¿Qué es la reacción en cadena de la polimerasa?

La reacción en cadena de la polimerasa es una reacción enzimática in vitro que amplifica millones
de veces una secuencia específica de ADN durante varios ciclos repetidos en los que la secuencia
blanco es copiada fielmente

¿Qué es la ADN polimerasa y cuantos tipos hay?

La ADN polimerasa es una enzima que se encarga de catalizar la polimerización de la nueva hebra
de ADN durante la replicación de esta molécula. Su función principal es emparejar los
desoxirribonucleótidos trifosfato con los de la cadena molde. También participa en la reparación
del ADN.

Esta enzima permite el emparejamiento correcto entre las bases de ADN de la cadena molde y la
nueva, siguiendo el esquema de A se aparea con T, y G con C.

Los organismos procariotas poseen tres ADN polimerasas principales, abreviadas comúnmente
como pol I, II y III.

La ADN polimerasa I participa en la replicación y en la reparación del ADN y posee actividad

exonucleasa en ambos sentidos

La II participa en la reparación del ADN y su actividad exonucleasa es en el sentido 3´-5´.

La III participa en la replicación y revisión del ADN, y al igual que la enzima anterior, presenta
actividad exonucleasa es en el sentido 3´-5´

Los eucariotas poseen cinco ADN polimerasas, denominadas con letras del alfabeto griego: α, β, γ,
δ y ε. Las variantes α, δ y ε son las más activas en el proceso de división celular

¿Cuál es el fundamento de la PCR?

Esta técnica se fundamenta en la propiedad natural de las ADN polimerasas para replicar hebras
de ADN, para lo cual se emplean ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas para separar las
hebras de ADN recién formadas entre sí tras cada fase de replicación y, a continuación, dejar que
las hebras de ADN vuelvan a unirse para poder duplicarlas nuevamente.
Def. 2. Para amplificar un segmento de ADN utilizando la RCP, primero se calienta la muestra para
la desnaturalización del ADN, es decir para que se separe en dos segmentos de una sola hebra de
ADN. Luego, una enzima llamada "polimerasa Taq" sintetiza - construye - dos nuevas hebras de
ADN, utilizando las hebras originales como plantillas. Este proceso resulta en la duplicación del
ADN original, en la que cada una de las nuevas moléculas contiene una hebra vieja y una hebra
nueva de ADN. Entonces, cada una de estas hebras puede usarse para crear dos copias nuevas, y
así sucesivamente.

Menciona al menos 3 aplicaciones de esta técnica

Una de sus aplicaciones más usadas es para cuantificar cambios muy pequeños en la expresión
génica mediante la detección de los niveles del ARNm procedente de células o tejidos.

La PCR se utiliza para amplificar genes asociados con trastornos genéticos a partir del ADN de los
pacientes (o de ADN fetal, en el caso de pruebas prenatales).

La PCR también puede utilizarse para detectar el ADN de una bacteria o un virus en el cuerpo de
un paciente: si el patógeno está presente, es posible amplificar regiones de su ADN de una
muestra de sangre o tejido.

La PCR tiene muchas aplicaciones en la investigación y en la práctica. Se utiliza de forma rutinaria

en la clonación de ADN, el diagnóstico médico y el análisis forense de ADN

Menciona sus etapas y descríbelas brevemente

1. Desnaturalización (96 °C): la reacción se calienta bastante para separar, o desnaturalizar,

las cadenas de ADN. Esto proporciona los moldes de cadena sencilla para el siguiente
paso.

2. Templado (55°C-65 °C): la reacción se enfría para que los cebadores puedan unirse a sus
secuencias complementarias en el molde de ADN de cadena sencilla.

3. Extensión (72°C): la temperatura de la reacción se eleva para que la Taq polimerasa

extienda los cebadores y sintetice así nuevas cadenas de DNA