IMUNOLOGIA

PRÁTICA
 RESPOSTA IMUNOLÓGICA
Mecanismo pelo qual o organismo reconhece e
responde à substância que considera estranha.

As células da resposta imunológica são oriundas

da linhagem linfóide e linhagem mielóide (Agem
independentes).

A célula primordial linfóide, na presença

principalmente de IL3 e IL7 do estroma da medula
óssea, dá origem aos linfócitos.

Neutrófilos, monócitos, macrófagos, mastócitos,

basófilos, eosinófilos e plaquetas são
provenientes da linhagem mielóide, na presença
de IL-3, GM-CSF e G-CSF.

A maioria das células dendríticas tem origem

mielóide, entretanto, algumas destas células têm
progenitores linfóides
 RESPOSTA IMUNE
 Resposta imune 1ária:
Qdo se tem o 1° contato com o Ag, observamos um período de
latência que é variável *

 Resposta imune 2ária ou anamnéstica:

Qdo já estamos sensibilizados por um estímulo 1ário, há produção de
uma resposta acelerada e de nível aumentado.Atribuída ao que chamamos
“memória imunológica”.

* Depende da sp, idade, dose, natureza

do Ag e metodologia usada, para
detectar a R.I.
IMUNOGLOBULINAS OU ACs
A)Cadeia leve
B)Cadeia pesada
C)Pontes dissulfeto
1)Região variável
2)Região Constante
 PRÁTICA
DE
IMUNOLOGIA
 ELISA
(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)
 COMO PIPETAR?
Para coletar uma amostra:
-Ajustar o vol. desejado
-Pressione até atingir a 1ª parada
-Libere lentamente até voltar totalmente à posição inicial

Para liberar a amostra:

-Pressione até passar da primeira parada e
sentir a 2ª parada.
 Placa de ELISA
Incubador a seco e timer para duas
placas de Elisa modelo IT-2000 EL.
Não necessita água para aquecimento.
FLOCULAÇÃO
VDRL
(Veneral Disease Research Laboratory)
 TÉCNICA QUALITATIVA

Agitador de Kline

Em uma placa escavada pipetar:

Amostra ...................50 μL
Reagente Nº 1 ..........20 μL

Técnica:
- Agitar manualmente com movimentos circulares ou em um agitador por 4
minutos a 180 rpm.
- Examinar no microscópio no aumento 100 X.
Além do teste sem diluição é recomendado um teste
com uma diluição de 1:8 com NaCl 0,85% (para todos os
testes), a fim de evitar o efeito prozona (quando o título de anticorpos é muito
alto pode não ocorrer a aglutinação) .
 PROVA SEMI QUANTITATIVA

Cavidade Nº 1 2 3 4 5 6 1:2 1:4 1:8 ...

Diluição 1:2 1:4 1:8 1:16 1:32 1:64

-Pipetar em cada cavidade da lâmina escavada 50 μL de NaCl 0,85%.

-Na cavidade Nº 1, pipetar 50 μL da amostra a ser titulada, homogeneizar.
Transferir 50 μL da cavidade Nº 1 para a Nº 2 e assim sucessivamente até a
diluição desejada.
-Desprezar os 50 μL em excesso da última escavação.
-Em seguida adicionar à cada cavidade, 20 μL do Reagente Nº 1 (Ag). Agitar
manualmente com movimentos circulares ou em um agitador rotativo por 5
minutos a 180 rpm.
-Examinar ao microscópio no aumento 100 X, logo após a agitação. O título
corresponde à maior diluição da amostra em que ocorreu a floculação.
AGLUTINAÇÃO
Ag presente na superfície da cél naturalmente, ou seja, qdo faz parte
da estrutura da cél.
Parabéns à todas as mães do mundo.
O presente já ganhamos.
Nossos filhos.