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TRABALHOS INTERNOS

Pesquisadores recorrem a pequenos robôs para combater a resistência aos antibióticos

Stephen Ornes,Escritor científico
Baixado de https://www.pnas.org pela UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA em 4 de outubro de 2023 a partir do endereço IP 200.135.76.132.

A resistência antimicrobiana continua a ser um problema urgente, mas novos medicamentos As nanomáquinas poderão algum dia oferecer uma
nova abordagem para o tratamento de infecções
são terrivelmente difíceis de encontrar, desenvolver e testar. E mesmo avanços bem-sucedidos
perigosas por MRSA, mostrada aqui em uma
são apenas uma solução temporária. “As bactérias desenvolveram resistência a todos os imagem de microscopia eletrônica de varredura
antibióticos tradicionais”, diz a microbiologista Ana Santos da Rice University em Houston, TX, e digitalmente colorida, na qual detritos celulares de
cor laranja cercam as bactérias esféricas de cor
da Fundación Instituto de Investigación Sanitaria Islas Baleares em Palma, Espanha.
mostarda. Crédito da imagem: Instituto Nacional de
“Precisamos tentar algo completamente diferente que eles ainda não conheçam na história e ao Alergia e Doenças Infecciosas.
qual não tenham sido expostos ao longo de sua evolução.”
Santos tem colaborado na Rice com o químico James Tour nessa perspectiva. Em vez de
procurar novos compostos antimicrobianos, o seu grupo utiliza o que poderia ser melhor
descrito como uma abordagem de força bruta. Os pesquisadores projetaram recentemente
pequenas máquinas moleculares giratórias, que viajam até o local de uma infecção e fazem
furos em patógenos infecciosos, destruindo as duras membranas externas. Sem a membrana
externa, as entranhas vulneráveis se espalham e a célula morre. Em testes de laboratório, as
máquinas moleculares podem perfurar uma grande variedade de agentes patogénicos,
actuando como uma espécie de antibiótico sintético que pode até matar eficazmente
populações bacterianas resistentes a antibióticos e persistentes, uma subpopulação de células
que se pensa promover a resistência (1).
Essas abordagens colaborativas entre microbiologistas e químicos oferecem uma forma
fundamentalmente nova de combater doenças. Enquanto os antibióticos adotam uma
abordagem biológica, as nanomáquinas oferecem uma abordagem decididamente mecânica. “É
realmente pegar uma ferramenta da área da química e aplicá-la à biologia”, diz Santos.
Este artigo é distribuído sobLicença Creative Commons
Experiências recentes de Santos e Tour – e de outros grupos – testaram nanomáquinas contra
Atribuição-NãoComercial-SemDerivações 4.0 (CC BY-NC-ND).
linhas celulares e em modelos animais de infecções resistentes a antimicrobianos. As primeiras
descobertas foram promissoras, sugerindo uma série de aplicações biomédicas. Se eles Publicado em 9 de fevereiro de 2023.

PNAS2023 vol. 120 Nº 7 e2300515120 https://doi.org/10.1073/pnas.2300515120 1 de 4

 Máquinas moleculares ativadas por luz (esquema de duas variantes;Certo) perfurar e destruir bactérias resistentes a antibióticos. Experimentos comE. coli (Esquerda;
imagem de microscópio eletrônico de transmissão) sugerem que as bactérias se degradam após exposição a brocas moleculares ativadas por luz. Créditos da imagem: (
Baixado de https://www.pnas.org pela UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA em 4 de outubro de 2023 a partir do endereço IP 200.135.76.132.

