Soluções Tampões

Certos ensaios farmacopeicos

exigem o ajuste ou a
manutenção de pH. Para tal,
empregam-se soluções
denominadas tampões,
capazes de suportar
variações na
atividade de íons
hidrogênio. Os componentes
requeridos estão descritos
no item
Reagentes. Os de natureza
cristalina devem ser
previamente dessecados a 110 -
120
°C por uma hora; utilizar água
isenta de dióxido de carbono. A
armazenagem deve ser
feita em recipientes herméticos
e apropriados. Considerar a
estabilidade no preparo
das quantidades para
consumo. A seguir,
relacionam-se as soluções
em ordem
crescente de valores de
pH. Outros tampões com
características particulares
são
descritos nos textos dos
respectivos ensaios.
Tampão ácido clorídrico pH 2,0
Preparação – Misturar 50 mL
de solução aquosa de cloreto de
potássio 0,2 M com 13
m de solução aquosa de ácido
clorídrico 0,2 M. Completar o
volume para 200 ml com
água e ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 2,2
Preparação – Dissolver 1,38 g
de fosfato de sódio monobásico
em 800 ml de água.
Ajustar o pH com ácido
fosfórico e diluir para 1000 ml
com água.
Tampão acetato pH 3,0
Preparação – Dissolver 12 g de
acetato de sódio em água,
adicionar 6 ml de ácido
acético glacial e diluir com
água para fazer 100 ml. Ajustar
o pH se necessário.
Tampão acetato pH 3,5
Preparação – Dissolver 25 g de
acetato de amônio em 35 ml
de água, adicionar 38 mL de
ácido clorídrico 7 M, ajustar o
pH para 3,5 com ácido
clorídrico SR ou hidróxido de
amônio 6 M e completar o
volume para 100 ml com
Tampão acetato pH 4,0
Preparação – Transferir 900 ml
de água para balão volumétrico
de 1000 mL, adicionar
2,86 ml de ácido acético glacial
e 1 ml de hidróxido de sódio a
50% (p/v), completar o
volume com água e
homogeneizar. Se necessário,
ajustar o pH em 4,0 com ácido
acético glacial ou hidróxido de
sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato pH 4,4
Preparação – Dissolver 136 g
de acetato de sódio e 77 g de
acetato de amônio em
água e diluir a 1000 ml.
Adicionar 250 mL de ácido
acético glacial e homogeneizar.
Tampão biftalato pH 4,4
Preparação – Dissolver 2,042 g
de biftalato de potássio em 50
ml de água, adicionar
7,5 ml de hidróxido de
hidrogênio 0,2 M e diluir para
200 mL em água. Ajustar o pH
se
necessário.
Tampão acetato 0,05 M pH 4,5
Preparação – Transferir 2,99 g
de acetato de sódio trihidratado
e 1,66 ml de ácido
acético glacial para balão
volumétrico de 1000 mL.
Dissolver em água e completar
o
volume com o mesmo solvente.
Ajustar o pH se necessário.
Tampão acetato de sódio pH
4,5
Preparação – Diluir 2,8 mL de
ácido acético glacial com água
para 1000 ml. Ajustar o
pH em 4,5 ± 0,05 com
hidróxido de sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato de sódio 0,1 M
pH 5,0
Preparação – Transferir
13,61 g de acetato de
sódio trihidratado para
balão
volumétrico de 1000 ml,
dissolver em quantidade
suficiente de água e completar
o
volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar.
Ajustar o pH em 5,0 com
ácido
acético 0,1 M.
Tampão citrato-fosfato pH 5,0
Solução A – Dissolver 0,8 g de
fosfato de sódio dibásico
hepta-hidratado em 500 mL
de água. Solução B –
Dissolver 3,5 g de ácido cítrico
monoidratado em 500 mL de
água. Preparação – Misturar,
com agitação, as Soluções A e
B até ajustar o pH para
5,0. Distribuir em recipientes
com 50 ml cada. Autoclavar a
