UFAM / ICB / Departamento de Genética

Curso: Biotecnologia
Disciplina: Desenvolvimento de Marcadores Moleculares
Atividade de Reposição – 12/09/2022
Profs. Doriane Picanço & Diego Sotero

Gabrielly Sidrim Melo

Aluno:
21952280
Matrícula:
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1. Os marcadores de microssatélites sã o definidos como sequências repetidas em

tandem com unidades de repetiçã o que variam de 1 a 9 nucleotídeos. De acordo
com o que foi visto em sala de aula, explique como essas marcas sã o originadas no
genoma.

2. No ú ltimo edital da FAPEAM, você foi contemplado com uma verba para trabalhar
com marcadores moleculares no acesso à diversidade genética das espécies
nativas amazô nicas. Assim, para gerar marcas de mais de 400 indivíduos, os seus
colaboradores estã o divergindo quanto ao uso dos tipos dos marcadores e em um
consenso final vocês estã o discutindo entre o CAPs, o RFLP e o STR. Qual técnica
você aconselharia quanto aos critérios: grau de dificuldade, orçamento e poder
discriminató rio (alcance) do marcador. Justifique sua resposta.

Marcadores: Vantagens: Desvantagens:

Baixo custo; usado para mapeamento genético

Precisa de enzimas de
CAPs e estudo populacional; Rá pida detecçã o de
restriçã o específicas;
polimorfismos.
conhecimento prévio da
sequência.

Alto custo; nã o sã o
gRFLP Fá cil execuçã o; livres de efeito de epistasia.
multialélicos.

Simples execuçã o; Baixo custo; Dificuldade em identificar

STR
variante alélico;

A técnica ideal seria do marcador CAPs visto que possui rápida execução, custo baixo e
trabalharemos com um grande volume de indivíduos (400) sendo assim, o marcador ideal.
 3. Quanto aos marcadores moleculares, leia as afirmativas abaixo e responda qual a
alternativa está CORRETA e Justifique as falsas. 
I. A técnica de PCR revolucionou as estratégias de desenvolvimento de marcadores
moleculares e afins, principalmente, pois todos os marcadores que não eram
baseados em amplificação foram descontinuados; 
II. As técnicas de Crops e AFLP são baseadas em enzimas de restrição, a diferença
principal entre elas baseia-se na utilização da plataforma de sequenciamento, após a
digestão enzimática e ligação de adaptadores na técnica de Crops
III. A técnica de SSRs nã o é aconselhá vel nos estudos de grupos evolutivamente
distantes, devido à maior sensibilidade desta técnica ao aparecimento de
homoplasia.
IV. A caracterização do polimorfismo de DNA tornou-se possível com a descoberta das
endonucleases de restrição de Classe II, capazes de copiar a molécula de DNA em
sítios específicos, denominados sítios de restrição. 
 
a) Somente I, II e III estã o corretas 
b) Somente I, e II estã o corretas 
c) Somente II e III estã o corretas 
d) Somente II, III e IV estã o corretas 
e) Somente I, II e IV estão corretas 

Justificativa - tem I ou III:

O item está errado pelo fato de
4. Sobre os Marcadores responda V para as alternativas verdadeiras e F para as
falsas, justificando as falsas (se houver).
( V ) Os marcadores do tipo RFLP foram os primeiros marcadores baseados em
DNA utilizados para desvendar graus de polimorfismos em humanos e sã o
conhecidos como sistemas fechados, ou seja, quando se possibilita a descoberta de
novos genes no processo de hibridizaçã o
( V ) A técnica de RAD-seq é também considerada “O AFLP da nova geraçã o” pois
combina  estratégia de digestã o enzimá tica com ligaçõ es de adaptadores, no
entanto utilizando plataforma NGS para sequenciamento dos fragmentos
( ) Nas aná lises de amplificaçã o heteró loga em espécies distantes uma boa
estratégia diz respeito ao uso de marcadores em regiõ es codificantes do DNA, por
ter uma maior chance de sucesso
( ) A regiã o de DNA contendo o STR é amplificada pela PCR, usando iniciadores
que se complementam a sequências flanqueadoras ú nicas; 
( ) Na sequência: CTGAGACAGACAGACAATCGACAGACA – podemos observar um
motivo de microssatélite do tipo tetranucleotídeo e imperfeito.
 5. Testes de paternidade comparando o DNA presente em amostras bioló gicas, a
partir do uso de marcadores, sã o cada vez mais comuns. Nesses testes, podem ser
comparados fragmentos do DNA do pai e da mã e com o do filho. Os primeiros
testes deste tipo envolviam o emprego de marcadores de microssatélites e aná lises
de fingerprinting. Assim, um teste molecular foi solicitado por uma mulher que
queria confirmar a paternidade dos filhos. Ela levou ao laborató rio amostras de
cabelos dela, do marido, dos dois filhos e de um outro homem que poderia ser o
pai. Os resultados obtidos estã o mostrados na figura a seguir.

a) Que resultado a aná lise mostrou em relaçã o à paternidade do filho 1? E do filho 2?

Justifique.
O filho 1 não é descendente do marido e sim do outro homem. O filho 2 é descendente
do marido. No primeiro caso ele não possui nenhuma semelhança com o marido e sim com a
mãe e o outro homem. Da mesma forma, no segundo caso, não coincidem com o outro
homem mas sim com a mãe e o marido.

filho 1 filho 2
b) Num teste de paternidade, poderia ser utilizado apenas o DNA mitocondrial? Porquê? 
Não poderia. O DNA mitocondrial é apenas de origem materna, para o teste de
paternidade necessita-se do DNA de ambos os genitores, ou seja, deve ser utilizado DNA
biparental.