Esquerda) Matthew Meyer (Universidade Rice, Houston, TX). (Certo) Grupo de Pesquisa Turística (Rice University).

pode ser traduzido com sucesso para ambientes clínicos do mundo
real, no entanto, ainda precisa ser visto.
Pequenas soluções para um grande problema
Nanomáquinas, ou motores moleculares artificiais, referem-se a
dispositivos sintetizados que normalmente medem menos de um
micrômetro de tamanho e podem ser controlados para completar
uma tarefa. Ao longo da última década, os pesquisadores projetaram
engenhocas minúsculas que incorporam rotores, lançadeiras,
componentes semelhantes a músculos e outras peças móveis (2–4).
Químicos e engenheiros pioneiros sintetizaram até carros minúsculos,
elevadores e bombas feitos de um aglomerado de átomos. Algumas,
incluindo nanomáquinas desenvolvidas pela Tour at Rice, são movidas
a luz; outros obtêm energia de reações químicas ou energia elétrica.
Em 2005, Tour liderou o projeto do primeiro veículo do mundo em
nanoescala, uma maravilha em miniatura de duas rodas feita de uma
única molécula. Era um pouco mais largo que uma molécula de DNA.
Suas rodas giratórias eram feitas de fulerenos – 60 átomos de carbono
puro firmemente dispostos para formar uma bola oca – e grupos
orgânicos constituíam seu chassi e eixo (5). Em 2006, Tour modificou o
nano veículo para incorporar um motor baseado em um projeto do
químico orgânico Ben Feringa. Máquinas moleculares até renderam a
Feringa e outros o Prêmio Nobel de Química de 2016. Mas até agora,
estes mini bots têm sido uma tecnologia promissora sem uma
aplicação óbvia. Alguns acham que a resistência aos antibióticos pode
ser adequada.
Tour e muitos outros já começaram a explorar seu uso em
aplicações médicas. Em 2017, ele e os seus colegas manipularam as
máquinas para se fixarem em células vivas e, quando activadas pela
luz ultravioleta (UV), penetrarem na espessa bicamada lipídica no
exterior da membrana (6). Em experiências de laboratório, as
máquinas moleculares mataram eficazmente as células cancerígenas
de uma forma completamente diferente das terapias disponíveis.
“É um domínio totalmente novo no tratamento”, diz Tour. Usar
máquinas moleculares, diz ele, é como realizar uma cirurgia com
bisturi em nível celular: “Esta é uma nova modalidade em que
você tem uma ação mecânica em escala nanométrica”. Isso é
difícil imaginar como uma célula cancerígena poderia desenvolver defesas. “Um
tumor pode desenvolver resistência a um bisturi?” Tour pergunta.
Essa prova de conceito de 2017 chamou a atenção de Santos,
cujo trabalho se concentrou na resistência aos antibióticos. “Eu
pensei, isso é incrível; isso é algo que pode funcionar para
patógenos”, diz ela. “Eram mecanismos mecânicos de perfuração
que não existem na natureza.”
Foi um primeiro passo importante, mas havia um obstáculo:
Tour ativou as máquinas com luz UV de alta energia que, em
sistemas vivos, poderia danificar os tecidos saudáveis
circundantes. E seria difícil colocar uma fonte de luz UV no corpo
com a máquina. Mas quando Santos contactou Tour para saber
mais, descobriu que ele estava a trabalhar numa fonte de energia
menos destrutiva: a luz visível. Tour suspeitava que ajustando a
composição das máquinas, como adicionando átomos de
nitrogênio, eles poderiam criar dispositivos capazes de coletar
energia suficiente do espectro visível para matar células.
Santos, um microbiologista, passou anos investigando os danos
biológicos que a radiação UV infligia às bactérias, especialmente às
cepas patogênicas resistentes aos antibióticos. Então, quando ouviu
os planos de Tour para modificar as máquinas, ela imediatamente viu
uma maneira de combinar os interesses deles. Talvez, pensou ela, as
máquinas destruidoras de células pudessem ser aproveitadas contra
bactérias.
Bactérias vs. Máquinas
Os dois passaram o ano seguinte desvendando as complexidades das
células patogênicas. “Ana estava constantemente me ensinando como
eles se reproduzem, mudam e compartilham DNA rapidamente”, diz
ele. “São coisinhas realmente sofisticadas.” Os pesquisadores
modificaram seus projetos originais e começaram a fazer cálculos de
quanta energia seria necessária para perfurar as membranas
bacterianas. “Tivemos que modificar extensivamente o design da
molécula e depois tentar entender por que essa coisa estava
funcionando”, diz Tour.
Tour percebeu o quão grande era o desafio representado pelas células
bacterianas, em comparação com outras células que ele testou no

