5991-5422PTBR Agilent GC Theory Portuguese

Conceitos básicos de
cromatografia gasosa:
Teoria
DESENVOLVENDO
UMA CIÊNCIA MELHOR
AGILENT E VOCÊ
Apenas para finalidades de ensino

11/11/21
© Agilent Technologies, Inc. 2016
1
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Índice
Introdução Como influenciar a seletividade

• Separação de compostos • Pratos teóricos
• O que acontece dentro da coluna? • Reúna o selementos
Principais parâmetros Equação de Van Deemter

• Tempo de retenção e largura de pico • Difusão de Eddy
• Difusão axial
• Fator de retenção
• Resistência à transferência de massa
• Seletividade ou fator de separação
• Mais informações sobre Van Deemter
• Eficiência
Saiba mais
• Resolução
• Site do meio acadêmico da Agilent
• Publicações

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Introdução
Na química analítica, os cientistas usam a cromatografia gasosa (GC)

para separar e analisar compostos que podem ser vaporizados sem
decomposição. Geralmente, eles usam a GC para testar a pureza de uma
substância específica, ou para separar os componentes de uma mistura
para determinar as quantidades relativas de cada um.
Os cientistas usam a GC para a análise qualitativa e quantitativa de
analitos voláteis.
O instrumento, denominado cromatógrafo gasoso, utiliza uma fase móvel
e uma fase estacionária. Isto é, um gás em movimento carrega a amostra
através de um suporte estacionário (uma tubulação de metal ou vidro,
chamado de coluna) dentro do instrumento.

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Introdução
Separação de compostos
Tempo t
Fluxo de gás de arraste
Separação tr2-tr1
Largura de pico Wb1,2
Os compostos são separados por suas afinidades diferentes com a coluna

durante a fase estacionária. Os compostos com menos afinidade eluirão
da coluna mais rapidamente; os componentes com maior afinidade
eluirão depois.
ToC
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Introdução
O que acontece dentro da coluna?
A cromatografia gasosa usa uma fase
móvel gasosa para transportar a amostra
pela coluna, que pode ser empacotada
ou coberta em sua superfície interna. Na
maioria dos casos, as colunas de GC
têm diâmetros internos menores e são
mais longas que as colunas de HPLC. Colunas de GC
Conforme a coluna é aquecida, os

compostos começam a se separar com
base no ponto de ebulição. Alterar a
coluna para a fase estacionária polar
modificará as capacidades de separação.
Os compostos vão se separar pelo
ponto de ebulição e pelas características Colunas de HPLC
polares.
ToC
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Introdução
O que acontece dentro da coluna?
tr2-tr1 tr2-tr1
Separação superior vs Separação inferior
Wb1 Wb2 Wb1 Wb2
Separação superior vs Separação inferior

ToC
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Principais parâmetros
Tempo de retenção e largura de pico
h
tr2 tri Tempo de retenção do

composto i
tr1
W1/2 Largura de pico na
meia altura
Wbi Largura de pico na
linha de base
W1/2
Wb1 Wb2
t
O tempo de retenção de um composto não retido (tM ou t0) também é conhecido

como tempo de espera. Moléculas de soluto não retidas percorrem a coluna na
ToC mesma taxa que o gás de arraste.
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Fator de retenção (k`)
 tr  t M  t'R tr Tempo de retenção

k `   
 tM  tM tM Tempo de retenção de pico não retido
O fator de retenção (também conhecido como coeficiente de partição ou

fator de capacidade) é a razão entre o tempo que um soluto passa nas
fases estacionária e móvel. Ele é calculado dividindo o tempo de retenção
pelo tempo de um pico não retido (tM). Um composto não retido tem k = 0.
Como todos os solutos passam o mesmo tempo na fase móvel, o fator de
retenção é uma medida de retenção pela fase estacionária.
Parâmetros que influenciam o fator de retenção:
• Fase estacionária
ToC
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Seletividade ou fator de separação (α)
a Seletividade
k2
 k1 Fator de retenção de primeiro pico
k1
k2 Fator de retenção de segundo pico
Seletividade é uma medida do tempo ou da distância entre dois picos.