121 °C, pressão de 1 atm,
por 20 minutos. Estocar a 4
°C.
Tampão fosfato pH 5,5
Solução A – Dissolver
13,61 g de fosfato de
potássio monobásico em
água e
completar para 1000 mL com o
mesmo solvente. Solução B –
Dissolver 35,81 g de
fosfato de sódio dibásico
dodeca-hidratado em água e
completar para 1000 mL com
o mesmo solvente.
Preparação – Misturar 96,4
mL da Solução A e 3,6
ml da
Solução B. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 5,8
Preparação – Em balão
volumétrico de 200 mL,
adicionar 3,6 mL de
hidróxido de
sódio 0,2 M a 50 ml de fosfato
de potássio monobásico 0,2 M
e completar o volume
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 6,0
Preparação – Misturar 50 mL
de fosfato de potássio
monobásico 0,2 M e 5,7 ml de
hidróxido de sódio 0,2 M.
Completar o volume a 200 ml
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão acetato pH 6,0
Preparação – Dissolver 100 g
de acetato de amônia em 300
mL de água, adicionar
4,1 ml de ácido acético glacial,
se necessário ajustar o pH,
utilizando hidróxido de
amônio 10 M ou ácido acético
glacial 5 M e completar a 500
ml com água.
Soluções Tampões
Certos ensaios farmacopeicos
exigem o ajuste ou a
manutenção de pH. Para tal,
empregam-se soluções
denominadas tampões,
capazes de suportar
variações na
atividade de íons
hidrogênio. Os componentes
requeridos estão descritos
no item
Reagentes. Os de natureza
cristalina devem ser
previamente dessecados a 110 -
120
°C por uma hora; utilizar água
isenta de dióxido de carbono. A
armazenagem deve ser
feita em recipientes herméticos
e apropriados. Considerar a
estabilidade no preparo
das quantidades para
consumo. A seguir,
relacionam-se as soluções
em ordem
crescente de valores de
pH. Outros tampões com
características particulares
são
descritos nos textos dos
respectivos ensaios.
Tampão ácido clorídrico pH 2,0
Preparação – Misturar 50 mL
de solução aquosa de cloreto de
potássio 0,2 M com 13
m de solução aquosa de ácido
clorídrico 0,2 M. Completar o
volume para 200 ml com
água e ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 2,2
Preparação – Dissolver 1,38 g
de fosfato de sódio monobásico
em 800 ml de água.
Ajustar o pH com ácido
fosfórico e diluir para 1000 ml
com água.
Tampão acetato pH 3,0
Preparação – Dissolver 12 g de
acetato de sódio em água,
adicionar 6 ml de ácido
acético glacial e diluir com
água para fazer 100 ml. Ajustar
o pH se necessário.
Tampão acetato pH 3,5
Preparação – Dissolver 25 g de
acetato de amônio em 35 ml
de água, adicionar 38 mL de
ácido clorídrico 7 M, ajustar o
pH para 3,5 com ácido
clorídrico SR ou hidróxido de
amônio 6 M e completar o
volume para 100 ml com
Tampão acetato pH 4,0
Preparação – Transferir 900 ml
de água para balão volumétrico
de 1000 mL, adicionar
2,86 ml de ácido acético glacial
e 1 ml de hidróxido de sódio a
50% (p/v), completar o
volume com água e
homogeneizar. Se necessário,
ajustar o pH em 4,0 com ácido
acético glacial ou hidróxido de
sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato pH 4,4
Preparação – Dissolver 136 g
de acetato de sódio e 77 g de
acetato de amônio em
água e diluir a 1000 ml.
Adicionar 250 mL de ácido
acético glacial e homogeneizar.
Tampão biftalato pH 4,4
Preparação – Dissolver 2,042 g
de biftalato de potássio em 50
ml de água, adicionar
7,5 ml de hidróxido de
hidrogênio 0,2 M e diluir para
