Disciplina: Análise Instrumental

Curso: Licenciatura em Química Valor da atividade: X/20

Data: 21/10/2021 – 29/10/2021 Professora: Pamela R Patricio
Aluno (a) : João Bruno de Oliveira Gontijo

ATIVIDADE 2

1. (UFSJ - MG) Na determinação de uma proteína pelo método de Bradford, a cor de

um corante muda de marrom para azul (medida pela absorbância da luz em um

comprimento de onda de 595 nm) e é proporcional à concentração de proteína

presente.

Proteína (µg):

0,00 9,36 18,72 28,08 37,44

Absorvância em 595 nm:

0,000 0,210 0,417 0,620 0,814

a) Utilizando qualquer programa de computador, obtenha a curva analítica com os dados

fornecidos, bem como a equação da curva e o coeficiente de correlação.

Concentração / µg L-1 Sinal Sinal Corrigido

0,0 0 0
9,3 0,21 0,21
18,72 0,417 0,417
28,08 0,62 0,62
37,44 0,814 0,814
 DETERMINAÇÃO DA PROTEÍNA
0,90
0,80
0,70
y = 0,0218x + 0,0051
0,60 R² = 0,9998
0,50
0,40
0,30
0,20
0,10
0,00
0,00 5,00 10,00 15,00 20,00 25,00 30,00 35,00 40,00

Sinal Sinal Corrigido

Linear (Sinal Corrigido) Linear (Sinal Corrigido)

b) Uma amostra desconhecida de proteína forneceu uma absorbância corrigida de 0,507.

Considere que o branco da amostra apresentou absorbância igual a 0,000 e calcule

quantos microgramas de proteína estão presentes na amostra.

𝑅 = 𝑆𝑖𝑛𝑎𝑙 𝐴𝑛𝑎𝑙í𝑡𝑖𝑐𝑜 = 0,507

𝑌 = 0,0051 + 0,0218𝑥
0,507 − 0,0051
𝑋=
0,0218
𝑋 = 23,0 𝜇𝑔𝐿−1
2. (UFSJ - MG). Considere a curva de calibração linear com a equação a seguir e faça o

que se pede.

Concentração de proteína (µg) vs Absorvância corrigida: Y = 0,01630X + 0,0047.

Suponha que foram encontrados valores de absorvância de 0,265; 0,269; 0,272 e

0,258 para quatro amostras idênticas e absorbância média de 0,095 para os brancos.

Determine a quantidade de proteína na amostra desconhecida. (Expresse os

resultados da seguinte forma: valor médio ± desvio padrão):

𝑹 = 𝑀é𝑑𝑖𝑎: 0,265 + 0,269 + 0,272 + 0,258 = 0,266 − 0,095 = 0,171

∑𝑛𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑀𝐴 )2
𝐷𝑃 = √
𝑛

√(0,265 − 0,171)2 + (0,269 − 0,171)2 + (0,272 − 0,171)2 + (0,258 − 0,171)2 =

𝐷𝑃 =
4
0,0362
𝐷𝑃 = √ = 0,095
4

𝐸𝑞𝑢𝑎çã𝑜: 𝑌 = 0,01630𝑥 + 0,0047

(0,171 − 0,0047)
𝑥=
0,01630
𝑥 = 10,202
3. (Harris, 2016) Uma forma comum de determinar fósforo em urina consiste em tratar

a amostra, com molibdênio(VI) após se remover as proteínas, e então reduzir o

complexo 12- molibdofosfato com ácido ascórbico para fornecer uma espécie de cor

azul intensa. A absorbância do azul de molibdênio pode ser medida a 650 nm. Um

paciente produziu 1122 mL de urina em 24 horas. Uma alíquota de 1,00 mL da

amostra foi tratada com Mo(VI) e ácido ascórbico e foi diluída para um volume de

50,00 mL. Uma curva analítica foi preparada tratando-se alíquotas de 1,00 mL de

soluções padrão de fosfato da mesma forma que a amostra de urina. As absorbâncias

dos padrões e da amostra de urina foram medidas a 650 nm, obtendo-se os seguintes

resultados:

Concentração / mg L-1 Absorbância

0,00 0,000

1,00 0,230

2,00 0,436

3,00 0,638

4,00 0,848

Amostra de urina 1 0,518

Amostra de urina 2 0,525

Amostra de urina 3 0,519

(a) Encontre a inclinação e o intercepto em y da curva de calibração. Construa um gráfico

da curva de calibração. Considere que o branco da amostra apresentou absorbância igual

a 0,000 e determine a concentração média em mg L-1 de P na amostra de urina e o

respectivo coeficiente de variação. (Expresse os resultados da seguinte forma: valor

médio ± desvio padrão)

(b) Qual massa média, em gramas, foi eliminada pelo paciente por dia? (Expresse os

resultados da seguinte forma: valor médio ± desvio padrão)

(c) Qual é a concentração média de fosfato na urina em mmol L-1. (Expresse os

resultados da seguinte forma: valor médio ± desvio padrão)

4. Na espectrofotometria medimos a concentração de um analito com base na

absorbância de luz. Uma amostra com baixa concentração foi preparada, e medidas

de nove amostras idênticas forneceram absorbâncias de 0,0047, 0,0052, 0,0062,

0,0060, 0,0046, 0,0056, 0,0052, 0,0044 e 0,0058. Nove brancos de reagente

produziram uma absorbância média 1,1375 x 10-3.

a) A curva de calibração foi obtida e o seu coeficiente angular é m = 2,24 x 104 M-1.

Encontre o limite de detecção.

Média=0,0047+0,0052+0,0062+0,0060+0,0046+0,0056+0,0052+0,0044+0,0058/9
=0,0053
0,0053- valor do branco (1,1375 x 10-3)=0,00416
𝑫𝑷 = 𝟎, 𝟎𝟎𝟏𝟐
R= LD= 3s / m
LD= 3.(4,1625x10-3 ) / 2,24 x 104 M-1
LD=1,10-7

b) Encontre o limite de quantificação.

Lq= 10s/m
Lq= 10(0,0012) /2,24 x 104 M-1
Lq= 5,10-7 M-1