Apostila de patologia clnica

Adriane Pimenta da Costa Val Bicalho Rubens Antnio Carneiro

ndice
Fundamentos de hematologia Composio do sangue Volume sangneo Sistema hematopoitico/ltico Hematopoiese Eritropoiese Exigncias Nutricionais da Hematopoiese Eritropoiese ineficaz Eritropoiese anormal Anticoagulantes Colheita de sangue Colheita de material e exame da medula ssea Bibliografia Literatura Recomendada

Estudo do eritron Introduo Eritrograma Contagem total de eritrcitos Dosagem total de hemoglobina Hematcrito (Hc) ou volume globular (VG) ndices hematimtricos ou valores globulares mdios

Bibliografia Literatura recomendada

Avaliao das anemias Introduo Sintomatologia clnica Colheirta Classificao das anemias Hemoparasitas Intensidade da anemia Bibliografia e leitura recomendada

Avaliao das policitemias Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bibliografia e leitura recomendada

Os leucticos Leucopoiese / compartimentos Caractersticas dos leuccitos Formas de atuao dos leuccitos Os leuccitos e a inflamao Referncias bibliogrficas

Interpretao clnica das alteraes no nmero dos leuccitos Alteraes no nmero de leuccitos na circulao

Respostas leucocitrias nos ruminantes Contagens leucocitrias absolutas e relativas Interpretao do leucograma Referncias bibliogrficas

Hemostasia Introduo Sintomatologia clnica Fatores envolvidos Hemostasia primria Hemostasia secundria Fibrinlise Avaliao laboratorial Esquema diagnstico Anormalidades de hemostasia Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue

Avaliao laboratorial do lquido cfalo raquidiano Introduo Produo / circulao Funes Colheita Riscos e contra indicaes Tcnica de colheita Anlise laboratorial Bibliografia e literatura recomendada

Aspectos laboratoriais das afeces de pele

Introduo Colheita Artrpodes Helmintos Fungos

Avaliao laboratorial do sistema renal Sistema renal Formao da urina Concentrao e diluio da urina Rim, rgo endcrino Avaliao e interpretao do exame de urina Caractersticas da qumica urinria (Elementos anormais) Bibliografia Literatura recomendada

Avaliao laboratorial das doenas hepticas Introduo Anatomia Circulao heptica Sistema biliar e produo de bile Funes hepticas Causas de doenas hepticas Sinais clnicos Mecanismo da leso Avaliao Mecanismo da leso Testes indicativos de leses hepatocelulares Testes relacionados com captao, conjugao, e secreo

Testes relacionados com clareamento portal Testes relacionados com a sntese heptica

Exame de fezes Introduo Colheita Conservao Exame fsico Elementos anormais Exame qumico Exame microscpico Mtodos de pesquisa de parasitas Tabelas

Avaliao laboratorial das efuses corporais Introduo Diagnstico das efuses Exame laboratorial dos fludos corporais

Fundamentos de hematologia
ndice
Composio do sangue Volume sangneo Sistema hematopoitico/ltico Hematopoiese Eritropoiese Exigncias Nutricionais da Hematopoiese Eritropoiese ineficaz Eritropoiese anormal Anticoagulantes Colheita de sangue Colheita de material e exame da medula ssea Bibliografia Literatura Recomendada

Composio do sangue
O sangue um tecido formado por trs tipos de clulas: os glbulos vermelhos, tambm conhecidos como hemcias ou eritrcitos; os glbulos brancos ou leuccitos e ainda as plaquetas, que so fragmentos de citoplasma dos megacaricitos e por um meio intercelular, denominado plasma, que por sua vez composto de 91,5% de gua, 7,5% de slidos orgnicos. Protenas, tais como albumina, globulinas e o fibrinognio e demais fatores de coagulao respondem por 7% dos slidos orgnicos do plasma, os 0,5% restantes so um conjunto de substncias nitrogenadas, gorduras neutras, colesterol, fosfolipdeos, glicose, enzimas e hormnios. A parte restante compe-se de slidos inorgnicos, os minerais como Na, K, Mg, Cu, e HCO3.

Volume sangneo
O sangue responsvel por cerca de 7,5% do peso de um animal. Esse valor mantm-se estvel, pela passagem de lquidos intersticiais para o meio vascular e vice e versa. Mas alguns fatores, como a ingesto de lquidos, a produo de gua metablica e perda de gua corporal podem determinar variaes neste percentual.

Sistema hematopoitico/ltico

Sabemos que as clulas do sangue possuem natureza temporria, ou seja, apresentam um perodo de vida curto e limitado. Portanto, para que se mantenha uma quantidade estvel destas clulas na circulao necessria a existncia de um conjunto de rgos e tecidos chamados de sistema hematopoitico/ltico, que tem a funo de produzir e destruir glbulos do sangue e plaquetas, de modo a manter a populao sempre constante. Medula ssea o tecido existente no interior das cavidades sseas, podendo ser divido em dois meios, o intravascular e o extravascular, sendo que neste ltimo so produzidos os glbulos brancos, vermelhos e plaquetas. Sistema monoctico fagocitrio (S.M.F.) um conjunto de clulas com poder fagocitrio que destri os eritrcitos velhos ou anormais, desmembra a hemoglobina em globina e bilirrubina livre e armazena o ferro. O S.M.F. encontra-se espalhado por todo o organismo, mas sua maior concentrao nos rgos linfticos, principalmente o bao. Bao e linfonodos Produzem linfcitos T e B, alm de serem os locais de maior concentrao do S.M.F. Mantm a sua capacidade hematopoitica embrionria por toda a vida adulta, que pode ser acionada nos casos de anemias regenerativas. O bao ainda um importante local de reserva de eritrcitos. Fgado o local de reserva de vitamina B12, cido flico e ferro, elementos necessrios hematopoiese e sntese de hemoglobina. o local predominante de produo de eritropoietina no feto. Nos animais adultos, produz ainda uma pequena quantidade desta glicoprotena, exceto no co. Tambm mantm sua capacidade embrionria de hematopoiese. Mucosa estomacal Produz cido clordrico, que libera o ferro das molculas complexas e o fator intrnseco, que facilita a absoro da vitamina B12. Mucosa intestinal Absorve vitamina B12, folatos e ferro e ainda elimina boa parte da bilirrubina. Rim Produz eritropoietina e trombopoietina e elimina uma parte da bilirrubina.

Hematopoiese
Pode ser definida como a produo de clulas do sangue, compreendendo ento a eritropoiese, a leucopoiese e a trombocitopoiese. Pode ser dividida em duas fases, a hematopoiese pr-natal e a hematopoiese ps natal.

Os primeiros indcios da hematopoiese so extra-embrionrios. Esta fase se inicia em torno do dcimo dia de gestao. So observados, no saco vitelnico, as primeiras ilhas de clulas eritropoiticas, juntamente com os primeiros precursores dos leuccitos. Logo a seguir vem a hematopoiese embrionria, que comea no final do primeiro tero de gestao e composta por trs fases. A primeira heptica, quando a eritropoiese predomina no fgado e a leucopoiese se torna mais evidente. Em seguida vem a fase esplnica/linftica, quando estes acontecimentos tm lugar tambm no bao e linfonodos. A ltima fase, que a medular comea aproximadamente na metade da gestao e perdura por toda a vida.. A hematopoiese ps-natal limita-se exclusivamente a medula ssea e pode ser dividida em duas fases: a infantil, que envolve a medula ssea de todos os ossos e a adulta, quando a atividade a hematopoitica se limita aos ossos chatos a s extremidades dos ossos longos. Nesta fase, as demais medulas sseas so tomadas por tecido adiposo e se tornam amarelas. Porm, em casos de necessidade a medula amarela volta a ser vermelha, ou seja, recupera sua atividade hematopoitica, o que pode ocorrer com os demais rgos que desempenharam funes a hematopoiticas na vida pr-natal. Formao das clulas do sangue Atualmente, a teoria mais aceita que exista na medula ssea uma clula pluripotencial indiferenciada. Ao se dividir, esta clula d origem a duas clulas: uma igual a si prpria, destinada a manter a populao constante e a uma outra clula chamada Unidade Formadora de Colnias (UFC). A UFC pode ser uma UFCe, formadora de linhagem eritroctica; uma UFCmg, formadora de linhagem megacarioctica ou uma UFCmm, formadora de linhagem mielomonoctica, que por sua vez da origem a duas linhagens, a mieloctica ou granuloctica e a monoctica. A clula tronco provavelmente d tambm origem a clula que originar os linfcitos. Aps formadas, as UFCs seguem um processo de amadurecimento, com vrias divises, dando origem a um clone de clulas de seu grupo.

Eritropoiese
Fator estimulante O fator estimulante para a produo de eritrcitos a eritropoietina. Este hormnio atua sobre a clula tronco da medula ssea, determinando a sua diviso e a produo da UFCe. O amadurecimento da clulas tronco e precursora ocorrem sob o estmulo de grandes concentraes de eritropoietina. As quatro divises que ocorrem (de rubroblasto at metarubrcito) so mitticas, e acontecem paralelamente com a maturao das clulas. Estes dois processos so caracterizados pelos seguintes eventos: perda dos nuclolos, diminuio do tamanho da clula e do ncleo, aumento na condensao da cromatina nuclear, diminuio da basofilia nuclear e aumento na policromasia, seguida ento de normocromasia e sntese de hemoglobina. Ocorre, por fim, perda da capacidade mittica. Tanto as divises como a maturao dos eritrcitos ocorrem sob o estmulo de concentraes basais de eritropoietina. Em situaes normais, o nvel basal de eritropoietina fornece estmulos necessrios para a reposio de eritrcitos perdidos, mantendo a massa normal destas clulas. Quando h transporte insuficiente de O2 para os tecidos, sensores renais localizados no aparelho justaglomerular dos rins sinalizam para que haja aumento na secreo de eritropoietina. A eritropoietina possui duas origens: produzida na medula renal tanto na forma de eritropoietina ativa como de pr-eritropoietina, que ativada por um fator srico no momento da liberao e nas clulas de Kupfer, as produzem uma molcula precursora, que ativada por uma fator renal para produzir eritropoietina ativa. O rim a nica fonte de eritropoietina no co, ao contrrio das outras espcies.

UFCe Como foi visto anteriormente, a clula tronco se divide em duas, uma igual a si e outra que dar origem Unidade Formadora de Colnias da linha eritroctica ou UFCe. Rubroblasto a clula que vem em seguida a UFCe, tambm chamado de proeritoblasto. uma clula trs vezes maior que o eritrcito maduro, tem ncleo geralmente central, que ocupa quase toda a rea da clula e formado por cromatina de aspecto delicado, onde pode-se ver dois ou at trs nuclolos. Apresenta DNA e RNA em atividade, alm da sntese proteca, mas no sintetiza hemoglobina. Pr-rubrcito O rubroblasto se divide em duas clulas chamadas de pr-rubrcito ou eritroblasto. um pouco menor que o rubroblasto, a cromatina um pouco mais grosseira e os nuclolos menos evidentes. Nesta fase inicia-se a sntese de hemoglobina, que persiste at a fase de reticulcitos. Rubrcito basfilo O pr-rubrcito divide-se em dois rubrcitos basfilos ou eritroblasto basfilo. Nesta fase, o citoplasma j se torna um pouco acidfilo, devido ao acmulo de hemoglobina j nele produzida. Ocorre diminuio da sntese de cidos. uma clula bem menor que a anterior, o ncleo j no apresenta nuclolos e a cromatina bem mais compacta. Rubrcito policromtico O rubrcito basfilo se divide em dois rubrcitos policromticos ou eritroblastos policromatfilos. Nesta fase, ocorre a finalizao da sntese de DNA, que por sua vez controlada pelo aumento da sntese de hemoglobina. Metarubrcito O rubrcito policromtico se divide em dois metarubrcitos. a menor clula dos precursores nucleados dos eritrcitos e neste estgio o ncleo apenas uma mancha de cromatina compacta. Neste estgio est o auge da produo de hemoglobina. Reticulcito O metarubrcito no se divide mais, apenas amadurece, perde o ncleo e passa a se chamar reticulcito. A substncia basfila dessas clulas o RNA, pode se apresentar em formas de grnulos. Quando corados pelo novo azul de metileno ou outro corante vital, esta substncia basfila precipita-se em forma de retculos, da o nome reticulcito. Quando corados pelos mtodos usuais, os reticulcitos so vistos como clulas no nucleadas, um pouco maiores que os eritrcitos adultos, apresentando certa policromatofilia. Essas clulas no so achadas normalmente na circulao de cavalos e ruminantes sadios, pois toda a maturao eritrocitria nestas espcies ocorre dentro da medula ssea. Em sunos sadios so observados cerca de 2% de reticulcitos na circulao. J em ces e gatos normais podem ser encontrados em percentuais que variam de 0,5-1,5; sendo que nestes ltimos animais se apresentam em duas formas: os reticulcitos agregados e ponteados e refletem diferenas significativas no estdio de maturao e tempo de vida no sangue. Os reticulcitos agregados apresentam a substncia basfila de forma linear e se maturam em ponteados, que apresentam apenas pequenos pontos de retculo, sem formaes lineares. A contagem

