20/11/23, 21:36 Avaliação I - Individual

Prova Impressa
VOLTAR
GABARITO | Avaliação I - Individual (Cod.:883916)
A+ Alterar modo de visualização
Peso da Avaliação 1,50
Prova 74655859
Qtd. de Questões 10
Acertos/Erros 10/0
Nota 10,00

1 A terceira geração de métodos de sequenciamento de DNA, possibilitaram analisar as

sequências de nucleotídeos de uma única molécula de DNA, sem a necessidade de amplificar a
molécula. Sobre esses métodos, assinale a alternativa CORRETA:
É um método totalmente automatizado, também conhecido como Illumina, em que o DNA a ser
A sequenciado é fragmentado por nebulização e os fragmentos são acoplados a uma placa de vidro
por meio de primers adaptadores, formando uma biblioteca de DNA, que será submetida ao PCR.
A terceira geração de sequenciamento utiliza DNA fragmento que é transformado em fragmentos
B de DNA circular, os quais são replicados em chips com nano-poços. A cada novo nucleotídeo
adicionado à nova fita, ocorre a emissão de fluorescência e a detecção ocorre em tempo real.
Para os métodos de terceira geração, são utilizadas plataformas 454, que são esferas sólidas, nas
C quais são ligadas as sequências adaptadoras, com o DNA a ser sequenciado, formando uma
biblioteca de DNA.
É o mais recente avanço em biologia molecular, que permite o sequenciamento de DNA de forma
D portátil, capaz de sequenciar grandes moléculas de DNA em pequenos equipamentos,
semelhantes a pen drives. A plataforma MinION é a mais utilizada.

2 A técnica de eletroforese consiste na separação de moléculas de DNA, RNA ou proteínas em gel

de agarose ou poliacrilamida. Essa separação se dá de acordo com o tamanho da molécula. Com base
no processo de eletroforese em gel, analise as sentenças a seguir:

I- Uma corrente elétrica é transmitida através do gel do polo negativo ao polo positivo.
II- As moléculas de DNA são carregadas negativamente e são carregas por afinidade para o polo
positivo.
III- Moléculas menores tendem a migrar com maior dificuldade no gel. Já as moléculas maiores,
tendem a migrar mais facilmente.

Assinale a alternativa CORRETA:

A Somente a sentença III está correta.

B Somente a sentença II está correta.

C As sentenças I e III estão corretas.

D As sentenças I e II estão corretas.

about:blank 1/5
20/11/23, 21:36 Avaliação I - Individual

3 As endonucleases de restrição são produzidas naturalmente por diversas bactérias. De acordo

com essas enzimas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:

( ) As enzimas de restrição são utilizadas para fragmentar o DNA em regiões específicas, permitindo
a manipulação do DNA.
( ) Cada bactéria produz uma enzima de restrição específica, que pode ser isolada e purificada a
partir de colônias dessas bactérias.
( ) As enzimas de restrição não reconhecem sequências específicas, apresentando regiões de
clivagem aleatórias de 4 a 8 nucleotídeos.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A F - V - F.

B V - V - F.

C F - F - V.

D V - F - F.

4
[Laboratório Virtual - Hibridização] Segundo o roteiro de hibridização, o sucesso dessa prática
depende da capacidade do DNA de se anelar às sequências complementares após a desnaturação
(período em que a fita de DNA é simples). Dessa forma, o ponto de fusão do DNA, ou seja, o
momento em que ocorre a ruptura das pontes de hidrogênio e a abertura da dupla fita de DNA, varia
de um organismo para outro. O ponto de fusão do DNA também depende da quantidade de pares de
base G-C e A-T, sendo que, quanto mais pares G-C, maior o ponto de fusão do genoma. Isso ocorre
porque o par G-C é mais estável, apresentando três pontes de hidrogênio, enquanto o par A-T conta
apenas com duas. Após o anelamento da sonda com sua sequência-alvo complementar, o padrão de
hibridização é visto em microscópio de fluorescência. Além do ponto de fusão, outros fatores podem
interferir na hibridização da sonda de DNA. Sobre esses fatores, analise as opções a seguir:
I- Temperatura de fusão.
II- pH alto para produzir condições de hibridização.
III- Concentração de cátions monovalentes.
IV- Presença de solventes orgânicos.Assinale a alternativa CORRETA:
A Somente a opção III está correta.

B Somente a opção I está correta.

C As opções I, II, III e IV estão corretas.

D Somente a opção II está correta.

5 As bibliotecas de DNA e cDNA são essenciais para manter e replicar um fragmento clonado por
tempo indeterminado. Sobre essas técnicas, associe os itens, utilizando o código a seguir:

I- Biblioteca de cDNA.
II- Biblioteca de DNA.

about:blank 2/5
20/11/23, 21:36 Avaliação I - Individual

III- Hibridização em colônia.

( ) Técnica que detecta os fragmentos do DNA de interesse com sondas específicas em meio de
cultivo sólido.
( ) Clonagem de fragmentos aleatórios do DNA, permitindo a sua identificação, isolamento e
sequenciamento do genoma.
( ) Clonagem de mRNAs, em que cada célula/tecido pode originar uma biblioteca diferente,
considerando o padrão de expressão gênica específico, relacionado sempre a sua função.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A III - II - I.

B I - III - II.

C I - II - III.

D II - I - III.

