UNIVERSIDADE FEDERAL RURAL DE PERNAMBUCO

Departamento de Biologia – Área Genética

Disciplina: Genética Básica Profa: Fernanda Leite
ALUNO:_______________________________________________________ DATA: ___________

ESTUDO DIRIGIDO 2

1. Construa uma tabela comparativa entre o processo de Replicação in vivo e a técnica de PCR,
indicando quais são as semelhanças e as diferenças entre elas, em termos dos constituintes
necessários.

Item Replicação PCR Comentário

in vivo
DNA molde

dNTPs

DNA polimerase

DNA helicase

DNA primase

DNA topoisomerase

2. A reação em cadeia da polimerase é uma técnica baseada no sistema de replicação in vivo.

Para tanto, o seu sucesso depende, dentre outros fatores, da ciclagem de temperatura. Defina
quais são estas temperaturas e indique a quais eventos estas temperaturas estão relacionadas.

3. Explique qual o fundamento da técnica de eletroforese em gel de agarose para ácidos

nucléicos.

4. Qual a diferença entre PCR convencional e PCR em tempo real?

 5. O exame de paternidade é realizado através da técnica de PCR. Esse teste baseia-se na
identificação de marcadores genéticos específicos que podem ser encontradas no DNA da
mãe, do pai e dos filhos. O resultado do teste, representado abaixo, contém padrões dessas
marcas de uma determinada família. Com base neste resultado, assinale a alternativa
INCORRETA:

a) I é filho biológico do casal.

b) II não é filho deste pai.
c) III é irmão biológico de I.
d) IV pode ser filho adotivo do casal.
e) V não pode ser filho biológico deste casal.

6. Uma rede de mercado foi denunciada por comercializar pescado adulterado por substituição de
espécie por uma de menor valor de mercado e com suspeita de contaminação por Listeria
monocytogenes, bactéria causadora da listeriose. A vigilância sanitária, após receber a denúncia,
esteve no mercado para fazer coleta de amostras e realizar a análise por PCR. Foram utilizados
dois pares de primers numa reação multiplex: um par que resulta na amplificação de um
fragmento de 500 pb e identifica a bactéria Listeria monocytogenes; outro par que amplifica 900
pb e identifica a espécie de salmão Salmo salar e amplificação de fragmentos maiores são
indicadores de adulteração deste pescado.
A partir da eletroforese abaixo para a elaboração de um laudo, assinale (V) para VERDADEIRO ou (F) para
FALSO:
( ) As amostras 2 e 6 estão contaminadas
( ) As amostras 1, 4 e 5 estão próprias para
consumo
( ) As amostras 2, 3 e 6 foram adulteradas
( ) A amostra 3 está contaminada e foi
adulterada
( ) A amostra 6 está própria para consumo

7. A figura abaixo ilustra a seqüência de dois alelos para um determinado gene. O pesquisador
deseja estabelecer um protocolo de identificação de indivíduos, baseado em PCR, que possa
identificar qual alelo o indivíduo possui. Ajude o pesquisador a utilizar a PCR para este fim e
faça um esquemático do resultado em eletroforese em gel.