Profª Ms: Juliana Mendonça

▪ Úteis para auxiliar no diagnóstico clínico;

▪ Facilita a visualização das estruturas;

▪ Evidencia as diferenças entre as células (coloração de Gram);

▪ Permite observar com maior precisão detalhes morfológicos e

agrupamento dos microrganismos.
▪ Coloração diferencial;

▪ Descrita em 1884, pelo médico dinamarquês Christian Gram;

▪ Desenvolveu esse método quando estava procurando meios para

localizar células de pneumococo em tecido pulmonar de
pacientes que morreram de pneumonia;

▪ Teste adicional rápido para o diagnostico de agentes

infecciosos, além de ser utilizado para avaliar a qualidade da
amostra clinica analisada;

▪ As interpretações dos esfregaços corados pelo Gram envolvem

considerações relacionadas com as características da
coloração, tamanho, forma e agrupamento das células.
▪ Classifica as bactérias como:
▪ Diagnóstico rápido;
▪ Direcionar terapia;
▪ Necessidade de cultura;
▪ Avaliação de microbiota;
▪ Monitoramento da cultura;
▪ Suspeita de anaeróbios;
▪ Interpretação da resposta inflamatória;
▪ Controle de qualidade de insumos.
 Principais etapas da Coloração de Gram são:
✓ Fazer um esfregaço da suspensão bacteriana na lâmina de vidro;
✓ Fixar o esfregaço na lâmina através do calor;
✓ Cobrir o esfregaço com cristal violeta por um minuto;
✓ Cobrir o esfregaço com solução de iodo (30 segundos), que irá fixar o cristal violeta dentro da célula
bacteriana;
✓ Lavar com álcool, que irá remover o corante da bactéria Gram negativa;
✓ Cobrir o esfregaço com safranina (um minuto), que irá colorir as células que foram descoloridas pela
ação do álcool.
✓ Lavar com água, secar no calor e observar.
▪ Proposto por Franz Ziehl e aprimorado por por Friedrich Neelsen
ainda no século XIX;

▪ Realiza a diferenciação das bactérias em dois grandes grupos: as

álcool-ácido-resistentes (ex.: micobactérias) e as não álcool-
ácido-resistentes;

▪ Morfotintorialmente, as micobactérias apresentam-se na forma de

bacilos, sutilmente curvos ou retos, álcool-ácido-resistentes.

▪ Paredes celulares de algumas micobactérias (Ex: M. tuberculosis)

possui alto teor de lipídeos (cerca de 60%, principalmente de Ácido
micólico);

▪ Quando tratadas pelo corante Fucsina fenicada, coram-se de

vermelho e persistem ao descoramento subsequente por uma
solução de Álcool-ácido forte (diferenciador).
▪ Outras bactérias, que não possuem tais paredes celulares
ricas em lipídeos, têm a sua coloração pela Fucsina
descorada pela solução de Álcool-ácido e coram-se em
azul pela coloração de fundo do Azul de
metileno (contra-corante).

▪ A exposição ao calor durante a coloração inicial com a

FUCSINA de ZIEHL (carbol-fucsina), é necessária para que o
corante penetre através da parede celular das micobactérias
▪ Critérios de interpretação dos resultados ▪ Critérios de interpretação dos resultados
(Lâmina de escarro) – OMS (Lâmina de outros materiais) – OMS

✓ Nenhum BAAR em 100 campos = negativo ✓ Achados Resultado Não são encontrados BAAR
✓ 1 a 9 BARR em 100 campos = relata-se apenas a no material examinado (Negativo)
quantidade encontrada ✓ São encontrados BAAR em qualquer quantidade
✓ 10 a 99 BAAR em 100 campos = positivo + no material examinado (Positivo)

✓ Média de 1 a 10 BAAR por campo, nos primeiros

50 campos = positivo ++
✓ Média mais de 10 BAAR por campo, nos
primeiros 20 campos = positivo +++
▪ Pesquisa de BAAR – Técnica mais utilizada;

▪ Método simples e seguro;

▪ Permite detectar 60 a 80% dos casos de TB pulmonar.

▪ Resultado rápido;
▪ Conhecida como microscopia por fluorescência, também chamado de método
auramina;
▪ Assim como o método de Ziehl-Neelsen, baseia-se na propriedade de álcool-
ácido resistência das micobactérias;
▪ Consiste na coloração pelo fluorocromo auramina ou rodamina, onde será
permitida a visualização dos bacilos em amarelo-fluorescentes ou laranja-
avermelhado;
▪ A leitura deve ser realizada em microscopia de fluorescência;
Fluorocromo: substância
▪ Método sugerido para rotinas acima de 50 amostras de escarro diariamente,
orgânica é excitada por
com o objetivo de triagem, para reduzir o tempo de leitura dos exames
luz.
negativos;
▪ Confirmar resultados positivos pelo método de Ziehl-Neelsen;

▪ Técnica pouco utilizada.