200 mL em água. Ajustar o pH
se
necessário.
Tampão acetato 0,05 M pH 4,5
Preparação – Transferir 2,99 g
de acetato de sódio trihidratado
e 1,66 ml de ácido
acético glacial para balão
volumétrico de 1000 mL.
Dissolver em água e completar
o
volume com o mesmo solvente.
Ajustar o pH se necessário.
Tampão acetato de sódio pH
4,5
Preparação – Diluir 2,8 mL de
ácido acético glacial com água
para 1000 ml. Ajustar o
pH em 4,5 ± 0,05 com
hidróxido de sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato de sódio 0,1 M
pH 5,0
Preparação – Transferir
13,61 g de acetato de
sódio trihidratado para
balão
volumétrico de 1000 ml,
dissolver em quantidade
suficiente de água e completar
o
volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar.
Ajustar o pH em 5,0 com
ácido
acético 0,1 M.
Tampão citrato-fosfato pH 5,0
Solução A – Dissolver 0,8 g de
fosfato de sódio dibásico
hepta-hidratado em 500 mL
de água. Solução B –
Dissolver 3,5 g de ácido cítrico
monoidratado em 500 mL de
água. Preparação – Misturar,
com agitação, as Soluções A e
B até ajustar o pH para
5,0. Distribuir em recipientes
com 50 ml cada. Autoclavar a
121 °C, pressão de 1 atm,
por 20 minutos. Estocar a 4
°C.
Tampão fosfato pH 5,5
Solução A – Dissolver
13,61 g de fosfato de
potássio monobásico em
água e
completar para 1000 mL com o
mesmo solvente. Solução B –
Dissolver 35,81 g de
fosfato de sódio dibásico
dodeca-hidratado em água e
completar para 1000 mL com
o mesmo solvente.
Preparação – Misturar 96,4
mL da Solução A e 3,6
ml da
Solução B. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 5,8
Preparação – Em balão
volumétrico de 200 mL,
adicionar 3,6 mL de
hidróxido de
sódio 0,2 M a 50 ml de fosfato
de potássio monobásico 0,2 M
e completar o volume
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 6,0
Preparação – Misturar 50 mL
de fosfato de potássio
monobásico 0,2 M e 5,7 ml de
hidróxido de sódio 0,2 M.
Completar o volume a 200 ml
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão acetato pH 6,0
Preparação – Dissolver 100 g
de acetato de amônia em 300
mL de água, adicionar
4,1 ml de ácido acético glacial,
se necessário ajustar o pH,
utilizando hidróxido de
amônio 10 M ou ácido acético
glacial 5 M e completar a 500
ml com água
Soluções Tampões
Certos ensaios farmacopeicos
exigem o ajuste ou a
manutenção de pH. Para tal,
empregam-se soluções
denominadas tampões,
capazes de suportar
variações na
atividade de íons
hidrogênio. Os componentes
requeridos estão descritos
no item
Reagentes. Os de natureza
cristalina devem ser
previamente dessecados a 110 -
120
°C por uma hora; utilizar água
isenta de dióxido de carbono. A
armazenagem deve ser
feita em recipientes herméticos
e apropriados. Considerar a
estabilidade no preparo
das quantidades para
consumo. A seguir,
relacionam-se as soluções
em ordem
crescente de valores de
pH. Outros tampões com
características particulares
são
descritos nos textos dos
respectivos ensaios.
Tampão ácido clorídrico pH 2,0
Preparação – Misturar 50 mL
de solução aquosa de cloreto de
potássio 0,2 M com 13
m de solução aquosa de ácido
clorídrico 0,2 M. Completar o
volume para 200 ml com
água e ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 2,2
Preparação – Dissolver 1,38 g
de fosfato de sódio monobásico
em 800 ml de água.
Ajustar o pH com ácido
fosfórico e diluir para 1000 ml