de reticulcitos pode ser usada na avaliao da resposta individual a uma anemia em todos os animais e avaliao da terapia usada, com exceo dos eqinos, pois nestes animais os reticulcitos s so liberados da medula aps sua total maturao. Cerca de 20% da hemoglobina contida nos eritrcitos ainda sintetizada nos reticulcitos. Eritrcitos Os reticulcitos se maturam em eritrcitos ou hemcias, clulas anucleadas e sem incluses de retculo. Os eritrcitos so as clulas mais numerosas no sangue, seu citoplasma formado por 1/3 de hemoglobina e 2/3 de gua. Sua funo carrear hemoglobina, que por sua vez, transporta O2 dos pulmes para os tecidos e CO2 dos tecidos para os pulmes. A membrana eritrocitria formada por duas camadas proticas, envolvendo uma camada de lipdios; flexvel permitindo a deformao e passagem da clula pelos estreitos sinusides do bao e dos tecidos. A medida que a clula envelhece e flexibilidade vai diminuindo, no consegue mais atravessar os sinusides do bao e ento fagocitada pelo S.M.F.

Exigncias Nutricionais da Hematopoiese

Protenas So extremamente necessrias na formao da globina Vitaminas Em especial, a riboflavina ou vitamina B2, a piridoxina ou vitamina B6, a niacina, o cido flico, a tiamina e a vitamina B12, sendo esta ltima extremamente necessria diviso das fases nucleadas das clulas. Minerais O mais importante o ferro, utilizado na sntese do heme. Outros minerais importantes na eritropoiese so o cobalto, necessrio sntese da vitamina B12 e o cobre, co-fator da enzima ALA-dehidrase, necessria sntese do heme. Lipdios Os lipdios so integrantes da membrana do eritrcito. Alm disto, o colesterol funciona como regulador da resistncia osmtica da clula.

Eritropoiese ineficaz
Este termo designa a quantidade de eritrcitos que morrem ainda no interior da medula, sem chegar a circulao. A taxa de eritropoiese ineficaz cerca de 10% na maioria das espcies, mas pode estar aumentada em algumas doenas.

Eritropoiese anormal
Na ausncia dos fatores apropriados a eritropoiese, como por exemplo os fatores nutricionais, este processo pode ocorrer de forma anormal, sendo lanadas na circulao

eritrcitos com teor de hemoglobina incompleto ou clulas atpicas, deficientes em nmero ou com anormalidades fisiolgicas. Na eritropoiese anormal, em alguns casos, pode ser produzido nmero excessivo de eritrcitos.

Anticoagulantes
EDTA o cido etilenodiaminotetractico. Este anticoagulante o mais utilizado na rotina dos laboratrios pois possuem um excelente poder preservador da morfologia e caractersticas de colorao das clulas vermelhas e brancas. Atuam como quelantes, evitando a coagulao do sangue ao se combinar com o clcio. No se deve exceder o nvel recomendado de EDTA, pois o excesso prejudica a determinao do hematcrito, provocando uma falsa diminuio deste devido ao "encarquilhamento" celular". As quantidades recomendadas so: 1 gota de uma soluo a 10% para 5 ml de sangue ou 1 mg de p por ml de sangue. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor roxa. Heparina Evita a coagulao do sangue ao interferir na converso de pr-trombina em trombina. Afeta de forma intensa e prejudicial as qualidades de colorao dos leuccitos, por isto usado em provas bioqumicas, como por exemplo a dosagem de Ca++ no sangue. Tem um custo bastante elevado. Por estes motivos, utilizado na rotina como anticoagulante, sem apresentar propriedades preservativas. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor verde. Fluoreto de sdio Atua como anticoagulante e conservador de glicose, por isto usado quando se deseja a determinao da glicemia. Na rotina laboratorial o tubo que o contm identificado por uma tampa de borracha de cor cinza.

Colheita de sangue
Local de puno O local de puno varia de acordo com a espcie, quantidade de sangue a ser colhido e a finalidade laboratorial da amostra. Eqinos: Principalmente na veia jugular, quando se deseja maiores quantidades. Para pequenas quantidades e pesquisa de hemoparasitas pode-se realizar uma pequena inciso na borda das orelhas, realizando-se o esfregao do sangue obtido logo em seguida. Bovinos: Para obteno de maiores quantidades, utiliza-se a veia jugular, a veia mamria e a veia coccgea. Para pesquisa de hemoparasitas utiliza-se tambm a borda das orelhas, realizando-se o esfregao do sangue obtido logo em seguida Ces: Quando se deseja realizar pesquisas de hemoparasitas ou alguns testes sorolgicos, como por exemplo para a Leishmaniose Visceral, realiza-se um pequeno corte na ponta da orelha, recolhendo o sangue em um papel de filtro no segundo caso e realizando um

esfregao sangneo normal no primeiro. Para obteno de maiores quantidades de sangue utiliza-se as veias jugular, ceflica ou safena. Gatos: Para maiores quantidades, utiliza-se a veia jugular e ceflica Para pesquisas de hemoparasitas, faz-se o mesmo procedimento que os outros animais. Sunos: Veia cava anterior ou seio venoso orbital. Para pesquisas de hemoparasitas, faz-se o mesmo procedimento que os outros animais. Tcnica de puno A realizao de anti-sepsia no local antes que a agulha seja introduzida na veia de suma importncia na colheita do sangue. Seria desejvel que a rea a ser puncionada fosse depilada antes da anti-sepsia com lcool ou lcool iodado, mas na rotina hospitalar, este procedimento nem sempre feito; sendo resguardado para momentos em que se necessite melhor visualizao do vaso a ser puncionado. Aps a escolha do local adequado e realizao da ant-sepsia, faz-se ento o garrote, isto , a compresso da veia escolhida cranialmente ao local desejado. Se for necessrio, pode-se distender a pele sobre a veia, para que esse fique mais firme. Em seguida, introduzir a agulha na pele com o bisel posicionado para cima, puncionando a veia. Soltar o garrote, recolher o sangue, retirar a agulha e comprimir a regio, para evitar a formao de hematomas. Cuidados a serem observados durante a colheita visando evitar a hemlise e danos aos leuccitos

Observar se a agulha possui dimetro adequado quantidade de sangue que se deseja e ao calibre da veia escolhida; Aderir bem a seringa ao canho da agulha; Deixar o sangue fluir com o mnimo de vcuo; Evitar o bombeamento do sangue; Evitar o excesso de presso na seringa, pois isto poder provocar o colabamento da parede da veia contra o bisel da agulha; Se o sangue parar de fluir, rotacionar cuidadosamente a seringa e a agulha, procurando posicionamento mais adequado; Em sunos, pode ocorrer entupimento da agulha por tecido adiposo e cogulos de sangue quando se tente puncionar mais que uma vez. Este ltimo fato pode acontecer tambm nos outros animais, especialmente os pequenos; Retirar a agulha da seringa antes de colocar o sangue no recipiente.

Colheita de material e exame da medula ssea

O exame da medula ssea fornece informaes a respeito do estado hematopoitico dos animais. Existem vrias ocasies em que este estudo se faz necessrio: anemias no regenerativas, neutropenias e trombocitopenias persistentes, quando so observadas clulas atpicas no sangue, sugerindo uma alterao neoplsica, intoxicao por drogas, radiao. o nico meio de avaliar a resposta a anemias em cavalos. Coloraes especiais fornecem informaes sobre os estoques de ferro e ajuda na diferenciao entre anemias ferroprivas e por inflamao crnica. A medula ssea ativa vermelha, enquanto que aquela no produtiva amarela. Nos animais adultos a maioria das cavidades sseas dos ossos longos so preenchidas por medula amarela, estando a atividade hematopoitica reservada aos ossos chatos, tais como costelas, plvis e ossos da cabea, a ossos menores como as vrtebras e as extremidades

dos ossos longos. Portanto, para obteno de amostras para estudo, necessria a escolha de algum destes stios. O esterno pode ser escolhido para este procedimento em grandes animais, bem como a poro dorsal da oitava a dcima primeira costelas. A crista ilaca um local adequado para colheita tanto em grandes animais como nos pequenos, sendo que nestes utiliza-se tambm a poro proximal do mero e do fmur. A aspirao da material medular na maioria das vezes adequada para a avaliao desejada. Mas em alguns casos necessria a bipsia, especialmente quando se desejam informaes sobre a topografia e arquitetura medulares, quando no de obtm material aps diversas aspiraes ou h suspeita de mielofibrose. Existem agulhas adequadas tanto para obteno de material por aspirao ou para bipsia. No casa de obteno do material por aspirao deve-se ter o cuidado de no aspirar mais que 0,5 ml de material, pois pode haver contaminao com sangue, o que pode dificultar ou mesmo impedir o estudo do esfregao do material obtido. Pela mesma razo no se deve aspirar material medular com muita fora.

Bibliografia
1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. 2) NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Varela, So Paulo, 1994, 163p.

Literatura Recomendada
1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p.

Estudo do eritron
ndice
Introduo Eritrograma Contagem total de eritrcitos Dosagem total de hemoglobina Hematcrito (Hc) ou volume globular (VG) ndices hematimtricos ou valores globulares mdios Bibliografia Literatura recomendada

Introduo
O termo eritron define a massa total de eritrcitos circulantes associado ao tecido eritropoitico da medula ssea. Os mtodos para a avaliao do estado funcional do eritron so a contagem total de hemcias; a avaliao do teor de hemoglobina e a determinao do hematcrito. Estes trs valores, por sua vez, so utilizados para o clculo dos ndices Hematimtricos ou seja, o Volume Globular Mdio (VGM), a Hemoglobina Globular Mdia (HGM) e a Concentrao da Hemoglobina Globular Mdia (CHGM). Tais ndices so utilizados para a elucidao das alteraes do eritron, especialmente na avaliao dos tipos de anemia.

Eritrograma
a avaliao dos eritrcitos, do hematcrito e da hemoglobina, assim como a contagem e avaliao dos reticulcitos, nos casos necessrios.

Contagem total de eritrcitos

Para a realizao da contagem total de eritrcitos podem ser utilizados vrios mtodos, que so divididos em manuais e automticos. O mtodo manual utilizado o mtodo do hemocitmetro ou seja, a Cmara de Neubauer. As contagens automticas so realizadas atravs de aparelhos fotoeltricos, eletrnicos ou a lazer. Hemocitmetro: Utilizado quando em pequenos laboratrios, onde o volume de servios no justifica a compra de um aparelho para a contagem por mtodos automticos. Este mtodo apresenta erros de at 20%. Automticos: Utilizados em grandes laboratrios, onde o volume de exames justifica a compra de um aparelho destes. Podem ser fotoeltricos, que medem a quantidade de luz que transmitida atravs de uma suspenso de hemcias; eletrnicos, quando as hemcias so diludas em uma soluo eletroltica e passadas por uma abertura, que apresenta certa

resistncia eltrica. A alterao na freqncia eltrica igual ao nmero de clulas. Nos aparelhos a laser a difrao da luz incidida sobre as clulas faz a contagem, baseada no tamanho e complexidade interna de cada uma. Estes mtodos apresentam erros de at 5%.

