qumicos tradicionais,
como por exemplo atuao sob condies de operao mais brandas,
aplicabilidade sobre molculas trmica e quimicamente instveis a
altas temperaturas, elevado controle estreo-, quimio- e regioseletivo
e reduzida gerao de subprodutos.1 Mesmo assim, h pontos que
ainda necessitam ser aprimorados na biocatlise, como a perda de
atividade cataltica ao longo do tempo, menores taxas de converso
com relao a outros processos e o elevado tempo de reao.
As enzimas podem ser aplicadas em uma ampla gama de processos industriais, sejam isoladas ou sendo produzidas in situ por
microrganismos. Um uso das enzimas que vem recebendo destaque
nos ltimos anos em tecnologia petroqumica,2 rea na qual a degradao de polmeros se encontra inserida. Estes biocatalisadores
podem, por exemplo, atuar de forma isolada ou associadamente a
consrcios microbianos, para catalisar a hidrlise de ligaes ster
em polmeros de grande importncia industrial, como poliuretanos e
polisteres. As enzimas podem atuar tambm como catalisadores da
oxidao de grupos funcionais, tornando polmeros sintticos mais
hidroflicos, e dessa forma mais sujeitos degradao microbiana.
Sua atuao se estende ainda alterao de caractersticas como
cristalinidade, orientao e morfologia dos polmeros pelo mesmo
mecanismo de reaes de hidrlise ou oxidao, que podem ocorrer
na cadeia central ou na cadeia lateral dos polmeros. Estes parmetros
tambm influenciam a degradao destas espcies, porm alguns
*e-mail: alinebio@petrobras.com.br
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Microrganismo
Condies experimentais:
t(dias); T(C);
pH; agitao(rpm)
Aspergillus versicolor;
Penicillium, Bacillus, Thermopolyspora
Rhizopus oryzae
120; 30; 7; Nr
poli(e-caprolactona) (PCL)
Penicillium oxalicum
(OGM)
Aspergillus niger
poli(cido hidroxidodecanico)(POL);
poli(cidos graxos de coco hidroxilados)
(POCFA); poli(cidos graxos de coco
aminados)(PNCFA); poli(aminolurico)
(PNL); poli(hidroxilurico)(POL); PET;
Polipropileno (PP); politetrafluoretileno
(PTFE)
Aspergillus niger
poli(adipato-co-tereftalato de butileno)
Poliuretano
Nr: Condio no reportada.
Resultados observados
Biodegradao mais extensa
observada com a linhagem
de A. versicolor (anlise
qualitativa)
25% de perda de massa do
polmero
100% de perda de massa do
filme polimrico inicial
Reduo da massa molar
numrica mdia (Mn) para
20% (1,2-PPS) e 15% (1,3PPS) dos respectivos valores
iniciais dos polmeros
Referncia
14
15
16
17
19
Rhizopus oryzae
120; 31; 7; Nr
Reduo da massa do
polmero a 18% da massa
inicial
21
Saccharomyces cerevisiae
(OGM, contendo a lipase B
de Candida antarctica)
7; 30; Nr; Nr
8% de perda de massa do
polmero inicial
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Origem da enzima
Proteinase K (comercial)
Poli(cido lticoco-gliclico)
poli(xido de tetrametileno)
Poli(tereftalato de trimetileno)
Polisteres
Poli(carbonato de etileno)
(PEC)
Poli(acetato de vinila)
(PVAc)
Poli(-caprolactona)(PCL)
Condies experimentais:
t; T(C); pH; [E]a;
agitao(rpm); solvente
31 dias; 37; 8,5; Nrb; esttico;
tampo Tris
90 h; 30; 7; Nr; Nr; tampo
fosfato
55 dias; 30; 7; 50 U mL-1; 80;
tampo fosfato
48 h; 37; 7,4; 3,9-6,5 U mg-1;
800; Nr
7 dias; 37; 7; 2 mg mL-1; esttico; tampo fosfato
72 h; 60; 7; 0,2 g L-1; 450,
tampo fosfato
72 h; 37; 7; 38 g L-1; 450,
tampo fosfato de sdio e
potssio
Resultados observados
68% de perda de massa do
polmero
75% de perda de massa do
polmero
65% de perda de massa do
polmero
Entre 35-57% de biodegradabilidade (medida definida
pelos autores)
At 2,7 g m-2 de perda de
massa do polmero
Liberao de 600 M de
cido tereftlico
Liberao de 180 M de
cido tereftlico
Percentual de hidrlise
do polmero em produtos
solveis de 43% (AbC),
100% (AfC, AoC e HiC) e
50% (FsC)
Elevada atividade sobre a
ligao N-H, mdia atividade sobre a ligao C=O
e baixa atividade sobre as
ligaes C-N e C-O-C
Mdia atividade sobre a
ligao C-O-C e baixa
atividade sobre as ligaes
C=O e C=C
68% de perda de massa do
PEC de 200kDa e 8% de
perda de massa do PEC de
41kDa
Referncia
