Universidade de São Paulo

Escola de Engenharia de Lorena

Departamento de Biotecnologia

Curso: Engenharia Bioquímica

Segurança do Trabalho e
Biossegurança
Manuseio de Cobaias
Prof: Tatiane da Franca Silva
tatianedafranca@usp.br
 Segurança no manuseio de animais em Pesquisa
❑ Ética no uso de animais
❑ Segurança dos animais
❑ Segurança do operador:
Risco Ocupacionais específicos
Exemplos:

Zoonose: ex: Vírus

Marbug (1967)

Alergia a animais de laboratório (ALA)

mordeduras e arranhões de animais exposições repetidas
 Histórico
❖ Início antes de Cristo com Aristóteles,
Galeno, Hipócrates
Aristóteles
❖ Proibição de dissecação de cadáveres
Hipócrates 460 a.c.

Atualmente:

Council of International Organization for Medical

Science Galeno 129 a.c

A sensibilidade do animal é similar á humana no que se refere à

dor, memória, angústia e instinto de sobrevivência (CIOMS)
 Importância da Utilização de Animais
❖ Parte do processo de pesquisa
❖ Utilizados na produção de:
❑ vacinas e anticorpos monoclonais;
❑ estudos de farmacologia e toxicologia;
❑ estudos de imunopatologia,
❑ de transplante e de drogas; etc...

Institute of Cytology and Genetics in

Novosibirsk, Russia
❖ Primeiros transplantes de coração: Testes em cachorros

“....... quando eu contei que já tinha operado uns 200 cachorros, mas nenhum tinha ficado
vivo, ele me disse que não poderíamos fazer o procedimento ainda aquela altura. Poucas
semanas depois, o sul-africano fez o primeiro transplante.“ Dr. Euclydes Marque equipe do
Dr Zerbini.

Christiaan Barnard – médico sul

africano – 1° transplante de
coração

Maio de 1968
 Ética no Uso de Animais

Os experimentos devem ser realizados de maneira ética e

justificada, não abusando do direito do homem sobre os animais e
evitando o sofrimento destes.

Ética: Estudo dos juízos e da apreciação da conduta humana

susceptível a qualificação do bem e do mal , seja relativamente a
determinada sociedade ou do indivíduo. Dicionário Aurélio
❖ 1995, cientistas da Universidade
de Harvard : orelha humana
crescer nas costas de um rato
graças à manipulação genética

❖ 1997, cientistas da universidade de

Bath : girino sem cabeça
 Estes tipo de experimentos são justificáveis?

Leis ou normas restritivas devem impedir o avanço do

conhecimento ?

Bioética: tem como princípios básicos a Autonomia, a Beneficiência

(atendimento ao interesse do indivíduo) e Justiça (equidade). WT.
Reich
 Ética no Uso de Animais

✓ São eticamente válidos

experimentos com animais em
situações em que existem métodos
alternativos fidedignos?
 Princípios dos 3Rs
❖ 1959 Russell (zoologista) e Burch (Microbiologista):
The Principles of Humane Experimental Technique

Replace Reduce
sempre que possível, menor número possível
utilizar alternativas aos de animais (viabilidade
animais vivos; estatística);

Refine
técnicas menos
invasivas,
 Princípios dos 3Rs Exemplos
Replace
modelos computacionais, teste in vitro, cultura de
células, modelos e simuladores mecânicos, vídeos
para demonstração em aulas

Reduce
Escolha do modelo e linhagem adequado. Exemplo:
para um teste de insulina podem ser utilizados 12
coelhos ou 96 camundongos.

Refine
Protocolos experimentais bem definidos, anestesia,
analgesia, utilização de anti-inflamatórios e
antibióticos. Treinamento! Exemplo: Injeção mal
aplicada rompimento de fibras musculares.
 No Brasil
Lei Arouca (11.794/2008): regulamenta a criação e a utilização de
animais em atividade de ensino e pesquisa científica com objetivo
de garantir o atendimento ético e humanitário

CONCEA
Conselho Nacional de
Experimentação
Animal

CIUCA
Sistema de Cadastro CEUA
das Instituições de Uso Comissões de Ética em
Científico de Animais Uso Animal
 CEUA
Analisar, emitir parecer e expedir certificado sobre os protocolos de
experimentação animal compatíveis com a legislação vigente

Aprovação

Minimização do sofrimento
Maior ganho de
conhecimento com
menor número de
Ausência de animais
métodos
alternativos
fidedignos
Submissão
do Projeto
 Biotério
Instalação destinadas a criação ou manutenção de animais,
utilizados em atividade de pesquisa ou ensino. Deve proporcionar
bem-estar e saúde aos animais.

