CONTROLE DE QUALIDADE DE

MATÉRIAS-PRIMAS

MÉTODOS DE
POTÊNCIA
Disciplina: Tecnologia Farmacêutica e Controle de
Qualidade
Universidade Nilton Lins
Prof. Me. Carlos Klinger Rodrigues Serrão
MÉTODOS DE POTÊNCIA
Volumétricos
- Neutralização
Clássicos - Precipitação
- Complexação
Identificação
- Oxirredução

Métodos físico- Gravimétricos

Pureza
químicos

Potência
UV-Vis
Instrumentais HPLC
Eletroanalíticos
MÉTODOS DE POTÊNCIA
São ensaios que visam a determinação quantitativa, ou seja, a concentração
do analito no medicamento ou matéria-prima. Chamados também de ensaios
de doseamento.

Parâmetros analíticos Escolha do método

importantes:

Exatidão, precisão e Tipo de amostra Custo-benefício

especificidade
MÉTODOS CLÁSSICOS DE POTÊNCIA
VOLUMÉTRICOS E GRAVIMÉTRICOS
Baseados no desenvolvimento de reações químicas, seguida da determinação
quantitativa do produto formado.

Volumetria
Determinação quantitativa do analito pela
reação com uma solução padronizada
Gravimetria
Determinação quantitativa do analito pela
reação com um reagente específico,
formação de um precipitado, separação e
determinação da massa do produto.
MÉTODOS CLÁSSICOS VOLUMÉTRICOS
Método analítico clássico empregado para a quantificação de um analito
mediante adição de outro reagente em concentração conhecida.

Reação analito-reagente Ponto final

Deve ser estequiométrica, É observado pela variação de
reprodutível, rápida e sem cor de um indicador ou da
reações laterais. resposta de um instrumento

Ponto de equivalência Volume gasto

momento da titulação onde Quantidade de reagente
a quantidade de reagente necessária para consumir o
é exatamente equivalente analito. É usado para calcular a
à quantidade de analito concentração do analito.
MÉTODOS CLÁSSICOS VOLUMÉTRICOS
A volumetria também é chamada de titrimetria ou titulometria. É uma técnica
simples, fácil e de baixo custo, porém apresenta limitações como baixa
especificidade e seletividade e geração de resíduos.

Solução titulante
Solução com concentração
rigorosamente determinada
(SV) por padrão primário, que
se coloca dentro da bureta.

Solução titulada
Solução com concentração
desconhecida, mas de volume
rigorosamente medido, que se transfere
para dentro de um erlenmeyer.
PADRONIZAÇÃO DAS SOLUÇÕES
A padronização é o processo no qual a solução titulante preparada
volumetricamente tem sua concentração exatamente quantificada ao ser
titulada com uma solução de padrão primário.

Padrão primário Características do padrão

É uma substância purificada que
serve como material de referência.
A precisão do método é
criticamente dependente das
propriedades desse composto.
Ex.: Biftalato de potássio
primário
Ter elevada pureza;
Ausência de água de cristalização
e baixa higroscopicidade.
Estabilidade a temperatura de
secagem e ar atmosférico
Massa molecular grande
Baixo custo
DETECÇÃO DO PONTO DE EQUIVALÊNCIA
Colorimétrica Potenciométrica
A mudança de coloração Mede o ponto de equivalência pela variação do
do indicador revela o potencial elétrico (na ausência de corrente) entre
ponto final da titulação os eletrodos indicador (seletivo para H3O+ em
solução) e o de referência (constante e
insensível à solução) numa titulação ácido-base.
CLASSIFICAÇÃO DAS VOLUMETRIAS

Neutralização Complexação
Reação entre ácido e Formação de um complexo
base, com formação estável pela reação entre um íon
de sal e água. metálico e um agente ligante.

Precipitação Oxirredução
O produto da reação é Envolve transferência de
um sólido insolúvel. elétrons, provocando oxidação e
redução entre reagente e analito.
VOLUMETRIA DE NEUTRALIZAÇÃO
VOLUMETRIA DE NEUTRALIZAÇÃO
Quando o analito é um ácido ou uma base FORTE, a cinética de reação é
rápida. O analito pode ser titulado diretamente com a solução padronizada e
ser feita em meio aquoso.
VOLUMETRIA DE NEUTRALIZAÇÃO
Quando o analito é um ácido ou uma base FRACOS, a cinética de reação
pode não ser adequada (a água do meio pode ter característica aceptora ou
doadora de prótons mais forte que o analito (H2O + H+ H3O+).
Titulação em meio não aquoso Titulação indireta
Quando o analito é um ácido fraco O analito é quantificado de forma indireta
pode ser usada dimetilformamida,
quando o analito é uma base fraca
pode ser usado ácido acético glacial.
MÉTODOS DE DETECÇÃO DO P. E.
Método potenciométrico
Durante a titulação, introduz-se um
eletrodo de pH no titulado, o que
permite medir o pH ao longo da
titulação e traçar a curva de titulação.
Método colorimétrico
Adiciona-se ao titulado uma substância
indicadora que muda de cor com a
variação do pH da solução.
INDICADORES ÁCIDO-BASE

Substância de caráter ácido ou

básico fraco, que exibe colorações
diferentes em pH ácido e básico,
de acordo com a sua forma
(ionizada/não-ionizada).