Dosagem total de hemoglobina

A hemoglobina uma protena conjugada, composta por uma protena simples, a globina e por um ncleo prosttico do tipo porfirina, chamado heme, cujo principal componente qumico o ferro. A hemoglobina responsvel por at 90% do peso seco de um eritrcito adulto e por aproximadamente 1/3 de seu contedo celular e sua sntese se faz no citoplasma dos precursores nucleados dos eritrcitos. A molcula de hemoglobina tem peso molecular que varia entre 66.000 e 69.0000 daltons. formada por um conjunto de quatro molculas de heme, ligadas a uma cadeia peptdica, formando um conjunto de duas cadeias alfa e duas beta. O grupamento heme um composto metlico, com um tomo de ferro em seu interior e uma estrutura porfirnica, formada por quatro anis pirrlicos. Os grupamentos heme e polipepitdicos ligam-se atravs de pontes que se abrem facilmente para fazer a ligao com o O2 ou com o CO2. Estas ligaes obedecem ao grau local de tenso destes gases. Nos capilares pulmonares, a tenso de O2 elevada e de CO2 baixa. Desta forma, a ligao de da hemoglobina com o O2 acontece juntamente com a liberao de CO2. Nos capilares dos tecidos ocorre o contrrio. Dentro de uma mesma espcie existem vrias formas de hemoglobina, sendo as principais, alm da hemoglobina, a oxi hemoglobina, meta hemoglobina e hemoglobina reduzida. Essa variedade determinada por alteraes na seqncia de aminocidos da molcula, havendo ainda diferenas entre as hemoglobinas fetais e adultas. O eritrcito, no fim de sua vida til, perde a sua elasticidade, no conseguindo mais passar pelos sinusides do bao, onde fagocitado por um macrfago. No interior desta clula ocorre o desmembramento da hemoglobina, com liberao do ferro do heme e da globina, formando-se ento a bilirrubina, que abandona o macrfago e passa a circular no plasma. A dosagem total da hemoglobina reflete diretamente a capacidade do eritron como carreador de oxignio. A determinao exata do teor de hemoglobina no fcil de ser obtida, pois algumas tcnicas, especialmente as de comparao visual com algum padro, no so suficientemente precisas. Na prtica atual so utilizados mtodos qumicos, em que a leitura feita por espectofotometria, que possuem preciso suficiente para uma interpretao correta. Tais mtodos convertem todas as formas de hemoglobina presentes no interior do eritrcito em cianometahemoglobina, cuja dosagem ento determinada pelo espectofotmetro. A dosagem de hemoglobina dada em g/% ou g/dl.

Hematcrito (Hc) ou volume globular (VG)

Literalmente, a palavra hematcrito significa separao do sangue e essa separao obtida facilmente no laboratrio atravs da centrifugao. Aps este processo, o sangue fica separado em trs partes: a massa vermelha de eritrcitos ao fundo, uma camada bastante fina, branca ou acinzentada, formada de leuccitos e plaquetas logo acima da camada vermelha que chamada de boto leucocitrio e por fim, o plasma. Define-se como hematcrito o volume do sangue total que ocupado pelas hemcias sendo os resultados expressos em porcentagem.

Para a determinao do hematcrito deve ser usado sangue com anticoagulante. O mtodo do microhematcrito atualmente o de eleio para a determinao do volume globular, por requerer menor quantidade de sangue e possuir maior rapidez, sendo realizado em 5 minutos e a leitura feita comparando-se o tubo do microhematcrito com grfico especial. Existem ocasies em que o hematcrito pode estar falsamente aumentado. A principal destas so os casos de desidratao, pela perda de lquidos do organismo. Neste caso, as protenas plasmticas totais estaro tambm aumentadas, diferenciando a desidratao de outra situao na qual haver um aumento real do hematcrito. Quando sangue colhido em situaes de excitao ou estresse, principalmente em eqinos, pois nestes animais o bao reserva cerca de 1/3 do potencial de eritrcitos circulantes, alm de possuir musculatura muito enervada. Portanto, sob estmulos adrenrgicos, ocorre a contrao deste rgo e liberao de grande quantidade de eritrcitos na corrente circulatria, e isto causar alteraes de 10-15% na determinao do hematcrito. Em menor grau, este fato tambm observado em certas raas de ces de difcil manuseio. Por outro lado, existem situaes em que o hematcrito pode estar falsamente diminudo. Em amostras colhidas com excesso de EDTA, uso de amostras velhas e ainda o uso de anestsicos ou conteno qumica pode ocorrer o "encarquilhamento celular", isto uma diminuio do tamanho dos glbulos. Alm da determinao da massa eritroctica em si, outras avaliaes podem ser feitas a partir do hematcrito. Por exemplo, uma avaliao do boto leucocitrio pode sugerir um excesso de leuccitos, se esse estiver muito largo; o teor de protenas plasmticas totais, se o tubo quebrado e o plasma colocado em um proteinmetro para leitura. O aspecto do plasma pode ainda oferecer informaes sobre o estado da amostra colhida, pois normalmente ele se apresenta claro, mas em outras situaes pode ter aspecto avermelhado se h hemlise, esbranquiado se h uma lipemia ou ainda amarelado, se h ictercia. Alguns protozorios pode ser observados no plasma, dentro do tubo do hematcrito, logo acima do boto leucocitrio. So eles Tripanossoma eqinun e T. equiperdum vistos no plasma de equdeos e T. Cruzi, em ces e tatus. Larvas de helmintos so tambm observados, especialmente as microfilrias dos gneros Dirofilaria e Diptalonema, no plasma de ces habitantes de regies litorneas, onde existam insetos transmissores.

ndices hematimtricos ou valores globulares mdios

Utilizando a contagem total de eritrcitos, o teor de hemoglobina e o hematcrito possvel calcular o volume de um eritrcito mdio e sua concentrao de hemoglobina. Estes valores so de importncia particular na determinao do tipo morfolgico das anemias, servindo de guia para a determinao do tratamento e monitorao do paciente. Em alguns contadores automticos, estes ndices so calculados automaticamente. Volume Globular Mdio (VGM) Este ndice determina o tamanho mdio dos eritrcitos ou seja o volume de um eritrcito mdio. Se estiver aumentado, normal ou diminudo, indica se as clulas esto macrocticas, normocticas ou microcticas. O VGM determinado pela diviso do hematcrito em 1.000 ml de sangue (porcentagem x 10) pelo nmero de hemcias em milhes. Os resultados so expressos em fentolitros (fl). A frmula portanto : VGM: Hc x 10 /no He (106) Observao: 1 fl = 1015l

Concentrao hemoglobnica globular mdia (CHGM) uma medida da concentrao de hemoglobina nas hemcias. Expressa a taxa de peso da hemoglobina em relao a um dl de eritrcitos, e no a um dl de sangue total. Se est normal ou diminudo, define morfologicamente se o eritrcito normocrmico ou hipocrmico. O CHGM calculado pela diviso do teor de hemoglobina em 1.000 ml de sangue (g/dl x 100) pelo Hc. Os resultados so expressos em g/dl ou g/%. Portanto, a frmula : CHGM: Hb x 100 / Hc Hemoglobina Globular Mdia (HGM) Indica o contedo hemoglobnico de cada hemcia, sendo porm o peso da hemoglobina em uma clula mdia. menos preciso que o CHGM, pois calculado por dois ndices menos sensveis, que so a dosagem de hemoglobina e contagem total de hemcias. de pouco valor prtico direto. O HGM calculado pela diviso do teor de hemoglobina em 1.000 ml de sangue (g/dl x 10) pelo nmero de hemcias em milhes. Os resultados expressos em picogramas (pg). Portanto, a frmula : HGM: Hb x 10 / no He (106)

Bibliografia
1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. 2) NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Varela, So Paulo, 1994, 163p.

Literatura recomendada

1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p.

Avaliao das anemias

ndice
Introduo Sintomatologia clnica Colheita Classificao das anemias Hemoparasitas Intensidade da anemia Bibliografia e leitura recomendada

Introduo
Pode-se caracterizar anemia quando a contagem de eritrcitos, a dosagem de hemoglobina e a determinao do hematcrito demonstrarem valores abaixo dos normais. Estes valores normais ou de referncia so caracterizados de acordo com a espcie, raa, sexo e idade. No pedido enviado ao laboratrio ou na realizao do exame a anotao da espcie imprescindvel, pois a variao dos valores entre os animais muito grande. Estes valores esto relacionados com o tamanho dos eritrcitos e conseqentemente, com o contedo de hemoglobina. Por exemplo, quando compararmos os eritrcitos de ces e dos caprinos veremos que, os eritrcitos dos caprinos por serem menores, em um mesmo volume sero em maior nmero. Por outro lado, o contedo de hemoglobina est relacionado com a atividade animal isto , animais mais lpidos como os ces e os cavalos tendem a ter contedo maior de hemoglobina que os bovinos. Animais de mesma espcie tambm apresentam variaes; os cavalos utilizados para corrida apresentam os eritrcitos maiores que os animais de trabalho ou trao; os ces da raa Akita apresentam eritrcitos menores, enquanto que os da raa Poodle apresentam eritrcitos maiores em relao ao tamanho mdio para a espcie. A idade outro parmetro importante a ser observado; os animais recm nascidos possuem eritrcitos maiores, ainda de origem fetal que so substitudos gradativamente durante as primeiras semanas de vida. A variao entre sexos discreta podendo haver variaes durante a gestao devido a hemodiluio inerente a gestao.

Sintomatologia clnica
O animal anmico apresenta mucosas plidas e, dependendo da intensidade, pode-se observar tambm fraqueza, aumento da freqncia e sopros cardacos, depresso mental e sede. Tais sintomas so relacionados com a reduzida capacidade de oxigenao sangnea devido aos valores reduzidos da taxa de hemoglobina e dependero da intensidade da mesma. Pela resistncia individual de alguns animais, de mesma espcie ou no, o quadro de anemia pode ser assintomtico.

Colheita

Para avaliao adequada das anemias importante que a amostra seja colhida e manuseada corretamente, pois caso contrrio os resultados podem ser alterados total ou parcialmente. Primeiramente, no estressar muito os animais, em especial os cavalos e os gatos, a contrao esplnica resultante lanar eritrcitos na corrente sangnea alterando o valor do eritrograma. A relao sangue-anticoagulante deve ser correta, pois volumes maiores do anticoagulante podem diluir a amostra e alterar a caracterstica das clulas, como por exemplo, o excesso de EDTA pode causar encolhimento dos eritrcitos. Estase prolongada provoca hemoconcentrao, presso exagerada no mbolo da seringa causar hemlise diminuindo o valor do volume globular e aumentando o valor da hemoglobina alm de aumentar a densidade tica da amostra. A observao de jejum muito importante, pois a lipemia ps prandial pode aumentar a fragilidade osmtica dos eritrcitos tornando-os facilmente lisveis.

