Universidade Comunitária da Região de Chapecó – UNOCHAPECÓ

Curso de Engenharia Química

Disciplina: Análise Química Instrumental
Professor: Jacir Dal Magro
Acadêmica: Kaila Petkowicz e Roberta Sommer

LISTA CROMATOGRAFIA

1. Explique o princípio de funcionamento da cromatografia gasosa. O que a diferencia

da cromatografia líquida?
A cromatografia gasosa é uma técnica analítica comum, usada para separar e analisar
compostos voláteis e semivoláteis em uma mistura. Assim como outras formas de
cromatografia, necessita de uma fase estacionária e uma fase móvel. A fase móvel é um
gás inerte, geralmente hélio ou nitrogênio e a fase estacionária é um adsorvente sólido,
denominada cromatografia gás-sólido, ou um líquido adsorvido em um suporte inerte,
denominada cromatografia gás-líquido.
A cromatografia gasosa é utilizada para compostos voláteis, já a líquida é mais adequada
para amostras menos voláteis. Na cromatografia gasosa a fase móvel é um único gás de
elevada pureza, enquanto na líquida é utilizada uma fase móvel líquida, constituída de
misturas de solventes de polaridades compatíveis.

2. Que tipo de compostos pode ser separados por cromatografia gasosa?

Compostos e misturas que tenham pontos de ebulição de até 300 °C e sejam termicamente
estáveis.

3. Qual a diferença entre coluna capilar e empacotada?

A coluna capilar possui uma fase estacionária líquida revestindo as paredes internas do
tubo, sendo significativamente maior se comparada com a empacotada, possuindo de
1260 metros de comprimento e diâmetros externos de 0,1, 0,22, 0,32 e 0,53 mm, existe
também uma pressão menor dentro da coluna. Já a coluna empacotada possui uma fase
estacionária sólida compactada dentro de um tubo, possui um tamanho médio de 2 metros
e diâmetro externo de 2-4 mm, seu uso é bastante limitado, por isso, praticamente não
tem sido utilizada, também há altas pressões dentro da coluna.
 4. Qual a diferença entre resolução e seletividade na cromatografia?
A resolução descreve a habilidade de uma coluna de separar os picos de interesse, já a
seletividade é a capacidade do sistema químico diferenciar os componentes da fase
líquida.

5. O cromatograma na figura abaixo possui alguns picos parcialmente resolvidos.

Assuma que o primeiro pico é devido a um soluto não-retido e atribua tM a este
primeiro pico.

a. Desenhe uma escala na abscissa marcando os valores de k´ de 0 a 5;

b. Determine k´ para cada pico;

c. Determine as larguras dos picos (wb) e calcule a resolução entre os picos;

 d. Para cada pico não-resolvido, extrapole uma linha até a base do pico; Calcule a
seletividade para os picos 2 e 3, os picos 3 e 4 e para os picos 4 e 5;

e. Para os dois últimos picos, calcule a eficiência (N) e a altura de um prato (H),
considerando que o comprimento da coluna é de 25 cm;

f. Avalie a assimetria dos picos 4 e 5.

Sabe-se que picos mais finos e mais internos apresentam maior detectabilidade, os que
são pouco largos podem indicar fluxos lineares rápidos. O tempo gasto em P4 foi menor
que em P5 por isso seu pico é menos largo.

6. Que compostos não podem ser analisados por cromatografia gasosa (CG)?
Compostos que ultrapassem o ponto de ebulição de 300 °C e que não sejam voláteis.

7. Um soluto não-retido passa por uma coluna cromatográfica em 3,7 min e o

constituinte em análise necessita de 8,4 min.
a. Encontre o tempo de retenção ajustado e o fator de capacidade do constituinte.

b. O volume de fase móvel é 1,6 vezes o volume da fase estacionária. Encontre o

coeficiente de partição do constituinte.

8. No cromatograma mostrado abaixo, os tempos de retenção dos picos 4 e 6 são,

respectivamente, 354 e 373 s. A coluna possui 3500 pratos e tM para este sistema
é 123 s.
a. Calcule a resolução entre os picos 2 e 3 e os picos 4 e 6, usando a equação:

b. Usando a mesma fase móvel, qual é o número de pratos necessário para produzir
resolução unitária entre os picos 4 e 6?
 c. Se o tempo de retenção for aumentado pela adição de água à fase móvel,
assumindo que a e N permanecem constantes (item a), calcule k´ para os
picos 4 e 6 quando a resolução entre eles for igual a 1.

d. Qual será o tempo de retenção do soluto 6 para as condições do item c?

9. Descreva o princípio de funcionamento dos detectores FID e TCD.

O detector por ionização de chama (FID) tem como base a formação de íons quando um
composto é queimado em uma chama de hidrogênio e oxigênio. E no detector por
condutividade térmica (TCD) ocorre uma variação na condutividade térmica do gás
quando da eluição de um analito.

