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GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:771462)

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Prova 58689505
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00

1 As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por
tempo indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:

I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.
III- Hibridização em colônia.

( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e
sequenciamento do genoma.
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente,
considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A II - I - III.

B I - III - II.

C I - II - III.

D III - II - I.

2 O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA permitem a manutenção e replicação do material

genético em grandes coleções mantidas em colônias de bactérias, nas quais um fragmento específico
de DNA ou um gene podem ser procurados. Sobre as bibliotecas de DNA e cDNA, avalie as
asserções a seguir e a relação proposta entre elas:

I- A bactéria E. coli é a principal célula hospedeira utilizada no processo de clonagem em vetores,

inclusive na construção de bibliotecas de DNA e cDNA, em que cada bactéria irá internalizar apenas
um vetor.

PORQUE

II- Assim que o vetor é inserido, em condições adequadas de diluição e meio de cultivo, em poucas
horas corre a formação de diversos clones dos fragmentos inseridos, sendo cada um encontrado em
uma colônia diferente de crescimento bacteriano.

Assinale a alternativa CORRETA:

A As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.
B As asserções I e II são proposições falsas.

C A asserção I é uma proposição falsa, e a II é uma proposição verdadeira.

D As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.

3 Com o desenvolvimento das técnicas de clonagem de DNA, tornou-se possível a construção de

bibliotecas de DNA e cDNA. Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa CORRETA:
A A biblioteca de cDNA contém éxons e íntrons, já que são clonados todos os fragmentos de
DNA, incluindo o não codificante.

B As bibliotecas de cDNA contêm somente os éxons de uma molécula de mRNA, que

posteriormente é convertido em cDNA pela técnica de transcrição reversa.

C Uma biblioteca de DNA contém somente os íntrons de uma molécula de DNA, sendo
extremamente específico para identificar o conteúdo expresso em uma célula ou tecido.

D As bibliotecas de mRNA são originadas a partir da fragmentação do DNA com enzimas de

restrição e, posteriormente, da clonagem do DNA.

4 O sequenciamento de DNA permite a identificação de qual nucleotídeo ocupa cada posição na

fita de uma molécula ou fragmento de DNA. As primeiras técnicas que permitiram sequenciar o DNA
começaram a ser desenvolvidas na década de 70, com o método desenvolvido por Sanger. Sobre o
método de Sanger, assinale a alternativa CORRETA:
A Os didesoxinucleotídeos são similares aos primers ou iniciadores, já que iniciam a reação em
diferentes terminações 3'.

B Os didesoxinucleotídeos são ineficazes para a técnicas de Sanger, sendo utilizados somente os

primers e diversas fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, com a mesma extremidade 5'.

C A técnica de Sanger, utiliza terminadores de sequência em réplicas de DNA de uma fita molde
diferenciada.
São utilizados iniciadores (primers), fitas de DNA réplicas da mesma fita molde, ou seja, com a
D mesma extremidade 5' e diferentes terminações 3', devido à inserção dos didesoxinucleotídeos,
que são nucleotídeos terminadores de cadeia (ddNTP: ddATP, ddTTP, ddCTP e ddGTP).

5 A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as

sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a
molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
A quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
B sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
C portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos,
 semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos
D de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo
adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.

6 Para detecção do DNA em bibliotecas de DNA, uma membrana é colocada em contato com as
colônias na placa logo após o crescimento das colônias bacterianas em placas de cultivo contendo
meio sólido. Algumas células irão se aderir à membrana, formando uma impressão das colônias
presentes na placa. Em seguida, as células aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar o DNA, que
permanece aderido à membrana. Por fim, a membrana é incubada com sondas de hibridização
marcadas, complementares à porção do gene de interesse, permitindo a visualização da posição dos
clones que contêm o fragmento de interesse. Sobre a técnica exposta, assinale a alternativa
CORRETA:
A Hibridização em colônia.

B Hibridização in situ.

C Northen-blot.

D Southern-blot.

7 O RNA é uma molécula muito semelhante ao DNA, originado a partir do processo de

transcrição, em que carrega informações contidas no DNA para fora do núcleo. Essas informações,
darão origem à síntese de proteínas, através do processo de tradução. Sobre o RNA, assinale a
alternativa CORRETA:
A O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pelos nucleotídeos adenina, timina, citosina e
guanina.

B O RNA é uma estrutura em dupla hélice, composta pela desoxirribose, nucleotídeos e fosfato.

C O RNA é composto por cinco nucleotídeos, adenina, uracila, timina, guanina e citosina.

D O RNA é uma estrutura em fita simples, composta pela pentose denominada como ribose; os
nucleotídeos adenina, uracila, citosina e guanina e fosfato.

8 A escolha do gel para a técnica de eletroforese deve-se dar através do tamanho da molécula a ser
isolada e do objetivo do isolamento. Com base nas matrizes de agarose e poliacrilamida para a
técnica de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:

I- A poliacrilamida pode separar fragmentos de DNA com até mesmo uma única base nitrogenada de
diferença.
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou seja, cada banda presente no gel, representa um
agrupamento de moléculas de tamanho semelhantes.
III- No gel de poliacrilamida, uma menor faixa de tamanho das moléculas pode se movimentar,
enquanto fragmentos maiores de DNA podem migrar facilmente no gel de agarose.

Assinale a alternativa CORRETA:

A Somente a sentença II está correta.

B Somente a sentença I está correta.

C As sentenças I, II e III estão corretas.

D Somente a sentença III está correta.

9 O processo de transcrição reversa, é uma das técnicas mais utilizadas na área de pesquisa de
expressão gênica. Essa técnica é conhecida como RT-PCR, ou transcrição reversa, seguida por PCR.
Com base no RT-PCR, analise as sentenças a seguir:

I- O RT-PCR avalia a expressão diferencial do mRNA, o qual será convertido em DNA

complementar (cDNA).
II- A enzima transcriptase reversa (RT) é responsável pela síntese de uma fita de DNA, utilizando
como molde uma fita simples de RNA.
III- A técnica de RT-PCR é realizada em 40 ciclos, para formação de uma quantidade adequada de
cDNA.

Assinale a alternativa CORRETA:

A As sentenças I e III estão corretas.

B Somente a sentença III está correta.

C As sentenças I e II estão corretas.

D Somente a sentença II está correta.

10 Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição
e clonagem em vetor. Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os
itens a seguir:

I- Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase.
II- Clivado do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de
DNA.
III- Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos.
IV- Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A I - IV - III - II.

B IV - II - I - III.

C I - III - II - IV.

D IV - II - III - I.
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