Classificao das anemias

As anemias podem ser divididas em relativas e absolutas. As anemias relativas so aquelas nas quais no h reduo da massa celular, ocorre apenas expanso do volume plasmtico. Situam-se nestes casos, as fmeas gestantes, os neonatos e os animais submetidos a fluidoterapia. Por outro lado as absolutas so tambm chamadas de anemias verdadeiras onde verifica-se reduo da massa celular e so classificadas baseando-se na resposta medular, na morfologia e colorao dos eritrcitos e na patofisiologia. Classificao baseada na resposta medular Est relacionada totalmente com a resposta reticulocitria, que est na dependncia da produo e liberao da eritropoetina renal e ou heptica, variando de acordo com a espcie. Baseado na resposta as anemias so consideradas regenerativas, pouco regenerativas e arregenerativas. As anemias regenerativas so aquelas onde se verifica resposta satisfatria da medula ssea, com produo e liberao de clulas jovens, como no caso das anemias hemolticas e perdas sangneas por parasitas ou traumas. As pouco regenerativas so aquelas nas quais se verifica diminuio dos precursores eritrides havendo pouca resposta a estmulos. Ocorre nas deficincias de vitamina B12 e acido flico, vitamina B6 e deficincia de ferro. J nas anemias arregenerativas no se observam precursores eritrides medulares, no h resposta a estmulos como nas anemias aplsticas. No caso particular dos ces, a deficincia de eritropoetina na insuficincia renal crnica grave no gera estmulos para o desenvolvimento e divises da clula tronco e linhagens, causando depresso medular, pois nesta espcie a produo de eritropoetina somente renal. Podem ser tambm causadas por eritropoiese ineficaz isto , ocorre aumento dos precursores eritrides, mas os eritrcitos formados no so liberados na circulao, devido a sua destruio intramedular pelo sistema fagocitrio mononuclear ou por algum defeito de maturao. Podem ter origem em alguma doena primria medular como neoplasias, aplasia eritride, anemia aplstica; ser de origem nutricional ou causadas por algum dano medular, seja qumico e uso de drogas. As doenas nutricionais, tais como deficincias de vitaminas B12 e B6, de ferro, cobalto e cobre geralmente so reversveis bastando para isso corrigir a causa. Por outro lado as outras causas podem provocar leses irreversveis nas clulas tronco eritropoiticas. Essas causas podem ser doenas hepticas, renais, radiao, txicos (samambaia, estrgenos, chumbo), doenas mieloproliferativas, medicamentos (quimioterpicos, fenilbutazona, sulfatrimetropina). A avaliao do sangue perifrico de cada animal oferece indcios da resposta medular: nos ces e gatos encontra-se policromatofilia (indicando reticulocitose); nos cavalos observa-se

macrocitose e anisocitose mas no se observa policromatofilia (por no haver liberao de reticulcitos na corrente sangunea); nos ruminantes observa-se ponteado basfilo e, nos sunos, policromatofilia. A avaliao reticulocitria deve ser relacionada com a espcie em questo, j que so encontrados normalmente no sangue perifrico de ces, raramente em ruminantes e no so encontrados em cavalos. A resposta reticulocitria em ces bastante acentuada permitindo avaliar bem a resposta medular; em ruminantes poucos reticulcitos j so patognomnicos de resposta medular. A avaliao nos eqinos feito pelo exame da medula ssea e ainda, existem atributos bioqumicos celulares nas clulas destes animais que podem ser medidas. Classificao morfolgica. baseada na morfologia do eritrcito e sua concentrao de hemoglobina, utilizando-se os ndices hematimtricos VGM e CHGM. Normoctica e normocrmica Neste tipo de anemia verifica-se pouca ou nenhuma resposta medular, sendo consideradas arregenerativas, ou pouco regenerativas. Geralmente ocorre em doenas crnicas:

doenas inflamatrias: doenas renais com uremia, doenas endcrinas, neoplasias, doenas hepticas, enfim doenas que podem afetar o funcionamento medular ou o estmulo para produo de hemcias; doenas parasitrias que so depressoras de medula como erliquiose e leishmaniose; doenas mieloproliferativas; viroses imunodepressoras e depressoras da medula ssea como cinomose, parvovirose;

Macroctica e normocrmica Relacionada com deficincia de vitamina B12 e cido flico. Com a deficincia vitamnica no h sntese normal de DNA, as clulas no apresentaro divises normais, encontrando-se clulas maiores na corrente sangunea. Como a produo de hemoglobina normal, o ncleo com crescimento contnuo por fim estrusado, dando origem a clulas maiores. Pode ocorrer em doenas hepticas, mieloproliferativas, com o uso de algumas drogas e por distrbios nutricionais. Ocorre na deficincia de cobalto em ruminantes; pois este mineral essencial na sntese de vitamina B12 no rumem. A macrocitose e normocromia pode ser ocorrncia normal em ces da raa Poodle. Macroctica e hipocrmica Geralmente so regenerativas quando ocorre aumento da produo de reticulcitos. A reticulocitose contribui para o aumento do VCM e diminuio do CHCM. Microctica e normocrmica Inicio da deficincia de ferro. Microcitose e normocromia caracterstica dos eritrcitos de ces da raa Akita. Microctica e hipocrmica Ocorre nas deficincias de ferro, cobre e piridoxina (vitamina B6). Nas deficincias de ferro ou falhas na sua utilizao no haver produo normal de hemoglobina e havendo demora na hemoglobinizao no haver parada na sntese de DNA, ocorrendo mitoses extras,

aparecendo clulas menores com pouca hemoglobina na corrente sangnea. O ferro faz parte da molcula de hemoglobina e o cobre co-fator da enzima cido d aminolevilnico (ALA) requerida para sntese do heme, alm de componente principal da ceruloplasmina, enzima responsvel pela transferncia do ferro das clulas da mucosa intestinal para a transferrina, protena de transporte plasmtico. A deficincia de ceruloplasmina dificulta tambm a transferncia do ferro dos macrfagos e do fgado para o plasma. A piridoxina necessria para a eritropoiese , principalmente porque serve de co-fator para a sntese do cido d aminolevilnico que faz parte da biognese do heme. Ocorre em perdas de sangue crnicas como nas leses gastrointestinais, neoplasias, desordens de coagulao, infestao de ecto e endo parasitas hematfagos tais como carrapatos, piolhos, pulgas e vermes. Classificao patofisiolgica Perdas sangneas (hemorragias) podem agudas ou crnicas e esta diferenciao depende da rapidez da instalao do processo. Um animal pode perder at 25% do seu contedo sangneo rapidamente ou cerca de 50% se esta perda for lenta (cerca de 24 horas) sem comprometimento fisiolgico. So exemplos de perdas por hemorragias:

traumas e procedimentos cirrgicos; defeitos de coagulao: envenenamento por samambaia, trevo doce, veneno de rato (dicumarol), trombocitopenias; parasitas, neoplasias, ulceraes intestinais; hemoparasitas: babesiose, ehrlichiose, anaplasmose, hemobartonelose.

Anemias hemolticas tambm tem carter agudo e crnico e geralmente tem carter regenerativo. Causas:

hemoparasitas; anemias hemolticas imunomediadas; intoxicaes: ingesto de cebola por ces e gatos, drogas como acetominofen em gatos, azul de metileno em ces e gatos; anemias hemolticas idiopticas.

Anemias depressivas: relacionadas com o tipo de resposta medular.

nutricionais: deficincia de cido flico e vitamina B12, cobre, cobalto, ferro, vitamina B6; inflamaes: as bactrias e os macrfagos utilizam ferro levando a deplesso orgnica; parasitas. Ehrlichia sp, Babesia sp., parasitoses intestinais crnicas; aplasias idiopticas ou adquiridas; doenas mieloproliferativas.

Anormalidades na forma (Poiquilocitose) A forma normal dos eritrcitos depende do perfeito equilbrio entre as propriedades estruturais da membrana celular e hemoglobina e a influncia dos meios intra e extracelulares. Os eritrcitos possuem forma definida por espcie e a mudana nesta forma pode auxiliar no diagnstico da causa e tipo de anemia. A forma mais comum do disco biconcavo, que pode ser alterado pela passagem atravs da microcirculao.

Codcitos: tambm chamado de clula em alvo; condensao central e perifrica da hemoglobina resultante da redistribuio da hemoglobina celular provavelmente devido ao excesso de membrana (aumento do colesterol da membrana pode variar de 25% a 75%) ou ao pequeno contedo hemoglobnico. So encontradas nas anemias crnicas e em situaes de estase sangnea;

Excentrcitos: condensao da hemoglobina na periferia da hemcia que aparecem como projees em brotamento na borda destas clulas. So encontradas em quadros hemolticos como na ingesto de cebola em ces e ocorrem em casos de animais que receberam drogas oxidantes, como por exemplo a fenotiazina em cavalos ou paracetamol em gatos. Podem surgir em casos de hemoglobinria psparto na vaca; Equincitos: so eritrcitos crenalados. Podem ser artefatos de esfregao, ou excesso de EDTA, como animais em exerccio, em linfomas, glomerulonefrites, como so comuns em sunos. So encontrados em sangue estocado por depleo de ATP; Eliptcitos ou Ovalcitos: so hemcias com forma oval ou elipsoidal. Ocorrem nas leucemias, sendo comum nas espcies de cameldeos; Esfercitos: so eritrcitos pequenos sem o halo central intensamente corados que aparecem como resultado de deformao de membrana citoplasmtica, geralmente produzidas por anticorpos anti-eritrcitos. Somente observadas em ces. Ocorrem em anemias hemolticas imunomediadas. Como estas clulas possuem menor capacidade de deformao, so prematuramente retirados da circulao pelo bao; Acantcitos: so eritrcitos de contorno irregular, assumindo forma estrelar, podendo tambm ser resultado de alterao de membrana atribuido ao aumento do colesterol na mesma. Vistos em doenas renais e esplnicas, no hemangiossarcoma e cirrose heptica, estas clulas so removidas prematuramente pelo bao tendo mais facilidade a lise. No devem ser confundidos com artefatos de tcnica; Esquiscitos ou fragmentos eritrocitrios: so clulas deformadas ou pedaos de clulas ( do grego, schistos, fragmentar), entre os quais se destacam a clula em capacete e a clula em gota. A fragmentao e portanto os esquistcitos ocorrem como resultado de um defeito na produo ou de uma destruio acelerada de eritrcitos. Podem ser vistos em casos de vasculite e na coagulao intravascular disseminada (CID), sendo que nesta ltima as clulas em capacete so caractersticas. Tambm podem aparecer em doenas renais ou esplnicas crnicas e ainda nas anemias ferroprivas; Fuscitos: So hemcias em forma de fuso, nas quais a hemoglobina se polimeriza em forma de tbulos. So encontrados normalmente em cabras de raa angor.

Incluses dos eritrcitos Ponteado basfilo So restos de ribossomos e polirribossomos que apresentam tom azulado formando agregados finos e irregulares no eritrcito. A enzima pirimidina 5'nucleotidase que est presente nos reticulcitos cataboliza estes ribossomas e polirribossomas. Aparecem nas anemias regenerativas em bovinos, ocorre nas intoxicaes por chumbo devido a enibio da enzima pelo chumbo. Corpsculos de Howell-Jolly So restos nucleares observados em forma de pequenos pontos na superfcie do eritrcito apresentando-se como pontos espessos de cor violeta, azul ou quase negros, geralmente na periferia da clula,. Aparecem em casos de anemia severa e so rapidamente retirados de circulao pelo bao e tambm nas anemias regenerativas de ces e gatos, podendo ainda significar inefetividade esplnica. No devem ser confundidos com parasitas do gnero Anaplasma, especialmente Anaplasma marginale pois estes estaro sempre em uma posio fixa e tero o tamanho uniforme, enquanto que os corpsculos apresentam localizao variada e dimenses no uniformes. Em sangue de gatos e cavalos sadios pode ser vistos em at 1%.

Hemoparasitas

Ricketsias Gnero Haemobartonela Aparecem na forma de pequenos cocos ou bacilos escuros na periferia da hemcia. So parasitas do co (H. canis) e do gato (H. felis). Gnero Anaplasma Parasitas dos bovinos, que aparecem como pequenos pontos escuros no citoplasma da clula, sendo que A. marginale possui sempre localizao perifrica e mais numeroso e A. centrale, de localizao central. Protozorios Gnero Babesia Tambm chamados de piroplasmas, pois possuem forma de chama de fogo. Estes hematozorios so vistos no interior dos eritrcitos como gotas nicas ou duplas, unidas pelo vrtice. Podem ser observados no sangue de bovinos (B. bovis ou B. bigemina); eqinos (B. cabali, Nutalia equi); e ces (B. canis). Em eqinos podem parecer em nmero de quatro no mesmo eritrcito, em uma formao chamada de Cruz de Malta. Gnero Plasmodium Tais protozorios podem ser vistos no interior de hemcias de rpteis, aves, ces, gatos e seres humanos.