10. Quais as vantagens e desvantagens dos detectores universais?

A principal vantagem é que esse tipo de detector gera sinal para qualquer substância
eluida, sem que ela necessite de uma propriedade físico-química específica. Porém, isso
faz com que possuam sensibilidade limitada, diferente dos detectores seletivos e
específicos.
 11. Porque o CO2, água e o ar não são detectados pelo detector FID?
Porque o detector possui uma seletividade para substâncias que contém ligações C-H em
sua estrutura.

12. (Skoog, 2012) O cinamaldeído é o componente responsável pelo aroma de canela.

Também é um potente composto antimicróbico presente nos óleos essenciais (ver
M. Friedman, N. Kozukue e L. A. Harden, J. Agric. Food Chem., 2000, v. 48, p.
5702). A resposta de CG de uma mistura artificial contendo seis componentes de
óleo essencial e benzoato de metila como padrão interno é mostrada na figura.

a. A seguinte figura é uma ampliação idealizada de uma região próxima ao pico do

cinamaldeído. Determine o tempo de retenção para o cinamaldeído.

b. A partir da figura na parte (a), determine o número de pratos teóricos para a coluna.
 c. Os dados quantitativos foram obtidos empregando-se o benzoato de metila como
padrão interno. Os seguintes resultados foram obtidos para as curvas de calibração
de cinamaldeído, eugenol e timol. Os valores abaixo de cada componente
representam a área do pico do componente dividida pela área do pico do padrão
interno. Determine as equações das curvas de calibração para cada componente.
Inclua os valores de R 2.

d. A partir dos dados da parte (d) deter- mine qual dos componentes apresenta a
maior sensibilidade para a curva de calibração. Qual apresenta a menor?
O que apresenta a maior sensibilidade para a curva é o timol, pois apresenta o maior valor
para a inclinação da reta e o que apresenta menor é o eugenol, poque apresenta o menor
valor para a inclinação da reta.

e. Uma amostra contendo os três óleos essenciais da parte (d) fornece as áreas de pico
relativas à área do padrão interno: cinamaldeído, 2,6; eugenol, 0,9; timol, 3,8.
Determine as concentrações de cada um dos óleos essenciais na amostra.
 13. O cromatograma abaixo refere-se a separação em cromatografia em fase reversa
(coluna C18) dos ácidos cafeico e cinâmico usando como fase móvel
metanol:água 30:70 em pH 2,0.

a) A que podem ser atribuídos os picos 1 e 2?

O pico 1 refere-se ao ácido cafêico e o pico 2 ao ácido cinâmico.
b) Como a proporção da fase móvel poderia ter sido alterada de forma que os picos
tivessem menor tempo de eluição?
Quanto mais polar for a fase móvel mais rápida será a eluição, ou seja, para diminuir o
tempo de eluição poderia ser aumentada a quantidade de água da fase móvel, tornando-a
mais polar.

c) Calcule o número de pratos teóricos para o pico 2.

d) Estime o tempo de retenção e calcule a resolução entre os dois picos.

14. Um dos problemas de da compra de bebidas falsificadas, é a presença de metanol,

uma substância tóxica quando ingerida. A análise pode ser feita por cromatografia
gasosa com detecção por ionização de chama (FID). Suponha que um comerciante
desconfiado de falsificação levou uma amostra para análise de um perito, que
determinou o teor de metanol por cromatografia gasosa injetando 1,0 µL em cada
análise. Para isso, ele preparou uma solução padrão de metanol em etanol a 100
mg/L e outra de benzeno (padrão interno) em etanol, também a 100 mg/L. Da
amostra, transferiu uma alíquota de 5,0 mL para um balão volumétrico de 25,0
mL, adicionou 1,0 mL da solução de benzeno e completou o balão com etanol. A
partir da solução padrão de metanol, ele pipetou volumes variados para um balão
de 25,0 mL, sempre na presença de 1,0 mL da solução de benzeno e completando
com etanol. As áreas correspondentes ao analito e ao padrão interno, obtidas para
cada volume de padrão pipetado, estão apresentadas na tabela abaixo.

a) Determine a concentração de metanol encontrada na amostra de whisky.

 1,2
y = 0,0122x + 0,3141
R² = 0,9974
1

0,8

0,6

0,4

0,2

0
0 10 20 30 40 50 60 70

Plotando o gráfico da razão entre as áreas de metanol e benzeno VS a concentração em

mg/L da solução, obtivemos a seguinte equação: Y = 0,0122X + 0,3141.
A concentração da mostra será:
Y = 0,0122X + 0,3141
0,8047 = 0,0122X + 0,3141

X = 40,21 mg/L

Onde 0,8047 é a razão entre a área de metanol e benzeno na amostra.

b) Embora em menor concentração o benzeno tem áreas maior que o metanol. Sugira
um motivo para isso.
As áreas são influenciadas pela quantidade de carbono em ambas as amostras. O benzeno
tem 6 carbonos enquanto o metanol tem somente 1, essa diferença é a responsável por
resultar áreas maiores no benzeno mesmo estando em menor concentração.

c) Por que as áreas do benzeno em cada solução não são as mesmas se a quantidade
de benzeno presente em cada é sempre 1,0 mL de sua solução padrão?
Isso ocorre devido as variações de concentração do metanol em cada uma das amostras
que interfere nas áreas encontradas para o benzeno.