Se a = 1, os dois picos têm o mesmo tempo de retenção e coeluição.
A seletividade é definida como a razão em fatores de capacidade.
Parâmetros que influenciam o fator de retenção:
• Fase estacionária
• Fase móvel
• Temperatura
ToC
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Eficiência ou número de pratos teóricos (N)
2 2
 tr   tr 
N  16    N  5.54   
 Wb   W1/ 2 
A eficácia da coluna é utilizada para comparar o desempenho de colunas
diferentes. Ela é expressa como o número de pratos teóricos, N.
As colunas com números altos de pratos são mais eficientes. Uma coluna
com um valor N alto terá um pico mais estreito em um determinado tempo
de retenção do que uma coluna com um número N mais baixo.
Parâmetros que influenciam a eficiência da coluna:
• Comprimento da coluna (aumentar o comprimento da coluna aumenta a eficiência)
• Tamanho da partícula (diminuir o tamanho da partícula aumenta a eficiência)
ToC
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Altura equivalente a um prato teórico (H)
L L Comprimento da coluna (mm)

H
N N Número de pratos teóricos
Outra forma de medir a eficiência da coluna é a altura equivalente a um

prato teórico, designada como H, que geralmente é expressa em milímetros.
Quanto mais curto for o prato teórico, mais pratos "cabem" em qualquer
comprimento de coluna. Isso significa mais pratos por metro e maior
eficiência da coluna.
ToC
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Utilização de eficiência teórica (UTE)
 H actual 
UTE%    100
 H theoretical 
Eficiência do revestimento (CE%) é um termo histórico que compara a eficiência da coluna
medida (Hreal)e sua eficiência teórica máxima (Hteórica).
Historicamente, a Hteórica era tão afetada pelas heterogeneidades na fase estacionária que as
contribuições extracoluna à Hreal podiam ser ignoradas (como anomalias de injeção ou tempos
de atraso mecânicos ou eletrônicos).
Devido às melhorias da eficiência do revestimento, isso não acontece mais. A H real geralmente
é mais afetada pelas contribuições extracoluna do que a própria coluna. O termo "utilização
de eficiência teórica", ou UTE, consideram esses fatores.
ToC
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Resolução – Separação na linha de base
Rs ≥ 1,5
A resolução descreve a habilidade de uma
h
coluna em separar os picos de interesse.
A resolução leva em consideração a
tr 2  t r1
eficiência (N), seletividade (a) Rs 
e retenção (k). 1 / 2  (Wb 2  Wb1 )
• Um valor de 1 é o mínimo para a uma
separação mensurável e uma quantificação
adequada. tri Tempo de retenção
do composto i
• Um valor de 0,6 é necessário para diferenciar Wbi Largura de pico na linha
de base do composto i
um vale entre dois picos de mesma altura.
• Valores de 1,7 ou maiores geralmente são
desejáveis para métodos robustos.
• Um valor de 1,6 é considerado a separação na
linha de base e garante o resultado
t
quantitativo mais preciso.
ToC
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Resolução – A equação fundamental
  1  k 
Rs  1 N    
4    1 k 
Eficiência Seletividade Retenção
A resolução pode ser melhorada aperfeiçoando qualquer um destes parâmetros:

• A seletividade tem a influência mais alta na resolução. Pequenas mudanças
na seletividade geram grandes alterações nas resoluções.
• A retenção tem uma influência significativa em valores k pequenos.
• A eficiência descreve o poder de separação da coluna.
ToC
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Influência de N, α, e k na resolução
A seletividade afeta mais a resolução
• Altere a fase estacionária
• Altere a fase móvel
Os pratos são mais fáceis de aumentar
A figura mostra a resolução como uma função de seletividade, eficiência de coluna

ou retenção.
ToC
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Como influenciar separações
O que é um "prato" em cromatografia?
Lc 1 Lc
Rs ~ 1 N Rs ~ 1 ~
4 4 H 4 h d
p
LC Comprimento da coluna
dp Tamanho de partícula
h Altura reduzida de um prato teórico
Um prato teórico é o estágio hipotético no qual duas fases de uma

substância (sua fase líquida e de vapor) estabelecem um equilíbrio.
ToC
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O alto número de pratos (N) fornece:

• Picos agudos e estreitos
• Melhor detecção
• Capacidade de pico para resolver amostras complexas
No entanto, a resolução aumenta apenas com a raiz quadrada do número
de pratos.
• RS ~ N
O aumento do número de pratos é limitado por condições experimentais
• Tempo de análise, pressão
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Reunindo – Largura de pico e altura reduzida de um prato teórico
tr1  tr 2 Lc
Rs  Rs ~ 1
1 / 2  ( Wb 2  Wb1 ) 4 h d
p
h  f (w )
h  f ( w eddy  w ax  w C )
h: altura reduzida de um prato teórico
ToC
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Equação de Van Deemter
A equação de Van Deemter relaciona as variações por comprimento

de unidade de uma coluna de separação com a velocidade linear da fase
móvel considerando as propriedades físicas, cinéticas e termodinâmicas
de uma separação (Wikipedia).
h = f ( weddy + wax + wC ) • Difusão de Eddy

• Coeficiente de difusão
• Resistência à transferência de massa
h = A + B/u + C u
ToC
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Difusão de Eddy
weddy ~ λ dp λ: Qualidade de empacotamento da coluna

Diferença nas trajetórias de difusão devido a:
Trajetórias diferentes Empacotamento Ampla distribuição de

de coluna precário tamanho de partícula
ToC
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Difusão axial ou longitudinal
Aumenta a largura de pico devido à autodifusão do analito
Em fluxo baixo, o analito permanece na fase móvel por um longo período