Intensidade da anemia
A avaliao da intensidade da anemia baseada no valor do hematcrito em relao as varias espcies. Esta intensidade nos direciona na avaliao da necessidade de reposio sangnea. Nos pequenos animais, usa-se os seguintes parmetros de reposio sangunea: hematcrito abaixo de 15% para os ces, abaixo de 10% para os gatos, e para os grandes animais abaixo de 12% mas a melhor avaliao da necessidade de reposio sangunea est na avaliao clnica.

Bibliografia e leitura recomendada

Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 1993. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger, 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATION ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978.

Morais, D,D. Review of anemia in horses Part II: Pathophisiologyc mechanisms, specific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989.

Avaliao das policitemias

ndice
Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bibliografia e leitura recomendada

Introduo
As policitemias so caracterizadas pelo aumento do nmero de eritrcitos, da concentrao da hemoglobina e do volume globular acima do normal avaliado para cada espcie, raa, sexo, idade. Volume globular acima de 50% torna o sangue mais viscoso dificultando o transporte de oxignio e quando este valor supera 60% considerado policitemia.

Sintomatologia Clnica
A viscosidade sangnea aumentada diminue o fluxo sangneo promovendo distenso de capilares e pequenos vasos, que, alm de causar ruptura vascular e mucosas hiprmicas, consequentemente ocorre hipxia, trombose, resultando em poliria, polidipsia, distrbios do SNC, hematemse, epistaxe, hematoquezia, hematria.

Classificao das policitemias

Relativa A caracterstica principal da policitemia relativa que os valores podem voltar ao normal aps a correo do evento. Pode ser devida a dois mecanismos distintos:

Diminuio do volume plasmtico causado principalmente por desidratao, ocasionando aumento do volume globular, mas a massa total de eritrcitos circulantes permanece inalterada. Contrao esplnica aps stress ou dor, com injeo temporria de grande massa de eritrcitos na corrente sangnea.

Absoluta Quando ha aumento da massa celular circulante permanente sem diminuio do volume plasmtico. Policitemia primaria

Tambm chamada de policitemia vera, doena mieloproliferativa caracterizada por excessiva proliferao das clulas tronco hematopoieticas da srie eritride. Esta mieloproliferao independente da produo de eritropoetina. Policitemia secundria Resultado do aumento da eritropoiese resultante de fatores que estimulam a produo de eritropoetina. Causando hipxia renal Neste caso, chamado tambm de policitemia fisiologicamente apropriada, a concentrao de oxignio nos tecidos renais diminui, aumentando a secreo de eritropoetina. So causas:

"Shunt" trio-ventricular Doenas pulmonares crnicas Altitudes elevadas Obesidade acentuada Hemoglobinopatias Depresso do centro respiratrio

Neoplasias produzindo substancia eritropoiticas Nestes casos, a produo de eritropoetina ou outras substancias eritropoiticas tais como corticides, andrgenos e prostaglandinas ocorre sem estmulo da hipxia.

Carcinoma renal Linfossarcoma renal Hepatoma Tumores uterinos Tumores da supra renal

Avaliao laboratorial
Algumas tcnicas inerentes ao laboratrio e a colheita de material podem causar policitemias transitrias. importante a homogeneizao bem feita quando da medida do volume globular pois corre-se o risco de medir a amostra concentrada. Este fato torna-se muito importante no caso dos eqinos que apresentam sedimentao mais rpida. O preenchimento correto do tubo capilar do microhematcrito tambm importante pois quando se preenche mais de 2\3 do tubo dificulta a concentrao da amostra. O exame mais importante o volume globular que deve estar acima de 60%. A medida dos gases arteriais til para se verificar a oxigenao do sangue assim como a dosagem de eritropoetina. Normalmente nas policitemias relativas a saturao de oxignio e os valores da dosagem de eritropoetina so normais enquanto na policitemia primria a saturao de oxignio normal e a dosagem de eritropoetina ligeiramente abaixo do normal; por outro lado, nas policitemias secundarias fisiologicamente apropriadas a saturao de oxignio baixa e a dosagem de eritropoetina alta e nas fisiologicamente inapropriadas, a saturao de oxignio normal mas a dosagem de eritropoetina alta. A anlise clnica e laboratorial das policitemias pode ser feita atravs do fluxograma que se segue:

Bibliografia e leitura recomendada

Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 1993. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger, 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATION ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978. Morais, D,D. Review of anemia in horses Part II: Pathophisiologyc mechanisms, specific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989.

Avaliao das policitemias

ndice
Introduo Sintomatologia Clnica Classificao das policitemias Avaliao laboratorial Bibliografia e leitura recomendada

Introduo
As policitemias so caracterizadas pelo aumento do nmero de eritrcitos, da concentrao da hemoglobina e do volume globular acima do normal avaliado para cada espcie, raa, sexo, idade. Volume globular acima de 50% torna o sangue mais viscoso dificultando o transporte de oxignio e quando este valor supera 60% considerado policitemia.

Sintomatologia Clnica
A viscosidade sangnea aumentada diminue o fluxo sangneo promovendo distenso de capilares e pequenos vasos, que, alm de causar ruptura vascular e mucosas hiprmicas, consequentemente ocorre hipxia, trombose, resultando em poliria, polidipsia, distrbios do SNC, hematemse, epistaxe, hematoquezia, hematria.

Classificao das policitemias

Relativa A caracterstica principal da policitemia relativa que os valores podem voltar ao normal aps a correo do evento. Pode ser devida a dois mecanismos distintos:

Diminuio do volume plasmtico causado principalmente por desidratao, ocasionando aumento do volume globular, mas a massa total de eritrcitos circulantes permanece inalterada. Contrao esplnica aps stress ou dor, com injeo temporria de grande massa de eritrcitos na corrente sangnea.

Absoluta Quando ha aumento da massa celular circulante permanente sem diminuio do volume plasmtico. Policitemia primaria

Tambm chamada de policitemia vera, doena mieloproliferativa caracterizada por excessiva proliferao das clulas tronco hematopoieticas da srie eritride. Esta mieloproliferao independente da produo de eritropoetina. Policitemia secundria Resultado do aumento da eritropoiese resultante de fatores que estimulam a produo de eritropoetina. Causando hipxia renal Neste caso, chamado tambm de policitemia fisiologicamente apropriada, a concentrao de oxignio nos tecidos renais diminui, aumentando a secreo de eritropoetina. So causas:

"Shunt" trio-ventricular Doenas pulmonares crnicas Altitudes elevadas Obesidade acentuada Hemoglobinopatias Depresso do centro respiratrio

Neoplasias produzindo substancia eritropoiticas Nestes casos, a produo de eritropoetina ou outras substancias eritropoiticas tais como corticides, andrgenos e prostaglandinas ocorre sem estmulo da hipxia.

Carcinoma renal Linfossarcoma renal Hepatoma Tumores uterinos Tumores da supra renal

Avaliao laboratorial
Algumas tcnicas inerentes ao laboratrio e a colheita de material podem causar policitemias transitrias. importante a homogeneizao bem feita quando da medida do volume globular pois corre-se o risco de medir a amostra concentrada. Este fato torna-se muito importante no caso dos eqinos que apresentam sedimentao mais rpida. O preenchimento correto do tubo capilar do microhematcrito tambm importante pois quando se preenche mais de 2\3 do tubo dificulta a concentrao da amostra. O exame mais importante o volume globular que deve estar acima de 60%. A medida dos gases arteriais til para se verificar a oxigenao do sangue assim como a dosagem de eritropoetina. Normalmente nas policitemias relativas a saturao de oxignio e os valores da dosagem de eritropoetina so normais enquanto na policitemia primria a saturao de oxignio normal e a dosagem de eritropoetina ligeiramente abaixo do normal; por outro lado, nas policitemias secundarias fisiologicamente apropriadas a saturao de oxignio baixa e a dosagem de eritropoetina alta e nas fisiologicamente inapropriadas, a saturao de oxignio normal mas a dosagem de eritropoetina alta. A anlise clnica e laboratorial das policitemias pode ser feita atravs do fluxograma que se segue:

Bibliografia e leitura recomendada

Jain, N. C. ESSENTIALS OF VETERINARY HEMATOLOGY. Philadelphia, Lea & Febiger, 1993. Jain N. C. SCHALM'S VETERINARY HEMATOLOGY, 4ed., Philadelphia, Lea & Febiger, 1986. Campbell, K. Diagnosis and management of policythemia in dog. CONTINUING EDUCATION ARTICLE, v. 2,n. 4, p. 543-550, 1990. Cole, D, J., Roussel, A, J., Whitney, M,S Interpreting a bovine CBC: Collecting a sample and evaluating the erythron. VETERINARY MEDICINE. N.4, P. 460-478, 1978. Morais, D,D. Review of anemia in horses Part II: Pathophisiologyc mechanisms, specific diseases and treatment. EQUINE PRATICE-HEMATOLOGY. v.2 n.5, p. 39-46, 1989.

Interpretao clnica das alteraes no nmero dos leuccitos

ndice
Alteraes no nmero de leuccitos na circulao Respostas leucocitrias nos ruminantes Contagens leucocitrias absolutas e relativas Interpretao do leucograma Referncias bibliogrficas

Alteraes no nmero de leuccitos na circulao

Variaes no nmero de leuccitos podem ocorrer em situaes fisiolgicas ou de doena. Os sufixos "ose" ou "filia" so usados para denotar um aumento acima da contagem mxima, enquanto que o sufixo "penia" denota diminuio abaixo dos nveis mnimos. A leucocitose pode ser fisiolgica, patolgica em resposta a doena ou vir como resultado de uma alterao neoplsica. De forma especial, a leucocitose fisiolgica deve ser compreendida, para que haja discernimento entre esta e a patolgica. Pode-se observar elevao na contagem total de leuccitos como resultado de exerccio muscular intenso, excitao, apreenso ou alteraes emocionais. Esta elevao considerada leucocitose fisiolgica. Grandes variaes so observadas na contagem total e na contagem diferencial de leuccitos, talvez refletindo a intensidade do estresse envolvido. A contagem total pode aumentar muito, as vezes 100 ou 200%, inicialmente como resultado de elevao dos neutrfilos maduros; portanto esta condio pode ser chamada de "pseudo' neutrofilia. A leucocitose pode tambm ser observada como resultado de linfocitose, especialmente em animais jovens ou em crescimento e em particular no gato e no cavalo. Entretanto, em alguns casos pode haver aumento em todos os tipos de leuccitos. Leucocitose por neutrofilia e linfocitose geralmente considerada como efeito da adrenalina. Aumentos nos nveis de corticides, sejam eles endgenos ou exgenos esto associadas com alteraes previsveis nas contagens total e diferencial de leuccitos. A resposta tpica consiste em neutrofilia, linfopenia e eosinopenia. A neutrofilia devido as clulas maduras, embora bastonetes possam ser observados em algumas ocasies. Para este estmulo, monocitose uma resposta caracterstica do co enquanto que nas outras espcies a resposta varivel. A leucopenia quase sempre devido a um processo patolgico e na maioria das vezes representa prognstico desfavorvel. As leucopenias acontecem quando a contagem total de leuccitos fica abaixo do nvel mnimo considerado para aquela espcie. Leucopenia pode resultar de um ou mais dos seguintes fatores: diminuio da produo em casos de danos a medula ssea ou necrose do tecido linfide, granulopoiese inefectiva ou diminuio da liberao na circulao, aumento na utilizao ou destruio, como nos casos de sepsias. Alguns dos motivos mais comuns de leucopenia so algumas doenas a vrus, septicemia ou toxemia bacteriana, alguns casos de leucemia, anafilaxia, substncias txicas, drogas ou outros compostos qumicos, que competem na utilizao do cido flico pelas clulas e ainda deficincias nutricionais. Alteraes quantitativas e qualitativas em um tipo particular de leuccito pode refletir a natureza do processo e a resposta do organismo a ele. Existem variaes particulares de

