Nomenclatura citogenética

Cariótipo - Conjunto de cromossomos de uma célula não organizada.

Cariograma - Conjunto de cromossomo de uma espécie organizado.

Idiograma - é uma representação gráfica que demonstra o tamanho dos cromossomos de

um determinado cariótipo.

Cariótipo -
Conjunto de cromossomos contidos nas células de uma determinada espécie, organizados
em ordem decrescente de tamanho.

46 cromossomos de células diplóides (2n)

Para poder determinar e visualizar o cariótipo é necessário a realização de uma cultura de

celular onde se estimulará e interromperá o processo de divisão celular; para isto se
utilizará substâncias mitogênicas apropriadas como base.

Fitohemaglutina - excelente atividade mitogênica (estimuladora da divisão) com aglutinação

dos eritrócitos.
Colchicina - inibe as proteínas do fuso mitótico parando a divisão celular na metáfase.

meio de cultura
Diante da cultura efetivada realiza-se técnica de squash, a qual consiste em gotejar o
material cultivado sobre uma lâmpada de vidro (com um breve afastamento para ação da
gravidade).
 no microscópico observa-se a metáfase - mais apropriada para avaliação. Fotógrafa-se,
amplia-se e realiza-se o cariótipo simples.

Classificação universal de Denver

Histórico
Denver - 1960
- Cromossomos mitóticos humanos.
- Divisão: 7 grupos de acordo com tamanho e morfologia (ex:. Grande e
Metacêntrico).
Londres - 1963
- Denominação de A - G para os 7 grupos.
- Detalhamento da descrição morfológica de cada grupo.
Chicago - 1966
- Fórmula cariotípica começou a expressar a simbologia do cariótipo.
46 XX; 46 XY; 47 XY +21.
- Simbologias para cariótipos normais e anormais em coloração convencional.

Paris - 1971
- Sistema internacional para nomenclatura (ISCN).
- Braço curto (p) petit e Braço longo (q) queue.
- Nos braços irão ter as regiões.
- As regiões são divididas em bandas.

1q21
Isso quer dizer que na 1° banda da 2° região do Braço curto do cromossomo número 6 se
encontra tal gene ou grupo de genes.

Em alguns casos tem até sub banda

14q32.3
Isso quer dizer que na 3° sub banda da 2° banda da 3° região do Braço curto do
cromossomo 14 se encontra o gene ou grupos de genes.

Questões com a palavras chaves = regiões, bandas e sub bandas.

COMO CARIÓTIPO HUMANO É ORGANIZADO

- Tamanho.
- Posição do centrômero.
- Padrão de bandas.
- Pares homólogos.
- Ordem decrescente de tamanho.

Grupos Morfologia Pares

A Grandes - Metacêntricos ou 1a3

submetacêntricos

B Grandes - submetacêntricos 4e5

 C Médios - submetacêntricos 6 a 12 - X

D Médios - acrocêntricos 13 a 15

E Pequenos - Metacêntricos 16 a 18
ou submetacêntricos

F Pequenos - Metacêntricos 19 a 20

G Muitos pequenos - 21 a 22 - Y
acrocêntricos

QUAIS AS INDICAÇÕES PARA REALIZAR O CARIÓTIPO

- Aborto recorrente.
- Deficiência mental sem causa conhecida.
- Gestação em mulheres com idade avançada.
- Histórico familiar de síndromes.
- Natimortos ou morte neonatal sem causa conhecida.
- Problemas de fertilidade.
- Problemas d e crescimento e desenvolvimento.

A COLETA DO MATERIAL PARA DETERMINAÇÃO DO CARIÓTIPO

Coleta de sangue venoso periférico *Análise citogenética: células do sangue, líquido
amniótico, vilosidades coriónicas, fibroblastos, células tumorais, medula óssea.
Cultura de leucócitos (microcultura).
Pouco invasivo.
Colocam-se linfócitos em meio de cultura específico para células eucarioticas
humanas com fitohemaglutina (mitótico que induz a divisão celular). Mantido por 72h
a 37°C.
Adiciona-se colchicina que impede a formação do fuso (divisão da célula).
Coloca-se a cultura em solução hipotônica para inchar as células.
Fixa-se o material em lâmina em solução de metanol e ácido acético cora-se.

