FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS

COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO

PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

RELATÓRIO DE ATIVIDADES - BOLSISTA E VOLUNTÁRIO

Tipo de relatório: parcial ✘ final

1. Dados do(a) Orientador(a):

Nome completo do(a) orientador(a) responsável: THAYANA CRUZ DE SOUZA

R.G.: 21792585 C.P.F 96097663234
E-mail: thayanacruz@gmail.com
Área de graduação: Biológicas Curso de graduação: CIÊNCIAS BIOLÓGICAS
Maior titulação: Mestrado Acadêmico Nº celular: 92 984157606
Enquadramento funcional: Horista Matrícula Institucional: 3691002
Linhas de pesquisa (inserir até três): Biotecnologia, microbiologia

2. Dados do(a) Discente:

Nome completo do(a) discente: Clarice Magalhaes Queiroz

R.G.: 30556031 C.P.F 04280842221

E-mail: claricequeiroz22@gmail.comNº de matrícula: 201703151747
Unidade da Estácio: Constantino Nery
Curso em andamento do(a) discente: Enfermagem
Período/Semestre do Curso: 8º Previsão de conclusão do curso: 2021.2
Coeficiente acumulado atual (C.R.A.): 7,95

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

3. Dados do Projeto de Pesquisa:

Título do Projeto de Pesquisa: Ação antimicrobiana de extratos brutos produzidos sob fermentação submersa
por Aspergillus e Penicillium
Título do Plano de Trabalho do discente: Inserir título completo
Palavras-chaves (máximo 6, separar por vírgula): Clique ou toque aqui para inserir o texto.
Área do Projeto: Ciências da Saúde Relatório: Final
Data do início do Projeto: agosto de 2019
Instituições parceiras: Instituto Leonidas e Maria Deane
Resumo do Projeto (300 palavras):

O uso constante e muitas vezes inadequado de antibióticos, vem acarretando a

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

4. Objetivos (Geral e Específicos) do Projeto do(a) discente:

Objetivo Geral:
Avaliar o potencial antimicrobiano de extratos fúngicos frente a microrganismos patogênicos

Objetivos Específicos:

-
Selecionar e reativar 10 culturas fúngicas; Obter extratos brutos dos fungos selecionados;
.

Cronograma original de execução do plano de trabalho do(a) discente:

Título da Etapa: Reativação e Autenticação das espécies
-Data de início e Fim: 01/08/2019 a 31/10/2019
- Descrição da etapa: Os fungos serão solicitados da Coleção de Fungos da Amazônia CFAM. As culturas
serão reativadas em meios específicos para cada espécie, e autenticadas para avaliar a viabilidade das
cepas e obter as culturas estoques para os testes.

-Título da Etapa: Obtenção do extrato

-Data de início e Fim: 20/10/2019 a 27/12/2019
- Descrição da etapa: As culturas fúngicas serão submetidas a produção e obtenção dos extratos
brutos

- Título da Etapa: Determinação da atividade antimicrobiana pelo método de “cup plate” por difusão
em ágar
-Data de início e Fim: 01/11/2019 a 28/02/2020
- Descrição da etapa: Os extratos brutos das espécies de Aspergillus e Penicillium serão testados
frente a microrganismos patogênicos.

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

- Título da Etapa: Determinação da concentração inibitória mínima (CIM) pelo método de

microdiluição em caldo
-Data de início e Fim: 03/03/2020 a 29/05/2019
-Descrição da etapa: Os extratos que apresentarem ação antimicrobiana serão submetidos ao teste de
concentração mínima inibitória utilizando placa multipoços.

-Título da Etapa: Análise dos dados, elaboração e entrega dos relatórios

-Data de início e Fim: 01/10/2019 a 07/2020 MAM
-Descrição da etapa: Os dados serão analisados ao longo do desenvolvimento de todos os
experimentos. Atentando sempre para o prazo de entrega dos relatórios parcial e final.

5. Metodologia:

Local de estudo
Os procedimentos foram realizados no laboratório da faculdade Estácio do Amazonas e no
Laboratório de Micologia do Instituto Leonidas e Maria Deane/Fiocruz/AM.
Microrganismos
Para realização deste estudo, foram selecionados 10 fungos, sendo 05 do gênero Aspergillus e 05 do
gênero Penicillium. As culturas foram obtidas da Coleção de Fungos da Amazônia (CFAM/ILMD-
FIOCRUZ). A reativação foi feita em Ágar Sabouraund em placas de Petri (Ø=90mmx15mm). Os cultivos
foram mantidos a 28ºC por 7 dias (cultura estoque).

Autenticação das espécies

Para a autenticação e/ou identificação taxonômica das espécies, foram observadas as
características macromorfológicas (coloração, consistência, e diâmetro das colônias) e
micromorfológicas (estruturas somáticas e reprodutivas) conforme descrita por Raper e Fennel (1977).
Os cultivos foram feitos nos meios de cultura Ágar Czapek (CZ) Agar Extrato de Malte (MEA) Agar
Glicerol 25% Nitrato (G25N) Ágar Czapek Extrato de Levedura (CYA) e Ágar Czapek 20% Sacarose
(CY20S). Em cada placa foi feito o microcultivo e foram inoculados três pontos eqüidistantes para
obtenção da macrocolônia. Os cultivos foram incubados a 28 ⁰C durante sete dias. Esta etapa será
realizada no Instituto Leônidas e Maria Deane, como um serviço prestado pela Coleção de Fungos da
Amazônia.

Extração dos biocompostos

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

As culturas de Penicillium e Aspergillus foram cultivadas em Ágar Extrato de Levedura Czapeck (YES), a
28 oC, e após sete dias foi feita a extração a frio dos biocompostos em Acetato de Etila, em frascos de
vidro por sete dias, a 25 ºC. Ao término da maceração, a biomassa será separada do sobrenadante, e
este submetido à evaporação sob baixa pressão para posterior utilização nas análises antimicrobianas.