acordo com a espcie em questo. O co responde de forma dramtica as infeces microbianas, doenas ou situaes de estresse. Contagens totais de leuccitos de 30.000/ml50.000/ml so comuns e contagens acima destas marcas tambm no so raras. Pode-se entender isto pelo fato que estes animais liberam tanto neutrfilos quanto moncitos em respostas a hormnios adrenocorticais em situaes de estresse. De modo geral, em resposta a doenas os gatos no respondem de forma to significativa como o co, apresentando contagens mximas de 75.000/ml. Por outro lado, leucocitose fisiolgica, na qual os linfcitos se igualam ou at mesmo superam o nmero de neutrfilos, bastante comum em filhotes amedrontados. Esta resposta dos gatos ao medo a excitao devem ser levados em conta na interpretao do leucograma. A leucopenia tambm um achado comum. Em gatos jovens, ela se d principalmente por infeces ao vrus da pancitopenia, mas em gatos mais velhos esta variao observada em situaes de toxemia, que podem causar depresso de medula. Nos eqinos, o nvel de resposta leucocitria fica entre 15.00025.000/ml. A leucocitose acentuada nestes animais so consideradas aquelas entre 25.00035.000/ml e respostas extremas so consideradas na faixa de 35.000/ml. Os ruminantes so ainda menos responsivos que os equdeos. Muito freqentemente, a faixa normal de resposta fica entre 4.0100-12.000/ml. A leucocitose acentuada seria representada por contagens de 20.000-30.000/ml e extremas por valores discretamente superiores a 30.000/ml. Neutrofilia/Neutropenia (Leucocitose/Leucopenia) Os neutrfilos so as clulas presentes em maior porcentagem no sangue dos animais. Assim sendo, a maioria das leucocitoses, vistas principalmente em ces e gatos, so devido a neutrofilia e da mesma forma, a maioria das leucopenias advindas de neutropenias. Como os neutrfilos so as clulas de primeira linha de defesa contra infeces e nas reaes inflamatrias, natural que as alteraes neste tipo de leuccito sejam melhor percebidas. Assim sendo, os termos desvio para a esquerda e desvio para a direita foram propostos para descrever as alteraes no sangue na contagem diferencial destas clulas. Estes desvios so baseados na contagem total de leuccitos, na contagem diferencial de neutrfilos e no grau de maturao destes. Desvio dos neutrfilos direita Neste tipo de alterao o nmero total de leuccitos varivel, mas h elevao no nmero de neutrfilos muito maduros ou seja, hipersegmentados. As formas jovens estaro ausentes ou em nmeros muito reduzidos. observado em doenas caquetizantes ou em situaes de deficincia de vitamina B12. A elevao nos nveis de corticides na circulao, sejam endgenos ou exgenos, faz com que os neutrfilos permaneam mais tempo no compartimento marginal, amadurecendo mais, ficando assim com o ncleo hipersegmentado. Desvio dos neutrfilos esquerda o aumento, na circulao, do nmero de neutrfilos jovens acima do normal da espcie. Ocorre na fase aguda dos processos inflamatrios, por uma liberao mais acelerada dessas clulas pela medula. Existem dois tipos de desvio esquerda, o regenerativo e o degenerativo. Desvio esquerda regenerativo Neste tipo de desvio observa-se leucocitose e neutrofilia, mas h manuteno da distribuio piramidal dos neutrfilos, isto , os mais jovens em nmero inferior aos mais maduros. considerado pequeno quando so vistos apenas neutrfilos bastonetes, moderado quando

so observados metamielcitos e bastonetes e ainda, acentuado quando so vistos mielcitos, metamielcitos e bastonetes. Representa prognstico bom, pois indica funcionamento normal do processo inflamatrio. Desvio esquerda degenerativo Neste caso o nmero total de neutrfilos normal ou h at mesmo neutropenia, mas h aumento do nmero de formas jovens. H duas explicaes para o desvio esquerda degenerativo. No primeiro caso, o nmero de neutrfilos deveria estar aumentado, mas a destruio dessas clulas processa-se a uma velocidade maior que a sua reposio. No segundo caso h uma interferncia no processo de maturao das clulas, causada por agresses em nvel medular. O prognstico para o desvio a esquerda degenerativo reservado, exceto nos ruminantes em fase inicial de resposta inflamatria. Ocasies em que h neutrofilia A neutrofilia fisiolgica no tem relao com alteraes patolgicas; causada por uma liberao sbita dos neutrfilos do compartimento marginal. Isto ocorre aps as refeies, na gestao, aps exerccios violentos ou prolongados, aps vmitos ou convulses e no estresse. Lembrar que o compartimento marginal na maioria das espcies domsticas igual ao compartimento circulante, nas no gato o tal compartimento chega a ser 2-3 vezes maior que o compartimento circulante. Existem situaes em que a neutrofilia patolgica, como por exemplo na fase aguda das inflamaes e infeces, especialmente aquelas causadas por bactrias piognicas, como a maioria dos cocos. Ocorre tambm na agudizao de processos crnicos anteriormente em equilbrio; intoxicaes metablicas, (uremia, acidose diabtica, e hipocalcemia puerperal) ou no metablicas (chumbo, mercrio, digitlicos, adrenalina, veneno de artrpodes peonhentos); leses com necrose abrangente de rgos e tecidos como miocrdio, pncreas e rins e nas leucemias mielocticas. Observa-se neutrofilia tambm em fase inicial e de regenerao das hemorragias, quando a liberao aumentada de eritrcitos jovens pode vir acompanhada de um maior nmero de neutrfilos. Algumas afeces so caracterizadas por extrema neutrofilia, como por exemplo a piometra na cadela e na gata e a pericardite traumtica nos bovinos. Ocasies em que h neutropenia A neutropenia ocorre basicamente por dois mecanismos, ou seja, quando h diminuio da produo de neutrfilos por uma hipoplasia granuloctica da medula ssea, seja ela de origem infecciosa (parvovirose, erlichiose), uso de drogas como estrgeno e sulfas nos ces e fenilbutazona em eqinos e ainda intoxicaes por plantas, como a samambaia no caso dos bovinos. O segundo mecanismo o excesso de consumo dos neutrfilos, em processos infecciosos graves e demorados. Linfocitose/Linfopenia Em filhotes e animais em crescimento observa-se linfocitose fisiolgica, pois neles a atividade imunognica mais intensa. O mesmo ocorre aps vacinaes ou imunizaes, independentes da natureza do antgeno. A linfocitose patolgica ocorre quando o agente agressor antignico, como por exemplo nas erlichioses e de modo especial nas viroses; infeces crnicas; linfoadenopatias inespecficas, locais ou generalizadas. Algumas protozoonoses so caracterizadas por linfocitose persistente, ainda que moderada, podem ser citadas como exemplo a doena de Chagas e a toxoplasmose. A linfopenia ou linfocitopenia ocorre na fase aguda das inflamaes, em viroses imunodepressoras e em processos infecciosos graves. A administrao de antagonistas do

cido flico e de drogas antineoplsicas tambm levam a linfopenia, bem como em algumas doenas mieloproliferativas como a doena de Hodgkin descrita no co, certos linfossarcomas nesta e em outras espcies e em neoplasias de outros tecidos, quando em estado avanado. O aumento no nvel de corticosterides circulantes, seja endgeno como no hiperadrenocorticismo ou iatrognico um fator determinante de linfopenia. Eosinofilia/Eosinopenia. O aumento no nmero de eosinfilos circulantes acima do normal da espcie ocorre em doenas alrgicas, onde h processos inflamatrios com hipersensibilizao; infeces parasitrias, principalmente naqueles em que h leso profunda de tecido e nas parasitoses intestinais, embora nestas com menor intensidade. Observa-se eosinofilia intensa no granuloma eosinoflico do gato. O reaparecimento dos eosinfilos no trmino da fase aguda da inflamao marca geralmente o incio da recuperao do organismo. J a eosinopenia ocorre na fase aguda das inflamaes, aps intenso estresse emocional ou fsico, nas endotoxemias e nas situaes em que h excesso de hormnios corticosterides circulantes, sejam de origem endgena ou exgena. Monocitose/Monocitopenia A monocitose observada principalmente na fase de recuperao das inflamaes, quando os moncitos iniciam o trabalho de "limpeza" da regio inflamada. Outras situaes em que h monocitose so: desnutrio e caquexia, inflamaes inespecficas ou doenas crnicas e leucemia monoctica. A monocitopenia no alterao significante, pois pequenos nmeros destas clulas so normalmente observados. Basofilia No observada normalmente, pois estas clulas esto presentes em nmero bastante reduzido na circulao dos animais domsticos. Em alguns casos, porem, pode ser observada: nas mesmas ocasies em que h eosinofilia, quando h lipemia nos ces ou ainda em casos de tuberculose.

Respostas leucocitrias nos ruminantes

Nestes animais, os linfcitos so as clulas presentes em maior nmero na circulao e o compartimento medular de reserva de neutrfilos segmentados bastante pequeno. Nos estgios iniciais das inflamaes os neutrfilos segmentados dos compartimentos marginal e circulante migram para o local atingido, tendo seu nmero diminudo na circulao. A medula ssea libera ento neutrfilos imaturos que ento superam os maduros. H uma diminuio acentuada dos linfcitos e eosinfilos devido a presena de hormnios corticosterides endgenos, observando-se ento uma leucopenia. Este quadro condizente com desvio para a esquerda degenerativo, no significando prognstico desfavorvel como para as outras espcies. Esta situao pode se manter por 6-24 horas, quando h ento progressiva liberao de neutrfilos maduros pela medula, sendo que a o quadro leucocitrio deve retornar ao normal em 3-4 dias.

Contagens leucocitrias absolutas e relativas

A contagem diferencial de leuccitos feita manualmente deve ser baseada na identificao de 100 clulas. A partir da contagem diferencial de leuccitos, expressa em porcentagem (contagem relativa) e o nmero total da contagem de leuccitos por ml de sangue, obtm-se o nmero total de cada leuccito por ml de sangue (contagem absoluta), determinando-se assim se houve um aumento ou decrscimo no nmero total daquele leuccito em particular. Os erros de interpretao so menos provveis de ocorrer quando os valores absolutos so usados, pois eles permitem a avaliao mais precisa que os valores relativos. Por exemplo, 65% de neutrfilos segmentados, para um co adulto com uma contagem total de leuccitos de 10.000/ml normal? Sim, pois 6500 neutrfilos segmentados/ml uma contagem normal para esta espcie, nesta faixa etria. Por outro lado, 65% de neutrfilos segmentados sempre normal? No. Se o animal apresentar uma contagem total de 1000 leuccitos/ml, sero 650 neutrfilos segmentados, significando uma neutropenia. Se a contagem total for 50.000/ml, sero 32.500 neutrfilos segmentados, o que significa uma neutrofilia. Outro exemplo, se a contagem total de leuccitos for 1.000/ml, 20% neutrfilos segmentados iro corresponder a 200 clulas. Este mesmo valor, isto , 200 clulas significam apenas 2% se a contagem total 10.000 leuccitos/ml e 2% de neutrfilos segmentados representam 1.200 clulas se a contagem total de leuccitos for de 60.000/l.

Interpretao do leucograma
Qualquer interpretao do leucograma deve levar em considerao os valores normais para a espcie em questo, idade do animal e respostas espcie-especficas. Sabemos que animais mais jovens possuem mais linfcitos que os adultos. Por exemplo, linfocitopenia deve ser considerada se encontramos < 2.000/ml em um co com menos de 6 meses de idade; < 1.500/ml em um co com menos de 1 ano e < 1.000/ml em um co adulto. A raa do animal deve ser levada em considerao especialmente em cavalos e ruminantes. A diferenciao entre leucocitose fisiolgica e leucocitose reativa requer muitas vezes considerao de outros fatores do hemograma e difcil em algumas ocasies. Hemogramas seqenciais podem ser feitos diariamente em tais pacientes, pois a leucocitose fisiolgica transitria. As alteraes nas contagens dos leuccitos podem envolver alteraes na produo, liberao, distribuio intravascular e consumo pelos tecidos. Por exemplo, os neutrfilos circulantes esto em equilbrio com os neutrfilos do compartimento marginal e do compartimento de reserva da medula. Uma demanda inicial de neutrfilos atendida pela mobilizao das clulas do compartimento marginal e do compartimento circulante, depois pelo compartimento de reserva da medula e finalmente por aumento na granulopoiese e liberao acelerada. Portanto, o tamanho do compartimento circulante, compartimento marginal e do compartimento de reserva e a capacidade proliferativa da medula so importantes na resposta neutroflica do organismo.