Meio de cultura
Estimular a proliferação, ou seja divisão.
Manter as células nutridas.

RPMI 1640 -
FITOHEMAGLUTINA -
SORO FETAL BOVINO -
PENICILINA -
ESTREPTOMICINA -
L-GLUTAMINA -
COLCHICINA -
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Os cromossomos não se apresentam uniforme ao longo de todo o seu comprimento, uma vez que
possuem uma contrição primária, o centrômero, que divide o cromossomo em dois braços (braço
curto – p; braço longo – q) e podem apresentar constrições secundárias, como as regiões
organizadoras do nucléolo.
Além dessas diferenças, cada cromossomo apresenta um padrão característico de bandas. Por meio
de técnicas de coloração especial, que coram seletivamente o DNA, cada par cromossômico é
individualmente identificado; isto ocorre por apenas um breve período, durante a mitose, na
metáfase, quando estão condensados ao máximo e quando os genes são transcritos em baixos
níveis. As técnicas de bandeamento cromossômico "expandiram" os horizontes da citogenética, e a
primeira aplicação do bandeamento deu-se no pareamento cromossômico. Essas técnicas têm
possibilitado compreender melhor as alterações cromossômicas que se estabelecem em cada
genótipo (Guerra,1988). Neste trabalho foram abordados os seguintes tipos de bandeamento
cromossômico: bandas Q, bandas G, bandas R, bandas C, bandas T, bandas NOR, Bandeamento de
Alta Resolução, FISH, Troca de Cromátides-Irmãs.

Bandeamento cromossômico

As técnicas de coloração foram desenvolvidas na década de 1970 para produzir as bandas

cromossômicas características dos cariótipos modernos;

O bandeamento cromossômico ajudou muito na: detecção de deleções, duplicação e outras

anomalias estruturais, e facilita a identificação correta dos cromossomos.

Tipos de bandeamento:

Bandeamento Q: Realizado com quinacrina mostarda, foi o 1° método de coloração usado

para produzir padrões específicos de bandeamento. Esse método requer um microscópio
de fluorescência, uma vez que após esse tratamento os cromossomos passam a expressar
diferentes fluorescência em faixas.
Padrão de bandas brilhantes (AT) e opacas (CG).
Importante para identificar: deleções, inversões e duplicações em humanos.

Bandeamento G: Bandeamento Giemsa, para produzir as bandas G, o corante é aplicado

após as proteínas cromossômicas serem parcialmente digeridas por tripsina (padrão de
bandas igual ao Bandeamento Q) O padrão de visualização são bandas claras e escuras
Cromossomos primeiros são desprotegidos por ação da enzima tripsina.
Posteriormente corado com Giemsa.
Padrão de banda claras e escuras.
Escuras: porção do DNA rico em AT e poucos genes.
Claras : porção do DNA rico em CG e muitos ge es ativos.
Importante para identificar: deleções, inversões e duplicações em humanos.
Bandeamento R: Bandeamento reverso, requer tratamento por aquecimento e reverte o
padrão normal branco e preto que é visto nas bandas G e Q. Esse método é útil para a
coloração das extremidades distais dos cromossomos.
Cromossomos tratados com solução salina e aquecimento.
Isso promoverá uma desnaturação controlada.
Posterior são cobrados com Giemsa.
Resultado: bandas claras e bandas escuras inverso ao G.

Bandeamento C: Envolve a coloração da região centromérica de cada cromossomo e outras

regiões que contenham heterocromatina.

Coloração NOR: Identificação cromossômica mediante o uso de . Evidencia os satélites e

os pedículos dos cromossomos acrocêntricos.

Bandeamento de alta resolução: Esse tipo de bandeamento cora cromossomos preparados

num estágio inicial da mitose (prófase ou prometáfase) que estão ainda em uma condição
relativamente não-condensada. O número de bandas observáveis para todos os
cromossomos aumenta de 300 a 450 para até 800. Isso permite a detecção de anomalias
menos óbvias, que normalmente não são vistas no bandeamento convencional.