com água.
Tampão acetato pH 3,0
Preparação – Dissolver 12 g de
acetato de sódio em água,
adicionar 6 ml de ácido
acético glacial e diluir com
água para fazer 100 ml. Ajustar
o pH se necessário.
Tampão acetato pH 3,5
Preparação – Dissolver 25 g de
acetato de amônio em 35 ml
de água, adicionar 38 mL de
ácido clorídrico 7 M, ajustar o
pH para 3,5 com ácido
clorídrico SR ou hidróxido de
amônio 6 M e completar o
volume para 100 ml com
Tampão acetato pH 4,0
Preparação – Transferir 900 ml
de água para balão volumétrico
de 1000 mL, adicionar
2,86 ml de ácido acético glacial
e 1 ml de hidróxido de sódio a
50% (p/v), completar o
volume com água e
homogeneizar. Se necessário,
ajustar o pH em 4,0 com ácido
acético glacial ou hidróxido de
sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato pH 4,4
Preparação – Dissolver 136 g
de acetato de sódio e 77 g de
acetato de amônio em
água e diluir a 1000 ml.
Adicionar 250 mL de ácido
acético glacial e homogeneizar.
Tampão biftalato pH 4,4
Preparação – Dissolver 2,042 g
de biftalato de potássio em 50
ml de água, adicionar
7,5 ml de hidróxido de
hidrogênio 0,2 M e diluir para
200 mL em água. Ajustar o pH
se
necessário.
Tampão acetato 0,05 M pH 4,5
Preparação – Transferir 2,99 g
de acetato de sódio trihidratado
e 1,66 ml de ácido
acético glacial para balão
volumétrico de 1000 mL.
Dissolver em água e completar
o
volume com o mesmo solvente.
Ajustar o pH se necessário.
Tampão acetato de sódio pH
4,5
Preparação – Diluir 2,8 mL de
ácido acético glacial com água
para 1000 ml. Ajustar o
pH em 4,5 ± 0,05 com
hidróxido de sódio a 50% (p/v).
Tampão acetato de sódio 0,1 M
pH 5,0
Preparação – Transferir
13,61 g de acetato de
sódio trihidratado para
balão
volumétrico de 1000 ml,
dissolver em quantidade
suficiente de água e completar
o
volume com o mesmo
solvente. Homogeneizar.
Ajustar o pH em 5,0 com
ácido
acético 0,1 M.
Tampão citrato-fosfato pH 5,0
Solução A – Dissolver 0,8 g de
fosfato de sódio dibásico
hepta-hidratado em 500 mL
de água. Solução B –
Dissolver 3,5 g de ácido cítrico
monoidratado em 500 mL de
água. Preparação – Misturar,
com agitação, as Soluções A e
B até ajustar o pH para
5,0. Distribuir em recipientes
com 50 ml cada. Autoclavar a
121 °C, pressão de 1 atm,
por 20 minutos. Estocar a 4
°C.
Tampão fosfato pH 5,5
Solução A – Dissolver
13,61 g de fosfato de
potássio monobásico em
água e
completar para 1000 mL com o
mesmo solvente. Solução B –
Dissolver 35,81 g de
fosfato de sódio dibásico
dodeca-hidratado em água e
completar para 1000 mL com
o mesmo solvente.
Preparação – Misturar 96,4
mL da Solução A e 3,6
ml da
Solução B. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 5,8
Preparação – Em balão
volumétrico de 200 mL,
adicionar 3,6 mL de
hidróxido de
sódio 0,2 M a 50 ml de fosfato
de potássio monobásico 0,2 M
e completar o volume
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato pH 6,0
Preparação – Misturar 50 mL
de fosfato de potássio
monobásico 0,2 M e 5,7 ml de
hidróxido de sódio 0,2 M.
Completar o volume a 200 ml
com água. Ajustar o pH se
necessário.
Tampão acetato pH 6,0
Preparação – Dissolver 100 g
de acetato de amônia em 300
mL de água, adicionar
4,1 ml de ácido acético glacial,
se necessário ajustar o pH,
utilizando hidróxido de
amônio 10 M ou ácido acético
glacial 5 M e completar a 500
ml com água
Soluções Tampões