Referncias bibliogrficas
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WILLARD, M.D., TVEDTEN, H., TURNVALD, G.H. Small animal diagnosis by laboratory methods.. W.B. Saunders Company, 2 ed., Philadelphia, 1994, 377 p.

Hemostasia
ndice
Introduo Sintomatologia clnica Fatores envolvidos Hemostasia primria Hemostasia secundria Fibrinlise Avaliao laboratorial Esquema diagnstico Anormalidades de hemostasia Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue

Introduo
Entende-se por hemostasia processos naturais e ou artificiais, fisiolgicos e bioqumicos envolvendo tanto estimulantes como inibidores da coagulao, necessrios para impedir que o sangue escape dos vasos lesados. Esses processos englobam vasos, plaquetas, fatores de coagulao e mecanismo fibrinoltico tendo as funes de limitar a perda sangnea, preservar a perfuso tecidual e reparar a leso local. Quando envolve apenas substancia intravasculares chamado sistema intrnseco e quando envolve tambm fatores teciduais denominado sistema extrnseco. O histrico do animal constando a idade, sexo e raa muito importante pois as coagulopatias hereditrias so muito comuns em animais jovens; as adquiridas so mais comuns em animais idosos; aquelas envolvendo os fatores VIII e IX so ligados ao cromossoma X ocorrendo primariamente em machos e algumas raas so mais propcias a apresentarem deficincias de fatores de coagulao, tais como Doberman, Pastor Alemo e outros. Estes processos hemostticos envolvem sistema intrnseco e extrnseco. O primeiro envolve apenas as substncias intravasculares e o segundo envolve tambm fatores teciduais.

Sintomatologia clnica
Os sinais e sintomas das alteraes hemostticas podem ser brandos ou emergenciais, observando-se hemorragias puntiformes (petequias), epistaxe, sangramentos gastrointestinais (hematoquezia e melena), hematmese, hemorragias oculares, hemartroses, hematomas.

Fatores envolvidos
Vasculares Dependem da existncia de vasos sangneos funcionais e com estrutura ntegra, pois o endotlio vascular participante dinmico em muitos aspectos da hemostasia. O mesmo constitui-se de monocamada de clulas na superfcie luminal dos vasos, possuindo caractersticas prprias nas artrias, veias, vnulas, arterolas e capilares nas vrias partes do corpo. As caractersticas superficiais do endotlio e o glicoclix endotelial associado contribuem para a tromboresistncia endotelial. Tromboresistncia o mecanismo pelo qual o sangue no coagula dentro dos vasos, sendo a maior funo das clulas endoteliais e depende de atributos estruturais, sintticos e metablicos. Essas propriedades antitrombognicas incluem mecanismos ativos e passivos. O mecanismo passivo corresponde a carga negativa que repele substncias de carga similar e clulas. Os constituintes do glicoclix so anticoagulantes naturais como o sulfato de heparan, a heparina e o sulfato de dermatan. O sulfato de heparan estimula a atividade da antitrombina III, anticoagulante mais importante circulante no plasma, provendo 80% do efeito anticoagulante. A heparina o anticoagulante mais importante encontrado na microcirculao. As clulas endoteliais tambm processam a trombomodulina que receptor superficial para a trombina ajudando a inativ-la. O complexo trombina-trombomodulina estimula a protena C, substncia vitamina K dependente, que tem atividade tambm anticoagulante, mediando a inibio dos fatores V e VIII ativados. O endotlio produz ainda ADPase, (enzima que inativa o ADP) e a prostaciclina (PGI). O ADP ativador fisiolgico das plaquetas e o PGI vasodilatador e inibidor da agregao plaquetria atravs da elevao do contedo celular de monofosfato cclico de adenosina (CAMP) inibindo a agregao plaquetria. O tromboxano A2 a prostaglandina plaquetria mais ativa e antagonista dos efeitos da PGI. As clulas endoteliais produzem ainda elastina, colgeno, fibronectina e fator de Von Willebrand que tem papel importante na formao do tampo hemosttico primrio. O colgeno promotor de aderncia das plaquetas aos componentes subendoteliais; a fibronectina e a globulina promovem adeso, agregao e aglutinao plaquetria e o fator de Von Willebrand componente da molcula do fator VIII, sua falta dificulta a adeso plaquetria e liberao de fator VIII. Outra funo endotelial produo de ativador tecidual do plasminognio (ATP) que converte plasminognio em plasmina responsvel pela lise do cogulo de fibrina. Plaquetas Tambm denominados trombcitos so pequenos fragmentos citoplasmticos derivados dos megacaricitos produzidos na medula ssea, bao, fgado e pulmes que apresentam as seguintes funes: adeso e liberao de eventos contrateis, agregao e retrao do cogulo. Fatores de coagulao So protenas plasmticas (glicoprotenas), que circulam em estado inativo sendo seqencialmente ativadas aps exposio ao colgeno ou fator tecidual. O nico fator no proteico o fator IV (Ca2+ ), que necessrio na maioria das reaes.Todos esses fatores so produzidos no fgado com exceo dos fatores VIII e o fator IV. Acredita-se que a sntese do fator VIII seja dividido em duas partes:, o fator VIII:von Willebrand (F VIII:VWF) vem das clulas endoteliais e megacaricitos e a outra parte, o (F VIII:C), possivelmente do fgado. Todos os fatores esto presentes no plasma, com excesso do fator III (tromboplastina tecidual). Estas protenas so divididas em trs grupos: o primeiro grupo ou famlia fibrinognio, compe-se de fibrinognio (fator I) e dos fatores V, VIII, e XIII; o fator XIII estabiliza a fibrina e os outros atuam como substrato para trombina. Os fatores V e VIII servem como cofatores que aceleram o processo de coagulao, so lbeis no sendo encontrados em sangue estocado. No segundo grupo, que vitamina K dependente, tambm chamado complexo protrombnico. incluem os fatores II, VII, IX, X e as protenas C e S. J o

terceiro grupo chamado grupo de contato, incluem os fatores XI, XII, cininognio e calicreina. Biosntese dos fatores Os fatores II, VII, IX e X so inicialmente sintetizados pelos hepatcitos como percursores inativos e requerem vitamina K para sua ativao. Os macrfagos produzem vrios fatores de coagulao como os fatores II, V, VII, IX e X e fator tecidual. O fator V tambm sintetizado pelos megacaricitos e possivelmente por clulas endoteliais. O fator de Von Willebrand (VWF) sintetizado por clulas endoteliais e megacaricitos, estando presente nos a grnulos plaquetrios. O fator XIII alm do fgado, sintetizado nos megacaricitos, moncitos e tambm pela placenta. Os megacaricitos produzem tambm fibrinognio. Sistema fibrinoltico Consiste no plasmonognio e todas as molculas que convergem o convergem em plasmina. Tem funo de dissolver o cogulo de fibrina.

Hemostasia primria
A hemostasia secundria consiste na formao de fibrina pelos fatores de coagulao para estabilizar o tampo hemosttico primrio. A mesma exposio ao colgeno atravs da leso vascular inicia a cascata de coagulao. A pr cralicreina e o cininognio dos tecidos lesados potenciam esta ativao. A prpria carga negativa tecidual estimula a ativao do fator XII, ativando o sistema intrnseco. Ao mesmo tempo as clulas endoteliais lesadas provocam exudao da tromboplastina tecidual (fator III) que ativa o fator VII, iniciando o sistema extrnseco. Finalmente o fator X ativado dispara a formao da fibrina entrelaada na qual se formar a malha de eritrcitos. A trombostenina dentro do cogulo plaquetrio se contrai, formando o grande tampo em cobertura. Durante todo o processo mecanismos reguladores mantm o processo de coagulao localizado. A trombina liga-se aos receptores das clulas endoteliais integras e liberam a PGI2 que tem a funo de inibir a agregao plaquetria; o complexo heparina antitrombina III cessa o processo de coagulao. Estes fatores de coagulao ativados precisam ser eliminados e o so por processos celulares (SFM, fgado, pulmes, neutrfilos) e humorais.

Hemostasia secundria
A hemostasia secundria consiste na formao de fibrina pelos fatores de coagulao para estabilizar o tampo hemosttico primrio. A mesma exposio ao colgeno atravs da leso vascular inicia a cascata de coagulao. A pr cralicreina e o cininognio dos tecidos lesados potenciam esta ativao. A prpria carga negativa tecidual estimula a ativao do fator XII, ativando o sistema intrnseco. Ao mesmo tempo as clulas endoteliais lesadas provocam exudao da tromboplastina tecidual (fator III) que ativa o fator VII, iniciando o sistema extrnseco. Finalmente o fator X ativado dispara a formao da fibrina entrelaada na qual se formar a malha de eritrcitos. A trombostenina dentro do cogulo plaquetrio se contrai, formando o grande tampo em cobertura. Durante todo o processo mecanismos reguladores mantm o processo de coagulao localizado. A trombina liga-se aos receptores das clulas endoteliais integras e liberam a PGI2 que tem a funo de inibir a agregao plaquetria; o complexo heparina antitrombina III cessa o processo de coagulao. Estes fatores de

coagulao ativados precisam ser eliminados e o so por processos celulares (SFM, fgado, pulmes, neutrfilos) e humorais.

Fibrinlise
Consiste na dissoluo do cogulo de fibrina. O sistema fibrinoltico o plasminognio e todas as substancias que convergem o plasminognio em plasmina, que responsvel pela dissoluo do cogulo de fibrina. A plasmina gerada pelos ativadores do plasminognio que so produzidos pelas clulas endoteliais em resposta a leso. A fibrina dissolvida em vrios fragmentos chamados de produtos de degradao da fibrina (FDP) que tem ao anticoagulante, interferem com a funo plaquetria e tambm atuam sobre a inibio da trombina. So removidos da circulao pelo fgado. A leso vascular recuperada por fibroblastos estimulados que migram para a rea lesada e produzem colgeno para reparo vascular permanente. Fatores de crescimento plaquetrio estimulam a formao de novas clulas endoteliais e colgeno, estimulando a produo de fibroblastos para reparar a rea lesada.

Avaliao laboratorial
A avaliao laboratorial deve ser sempre relacionada com a sintomatologia e histrico clnico. Como exemplo animais com distrbio de sangramento causado pela Doena de von Willebrand apresentam testes de coagulao normais apesar dos sintomas clnicos, por outro lado, animais com deficincia de fator XII ou deficincia de prcralicrena podero apresentar testes anormais, mas no apresentar sangramentos. Os testes de hemostasia podem ser divididos em testes gerais que avaliam a atividade de todo o mecanismo hemosttico (vasculares, plaquetas, coagulao e resposta fibrinoltica) e testes mais especficos que avaliam os componentes passo a passo desses processos. Colheita A veninpunctura inadequada pode acrescentar ao sangue colhido tromboplastina tecidual ativando fatores de coagulao e plaquetas. Qualquer remoo de sangue resulta em alguma ativao, por isso para qualquer avaliao laboratorial de hemostasia, o vaso deve ser puncionado da primeira vez. O uso de seringas descartveis recomendado pois o vidro ativa as plaquetas. Para avaliao dos fatores de coagulao, deve-se usar sempre plasma, que no seja colhido em EDTA, pois este evita a coagulao quelando o Ca++ . O soro tambm no deve ser utilizado porque deficiente em fatores I, II, V e tem concentraes reduzidas de fator XIII e maior concentrao de fator IX se comparado ao plasma. O uso de seringas de plstico e vidros siliconizados imprescindvel na avaliao do processo hemosttico, no sentido de diminuir a superfcie de ativao plaquetria e protenas de coagulao. O manuseio rpido e cuidadoso do sangue importante na avaliao da funo plaquetria, estas se deterioram rapidamente quando retiradas da corrente sangunea. Testes gerais para avaliao da hemostasia Hemostasia geral Tempo de sangria Tempo Tempo Tempo Tempo de de de de coagulao protrombina tromboplastina parcial trombina