A zona de transição do indicador

deve estar contida na zona de
variação brusca do pH e conter o
ponto de equivalência.
VOLUMETRIA DE COMPLEXAÇÃO
A titulometria com formação de complexos baseia-se em reações que
envolvem um íon metálico (M+n) e um agente ligante (EDTA é o mais
empregado = Y-4) com formação de um complexo suficientemente estável.
VOLUMETRIA DE OXIRREDUÇÃO
A titulometria de oxirredução envolve reações em que ocorre transferência
de elétrons. A iodometria é a mais empregada nas análises farmacêuticas.
O iodo é um oxidante moderado capaz de oxidar quantitativamente
apenas substâncias fortemente redutoras.
APLICAÇÕES DAS VOLUMETRIAS
DIPIRONA SÓDICA
Pesar, com exatidão, 0,35 g da amostra e solubilizar em 50
mL de água. Adicionar 3 mL de ácido acético 6% (v/v) e
titular com iodo 0,05 M SV em temperatura abaixo de 20
°C, utilizando amido SI. Realizar ensaio em branco e fazer
as correções necessárias. Cada mL de iodo 0,05 M SV
equivale a 16,67 mg de C13H16N3NaO4S ou a 17,57 mg de
C13H16N3NaO4S.H2O
F. BRAS. V. 2; 2019; EF162-00
ÁCIDO ACETILSALICÍLICO
Pesar, com exatidão, cerca de 1 g de amostra, transferir para
erlenmeyer de 250 mL com tampa e dissolver em 10 mL de
álcool etílico. Adicionar 50 mL de hidróxido de sódio 0,5 M
SV. Deixar em repouso por uma hora. Adicionar 0,2 mL de
fenolftaleína SI como indicador e titular com ácido
clorídrico 0,5 M SV. Realizar ensaio em branco e efetuar as
correções necessárias. Cada mL de hidróxido de sódio 0,5 M
SV equivale a 45,040 mg de C9H8O4.
F. BRAS. V. 2; 2019; IF010-00
MÉTODOS DE POTÊNCIA
Volumétricos
- Neutralização
Clássicos - Precipitação
- Complexação
Identificação
- Oxirredução

Métodos físico- Gravimétricos

Pureza
químicos

Potência
UV-Vis
Instrumentais HPLC
Eletroanalíticos
MÉTODOS ESPECTROSCÓPICOS
A espectrofotometria faz parte da classe dos métodos analíticos que se
baseiam na interação da matéria com a energia radiante
ESPECTRO ELETROMAGNÉTICO
Ultravioleta (UVC: 200-280 nm,
UVB: 280-320 nm e UVA: 320-400
nm); Detectada por reações
químicas.

Luz visível (400-760 nm)

Detectada por sistemas ópticos.

Radiação Infravermelha (IVA: 760-

1440 nm e IVB: 1440 - 3000 nm)
Sentida na forma de calor.
RADIAÇÃO UV-VISÍVEL
No espectro UV-Visível podem ocorrer determinados eventos moleculares,
provocados pela radiação, denominados transições eletrônicas, que
ocorrem em átomos e moléculas devido a absorção ou emissão de
radiação eletromagnética.

A transição eletrônica
ocorre quando o átomo
recebe energia de um
fóton. Os elétrons
recebem e passam para
um nível energético maior.

Ao retornar ao nível
energético inicial, o elétron
emite fóton de mesmo
comprimento de onda.
CROMÓFOROS
Cromóforos são grupos funcionais orgânicos e inorgânicos insaturados
que absorvem na região do UV ou espectro visível.

Chudakov et. al. Physiological reviews. v.90, n. 3, 2010, 1103-1163.

ESPECTROFOTÔMETRO
O espectrofotômetro é um instrumento de análise capaz de medir e
comparar a quantidade de luz absorvida, transmitida ou refletida por uma
determinada amostra.
ESPECTROFOTÔMETRO

Cubeta 2 faces escuras Cubeta em Quartzo

Cubeta em vidro Óptico Cubeta descartável

https://www.youtube.com/watch?v=R4ZT3g2-Ryg
PRINCÍPIO DA ESPECTROFOTOMETRIA
Concentração de Concentração de Mesma concentração
soluto menor soluto maior anterior

Luz Luz Luz

I0 I1 I0 I2 I0 I3

A A luz é transmitida em B é B A luz é transmitida em C é C

menor que em A, pois a amostra menor que em B, pois o
mais concentrada absorveu ela caminho percorrido é maior

Comparação da intensidade (I) da luz transmitida: I3 < I2 < I1

TRANSMITÂNCIA
É a intensidade de luz que saiu, que foi transmitida, sobre a quantidade de
luz que foi incidida.
A opacidade do
T1=
I1 analito ou do tubo
I0 influencia na luz que
I1 é transmitida
Luz T2=
I2
I2 I0
I0

I3
Luz se choca com o líquido,
perde luminosidade devido a
absorção e depois sai
I3
T3 =
I0
De acordo com a luz
transmitida, é possível
A transmitância (T) é a razão
da intensidade (I) da luz saber exatamente o
inicial (I0) e da intensidade quanto ficou na solução.
da luz que passou.
ABSORBÂNCIA
Representa o quanto a substância absorveu a luz.