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definio de atividade enzimtica particular para cada tipo de biocatalisador, sendo influenciada, por sua vez, pelo tipo e concentrao
de substrato empregado, tempo de reao e condies ambientais
(pH, temperatura). Devido heterogeneidade dos sistemas reacionais
de degradao de polmeros (substrato slido, enzima em soluo),
alguns estudos adotam substratos anlogos (estes solveis) para a
determinao da atividade de enzimas a serem empregadas na degradao de polmeros, e assim padronizar a quantidade de biocatalisador
adicionado ao sistema.55,57-59 Em poucos casos, como o reportado por
Wei et al.,56 uma metodologia mais especfica empregada. Estes
autores desenvolveram um mtodo turbidimtrico para a determinao da degradao de PET, empregado na forma de nanopartculas,
empregando uma cutinase de T. fusca, e constataram, por meio de
anlise de Calorimetria Diferencial de Varredura (DSC), que a atuao
da enzima na degradao do polmero predominantemente do tipo
endgeno (ou seja, nas regies mais internas da cadeia polimrica).
A maioria dos artigos voltados para a degradao biotecnolgica
de polmeros estuda a degradao enzimtica, que ocorre em geral na
presena de uma soluo tamponada. Devido constante disponibilizao de grupamentos carboxila durante a hidrlise (especialmente
de polisteres), o que pode reduzir significativamente o pH do meio, a
manuteno do pH necessria para evitar ou retardar a desnaturao
dos biocatalisadores. Cabe comentar, porm, que como muitos dos
processos de degradao enzimtica reportados na literatura so de
longo prazo (at meses de durao), mesmo com a manuteno do pH
as enzimas tendem a perder suas atividades. Para que o processo de degradao enzimtica continue, muitos autores adotam uma abordagem
de renovar o contedo enzimtico do sistema periodicamente.26,27,29,34,72
Muitos estudos apontam a estrutura, a composio e a hidrofilicidade como os principais fatores que influenciam a degradao
de polmeros, mais especificamente de polisteres.18 Para Rizzarelli
et al.,44,47 por exemplo, a degradao enzimtica influenciada pela
composio qumica, estrutura qumica, massa molar, cristalinidade e
pela temperatura de fuso do polmero. J os estudos de degradao
enzimtica de poli(succinato de butileno), realizados por Gigli et al.,72
levaram os autores a concluir que h uma correlao entre a taxa de
biodegradao do polmero e seu grau de hidrofilicidade e de regies
amorfas. Eles concluram que a incorporao de tomos de oxignio
na funo ter aumenta consideravelmente a biodegradabilidade do
polmero.
A morfologia do polmero, incluindo a ocorrncia e frequncia da
fase cristalina, tamanho, forma e nmero de cristalitos, desempenha
um papel importante na determinao da taxa de biodegradao do
polmero. Isso porque as regies amorfas presentes em polmeros so
mais suscetveis hidrlise enzimtica do que regies cristalinas. Esse
resultado foi demonstrado em vrios estudos, na qual foi observado
que a biodegradao se iniciava com a hidrlise rpida das regies
amorfas, sendo seguida pela degradao lenta das regies cristalinas.
Com isso, o comportamento da biodegradao destas amostras
fundamentalmente determinado no s pela sua composio, mas
tambm por suas estruturas de fase e todas as alteraes que ocorrem
durante este processo. 73 Especificamente no caso do PET, Wei et al.56
sugeriram que a degradao enzimtica do polmero substancialmente influenciada pela mobilidade das cadeias do polister, e que isto
determina a afinidade e a acessibilidade da enzima s ligaes ster.
Uma estratgia que pode ser aplicada para melhorar a biodegradabilidade dos polmeros o aumento da hidrofilicidade do polmero,
o qual realizado pela introduo de segmentos hidroflicos no seu
esqueleto. Isso pode ser feito por meio da adio de uma hidroxila,
e a formao de grupos carbonil ou carboxil. Essa incorporao
aumenta a polaridade das molculas, o que incorre em aumento do
carter hidroflico dos componentes, favorecendo assim o ataque
biolgico das molculas. Estruturas cristalinas e redes moleculares
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