Certos ensaios farmacopeicos exigem o ajuste ou a manutenção de pH. Para tal,

empregam-se soluções denominadas tampões, capazes de suportar variações na

atividade de íons hidrogênio. Os componentes requeridos estão descritos no item

Reagentes. Os de natureza cristalina devem ser previamente dessecados a 110 - 120

°C por uma hora; utilizar água isenta de dióxido de carbono. A armazenagem deve ser

feita em recipientes herméticos e apropriados. Considerar a estabilidade no preparo

das quantidades para consumo. A seguir, relacionam-se as soluções em ordem

crescente de valores de pH. Outros tampões com características particulares são

descritos nos textos dos respectivos ensaios.

Tampão ácido clorídrico pH 2,0

Preparação – Misturar 50 mL de solução aquosa de cloreto de potássio 0,2 M com 13

m de solução aquosa de ácido clorídrico 0,2 M. Completar o volume para 200 ml com

água e ajustar o pH se necessário.

Tampão fosfato pH 2,2

Preparação – Dissolver 1,38 g de fosfato de sódio monobásico em 800 ml de água.

Ajustar o pH com ácido fosfórico e diluir para 1000 ml com água.

Tampão acetato pH 3,0

Preparação – Dissolver 12 g de acetato de sódio em água, adicionar 6 ml de ácido

acético glacial e diluir com água para fazer 100 ml. Ajustar o pH se necessário.

Tampão acetato pH 3,5 Preparação – Dissolver 25 g de acetato de amônio em 35 ml

de água, adicionar 38 mL de ácido clorídrico 7 M, ajustar o pH para 3,5 com ácido

clorídrico SR ou hidróxido de amônio 6 M e completar o volume para 100 ml com

Tampão acetato pH 4,0

Preparação – Transferir 900 ml de água para balão volumétrico de 1000 mL, adicionar

2,86 ml de ácido acético glacial e 1 ml de hidróxido de sódio a 50% (p/v), completar o

volume com água e homogeneizar. Se necessário, ajustar o pH em 4,0 com ácido

acético glacial ou hidróxido de sódio a 50% (p/v).

Tampão acetato pH 4,4

Preparação – Dissolver 136 g de acetato de sódio e 77 g de acetato de amônio em

água e diluir a 1000 ml. Adicionar 250 mL de ácido acético glacial e homogeneizar.

Tampão biftalato pH 4,4

Preparação – Dissolver 2,042 g de biftalato de potássio em 50 ml de água, adicionar

7,5 ml de hidróxido de hidrogênio 0,2 M e diluir para 200 mL em água. Ajustar o pH se

necessário.

Tampão acetato 0,05 M pH 4,5

Preparação – Transferir 2,99 g de acetato de sódio trihidratado e 1,66 ml de ácido

acético glacial para balão volumétrico de 1000 mL. Dissolver em água e completar o

volume com o mesmo solvente. Ajustar o pH se necessário.

Tampão acetato de sódio pH 4,5

Preparação – Diluir 2,8 mL de ácido acético glacial com água para 1000 ml. Ajustar o

pH em 4,5 ± 0,05 com hidróxido de sódio a 50% (p/v).

Tampão acetato de sódio 0,1 M pH 5,0

Preparação – Transferir 13,61 g de acetato de sódio trihidratado para balão

volumétrico de 1000 ml, dissolver em quantidade suficiente de água e completar o

volume com o mesmo solvente. Homogeneizar. Ajustar o pH em 5,0 com ácido

acético 0,1 M.

Tampão citrato-fosfato pH 5,0

Solução A – Dissolver 0,8 g de fosfato de sódio dibásico hepta-hidratado em 500 mL

de água. Solução B – Dissolver 3,5 g de ácido cítrico monoidratado em 500 mL de

água. Preparação – Misturar, com agitação, as Soluções A e B até ajustar o pH para

5,0. Distribuir em recipientes com 50 ml cada. Autoclavar a 121 °C, pressão de 1 atm,
por 20 minutos. Estocar a 4 °C.