6
[Laboratório Virtual - Extração e Purificação de DNA e RNA] Conforme o sumário da prática, os
ácidos nucleicos apresentam características estruturais específicas, que permitem que sejam isolados e
manipulados para diversos tipos de aplicações. A técnica de hibridização in situ, por exemplo, baseia-
se na complementaridade das fitas de DNA ou RNA, utilizando sondas fluorescentes para a detecção
da fita complementar em uma determinada amostra. Essa técnica permite o estudo da expressão
gênica. Outra técnica, que também tem o mesmo princípio e finalidade, é a reação em cadeia da
polimerase transcriptase reversa (RT-PCR), muito utilizada no diagnóstico de algumas infecções e
doenças. Considerando esses aspectos, o primeiro passo para a maioria das técnicas citadas é o
isolamento e a purificação das moléculas de DNA e RNA. O processo de extração do DNA pode ser
dividido em etapas.
Com relação às etapas visualizadas na aula prática, assinale a alternativa CORRETA:
A Na Etapa de Lavagem, são adicionados 210 µl de álcool 96%.

B A segunda etapa é denominada como Etapa de Ligação, em que é adicionado álcool 96% no
eppendorf, homogeneizado, e 640 µl são transferidos para o tubo spin.

C A primeira etapa é a Etapa de Ligação, em que adicionamos 250 µl de Proteinase K, 20 µl da

amostra e 20 µl do tampão de lise S.

D O principal composto adicionado na Etapa de Ligação é a Proteinase K.

7
"A PCR pode ser precedida por uma reação de transcrição reversa (RT) para a obtenção de cDNA a
partir de RNA (RT-PCR), representando, por exemplo, uma possibilidade de análise de expressão
gênica em células ou tecidos" (SANTOS, 2004, s.p.). Sobre os componentes essenciais para a
realização da técnica de PCR e RT-PCR, analise as sentenças a seguir:
I- Para o processo de PCR convencional, utiliza-se a fita molde de DNA, os nucleotídeos ou dNTPs,
os primers e a Taq DNA polimerase.
II- Para o processo de RT-PCR, é utilizada uma enzima denominada como termoestável, como a Taq
DNA polimerase.

about:blank 3/5
20/11/23, 21:36 Avaliação I - Individual

III- Para o processo de RT-PCR, utiliza-se a fita molde de mRNA, os nucleotídeos ou dNTPs, primers
oligodT e enzima transcriptase reversa.
Assinale a alternativa CORRETA:
Fonte: SANTOS, Carlos Ferreira dos et al. Transcrição reversa e reação em cadeia da polimerase:
princípios e aplicações em odontologia. J. Appl. Oral Sci., v. 12, n. 1, p.1-11, 2004.
A As sentenças II e III estão corretas.

B Somente a sentença I está correta.

C As sentenças I e III estão corretas.

D As sentenças I e II estão corretas.

8
A transcrição reversa é uma reação que ocorre pela ação da enzima transcriptase reversa ou RT. Essa
enzima é uma DNA polimerase dependente de RNA, ou seja, ela é capaz de sintetizar uma fita de
DNA utilizando como molde a fita simples de RNA. Sua descoberta se deu a partir da observação de
que, quando os retrovírus, cujo material genético é um RNA, infectam um hospedeiro, o RNA viral é
convertido em DNA. Sobre a RT-PCR, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas:
I- Para o processo de transcrição reversa são necessários Oligonucleotídeos sintéticos, os quatro
dNTPs, a amostra de RNA e os cofatores enzimáticos. Ao invés da Taq DNA polimerase, essa técnica
utiliza a enzima transcriptase reversa.
PORQUE
II- O objetivo final da técnica é originar o DNA complementar ou cDNA, que é formado por essa
enzima.
Assinale a alternativa CORRETA:
A A asserção I é uma proposição verdadeira, mas a II é uma proposição falsa.

B As asserções I e II são proposições verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.

C As asserções I e II são proposições falsas.

D As asserções I e II são proposições verdadeiras, mas a II não é uma justificativa da I.

9 O PCR produz uma série de cópias de um determinado fragmento de DNA ou cDNA de uma
maneira bastante rápida e eficiente. No entanto, de acordo com o seu objetivo de pesquisa, a PCR
qualitativa ou quantitativa se torna mais eficaz para fornecer os resultados esperados. De acordo com
essas duas técnicas, classifique V para as sentenças verdadeiras e F para as falsas:

( ) A PCR qualitativa indica a presença de um fragmento específico de DNA ou cDNA em uma

amostra, mas não indica quanto do gene está expresso na amostra.
( ) A qPCR é conhecida como PCR em tempo real (quantitativa) e fornece informações precisas
relativas à quantidade de expressão de um gene.
( ) A PCR qualitativa necessita de um termociclador específico capaz de quantificar a amplificação
dos fragmentos de DNA ao final de cada ciclo em tempo real.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

A V - F - F.

about:blank 4/5
20/11/23, 21:36 Avaliação I - Individual

B V - V - F.

C F - F - V.

D F - V - F.

10 Com o passar do tempo, as técnicas de sequenciamento ficaram mais sofisticadas e

automatizadas. Sobre o sequenciamento de segunda geração, analise as sentenças a seguir:

I- O Next Generation Sequencing (NGS) não utiliza nucleotídeos terminadores de cadeira, permitindo
a criação de plataformas mais eficientes e rápidas.
II- Os métodos de segunda geração compreendem o uso de plataformas portáteis com processamento
rápido e eficiente, em plataformas do tamanho de um pen drive.
III- Os métodos de segunda geração compreendem o pirosequenciamento, o sequenciamento por
síntese, sequenciamento por terminação de cadeia reversível, sequenciamento por hibridização e
ligação, dentre outros.

Assinale a alternativa CORRETA:

A Somente a sentença I está correta.

B As sentenças I e III estão corretas.

C As sentenças I e II estão corretas.

D Somente a sentença II está correta.

Imprimir

about:blank 5/5