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 passado. “Felizmente, não tínhamos consciência de quão resistente é realmente a
parede celular”, diz ele.
Finalmente, em 2021, eles decidiram por uma série de designs de
nanomáquinas que, devido ao nitrogênio adicionado, provavelmente poderiam
girar rápido o suficiente para penetrar nas células quando ativadas pela luz
visível. Esta nova geração de máquinas funciona com luz a 405
“Combinamos princípios da nanotecnologia com
design antimicrobiano.”
- César de la Fuente-Nunez
nanômetros, a extremidade azul-violeta do espectro visível. E no seu último
relatório, publicado emAvanços da CiênciaEm junho passado (7), o grupo
descreveu o que aconteceu quando acionou máquinas moleculares em
uma variedade de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas. As bactérias
Gram-negativas têm paredes celulares finas rodeadas por uma membrana
espessa, enquanto as bactérias Gram-positivas têm uma parede celular
espessa e nenhuma membrana externa. Os assuntos de teste incluíram
cepas de bactérias Gram-negativasEscherichia colieAcinetobacter
baumannii, bem como resistentes à meticilinaStaphylococcus aureus(
Baixado de https://www.pnas.org pela UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA em 4 de outubro de 2023 a partir do endereço IP 200.135.76.132.
MRSA), bactérias Gram-positivas que vivem na pele e podem causar
infecções por estafilococos.
O experimento começou com 19 configurações de máquinas
moleculares que diferiam com base em onde os pesquisadores se
uniram em grupos moleculares (aminas, por exemplo, trouxeram
átomos de nitrogênio). Alguns tinham grupos adicionais nos
rotores; outros os tinham no “corpo” da máquina. Os
pesquisadores suspeitavam que os grupos adicionais ajudariam
as máquinas a coletar energia da luz visível. Mas eles precisavam
de experimentos para determinar exatamente onde adicionar
esses grupos.
Depois de testar os designs emE. coliculturas, os pesquisadores
reduziram o campo para seis. (Eles descobriram, por exemplo, que as
máquinas de rotação mais lenta não penetravam tão profundamente
na membrana bacteriana e, portanto, eram menos propensas a inibir
o crescimento deE. coli.) Nos testes expandidos em múltiplas cepas, as
máquinas moleculares de melhor desempenho mataram as células
bacterianas em apenas 2 minutos.
Quando os pesquisadores investigaram a ação usando
sequenciamento de RNA e microscopia avançada, descobriram que as
máquinas bem-sucedidas haviam rompido a membrana bacteriana o
suficiente para que o material dentro da célula fluísse para fora. Num
experimento de acompanhamento, eles descobriram que o ferimento
feito por máquinas menos potentes ainda poderia ser útil: quando
combinaram antibióticos comuns com essas máquinas moleculares,
foram capazes de matar até mesmo cepas teimosamente resistentes
em questão de minutos. Eles também descobriram que as máquinas
moleculares eliminaram com sucesso as células persistentes que
supostamente ajudam as bactérias a ganhar resistência.
Mesmo após exposições repetidas, as linhagens celulares tratadas
não apresentaram sinais de desenvolvimento de resistência ao
antibiótico sintético, diz Santos. A resistência ocorre quando genes
resistentes evoluem ou bactérias os adquirem de outras bactérias.
Santos não prevê que novos genes parem uma broca mecânica e
molecular que gira milhões de vezes por segundo.
Já testaram a abordagem em larvas da traça da cera, cujas
semelhanças com o sistema imunitário dos mamíferos as
tornam um modelo comum para doenças infecciosas. Os
pesquisadores infligiram queimaduras nas larvas e as
infectaram com um dos dois patógenos bacterianos,
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A.baumanniieS. aureus. Todas as larvas não tratadas morreram dentro de uma
semana de tratamento, enquanto o tratamento com nanomáquinas prolongou a
sobrevivência para além de uma semana para 25-60 por cento dos animais.
Na verdade, uma terapia melhor para o MRSA poderia ser uma vantagem
para o tratamento de vítimas de queimaduras. Cerca de três quartos de todos
as mortes de pacientes com queimaduras graves decorrem
de infecções bacterianas sistêmicas que começam na ferida
como MRSA ou alguma outra infecção; alguns estudos
estimam que metade de todas as vítimas de queimaduras em
unidades de cuidados intensivos hospitalares terá uma
infecção por MRSA (8). Porque as queimaduras estão
Na pele, diz Santos, as máquinas moleculares teriam bastante
luz visível disponível.
Mas Tour prevê ir mais fundo. “Logo abaixo da superfície da
pele é facilmente acessível com luz visível. Ou cavidade oral, cólon
e reto”, diz ele. “Existem muitas áreas onde você pode facilmente
obter luz sem precisar perfurar o corpo.”