Tampão fosfato pH 5,5

Solução A – Dissolver 13,61 g de fosfato de potássio monobásico em água e

completar para 1000 mL com o mesmo solvente. Solução B – Dissolver 35,81 g de

fosfato de sódio dibásico dodeca-hidratado em água e completar para 1000 mL com

o mesmo solvente. Preparação – Misturar 96,4 mL da Solução A e 3,6 ml da

Solução B. Ajustar o pH se necessário.

Tampão fosfato pH 5,8

Preparação – Em balão volumétrico de 200 mL, adicionar 3,6 mL de hidróxido de

sódio 0,2 M a 50 ml de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e completar o volume

com água. Ajustar o pH se necessário.

Tampão fosfato pH 6,0

Preparação – Misturar 50 mL de fosfato de potássio monobásico 0,2 M e 5,7 ml de

hidróxido de sódio 0,2 M. Completar o volume a 200 ml com água. Ajustar o pH se

necessário.

Tampão acetato pH 6,0

Preparação – Dissolver 100 g de acetato de amônia em 300 mL de água, adicionar

4,1 ml de ácido acético glacial, se necessário ajustar o pH, utilizando hidróxido de

amônio 10 M ou ácido acético glacial 5 M e completar a 500 ml com água

Tampão barbital pH 8,6

Preparação – Misturar 129 ml
de ácido clorídrico 0,1 M
adicionar volume suficiente de
barbital sódico 0,1 M para
completar 1000 ml. Ajustar o
pH se necessário.
Tampão fosfato pH 8,6
Preparação – Misturar 2,3
volumes de hidróxido de sódio
0,2 M, com 2,5 volumes de
fosfato de potássio monobásico
0,2 M e 2 volumes de metanol.
Resfriar e misturar
com água para obter 10
volumes de solução. Ajustar, se
necessário, o pH para 8,60
± 0,05 com hidróxido de sódio.
Tampão de tris-cloridrato 1,5 M
pH 8,8
Preparação – Dissolver 90,8 g
de trometamina em 400 ml de
água. Ajustar o pH para
8,8 com ácido clorídrico e
diluir para 500 ml com água.
Tampão borato pH 9,0
Preparação – Dissolver 12,37 g
de ácido bórico e 14,91 g de
cloreto de potássio em
água e completar o volume
para 1000 ml com o mesmo
solvente. Transferir 50 ml
da solução obtida para balão
volumétrico de 200 ml,
adicionar 20 ml de hidróxido de
sódio 0,2 M e 120 ml de água.
Ajustar o pH em 9,0 com
hidróxido de sódio SR ou
ácido clorídrico SR e completar
o volume com água.
Tampão tris 0,05 M pH 9,0
Preparação – Transferir 6,05 g
de trometamina para balão
volumétrico de 1000 mL.
Dissolver em água e completar
o volume com o mesmo
solvente. Ajustar o pH em 9,0
± 0,05 utilizando ácido
fosfórico. Dissolver 10 g de
laurilsulfato de sódio em cerca
de
600 ml do tampão. Misturar a
solução obtida com o restante
do tampão.
Tampão borato pH 9,6
Preparação – Transferir 3,093 g
de ácido bórico e 3,728 g de
cloreto de potássio para
balão volumétrico de 1000
ml, adicionar 250 ml de água e
agitar até dissolução.
Acrescentar 182 ml de
hidróxido de sódio 0,2 M e
completar o volume com água.
Ajustar o pH se necessário.
Tampão carbonato-bicarbonato
de sódio pH 9,6
Preparação – Dissolver 0,75 g
de carbonato de sódio e 1,5 g
de bicarbonato de sódio
em 500 ml de água. Distribuir
em recipientes com 50 ml cada.
Autoclavar a 121 °C,
pressão de 1 atm, por 20
minutos. Estocar a 4 °C.
Tampão cloreto de amônio pH
10,0
Preparação – Dissolver 5,4 g de
cloreto de amônio em 70 ml
de hidróxido de amônio
5 M e diluir com água a 100 ml.
Tampão cloreto de amônio pH
10,7
Preparação – Dissolver 67,5 g
de cloreto de amônio em água,
adicionar 570 ml de
solução concentrada de amônia
e diluir para 1000 ml com água.
Ajustar o pH se
necessário.
Tampão fosfato-laurilsulfato de
sódio pH 11,0
Preparação – Dissolver em água
16,35 g de fosfato de sódio
monobásico, 7,05 g de
hidróxido de sódio e 3 g de
laurilsulfato de sódio e diluir
com água para 1000 ml.
Ajustar o pH se necessário.
Tampão ácido acético-acetato
de amônio
Preparação – Dissolver 77,1 g
de acetato de amônio em água,
adicionar 57,0 ml de
ácido acético glacial e
completar com água a 1000
ml. Ajustar o pH se necessário.
Tampão de eletroforese DSS-
EGPA
Preparação – Dissolver 151,4 g
de trometamina, 721 g de
glicina e 50 g laurilsulfato
de sódio em água e completar
5000 mL com o mesmo
solvente. Diluir a 1:10 com
água, imediatamente antes
do uso. O pH da solução
diluída deve estar
compreendido entre 8,1 e 8,8.
Tampão concentrado para
amostras DSS-EGPA.
Preparação – Dissolver 1,89 g
de trometamina, 5 g de
laurilsulfato de sódio e 50 mg
de azul de bromofenol em
água; juntar 25 ml de glicerina
e completar para 100 ml
com água. Ajustar o pH para
6,8 com ácido clorídrico e
completar para 125 ml com
água.
Tampão concentrado para
amostras DSS-EGPA em
condições redutoras
Preparação – Dissolver 3,78 g
de trometamina, 10 g de
laurilsulfato de sódio, 100 mg
de azul de bromofenol e 50 ml
de glicerina em 200 ml de água.
Juntar 25 ml de 2-
mercaptoetanol. Ajustar o pH
para 6,8 com ácido clorídrico
e completar para 250 ml
com água. Em vez do 2-
mercaptoetanol, pode ser usado
o ditiotreitol como agente
redutor. Nesse caso, proceda
como se indica: dissolva 3,78
g de trometamina, 10 g
de laurilsulfato de sódio, 100
e completar para 250 ml com
água. Imediatamente
antes do emprego, adicionar o
ditiotreitol, de modo a obter
uma concentração final
de 0,1 M.
Tampão fosfato-salina (PBS)
Preparação – Dissolver, com
agitação, 24 g de cloreto de
sódio, 0,6 g de cloreto de
potássio, 4,3 g de fosfato de
sódio dibásico dodeca-
hidratado e 0,6 g de fosfato de
potássio monobásico em 4 L
de água. Autoclavar a 121 °C,
pressão de 1 atm, por
20 minutos. Estocar a 4 °C.
Tampão barbital pH 8,6

