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UNIVERSIDADE PAULISTA – UNIP

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS

FARMÁCIA

BIOQUÍMICA ESTRUTURAL
1. INTRODUÇÃO.................................................................................. 2
...
2. OBJETIVOS...................................................................................... 4
...
3. Indicadores de 5
Ph.................................................................................
Resultados e 6
3.1 discussões......................................................................
4. pH e solução 6
tampão............................................................................
4 Procedimento..................................................................................... 6
. ...
1
Resultados e 6
4.2 discussões......................................................................
Gráfico de 8
4.3 titulação...............................................................................
5 Aminoácidos...................................................................................... 8
...
Gráfico de pH solução x volume 11
5.1 NaOH/HCl........................................
Resultados e 11
5.2 discussões.....................................................................
6 Detecção de 12
aminoácidos...................................................................
Desnaturação 13
7. Proteica........................................................................
Atividade 13
8. Enzimática...........................................................................
Bibliografía......................................................................................... 14
9. ..
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1. INTRODUÇÃO

Os estudos na disciplina de Bioquímica Estrutural tem um vínculo entre


química e biologia. Que consiste no estudo e modificação da estrutura molecular e
das reações químicas do metabolismo de biomoléculas, biopolímeros,
componentes celulares e virais.
O relatório tem objetivo de esclarecer o entendimento do discente através das
aulas práticas. A aprendizagem se inicia com indicadores de pH, através do grau de
acidez ou basicidade de uma solução, para a medição utilizamos o pHmetro
(medidor de pH).
Ainda com a ênfase em pH é composta uma analise com solução tampão,
para manusear e compreender o funcionamento do pHmetro. E realizar uma breve
discussão das reações ocorridas através da solução tampão, associando com
acidose (pH baixo) e alcalose (pH alto) reações que alteram o pH do sangue que
está entre 7,35 a 7,45.
No estudo de aminoácido foi também relembrado o caráter anfótero (capaz de
reagir com comportamento ácido ou básico) que são apresentados pelos
aminoácidos. Feita uma determinação de valores de soluções como glicina e ácido
glutâmico.
Através dos aminoácidos estudamos as suas estruturas com foco na estrutura
primária ligações peptídicas (ligação entre aminoácidos). E analisar as propriedades
por reação colorimétrica (formação de produtos coloridos).
As proteínas em outras circunstâncias também fizeram parte dos estudos foi
realizado um ensaio em alteração de solubilidade na presença de soluções salinas e
solventes orgânicos.
Distintamente na atuação com a afinidade de debater e comprovar a
relevância das enzimas nos processos digestivos concerniu à atividade enzimática
para verificar a ocorrência da proteólise, entre outros procedimentos relativos a
enzima.
No ensinamento de revisão associaram-se os diferentes tipos de estrutura de
carboidratos, suas funções, suas fontes e a diferenciação por meio de reações
específicas.
Por meio de procedimentos como teste de Barfoed, teste do espelho de prata,
teste de Fehling.
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O último aprendizado foi sobre Lipídeos e o objetivo foi recordar a formula


geral dos ácidos graxos além dos processos de reações dos ácidos graxos como
hidrogenação (reação com hidrogênio) halogenação reações com (F2,Ol2, Br2 e I2)
saponificação (gerar sabão).
Este relatório está baseado nos fundamentos e etapas que foram seguidas
durante os roteiros, com o qual consiste nos resultados das experiências práticas
através do conhecimento adquirido e através de pesquisas literárias.
Por entre o conteúdo deferido espero contribuir de forma objetiva e assertiva
em todos os pontos relacionados.
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2. OBJETIVOS
O estudo que se faz presente neste relatório tem como objetivo apresentar ao
discente a rotina de um laboratório que demonstra conceitos relevantes de
Bioquímica Estrutural.
Combinando (Química e Biologia) as ênfases determinantes estão nos
processos, reações, interações e interações químicas nos organismos vivos.
É uma ciência e tecnologia essencial para todas as profissões relacionadas a
ciências da vida e uma das fronteiras de desenvolvimento das ciências químicas.