• Grande aumento na largura de pico
• Aumento da altura de um prato teórico
Fluxo
ToC
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Resistência à transferência de massa
wC ~ dp2
Trajetórias de difusão diferentes
Partícula porosa
Camada estacionária de fase móvel
ToC
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h = A + B/u + C u
Altura reduzida de um prato teórico (h)
Soma de curva: Van Deemter
Resistência à transferência de massa
Difusão de Eddy
Difusão axial
Fluxo
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Gás de arraste
As velocidades lineares (e taxas
N2 de fluxo) do gás de arraste
dependem da temperatura
da coluna. Em uma pressão de
entrada constante, as velocidades
Altura reduzida de um prato teórico (h)
lineares diminuem conforme

a temperatura da coluna aumenta.
O efeito da velocidade linear média
He
do gás de arraste (u) na eficiência
é melhor ilustrado usando uma
curva de Van Deemter.
H2
uopt Uopt: eficiência máxima

OPGV
OPGV: velocidade ideal do gás
u (cm / sec)
Consulte as notas para obter mais detalhes

ToC
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Saiba mais
Para obter mais informações sobre produtos Agilent, acesse www.agilent.com ou

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Publicação Título No. da pub.

Primer Conceitos básicos de cromatografia gasosa (material em inglês) G1176-90000
Vídeo Conceitos básicos de cromatografia gasosa (material em inglês) (14 min)
Guia Guia de seleção de colunas para GC Agilent J&W (material em inglês) 5990-9867EN
CHROMacademy (material em inglês) – acesso gratuito para alunos e funcionários da
Web
universidade a cursos on-line
Compêndio de
Uma compilação de notas de aplicação (material em inglês) (22MB) 5991-3592EN
aplicações
ToC
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ToC Número da publicação: 5991-5422EN
11/11/21
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Abreviações
Abbreviation Definition Abreviação Definição

α seletividade t tempo
dp tamanho de partícula tr tempo de retenção
ΔΦ intervalo de gradiente T0 ou tm tempo morto, tempo de espera da coluna
F taxa de fluxo tG tempo de gradiente
h altura reduzida de um prato teórico (uma UTE% utilização de eficiência teórica
medida do poder de resolução de uma
coluna) Vm volume da coluna
H altura equivalente a um prato teórico w largura de pico
k fator de retenção (também conhecido W1/2 largura de pico na meia altura
como fator de capacidade (k') ou
coeficiente de partição) Wbi largura de pico na linha de base
L, Lc comprimento (comprimento da coluna) weddy difusão de Eddy
λ qualidade de empacotamento da coluna wax difusão axial ou longitudinal
N eficiência ou número de pratos da wC resistência à transferência de massa
coluna
wav largura média de pico
R resolução
ToC
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5991-5422PTBR Agilent GC Theory Portuguese

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Conceitos básicos de

Apenas para finalidades de ensino

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Apenas para finalidades de ensino

Introdução Como influenciar a seletividade

Principais parâmetros Equação de Van Deemter

Apenas para finalidades de ensino

Na química analítica, os cientistas usam a cromatografia gasosa (GC)

Apenas para finalidades de ensino

Fluxo de gás de arraste

Os compostos são separados por suas afinidades diferentes com a coluna

Conforme a coluna é aquecida, os

Separação superior vs Separação inferior

Wb1 Wb2 Wb1 Wb2

Separação superior vs Separação inferior

tr2 tri Tempo de retenção do

O tempo de retenção de um composto não retido (tM ou t0) também é conhecido

 tr  t M  t'R tr Tempo de retenção

O fator de retenção (também conhecido como coeficiente de partição ou

Seletividade é uma medida do tempo ou da distância entre dois picos.

L L Comprimento da coluna (mm)

Outra forma de medir a eficiência da coluna é a altura equivalente a um

Eficiência Seletividade Retenção

A resolução pode ser melhorada aperfeiçoando qualquer um destes parâmetros:

A figura mostra a resolução como uma função de seletividade, eficiência de coluna

Um prato teórico é o estágio hipotético no qual duas fases de uma

O alto número de pratos (N) fornece:

h: altura reduzida de um prato teórico

A equação de Van Deemter relaciona as variações por comprimento

h = f ( weddy + wax + wC ) • Difusão de Eddy

weddy ~ λ dp λ: Qualidade de empacotamento da coluna

Trajetórias diferentes Empacotamento Ampla distribuição de

Em fluxo baixo, o analito permanece na fase móvel por um longo período

Soma de curva: Van Deemter

Resistência à transferência de massa

lineares diminuem conforme

uopt Uopt: eficiência máxima

Consulte as notas para obter mais detalhes

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Abbreviation Definition Abreviação Definição

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