Preparação – Misturar 129 ml de ácido clorídrico 0,1 M adicionar volume suficiente de

barbital sódico 0,1 M para completar 1000 ml. Ajustar o pH se necessário.

Tampão fosfato pH 8,6

Preparação – Misturar 2,3 volumes de hidróxido de sódio 0,2 M, com 2,5 volumes de

fosfato de potássio monobásico 0,2 M e 2 volumes de metanol. Resfriar e misturar

com água para obter 10 volumes de solução. Ajustar, se necessário, o pH para 8,60

± 0,05 com hidróxido de sódio.

Tampão de tris-cloridrato 1,5 M pH 8,8

Preparação – Dissolver 90,8 g de trometamina em 400 ml de água. Ajustar o pH para

8,8 com ácido clorídrico e diluir para 500 ml com água.

Tampão borato pH 9,0

Preparação – Dissolver 12,37 g de ácido bórico e 14,91 g de cloreto de potássio em

água e completar o volume para 1000 ml com o mesmo solvente. Transferir 50 ml

da solução obtida para balão volumétrico de 200 ml, adicionar 20 ml de hidróxido de

sódio 0,2 M e 120 ml de água. Ajustar o pH em 9,0 com hidróxido de sódio SR ou

ácido clorídrico SR e completar o volume com água.