Preparação dos extratos

Os extratos fúngicos foram ressuspendidos em Dimetilsulfóxido (DMSO), a uma concentração de 1%
para os testes antimicrobianos.

Determinação da atividade antimicrobiana pelo método de “cup plate” por difusão em ágar
Os microrganismos testados foram cultivados em ágar Sabouraud, a 25 oC por 48 horas (Candida
albicans CFAM 1285) e em ágar Müeller-Hinton, a 37 oC por 24 horas (Staphylococcus aureus CBAM
324, Escherichia coli CBAM 002). Nesses cultivos foram preparados uma suspensão celular de
concentração semelhante à coluna no1 da escala de MacFarland. De cada suspensão, 100 µL foi
retirado para ser semeado na superfície ágar Sabouraud e ágar Müeller-Hinton, em placa de Petri (10
mm x 90 mm), formando uma camada uniforme. Nesses cultivos foram feitas perfurações de 8 mm de
diâmetro e nelas adicionadas 150 µL de cada extrato fúngico. As placas foram incubadas em estufa a
25oC e 37 oC por 24 e 48 horas, respectivamente. Como padrão foi utilizado Itraconazol e Rifampicina.
A atividade antimicrobiana foi avaliada medindo o halo de inibição. Todos os ensaios foram realizados
em triplicata.

7. Resultados obtidos e Breve Discussão:

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

Esses resultados são estimuladores, visto que a possibilidade de aprimorar pesquisas dentro do reino
fungico para a descoberta de novos medicamentos para o combate de bactérias patogênicas é muito
relevante. O sucesso de vários medicamentos de origem microbiana, como o antibiótico penicilina de
Penicillium sp.,o imunossupressor ciclosporina de Tolypocladium inflatum e Cylindrocarponlucidum, o
agente antifúngico griseofulvina do Fungo Penicillium griseofulvum, o inibidor da biossíntese de
colesterol lovastatina do fungo Aspergillus terreus, e β-lactama antibióticos de vários táxons de fungos,
mudou o foco da descoberta de drogas de plantas para Microorganismos (SELIM KA at al 2012).
Vários compostos com atividade antibiótica, que vão desde antiparasitários, antifúngicos e
antibióticos até anticâncer, já foram produzidos, isolados e caracterizados a partir de fungos. No Brasil
alguns grupos de pesquisa já conseguiram purificar e caracterizar quimicamente alguns compostos
com atividade antibacteriana de fungos endofíticos ou micorrízicos de diversos biomas, como na
Amazônia e no Cerrado, por exemplo. ( CLEMENTINO et al 2015)

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

8. O Cronograma proposto foi cumprido? ✘ Não Sim

Se não, justifique:
Devido as circunstâncias acarretadas pela pandemia, a única etapa pendente foi referente ao objetivo “Determina

9. Dificuldades e desafios encontrados:

Por ser o meu primeiro contato com a área de pesquisa, a minha maior dificuldade foi entender como se
funciona as etapas, construção dos processos, adaptação na entrega mensal dos relatórios e conciliar o
projeto com faculdade e estagio. No início, encontrar horários livres e compatíveis com o da orientadora para
seguir o cronograma conforme o planejado, também foi um desafio.

10. Atividades paralelas desenvolvidas pelo(a) discente:

Atividades de extensão

Se outra(s) atividade(s), especificar: Atividades de extensão no laboratório da Fiocruz

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]
 FACULDADE ESTÁCIO DO AMAZONAS
COORDENAÇÃO DE PESQUISA E EXTENSÃO
PROGRAMA INSTITUCIONAL DE BOLSAS DE
INICIAÇÃO CIENTÍFICA

11. Há anexos/apêndices neste relatório? ✘ Sim Não

Se sim, listar o nome dos anexos/apêndices aqui: Apêndice A

PARA SER RESPONDIDO PELO(A) DISCENTE:

12. Autoavaliação do(a) discente:

Este trabalho de iniciação cientifica me mostrou que a enfermagem não se limita apenas na área hospitalar ou
burocrático, que podemos também contribuir cientificamente na descoberta até mesmo de possíveis medicamentos.
Devido a correria da faculdade, estágios curriculares e extracurriculares, muitas vezes deixei a desejar no meu empenho
com o projeto. Acredito que por ser meu primeiro, não tinha muita noção da rotina da pesquisa. Mas no geral,
obtivemos os resultados esperados e todos os processos foram cumpridos.

PARA SER RESPONDIDO PELO(A) ORIENTADOR(A):

13. Parecer do(a) orientador(a):

A aluna foi super esforçada e estava disposta a aprender novas técnicas e metodologias para o desenvolvimento de sua
pesquisa. Ela é responsável e empenhada o que facilitou o desenvolvimento do projeto. Acredito que essa experiência
tenha acumulado bastante maturidade científica para a aluna. Além disso, a aluna sempre esteve em diálogo constante,
sempre prestando satisfações de seus experimentos, e conseguiu conciliar o projeto com seus demais compromissos
como estágio, aulas e atividades de extensão.

Clique ou toque aqui para inserir uma data.

_____________________________________ _____________________________________
Discente: Orientador(a):

Av. Constantino Nery, Nº 3693 – Chapada / CEP: 69050-001 – Manaus/AM

CNPJ: 03.754.112/0001-26 - www.estacio.br

[Formulário de Relatórios – Programa de Iniciação Científica e Tecnológica – Estácio Amazonas – documento v.04 de 26/03/2019 – Elaborado por: Tatiana Pires]