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Métodos empregados no estudo das células e tecidos

Etapas para a obtenção da amostra Etapas para a obtenção da amostra


Técnica Histológica
Coleta do material
Definição : são operações regradas usadas em um Coleta do material
É a primeira etapa e consiste na retirada de uma amostra de tecido
material (tecido biológico) com o intuito de Fixação do material para a investigação
possibilitar seu estudo através de um microscópio
Lavagem e desidratação
e observar estruturas não vistas a olho nu.
Análise Histopatológica - consiste no estudo das Diafanização ou Clarificação
Coleta de
células e tecidos do nosso corpo para realizar o Inclusão Esfregaço Biópsia Necrópsia
diagnóstico de uma doença. Sangue
Microtomia (corte)

Coloração
• Remoção • Remoção
ex: neoplasias e anormalidades • Tecido
Observação • Descamar de tecido de tecido
líquido
vivo morto

Coleta do material
Espalhamento do material Etapas para a obtenção da amostra Etapas para a obtenção da amostra
Diversas maneiras de espalhar material

Coleta do material Fixação do material

Biópsias Objetivo: evita a autólise celular e impede a proliferação de microrganismos,


preservando a morfologia do tecido e fornecendo maior resistência para as
etapas seguintes.
Biópsia incisional: remove fragmento da lesão
Utiliza processos físicos ou químicos para imobilizar as substâncias
Estiraço Gotejamento Esmagamento Decalque Biópsia excisional: remove toda a lesão
constituintes das células e dos tecidos.  Depende do tipo de microscopia
escolhida.

EX:
• Esmaga entre a lâmina M. Óptica - Formol
• Obtenção de • Te c i d o s • Núcleos de tecidos
e lamínula
células inteiras líquidos impressos
medidas e M. Eletrônica - Glutaraldeído ou acetona
• Estu do de d ivisões
quantificadas • Sangue • Quantidade de DNA
celulares

Etapas para a obtenção da amostra Etapas para a obtenção da amostra Coloração


Etapas para a obtenção da amostra

Desparafinação
Inclusão
Lavagem e Desidratação parafina deve ser dissolvida e removida
Impregnação do tecido com uma substância de consistência
firme —> tecido endurecido —> facilita o corte em camadas
Consiste na remoção de impurezas e excesso de água dos tecidos
finas.
Reidratação
série de so luções de á lc o o l em
Desidratação - mais comum é o uso do álco o l em d iferentes A parafina é a mais utilizada neste procedimento
concentrações decrescentes.
concentrações
End u re ce em po ucos m in utos e preenche os lugare s
anteriormente ocupados pela água —> bloco de parafina Coloração
Clarificação ou diafanização Microtomia (corte) Hematoxilina Básico (+)
(azul-púrpura/ cora os ácidos nucleicos
etapa remove totalmente o álcool, preparando o espécime para a etapa Bloco de parafina é cortado em seções extremamente finas, que
seguinte.
roxo) dos núcleos
permitam a visualização do tecido ao microscópio

Micrótomo - alcança a espessura dos cortes de 5 a 15 μm Eosina(rosa) Ácido (-)


Para remover o álcool utiliza-se o xilol. Conforme o xilol penetra o
(micrômetros) - 1 micrômetro (μm) é igual a 1/1.000 de 1 cora os componentes básicos
tecido, em substituição ao álcool, o material se torna mais claro,
milímetro (mm) —> lâmina de vidro predominantes no citoplasma
transparente.
(proteínas)

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