Tampão tris 0,05 M pH 9,0

Preparação – Transferir 6,05 g de trometamina para balão volumétrico de 1000 mL.

Dissolver em água e completar o volume com o mesmo solvente. Ajustar o pH em 9,0

± 0,05 utilizando ácido fosfórico. Dissolver 10 g de laurilsulfato de sódio em cerca de

600 ml do tampão. Misturar a solução obtida com o restante do tampão.

Tampão borato pH 9,6

Preparação – Transferir 3,093 g de ácido bórico e 3,728 g de cloreto de potássio para

balão volumétrico de 1000 ml, adicionar 250 ml de água e agitar até dissolução.

Acrescentar 182 ml de hidróxido de sódio 0,2 M e completar o volume com água.

Ajustar o pH se necessário.

Tampão carbonato-bicarbonato de sódio pH 9,6

Preparação – Dissolver 0,75 g de carbonato de sódio e 1,5 g de bicarbonato de sódio

em 500 ml de água. Distribuir em recipientes com 50 ml cada. Autoclavar a 121 °C,

pressão de 1 atm, por 20 minutos. Estocar a 4 °C.

Tampão cloreto de amônio pH 10,0

Preparação – Dissolver 5,4 g de cloreto de amônio em 70 ml de hidróxido de amônio

5 M e diluir com água a 100 ml.

Tampão cloreto de amônio pH 10,7

Preparação – Dissolver 67,5 g de cloreto de amônio em água, adicionar 570 ml de

solução concentrada de amônia e diluir para 1000 ml com água. Ajustar o pH se

necessário.

Tampão fosfato-laurilsulfato de sódio pH 11,0

Preparação – Dissolver em água 16,35 g de fosfato de sódio monobásico, 7,05 g de

hidróxido de sódio e 3 g de laurilsulfato de sódio e diluir com água para 1000 ml.

Ajustar o pH se necessário.

Tampão ácido acético-acetato de amônio

Preparação – Dissolver 77,1 g de acetato de amônio em água, adicionar 57,0 ml de

ácido acético glacial e completar com água a 1000 ml. Ajustar o pH se necessário.

Tampão de eletroforese DSS-EGPA

Preparação – Dissolver 151,4 g de trometamina, 721 g de glicina e 50 g laurilsulfato

de sódio em água e completar 5000 mL com o mesmo solvente. Diluir a 1:10 com

água, imediatamente antes do uso. O pH da solução diluída deve estar

compreendido entre 8,1 e 8,8.

Tampão concentrado para amostras DSS-EGPA.

Preparação – Dissolver 1,89 g de trometamina, 5 g de laurilsulfato de sódio e 50 mg

de azul de bromofenol em água; juntar 25 ml de glicerina e completar para 100 ml

com água. Ajustar o pH para 6,8 com ácido clorídrico e completar para 125 ml com

água.

Tampão concentrado para amostras DSS-EGPA em condições redutoras

Preparação – Dissolver 3,78 g de trometamina, 10 g de laurilsulfato de sódio, 100 mg

de azul de bromofenol e 50 ml de glicerina em 200 ml de água. Juntar 25 ml de 2-

mercaptoetanol. Ajustar o pH para 6,8 com ácido clorídrico e completar para 250 ml

com água. Em vez do 2-mercaptoetanol, pode ser usado o ditiotreitol como agente

redutor. Nesse caso, proceda como se indica: dissolva 3,78 g de trometamina, 10 g

de laurilsulfato de sódio, 100 e completar para 250 ml com água. Imediatamente

antes do emprego, adicionar o ditiotreitol, de modo a obter uma concentração final

de 0,1 M.

Tampão fosfato-salina (PBS)

Preparação – Dissolver, com agitação, 24 g de cloreto de sódio, 0,6 g de cloreto de

potássio, 4,3 g de fosfato de sódio dibásico dodeca-hidratado e 0,6 g de fosfato de

potássio monobásico em 4 L de água. Autoclavar a 121 °C, pressão de 1 atm, por

20 minutos. Estocar a 4 °C.

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