3. Indicadores de pH

Certas substâncias têm as características e propriedades de mudar de cor


são denominadas de indicadores de pH. Essa característica define, se uma solução
é do tipo ácido ou básico, é universal o uso deste termo (pH) para se referir ao grau
de acidez ou basicidade de uma solução.
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Podemos expor que a escala de pH é constituída de uma série de números


de 0 a 14, sendo o ponto médio 7, quanto mais inferior a 7,0 o acido será mais forte.
Nas bases quanto mais alto o valor do pH, mas forte ele será.
Desempenhado um procedimento que comprova exatamente este conceito,
utilizando os indicadores de pH.
Enumerados 11 tubos de ensaio, adicionando extrato de repolho em todos,
nos copos 2 a 11, nesta sequência as seguintes substâncias Hidróxido de sódio,
Cloreto de sódio, água sanitária, sabão em pó, leite, detergente, vinagre,
bicarbonato de sódio, albumina e água.
E feita a seguinte observação:

Extrato de Repolho Roxo Cor pH aproximado


Ácido clorídrico 0,5M Vermelho 1,0
Hidróxido de sódio 0,1M Verde 1,0
Cloreto de sódio 10% Roxo (manteve a cor) 7,0
Vinagre Rosa 5,0
Detergente incolor Roxo (manteve a cor) 7,0
Água sanitária Amarelo 13
Água sem gás Roxo (manteve cor) 7,0
Sabão em pó Verde 10
Leite Roxo (claro) 7,0
Bicabornato de sódio Azul 9,0
Albumina Roxo 7,0

3.1 Resultados e Discussão

Através deste elaborado procedimento conseguimos obter a visibilidade de


quais soluções possuíam características ácidas ou básicas. Sendo o ácido clorídrico
0,5 M e o hidróxido de sódio 0,1 M as soluções mais ácidas e o bicarbonato de sódio
e a água sanitária possuem o pH mais básico.
Concluímos que todos os ensaios realizados ocorreram de forma sucinta, e
que contemplaram toda a especificidade da análise realizada pelos discentes que
formavam o grupo.
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4. pH e solução tampão

Os principais objetivos são manusear e compreender o funcionamento do


pHmetro.

4.1 - Procedimento

Proceder com a calibração do pHmetro com soluções pH 4,0 e pH 7,0 e fazer


a medição de 2 béqueres cada um deve conter uma barra magnética para a mistura.
Em ambos os béqueres adicionar 20mL de água, e medir o pH no primeiro
béquer adicionar 10 gotas de forma gota a gota de (HCl) 5M, anotando os valores
de pH a cada gota.
No segundo béquer fazer adição de solução tampão e realizar o mesmo
procedimento.
Após finalizar, realizar o mesmo procedimento béqueres com NaOh 5M.
E comparar os fenômenos obtidos em ambos processos e nas duas aferições.

4.2 - Resultados e Discussão

Primeiro béquer : Na medição do pH da água foi encontrado o valor de (1,3).


Com a adição de uma gota de HCl 5M, foi encontrado o pH de (1,78) com duas
gotas (1,29), três gotas (0,95), quatro gotas (0,77), cinco gotas (0,57), seis gotas
(0,36) sete gotas (0,23), oito gotas (0,12), nove gotas (0,03) dez gotas (0,18).
Segundo béquer : Na medição do pH do tampão encontramos o resultado de
(4,13). Com a adição de uma gota de tampão foi encontrado o pH de (3,37), com
duas gotas (3,63) três gotas (3,42), quatro gotas (3,76,), cinco gotas (3,57), seis
gotas (3, 6) sete gotas (0,73), oito gotas (0,32), nove gotas (0,03) dez gotas (0,11).
NaOh 5M: Com a adição de uma gota de foi encontrado o pH de (12,37), com
duas gotas (12,75) três gotas (12,72), quatro gotas (13,76,), cinco gotas (13,57), seis
gotas (13, 36) sete gotas (13,43), oito gotas (13,52), nove gotas (13,53) dez gotas
(13,51).
Ao término deste ensaio foi identificado ocorrências como falhas nas
medições devido oscilações no pHmetro utilizado, porém.
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Porém definido que as 2 primeiras soluções HCl 5M e o tampão são de


caráter ácidos, e quanto mais adições mais ácido se torna as soluções contidas nos
béqueres.
O NaOh 5M, possui característica de base as com adições se torna cada vez
mais forte esta característica.

