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[Laboratório Virtual - RT-PCR] Segundo o sumário da aula prática, em um contexto mais atual de sua
importância, pode-se dizer que, na pandemia de COVID-19, o RT-PCR em tempo real é um dos
métodos de melhor utilização e confiabilidade para detectar o RNA viral no SARSCoV-2.
De acordo com essa prática, assinale a alternativa CORRETA:
A A transcrição reversa utiliza a enzima Taq DNA polimerase como responsável por converter o
cDNA em RNA.
2 As regiões responsáveis por codificar ou regular o DNA são conservadas entre as espécies,
permitindo driblar um dos grandes desafios do Projeto Genoma Humano, ou seja, a interpretação dos
dados, já que grande parte dessa informação era não codificadora. Sobre as sequências codificadoras
e reguladoras de DNA, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- Uma estratégia utilizada para conhecer as sequências codificadoras do genoma humano é baseada
na comparação com outras espécies que sejam evolutivamente relacionadas aos seres humanos, como
os camundongos, por exemplo.
PORQUE
II- A partir da estratégia é possível definir quais regiões são não codificadoras entre as duas espécies,
indicando que essas regiões estiveram menos sujeitas a mutações ao longo do processo evolutivo.
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3 Existem diferentes técnicas de ionização que podem ser aplicadas aos peptídeos, sendo as
principais delas a ionização/dessorção a laser assistida por matriz (MALDI) e a ionização por eletro
spray (ESI). Sobre os processos de ionização utilizados nas análises de proteômica, assinale a
alternativa CORRETA:
A A ionização ESI utiliza cristais que são bombardeados por laser, sendo sublimados (convertidos
em fase gasosa) e ionizados durante o processo.
D A ionização por MALDI é considerada branda, sendo aplicável a moléculas sensíveis como
DNA e proteínas.
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[Laboratório Virtual - Cromatografia em coluna e em camada delgada] Para realizar a cromatografia,
inicialmente é necessário preparar a coluna cromatográfica. Esse preparo exige que alguns passos
sejam seguidos. De acordo com o método para preparar a coluna cromatográfica, ordene os itens a
seguir:
I- Colocar um algodão na bureta com o auxílio do bastão de vidro e acoplar o funil.
II- Adicionar a solução de hexano, armazenada na pisseta, no béquer contendo sílica em gel (béquer
1).
III- Com o auxílio do bastão de vidro, misture o hexano com a sílica em gel. Em seguida, transfira o
conteúdo do béquer 1 para a bureta. Depois, sedimente o adsorvente da proveta com os dedos.
( ) Primeira etapa.
( ) Segunda etapa.
( ) Terceira etapa.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A I - III - II.
B II - I - III.
C I - II - III.
D III - II - I.
( ) A MNase (nuclease microcócica), uma nuclease específica, capaz de clivar o DNA em pequenos
fragmentos, é modificada com a adição de uma proteína, a proteína A (pA) no sequenciamento CUT
& RUN.
( ) A MNase modificada com a pA forma regiões de interação entre a proteína e o DNA que podem
ser imunoprecipitadas, formando uma amostra rica de precipitados de regiões de interação da
proteína de interesse com o DNA.
( ) No sequenciamento ChIP, a proteína de interesse é reticulada ao DNA, ou seja, são formadas
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ligações covalentes entre a proteína e o DNA por meio da adição de anticorpos específicos para essa
proteína.
B V - F - V.
C V - V - F.
D F - F - V.
C Essa técnica é utilizada para detecção de grandes cromossomos somente, pois os pequenos
cromossomos não conseguem ser isolados nas bandas do gel.
D Essa técnica identifica a presença ou não de DNA na amostra, não sendo possível indicar sua
localização.
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A era da genômica iniciou-se através do Projeto Genoma Humano, através do desenvolvimento de
tecnologias que pudessem acelerar o processo. De acordo com o Projeto Genoma Humano,
classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:
( ) A técnica do shotgun hierárquico utilizou como vetor o BAC (cromossomo artificial de bactéria),
que permite a inserção de grandes fragmentos de DNA, sendo clonado para formação da biblioteca de
DNA.
( ) A técnica do shotgun hierárquico utilizou o vetor plasmidial, onde cromossomo artificial de
bactéria era fragmentado e inserido em vetores plasmidiais clonados com extremidades sequenciadas.
( ) A técnica do shotgun de genoma inteiro utilizou somente pequena parte do genoma completo de
um organismo para formar vetores plasmidiais clonados com extremidades sequenciadas, que
formavam os contigs.
Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:
A V - V - F.
B V - F - F.
C V - F - V.
D F - F - V.
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8 Conhecendo estes conceitos básicos e sabendo que o processo de recombinação gênica que
acontece na meiose é um processo ordenado em eucariotos, é possível inferir a frequência em que
essa recombinação ocorre para cada um dos genes e, assim, determinar sua posição relativa no
cromossomo. Sobre a recombinação cromossômica, avalie as asserções a seguir e a relação proposta
entre elas:
I- Genes heterozigotos não geram nova conformação de alelo, uma vez que ambos os alelos são
iguais.
PORQUE
II- Genes homozigotos apresentam dois genes que podem se apresentar como dominantes ou
recessivos.
9 A genômica estrutural é o estudo da estrutura propriamente dita do genoma, sendo seu principal
objetivo atrelado à possibilidade de manipulação de fragmentos do DNA ou de seus genes in loco.
Sobre a genômica estrutural, associe os itens, utilizando o código a seguir:
( ) A primeira etapa se baseia na ocorrência de um alelo que não esteja presente no mapa
cromossômico, em uma região com marcadores já mapeados. Dessa forma, pode-se definir em qual
cromossomo aquele novo alelo ocorre.
( ) A segunda etapa determina a posição dos genes dentro de cada cromossomo, fornecendo
informações mais precisas sobre esses gene e marcadores no genoma.
( ) A terceira etapa aplica diferentes técnicas determinando um mapa físico do genoma e ocorre o
sequenciamento.
B I - II - III.
C II - I - III.
D I - III - II.
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10 A genômica estrutural busca determinar qual é esse local e onde estão os marcadores associados
a cada um dos genes encontrados. Sobre os termos utilizados para denominar os locais de um
cromossomo, assinale a alternativa CORRETA:
A O termo locus se refere a uma das formas em que um gene pode ser encontrado em um
cromossomo.
C O termo homólogo se refere aos diferentes cromossomos, que apresentam genes heterógenos.
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