Bioquímica II

Docente: Vanderlei Biolchi

Discentes: Laura Cavalheiro, Lucas Baggio, Manoela Teixeira e Pedro Sousa

RELATÓRIO AULA PRÁTICA

DOSAGEM DE PROTEÍNAS TOTAIS E ALBUMINA

A realização dos procedimentos foi orientada pelo roteiro1 passado pelo

docente bem como com a sua devida ajuda. Anteriormente aos
procedimentos já nos estava à disponibilidade uma amostra de plasma do
sangue de um discente para que se fizéssemos a dosagem de suas proteínas
totais1.I e albumina1.II. Após realizados todos os procedimentos2 explicitados no
roteiro, os resultados3 das dosagens foram obtidos.
Dentre as explanações prévias, o professor ressaltou algumas
aplicabilidades e importância da dosagem de proteínas totais e,
principalmente, da albumina:
→ Em casos de Cirrose Hepática, com as lesões no fígado há uma
diminuição na produção de albumina, resultando em uma pressão oncótica
menor que a pressão hidrostática. Com isso, temos acúmulo de água no meio
intersticial, o que caracteriza o edema.
→ Na Síndrome de kwashiorkor, doença frequente em regiões pobres e
que acomete geralmente crianças, pela deficiência de proteínas, ocorre a
falta do pool de AA, resultando na perda de massa muscular e fenótipo
característico (braços e pernas finas e barriga d’água). Além disso, há baixa
produção de albumina, causando o edema abdominal.
Ou seja, a albumina, além de ser a principal proteína na circulação,
apresentar carga negativa e ser produzida pelo fígado, é um excelente
marcador de desidratação, desnutrição e cirrose.
1. ROTEIRO

I. PROTEÍNAS TOTAIS

meio
LIGAÇÕES PEPTÍDICAS + ÍONS CÚPRICO alcalino
CROMÓGENO VIOLETA

BRANCO PADRÃO AMOSTRA

R1 1mL 1mL 1mL

PADRÃO
R2 PT 4g/dL - 20µL -

AMOSTRA - - 20µL

- Homogeneizar;
- 37ºC por 10 min;
- Ler em 545 nm;
Valor de Referência:
Cálculo: ➔ 6,0 – 8,0 g/dL
PT (g/dL) = ABS AMOSTRA x 4
ABS PADRÃO

II. ALBUMINA

ALBUMINA + VERDE DE BROMOCRESOL COMPLEXO VERDE

BRANCO PADRÃO AMOSTRA

R1 1mL 1mL 1mL

PADRÃO
R2ALB 3,8g/dL - 10µL -

AMOSTRA - - 10µL

- Homogeneizar;
- 37ºC por 5 min;
- Ler em 630 nm;

Cálculo: Valor de Referência:

ALB(g/dL) = ABS AMOSTRA x 3,8 ➔ 3,5 – 5,5 g/dL
ABS PADRÃO
2. PROCEDIMENTOS

PROTEÍNAS TOTAIS
1º passo: pipetamos 1mL do reagente
1(R1) nos tubos de ensaio BRANCO(BP),
PADRÃO(PP) e AMOSTRA(AP);
2º passo: adicionamos ao tubo PADRÃO
20 microlitros do reagente 2(R2);
3º passo: por fim, adicionamos 20
microlitros da amostra de plasma(PLAS) nos
tubos de ensaio AMOSTRA(AP);
4º passo: todos os tubos de ensaio foram homogeneizados e colocados
em espera por 10 minutos a uma temperatura ambiente;
5° passo: para aferir a absorbância, zeramos o Espectrofotômetro com o
tubo BRANCO(BP), com o intuito de eliminar as interferências. Com os valores
obtidos foi possível calcular a dosagem de proteínas totais (tubo AMOSTRA).

ALBUMINA
1º passo: pipetamos 2,5mL do reagente
1(R1) nos tubos de ensaio BRANCO(BA),
PADRÃO(PA) e AMOSTRA(AA);
2º passo: adicionamos ao tubo de ensaio
PADRÃO(PA) 10 microlitros do reagente 2(R2);
3º passo: por fim, adicionamos 10
microlitros da amostra de plasma(PLAS) no tubo
de ensaio AMOSTRA(AA);
4º passo: todos os tubos de ensaio foram
homogeneizados e colocados em espera por 5 minutos a uma temperatura
ambiente;
5° passo: para aferir a absorbância, zeramos o Espectrofotômetro com o
tubo BRANCO(BA), com o intuito de eliminar as interferências. Com os valores
obtidos foi possível calcular a dosagem de albumina (tubo AMOSTRA).
3. RESULTADOS

Absorbância Padrão Absorbância Amostra

Para Proteínas Totais 0,247 nm 0,347 nm
Para Albumina 0,159 nm 0,218 nm

O valor de Proteínas Totais encontrado, com base no procedimento

explicado em aula, foi de 5,61 g/dL.
→ PT = Absorbância da Amostra / Absorbância do Padrão x 4
→ PT = 0,347 / 0,247 x 4 = 5,61g/dL

O valor de Albumina obtido na dosagem, com base nos procedimentos,

foi de 5,21 g/dL.
→ ALB = Absorbância da Amostra / Absorbância do Padrão x 3,8
→ ALB = 0,218 / 0,159 x 3,8 = 5,21g/dL

Dessa forma, de acordo com os nossos resultados, conclui-se que o

discente possui níveis de proteínas totais levemente abaixo do valor indicado
(6,0 – 8,0 g/dL) e, apesar disso, possui valores de albumina dentro do
recomendado (3,5 – 5,5 g/dL).
Essas medições refletem o estado nutricional do discente analisado
que, neste caso, com a possível alteração e com a Albumina dentro da
normalidade, devem-se ser feitos demais exames para identificar qual a
proteína específica (Fibrinogênio e/ou Globulinas) que está alterada e, dessa
forma, se obter um diagnóstico conclusivo.