4.3 - Gráfico de titulação


Valores aferidos de pH x volume gota de cada experimento;

pH
8

14
13
12
11
10
9
8
HCl 5M
7
Tampão
6
NaOh 5M
5
4
3
2
1
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10

Gotas

Realizado uma discussão sobre a função da solução tampão acido


carbônico/carbonato de sódio no sangue e do tris-acetato para fazer experimentos
com o DNA e RNA.
E concluímos que as soluções tampão faz um papel importante na
manutenção do pH no meio intracelular e no extracelular, e são substâncias
presentes no sangue.
O tris-acetato é usado para separação do DNA e RNA e vem sendo usado
para estudar a mobilidade do DNA livre com e sem cloreto de sódio.

5. Aminoácidos

Através do estudo, foi realizado uma experiência para relembrar o caráter


anfótero dos aminoácidos. O objetivo é determinar os valores de pH das soluções de
aminoácidos (glicina e ácido glutâmico), utilizando a curva de titulação, manuseando
o pHmetro.
Para o procedimento foram separado quatro béqueres dois identificados como
A1 e A2 adicionado 50 mL de Leucina 0,1M.
Os outros dois foram identificados como B1 e B2 também com a adição de 50
mL, Leucina 0,1M.
Proceder com a calibração do pHmetro com soluções pH 4,0 e pH 7,0.
Béquer A1, mergulhar uma barra magnética na solução contida e posicionar o
béquer sobre a placa agitadora.
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Sob a agitação, adicionar NaOh 0,5 N gota a gota e anotar os valores de pH.

A1- Leucina 0,1M pH


e NaOh 0,5 N
1 gota 7,1
2 gotas 7,3
8 gotas 8,8
13 gotas 8,2
18 gotas 8,4
23 gotas 8,5
28 gotas 8,6
33 gotas 8,8
43 gotas 9,0
53 gotas 9,2
63 gotas 9,3
73 gotas 9,4
83 gotas 9,5
103 gotas 9,6
123 gotas 9,7
143 gotas 9,8
163 gotas 10,0

Béquer A2, mergulhar uma barra magnética na solução contida e posicionar o


béquer sobre a placa agitadora.
Sob a agitação, adicionar HCl 0,5 M gota a gota e anotar os valores de pH.

A2- Leucina 0,1 M pH


e HCl 0,5 M
20 3,3
40 3,0
60 2,9
80 2,8
100 2,7
120 2,6
140 2,5
160 2,4
180 2,2

Realizar os mesmos procedimentos para os béqueres B1 e B2.


10

B1-Ac.Glutamico pH
0,1M e NaOh 0,5
N
11

1 gota 3,06
2 gotas 3,1
8 gotas 3,13
13 gotas 3,3
18 gotas 3,4
23 gotas 3,5
33 gotas 3,6
53 gotas 3,9
73 gotas 4,2
93 gotas 4,4
113 gotas 4,7
133 gotas 5,2

B2-Ac.Glutamico pH
HCl
20 gotas 2,8
40 gotas 2,6
60 gotas 2,4
80 gotas 2,3
100 gotas 2,2
120 gotas 2,1
140 gotas 2,0

5.1 Gráfico de pH da solução x volume de NaOH/HCl.

pH
14
13
12
11
10
9
8 A1- Leucina 0,1M e NaOh 0,5 N
A2- Leucina 0,1 M HCl 0,5 M
7
B1-Ac Glutamico 0,1 M e NaOh
6 0,5 N
5 B2-Ac.Glutamico HCl
4
3
2
1
0
1 21 41 61 81 101 121 141 161
12

Gotas
 
5.2 Resultados e Discussão

A capacidade tamponante é a quantidade de ácido ou base que pode ser


adicionada antes que o tampão perca sua habilidade de resistir à mudança em pH.
No béquer
A1- Leucina 0,1M e NaOh 0,5 N, inciou com uma característica no ponto
médio 7,1 e com 163 gotas sua verificou sua capacidade tamponante com um pH de
10,0.
A2- Leucina 0,1 M e HCl 0,5 M chegou em sua capacidade tamponante com
180 gotas com um pH 2,2. O Ac.Glutamico 0,1M e NaOh 0,5 N com 133 gotas se
tornou inalterável com um pH 5,2 e na útima experiência com B2-Ac.Glutamico HCl
com 140 gotas não houveram mais alterações seu pH inicial foi de 2,8 e o final de
2,0.
Realizado uma discussão sobre o caráter tampão da albumina sanguínea, e
através da discussão foi analisado e concluído que esta é a principal proteína
do plasma sanguíneo, sendo sintetizada no fígado, pelos hepatócitos.
A concentração normal de albumina no sangue animal fica entre 3,5 e 5,0
gramas por decilitro, e constitui cerca de 50% das proteínas plasmáticas.
A albumina é fundamental para a manutenção da pressão osmótica,
necessária para a distribuição correta dos líquidos corporais entre o compartimento
intravascular e o extravascular, localizado entre os tecidos.
Suas principais funções são Manutenção da pressão osmótica, Transporte
de hormônios tiroideais, Transporte de hormônios lipossolúveis, Transporte de
hormônios lipossolúveis, Transporte de bilirrubina não conjugada, transporte
de bilirrubina não conjugada, união competitiva com íons de cálcio controle do pH.