A absorbância (A) quantifica o que ficou retido na

I1 solução (é o contrário da transmitância)
T1=
I0

A T A T
I2
Luz T2=
I0
I0 A absorbância (A) pode ser expressa como:
I3
T3 =
I0 A = - logT

A absorbância é calculada Simulador de espectrofotometria

de acordo com a
transmitância. https://phet.colorado.edu/sims/html/beers-law-
lab/latest/beers-law-lab_pt_BR.html
LEI DE LAMBERT-BEER
A absorbância (A) é proporcional ao comprimento do caminho da luz dentro
da solução (L) e também proporcional a concentração do analito (C).

A∝LxC
Pode também ser representado
da seguinte forma:
Absorbância
0,1 e 0,3 são
concentrações conhecidas,
que tiveram valores de
absorbância 0,25 e 0,5.
0,5

0,4
Se a sua amostra teve
A= εxlxC absorvância de 0,4, é
possível dizer qual é a sua
0,25 concentração.

ε = Constante que depende do analito,

da concentração, da temperatura

0,1 0,2 (Concentração (em mols)

0,3
EXEMPLO
Elaborar curva de calibração para doseamento do teor de proteínas totais
(expressa em albumina).

Absorbância Concentração de Albumina Curva de Calibração

7,00

0,061 1% 6,00
y = 19,949x - 0,1351
5,00 R² = 0,997
0,099 2%

Concenração (%)
4,00

0,163 3% 3,00

2,00
0,254 5%
1,00

0,00
0,309 6% 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,35
Absorbância

Maior concentração do Equação de uma reta: y = ax + b

R² é coeficiente de determinação. Quanto mais próximo de 1 melhor.
analito, maior absorbância
EXEMPLO
A fórmula obtida pela aproximação dos pontos de absorbâncias foi:
y = 19,949x - 0,1351
Essa é a equação da reta obtida, que pode ser usada para determinar a
concentração de uma amostra desconhecida, desde que no intervalo da curva.

Uma amostra apresentou Uma amostra apresentou

absorbância de 0,141. Qual a absorbância de 0,211. Qual a
sua concentração? sua concentração?

y = 19,949 * 0,141 - 0,1351 y = 19,949 * 0,211 - 0,1351

y = 2,67 % de proteínas totais y = 3,97 % de proteínas totais

ESPECTROFOTÔMETRO UV-VIS
O espectrofotômetro para o espectro UV-Vis tem uma vasta aplicação, não
somente como ferramenta para o controle de qualidade de medicamentos,
mas para outras áreas como análise de alimentos, produtos biológicos, etc.
EXEMPLO DE ESPECTRO UV-VIS
RADIAÇÃO IV
No espectro do Infravermelho (IV) ocorrem as vibrações moleculares, outro
aspecto a ser considerado além das transições eletrônicas (que ocorrem
no UV-Vis). O espectro IV corresponde a 760 nm a 3000 nm.

As oscilações nos átomos Os átomos das moléculas nunca estão

provocam emissão da radiação, imóveis. Eles apresentam grau de liberdade
que é percebida na forma de calor. que corresponde aos modos vibracionais.
ESPECTROSCOPIA IV
A radiação IV pode interferir nas vibrações das ligações covalentes das
moléculas e isso pode ser mensurado. A espectroscopia IV se baseia na
medida da energia absorvida nas transições vibracionais de uma dada amostra
ESPECTROSCOPIA IV
Estiramento O-H e N-H (acima de
3000 cm-1), estiramento C-H dos
anéis aromáticos (3000-3100 cm-1),
informações sobre ligações C-H
(próximo a 1500 cm-1),

O espectro de IV é a
impressão digital da
Espectro de IV de cloridrato de propranolol molécula.

Fonte: Zeni, 2005. Dissertação de Mestrado. https://repositorio.ufsm.br/bitstream/handle/1/10478/diego%20zeni.pdf

ESPECTROSCOPIA IV
O objetivo da espectroscopia IV é a determinação dos grupos funcionais
de um material. Cada grupo absorve em uma frequência característica de
radiação na região IV.

Utilização
- Determinação dos grupos funcionais
- Identificação de compostos ou investigar
a composição de uma amostra
- Elucidação estrutural
 CONTROLE DE QUALIDADE DE
MATÉRIAS-PRIMAS

MÉTODOS DE
POTÊNCIA
Disciplina: Tecnologia Farmacêutica e Controle de
Qualidade
Universidade Nilton Lins
Prof. Me. Carlos Klinger Rodrigues Serrão