Um domínio desafiador
Tour e Santos não são os únicos que veem promessas no tratamento
de infecções resistentes com máquinas moleculares. Na reunião da
Associação Americana para o Avanço da Ciência de fevereiro de 2022,
o vencedor de uma competição de pôsteres eletrônicos para
estudantes descreveu experimentos de laboratório que testaram
várias concentrações de máquinas moleculares de rotação rápida -
como as desenvolvidas no laboratório de Tour - em vírus grandes e
em durações variadas de exposição à luz visível (9). A concentração de
melhor desempenho reduziu a viabilidade viral em 97%, e a pesquisa
sugere que os motores moleculares poderão um dia ter como alvo
vírus e bactérias (9).
Um ponto forte dessas abordagens pode ser a sua precisão, de
acordo com trabalhos recentes. Os antibióticos são geralmente
administrados a todo o sistema, acelerando assim as pressões
seletivas que estimulam a resistência aos medicamentos. O uso
excessivo aumenta ainda mais as chances de resistência. Uma
abordagem de nanomáquinas evitaria as armadilhas do uso excessivo
de antibióticos, diz o microbiologista Cesar de la Fuente-Nunez, da
Universidade da Pensilvânia, na Filadélfia. “Ele pode mover-se através
da ferida e entregar a terapêutica diretamente ao local da infecção”,
diz de la Fuente. Juntamente com o químico Samuel Sánchez, do
Instituto de Bioengenharia da Catalunha, em Barcelona, Espanha, de
la Fuente está a utilizar nanomáquinas como uma espécie de
lançadeira de precisão, mas para feridas infectadas. “Combinamos
princípios da nanotecnologia com design antimicrobiano”, diz ele. Eles
demonstraram que as nanomáquinas podem transportar uma carga
antibiótica diretamente para um patógeno conhecido por ser
vulnerável (10).
Suas máquinas baseadas em sílica podem transportar uma carga
útil de um potente antibiótico derivado do veneno de vespa. A
máquina obtém energia a partir de uma reação enzimática
envolvendo a urease, que é disposta em um rastro líquido pelos
pesquisadores. Ele segue essa trilha até o local da infecção. (Na
prática, tal rastro poderia levar a máquina através da pele até uma
ferida infectada.) As máquinas incluíam bolas ocas de sílica, cheias de
antibiótico, que eram capazes de autopropulsão impulsionadas pela
atividade da urease. Os pesquisadores testaram seus projetos em
ratos com abscessos cutâneos infectados com
A.baumanniie descobriu que as pequenas máquinas poderiam
reduzir a carga bacteriana.
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 Embora a tecnologia se preste naturalmente a infecções cutâneas, poderia ser facilmente ingerido, prontamente digerido e eliminado com segurança
de la Fuente observa que resultados recentes sugerem que uma depois de fazer seu trabalho.
nanomáquina poderia, em princípio, fornecer outros tipos de carga Tour está agora testando os limites das máquinas moleculares
útil – até mesmo quimioterapia ou imunoterapia, por exemplo. Até alimentadas por luz infravermelha, que tem menos energia que a luz
agora, no entanto, o progresso limitou-se a testes em linhas celulares visível, mas pode ser mais fácil de transmitir. Ele também está investigando
e modelos animais. se máquinas moleculares poderiam ser usadas para matar células de
Para abrir caminho para aplicações práticas além da pele, os gordura – uma aplicação que, segundo ele, seria um “grande negócio”. No
investigadores terão de garantir, entre outras coisas, que as máquinas laboratório de de la Fuente, eles procuram maneiras de carregar outras
tenham um mecanismo de orientação preciso que lhes permita pequenas moléculas em seus minúsculos dispositivos. Ele também está de
penetrar mais profundamente no corpo sem danificar os tecidos vivos. olho em um modelo de tratamento da sepse sistêmica; a ideia é que as
Se fossem usados, por exemplo, para prevenir mortes por câncer – a máquinas moleculares transportariam antibióticos poderosos para a
grande maioria das quais surge de metástases ou células infecção que desencadeou a reação. Santos quer ampliar a testagem para
cancerígenas no corpo – os pesquisadores precisariam treinar os fungos patogênicos e até parasitas como os causadores da malária. Mas
dispositivos para reconhecer células cancerígenas e desenvolver uma ela continua intensamente focada na resistência aos antibióticos. Máquinas
fonte de energia que pudesse funcionar com segurança. na corrente moleculares de perfuração de patógenos ainda podem estar a anos de
sanguínea. O objetivo, seja para câncer, infecções ou outras utilidade clínica, ela reconhece, mas as abordagens convencionais estão
aplicações, diz de la Fuente, seria criar algo que falhando. Diz Santos: “Precisamos realmente pensar fora da caixa”.