Complexidade da infra-estrutura varia de acordo com:

❑ Finalidade: Criação, Manutenção e Experimentação

❑ Padrão Sanitário dos animais
❑ Padrão Genético dos animais
 Biotério
❑ Estrutura independente e
específica para este fim

❑ Equipamentos específicos

❑ Modelo animal:
Fácil manejo , docilidade, prolificidade
pequeno porte, ciclo reprodutivo curto, baixo consumo de alimento,
fisiologia conhecida
 Responsabilidade pelo bem –estar dos animais
❖ Conhecimento da biologia da espécie (Bom alojamento
manejo,alimento, etc...
Diferentes habilidades auditivas entre as espécies
❖Exemplos:
Ciclo circadiano (horas de luz e escuro)
 Instalações do Biotério
❑ Seção de Produção

❑ Seção de Higiene

❑ Seção de Experimentação
 Seção de Produção de Animais
❑ Criação de animais sanitariamente definidos;
❑Presença de barreiras sanitárias: autoclave de dupla porta, ar
condicionado com sistema de pressão positiva, banho dos funcionários
 Segurança no manuseio de animais em Pesquisa
❑ Contenção
❑ Paramentação correta! EPIs!
❑ Treinamento Especializado
 Seção de Higiene e Esterilização
❖ Localizada no centro do Biotério, é responsável pela:
❑ Desinfecção e esterilização de todo o material sujo;
❑ Eutanásia dos animais;
❑ Descarte dos resíduos biológicos;
Procedimento de acesso á seção : Uso de EPI!
 Eutanásia
❖ Grego euthanasia – a morte “bela” ou “feliz” . Morte sem dor!
❑ Afastado dos outros animais;
❑ Tempo mínimo para a perda da consciência;
❑ Fácil aplicação, ação rápida e baixo custo;
❑ Evitar contaminações de doenças infecto-contagiosa;
❑ Não oferecer perigo ao profissional
Método Químico
Método Físico Exemplo: Câmara de monóxido ou dióxido de
Exemplo:Deslocamento da Cervical carbono
 Seção de Higiene e Esterilização
❑ Interligado às seções de produção e experimentação
❑ Barreira sanitária: autoclave dupla porta
 Seção de Experimentação
❖ Recebe e mantém os animais em ensaio experimental;

❖ Barreiras sanitárias: filtros seletivos HEPA na entrada e saída do ar; autoclave

de barreira; fluxo laminar.
 Seção de Experimentação
✓O lixo resultante das salas experimentais é previamente autoclavado para
posterior descarte
✓Devem ser seguidas todas as regras de segurança referentes ao seu trabalho,
comunicando imediatamente o responsável caso haja qualquer situação de risco
✓Acesso somente pessoas habilitadas deverão manusear os equipamentos,
 Classificação dos Animais

Status Sanitário

Gnobióticos
Livres de Patógenos
Microbiota definida Convencionais
Específicos
ou ausente
 Animais Gnobióticos
❑ Germfree (GF) : totalmente livres de microbiota!
- Obtidos pela remoção do útero no período de 24 horas antes do parto
- Mantidos em Isoladores Barreiras Sanitárias

❑ Flora Definida (FD): animais GF intencionalmente contaminados

com microorganismos ou parasitos específicos.
 Animais Livres de Patógenos Específicos (SPF)
❑ Manutenção: Barreiras Sanitárias
 Animais Convencionais
❑ Manutenção: Ambiente Higenizado e Desinfetado. Sem barreiras
Sanitárias
 Classificação dos Animais

Status Genético

Consanguíneos ou Não – OGM

Inbred Consanguíneos ou
Mutantes
Outbred

produto de 20 gerações grande diversidade

consecutivas do genética,
acasalamento entre possibilitando a
irmãos. Homozigose de reprodução de
99%! populações naturais Mutante Nude
 Alternativas ao Uso de Cobaias
❑ Ovos embrionados

❑ Cultura de Células:

Células Vero

Cercopithecus aethiops
 Alternativas ao Uso de Cobaias
❑ Invertebrados: Larvas de camarão, pulga d’água

❑ Pele reconstituída – fragmentos de pele humana

(circuncisão, sobras de cirurgia plástica);
 Alternativas ao Uso de Cobaias
❑ Animais mortos

❑ Restauração de partes do corpo em sua forma funcional

 Alternativas ao Uso de Cobaias
❑ Órgãos Sintéticos

❖ Primeiro órgão sintético: traquéia

2011 - Dr. Seifalian, da University College London