6. Detecção de Aminoácidos

Realizado um ensaio que consiste em identificar as propriedades das


proteínas e dos aminoácidos por reação colorimétrica diferencial.
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Para isso foram necessários 8 tubos de ensaios. E os que apresentaram


coloração arroxeada foram os tubos 3,4,5 e 9.
Sendo estes que continham líquidos compostos de proteínas como á
albumina 10%, o aminoácido glicina 1%, o leite sem ferver e o suco de fruta.
Não ocorrem os mesmos processos na detecção das proteínas na clara de
um ovo cozido e um outro cru
No ovo cozido ocorre o processo de desnaturação, na energia térmica do
calor que ocorre quando cozinhamos o ovo se têm o fato da desnaturação das
proteínas pois o calor rompe a ligação que mantém a forma da proteína do ovo
alterando sua estrutura.
Podemos afirmar que não é possível detectar aminoácidos livres pelo
procedimento do teste de biureto, pois para que a reação seja positiva há
necessidade de ao menos duas ligações peptídicas na molécula por tanto
aminoácidos e dipeptídeos não apresentaram reação.
Esse fenômeno deve-se à formação de um complexo entre o íon Cu 2+ e os átomos
de nitrogênio presentes na molécula do biureto. Abaixo segue o esquema que
representa um modelo da formação desse complexo:

7. Desnaturação Proteíca
Verificar a alteração de solubilidade de proteínas em presença de soluções
salinase solventes orgânicos.
A ação da temperatura nas proteínas, em um tubo de ensaio, foi posto 2mL
de Solução de ovoalbumina a10% e com auxílio de uma pinça, foi colocado no bico
de bunsen para analisar e o resultado foi desnaturação criou grumos da parede do
tubo de ensaio.
A ação do pH nas proteínas em um tubo de ensaio foi colocado 2mL de
solução de Ovoalbumina a 10% e adiconar 2mL de HCl 0,5 M, e o resultado foi de
desnaturação com uma prporção menor.
Ação dos solventes orgânicos sobre as proteínas Em um tubo de ensaio foi
adiciondo 2 Ml de solução de ovoalbumina e 10% e2% mL de Etanol gelado, neste
caso houve desnaturação e precipitação a proteína.
Ação de sais sobre proteína em um tubo de ensaio colocar 2Ml de solução
ovoalbumina a 10% e adicionar 2 Ml Da solução saturada de sulfato de amônio,
neste experimento houve mudança na estrutura e desnaturação.
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8. Atividade Enzimática
A importância das enzimas em processos digestivos.
Numerados os tubos de ensaios de 1 a 4 e preparar a sequência conforme a
tabela
Abaixo, segue a tabela com os resultados
Tu Composição Estado
bo
4 mL gelatina +2mL de água Gelificou
1
4 mL gelatina +2mL de extrato de mamão Viscosa
2
4 mL gelatina + 2mL de extrato de abacaxi Líquida
3
4 4 mL gelatina + 2 mL de extrato fruta Viscosa
regional

9. BIBLIOGRAFIA

SARDELLA, A & MATEUS, E. Curso de Química: Química Geral. 21.ed. São Paulo: Editora
Ática, 1995.

ARZZOCO, A. & TORRES, B. B. Bioquímica Básica. 3.ed. Rio de Janeiro: Guanabara


Koogan, 2007.

CAMPBELL, M. K.
Bioquímica. 3.ed. Porto Alegre: Artmed Editora, 2000.M

NELSON, D. L. & COX, M. M. Lehninger Princípios de Bioquímica.4.ed. São Paulo: Sarvier,


2006.
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