1. J. Madhusoodanan, Como as bactérias persistentes evitam os antibióticos e prolongam as infecções.Processo. Nacional. Acad. Ciência. EUA119,e2215617119. (2019).
2. C. Chenge outros., Uma bomba molecular artificial.Nat. Nanotecnologia.10,547–553 (2015).
3. J. Chene outros., Função semelhante a um músculo artificial a partir da montagem supramolecular hierárquica de motores moleculares fotorresponsivos.Nat. Química.10,132–138 (2018).
Baixado de https://www.pnas.org pela UNIVERSIDADE FEDERAL DE SANTA CATARINA em 4 de outubro de 2023 a partir do endereço IP 200.135.76.132.

4. T. Kudernace outros., Movimento direcional acionado eletricamente de uma molécula de quatro rodas em uma superfície metálica.Natureza479,208–211 (2011).
5. Y. Shirai, AJ Osgood, Y. Zhao, KF Kelly, JM Tour, Controle direcional em nanocarros de molécula única acionados termicamente.Nano Lett.5,2330–2334 (2005).
6. V. García-Lópeze outros., Máquinas moleculares abrem membranas celulares.Natureza548,567–572 (2017).
7. AL Santose outros., As máquinas moleculares ativadas por luz são antibacterianos de amplo espectro de ação rápida que têm como alvo a membrana.Ciência. Av.8,eabm2055 (2022).
8. W. Norbury, DN Herndon, J. Tanksley, MG Jeschke, CC Finnerty, Infecção em queimaduras.Surg. Infectar. (Larchmt.)17,250–255 (2016).
9. M. Arthur (2022, 17 a 20 de fevereiro) Matando vírus (bacteriófagos) por nanomáquinas moleculares [poster eletrônico do aluno]. Associação Americana para o Avanço da Ciência, Filadélfia,
PA, Estados Unidos. https://aaas.confex.com/aaas/2022/meetingapp.cgi/Paper/30139.
10. X. Arqué,e outros., Tratamento autônomo de infecções bacterianasna Vivousando micro e nanomotores antimicrobianos.ACS Nano16,7547–7558 (2022).

4 de 4 https://doi.org/10.1073/pnas.2300515120 pnas.org