BIOT075 – BIOQUÍMICA APLICADA À BIOTECNOLOGIA

1ª AVALIAÇÃO PARCIAL – 10/02/23

ESTUDANTE: Carina Gonçalves Mascarenhas dos Santos

1. Alguns princípios ativos de medicamentos são bases fracas e, para serem absorvidos
pelo organismo humano, obedecem, como um dos parâmetros, a equação de
HendersonHasselbach. Essa equação determina a razão molar entre forma protonada e
não protonada do princípio ativo dependendo do pH do meio. A forma não protonada é
aquela que tem maior capacidade de atravessar as membranas celulares durante o
processo de absorção. A equação de Henderson-Hasselbach adaptada para bases fracas é
representada a seguir.



Nessa equação, pka é a constante de dissociação do princípio ativo. Considerando-se
essa equação, um medicamento caracterizado como base fraca, com pka de 4,5, terá
maior absorção:
a) no estômago, com pH de 1,5.
b) na bexiga, com pH de 2,5.
c) no túbulo coletor do néfron, com pH de 3,5.
d) na pele, com pH de 4,5.
e) no duodeno, com pH de 6,5.
Resposta: letra E.

2. Para o tripeptídeo NH3+-Ala-Lys-Ser-COO- :

a) Desenhe sua estrutura química.

b) Esquematize a curva de titulação desse peptídeo e calcule o seu pI.

c) Para que polo migraria o tripeptídeo numa eletroforese feita a pH = 7? Justifique sua
resposta.
Resposta: Em valores de pH acima do pI, o tripetídeo adquire carga negativa e em
valores de pH abaixo do pI, a carga fica positiva. Já no pH 7, o tripetídeo fica com carga
positiva e migraria para o polo negativo por conta da atração eletrostática entre as
cargas positivas e negativas.
d) Esse tripeptídeo em pH fisiológico atua como tampão? Justifique sua resposta.
Resposta: Esse tripetídeo tem uma capacidade tamponante em pHs próximos aos
valores dos pKas dos grupos ionizáveis, portanto em pHs entre:
- pKa1 (SER): 2,21; pH: 1,21-3,21.
-pKa2 (ALA): 9,69; pH: 8,69-10,69.
-pKaR (LYS): 10,53; pH: 9,53-11,53.
e) Ao ser eliminado pela urina (pH=6,0), qual o estado de carga predominante desse
peptídeo?
Resposta: O estado de carga desse tripetídeo é carregado positivamente, pois em
valores de pH 6,0 estão abaixo do valor do pI (10,11).

3. Abaixo está representada a mobilidade eletroforética em pH 8,6 da hemoglobina

normal e de uma série de hemoglobinas anormais (que possuem um aminoácido
substituído):

Indique a que posição (A, B, C ou D) corresponde cada hemoglobina anormal,

justificando sua resposta:
HbS - Val em lugar de Glu
Resposta: 5,97 B
HbJ - Asp em lugar de Gly
Resposta: 2,77 D
HbN - Glu em lugar de Lys
Resposta: 3,22 C
HbC - Lys em lugar de Glu
Resposta: 9,74 A

4. Foram efetuadas medidas cinéticas para uma enzima na ausência e na presença de

inibidor ([I] = 2 x 10-3 M, fixa). As velocidades iniciais correspondentes às várias
concentrações de substrato estão indicadas na tabela abaixo:

Pergunta-se:
a) Quais são os valores de Vmax e Km na ausência de inibidor? E na sua presença?
  Velocidade (µmol/L)  
[S]M Sem inibidor Com inibidor
0 0 0
0,000003 10,4 4,1
0,000005 14,5 6,4
0,00001 22,5 11,3
0,00003 33,8 22,6
0,00009 40,5 33,8

Gráfico de Michaelis-Menten
45
40
35
30
Velocidade

25
20
15
10
5
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 01
000 000 000 000 000 000 000 000 000 00
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0.
0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0. 0.
[S]

Sem inibidor Com inibidor

Gráfico de Lineweaver-burk
0.3
0.25
f(x) = 6.66341675376074E-07 x + 0.02217000413914
0.2
0.15
1/V

0.1
f(x) = 2.23988316800025E-07 x + 0.0224053322144047
0.05
0
0 50000 100000 150000 200000 250000 300000 350000
[1/S]

Sem inibidor Linear (Sem inibidor)

Com inibidor Linear (Com inibidor)

b) Qual é o tipo de inibição? Justifique sua resposta.

Resposta: Inibição do tipo competitiva, pois o valor da Vmax não se altera e o Km,
quando na presença do inibidor, seu valor é superior frente a sua ausência.
5. A rafinose é um trissacarídeo constituinte da beterraba:

a) A rafinose é um açúcar redutor? Explique.

Resposta: Não. São considerados açúcares redutores, os carboidratos que possuem a
capacidade de reduzir íons. Para tanto, devem apresentar um grupo carbonila para fazer a
oxidação e formar um ácido carboxílico.
b) Quais são os monossacarídeos que a compõem?
Resposta: Glicose, frutose e galactose.
c) A β-galactosidase é uma enzima que remove resíduos de galactose a partir
de um oligossacarídeo. Quais são os produtos do tratamento de rafinose por
β-galactosidase?
Resposta: Frutose e glicose (sacarose).