Perfil de coagulao

Atividade plaquetria Fibrinlise

Contagem e avaliao plaquetria Retrao do cogulo Lise do cogulo Produtos de degradao da fibrina

Avaliao das plaquetas Para a contagem de plaquetas deve ser usado sangue colhido em EDTA que impede a agregao das mesmas. Pode-se contar por mtodos diretos usando o hemocitmetro ou via indireta por avaliao do esfregao sangneo correlacionando com o nmero de hemcias. Por esse mesmo mtodo avalia-se tambm a forma e tamanho das mesmas. A avaliao plaquetria via esfregao sanguneo oferece resultados satisfatrios de forma rpida. A contagem de 10 a 30 plaquetas em um campo de imerso sugere nmeros normais, isto , cada plaqueta em tal campo microscpio representa cerca de 15000/mm3. A presena de plaquetas gigantes indica hipertrofia de megacaricitos e resposta regenerativa. Tempo de sangria (TS) Este mtodo avalia-se as desordens plaquetrias e vasculares. Mede-se o tempo de sangramento desde o momento da perfurao da leso at o cessar o sangramento. No um teste especificamente laboratorial e no muito preciso, depende da espessura da pele, da profundidade da leso perfurante, do estado emocional do animal. Retrao do cogulo A porcentagem de retrao do cogulo representada pelo volume do soro obtido, aps a coagulao de uma quantidade determinada de sangue. Aps a retrao, o soro expulso da malha de fibrina, que se retrai pela ao das plaquetas. Este teste nos fornece dados relativos atividade plaquetria, em relao a quantidade e qualidade. um teste que apresenta variveis, no sendo muito preciso. A quantidade de trombina, de fibrinognio e valores anormais do hematcrito, influenciam o resultado. Por exemplo, nas policitemias, obtm-se pouca quantidade de soro e nas anemias, o hematcrito baixo fornece cogulo proporcionalmente reduzido. Avaliao da coagulao Tempo de coagulao (TC) Avalia o sistema intrnseco, simples, mas pouco sensvel, sendo influenciado por muitos fatores como volume do sangue, tipo do tubo, temperatura, valor do hematcrito, concentrao de plaquetas. Tempo de protrombina (TP) Avalia o sistema extrnseco e os fatores de coagulao da cascata comum I, II, III, V, VII, X. O princpio do mtodo, baseia-se no fato que, ao plasma descalcificado adicionado excesso de tromboplastina. Considerando que a protrombina convertida em trombina em tempo uniforme, a recalcificao com quantidade correta de cloreto de clcio produz coagulao do plasma. Por ser um mtodo avaliado em segundos, os processos devem ser precisos desde a colheita, sem hemlise e sem traumatismos, com relao certa do anticoagulante correto (Oxalato ou citrato). Este teste no afetado por alteraes plaquetrias.

Tempo de tromboplastina parcial ativada (TTPa) Avalia o sistema intrnseco e a cascata comum sendo utilizado no diagnstico das hemofilias. Este teste envolve tambm a recalcificao do plasma, porm, em presena de uma cefalina. A cefalina uma lipoprotena que funciona como substituto das plaquetas, fornecendo uma concentrao tima de fosfolpede. O meio de ativao por contato obtido pela adio de suspenso de caolin ao reagente.

Esquema diagnstico
TTPa Deficincia plaquetria Deficincia do fator VII Sistema intrnseco Normal Normal Aumentado TP Normal Aumentado Normal TC Normal Normal Aumentado TS Aumentado Normal Normal Normal

Deficincia de fibrinognio Aumentado Aumentado Aumentado

Anormalidades de hemostasia
Congnitas . Hemofilia A (Deficincia do fator VIII) Doena hemorrgica ligada ao cromossoma X, podendo ocorrer em ces, cavalos, gatos e bovinos. Doena de Von Willebrand Como o nome indica ocorre por deficincia deste fator, sendo comum em ces das raas Doberman, Pastor Alemo, Poodle e Schnauzer, sunos e eqinos. Deficincia do fator VII Ocorre com alta incidncia em ces da raa Beagle. Deficincia de fator X Descrito em ces da raa Cocker Spaniel. Deficincia de fator XI Observado em bovinos e ces da raa Springer Spaniel. Hipoprotrombinemia Comum em ces da raa Boxer.

Adquiridas Deficincia de vitamina K Intoxicao por veneno de rato (Warfarina). Em sunos devido a tratamento prolongado com antibiticos. Doena heptica Diminuio da sntese de fatores de coagulao, No remoo de produtos de degradao da fibrina, M absoro de vitamina K. Glomerulonefrite Perda de antitrombina 3.

Nomenclatura internacional dos fatores de coagulao do sangue

I - Fibrinognio II - Protrombina III - Trombloplastina tissular IV - Clcio V - Fator lbil, AC-globulina, proacelerina VII - Proconvertina, fator estvel VIII - Fator anti-hemoflico (FAH), tromboplastinognio IX - Componente tromboplastnico do plasma (CTP), fator de Christmas X - Fator de Stuart-Power, fator de Stuart XI - Antecedente tromboplastnico do plasma (PTA) XII - Fator de Haegeman, fator de ativao "in vitro" XIII - Fator de estabilizao da fibrina (FEF), fibrinase, fator de Laki-Lorand

Avaliao laboratorial do lquido cfalo raquidiano

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Introduo Produo / circulao Funes Colheita Riscos e contra indicaes Tcnica de colheita Anlise laboratorial Bibliografia e literatura recomendada

Introduo
O Sistema Nervoso Central (SNC) est completamente alocado dentro de ossos dificultando avaliao clnica satisfatria e procedimentos tais como bipsias e avaliaes radiogrficas. O crebro mantm estrito isolamento do restante do organismo; muitas substncias que circulam pelo corpo podem nunca penetrar no liquido cfalo raquidiano (LCR) e vice versa, substncias qumicas cerebrais e do LCR nunca se difundiro para a circulao geral. Essa caracterstica mantida pela barreira hematoceflica, que uma entidade fsica e qumica que mantm o crebro estvel no corpo que sujeito a variaes drsticas. A bipsia geralmente traumtica, podendo ocasionar leses irreversveis no SNC e, as radiografias normalmente oferecem poucas informaes. Alguns exames como tomografias computadorizadas e ressonncia magntica so onerosos e de difcil acesso. O exame do LCR ou o lquor um teste diagnstico do SNC que fornece boas informaes, e com treinamento e prtica, oferece mnimo de trauma.

Produo / circulao
Cerca de 70% do lquor (LCR) produzido primariamente nos plexos corides do sistema ventricular cerebral, outros 30% so formados em outros stios como as clulas ependimais do sistema ventricular e dos espaos subaracnides cerebrais. Normalmente duas barreiras podem ser identificadas entre os capilares sanguneos que nutrem o SNC e o fluido intersticial das clulas neuronais. A primeira, a barreira sangue - lquor uma membrana semipermevel formada por endotlio vascular e clulas ependimais altas do plexo coride que protege o SNC de vrias substancia, inclusive inicas. O lquor o resultado da ultrafiltrao do plasma e transporte ativo atravs desta membrana. Uma segunda barreira, a barreira LCR - crebro permite que alguns materiais sejam transportados do LCR para o fluido intersticial do crebro e medula espinhal. Quando comparado com o plasma, o lquor possui discretamente mais cloretos, sdio e magnsio; discretamente menos potssio, clcio e glicose e significativamente menos protenas. relativamente acelular, contendo poucos linfcitos. Sua velocidade de formao cerca de 0,05 cc/minuto em ces e 0,02 cc/minuto em gatos e essa velocidade independente da presso do lquor ou da presso hidrosttica sangunea, mas reduzida por aumento da presso osmtica. Sua circulao ocorre no

sistema ventricular, entrando nos espaos sub aracnides atravs de aberturas laterais do quarto ventrculo cerebral. Nos espaos subaracnides difunde-se entre as membranas sub aracnides e pial da coluna vertebral e do crebro, banhando toda superfcie do SNC. O fluxo primariamente no sentido caudal sendo na maioria das vezes absorvido atravs das vilosidades aracnides nos seios venosos e veias cerebrais. Estas estruturas atuam como vlvulas de uma s direo (lquor - sangue venoso) que se abrem quando a presso do lquor excede a presso venosa e se fecham quando a presso venosa aumenta, prevenindo o retorno do sangue venoso para os espaos sub aracnides. Pequenas quantidades so absorvidas pelas veias e linfticos encontrados ao redor das razes dos nervos espinhais, primeiro e segundo par craniano quando saem do crnio.

Funes
O LCR cobre todo o SNC mantendo o crebro e a medula espinhal suspensos, protegendo-os de injrias. Ajuda a modular as variaes normais da presso intracraniana (PIC) junto com o fluxo sangneo cerebral, possui propriedades antibacterianas e anticorpos, assim como meio de transporte de nutrientes, metablitos, neurohormnios e neurotransmissores.

Colheita
O LCR um importante aliado no diagnstico das doenas do SNC, mas a colheita pode ser perigosa, devendo-se tomar certos cuidados.

Riscos e contra indicaes

Anestesia Os cuidados na monitorao da anestesia so muito importantes; em pequenos animais ela feita com animais entubados e controlados; nos grandes animais, pela dificuldade de anestesia, recomenda-se boa tranqilizao e boa conteno para evitar traumas medulares. Traumatismo A colheita requer experincia e/ou acompanhamento de pessoas experientes. O treinamento em cadveres recomendado. Como o LCR cobre a medula espinhal, qualquer processo traumtico pode ocasionar leses irreversveis. A penetrao da agulha pode traumatizar um ramo do plexo venoso vertebral que corre juntamente com a juno atlanto-occiptal. Como este traumatismo no ocasiona leses no animal, nova puno deve ser efetuada. Contaminao Como um espao fechado e estril, recomenda-se total assepsia para evitar veiculao de doenas contagiosas, assim como evitar o contgio do colhedor em casos de doenas infecto contagiosas. Presso intracraniana Em casos de traumas cranianos, edemas cerebrais, hematomas sub durais, aneurismas, abscessos, neoplasias onde a presso intracraniana poder estar alterada, a remoo do

lquor pode causar baixa presso nas reas puncionadas em relao ao compartimento intracraniano ocasionando herniao do forame magno tentorium ou hrnia cerebelar.

Tcnica de colheita
Em geral recomenda-se anestesia geral e intubao dos pacientes assim como preparao de rea cirrgica. Como o LCR no possui diferenas de composio durante o seu percurso, pode-se colher tanto em puno cisternal como lombosacral. Alguns autores indicam a colheita prxima da leso como meio mais eficiente de diagnstico, mas devido dificuldade de colheita fora do forame magnum, pouco usado. Colhe-se normalmente em trs frascos: contendo EDTA, estril para cultura e frasco normal. Ces e gatos Nestes animais utiliza-se principalmente a colheita occipital, ou cisterna magna, podendo em alguns casos nos ces, utilizar-se colheita lombar. Colheita na cisterna magna O paciente colocado em decbito lateral, com a cabea formando um ngulo de 90 com a coluna cervical. No inclinar demais a cabea para evitar obstruo traqueal. Delinear o espao entre a protuberncia occipital e a ponta crnio dorsal da vrtebra C2, o espao mediano o local onde inserimos a agulha. Esta agulha deve ter um estilete para evitar entupimento no transpassar da pele como tambm evitar contaminao celular intramedular. Esperar o gotejamento evitando a aspirao. A quantidade coletada varia de um a dois ml que ser suficiente para todos os exames, devendo-se colher em frascos separados para culturas e rotina, devendo-se os exames serem processados rapidamente para evitar deteriorao celular. Colheita lombar A puno neste espao de colheita mais indicado para mielografias. A colheita de lquor mais difcil, pois menor quantidade de material obtido e maior a possibilidade de traumatismos e sangramentos. A utilizao desse espao pode ser necessrio em casos de doenas que possam obliterar o espao subaracnideo da cisterna magna, ou na localizao de doenas de origem traco - lombar, j que o fluxo do LCR no sentido caudal. A puno poder ser entre L5 - L6 ou entre L6 -L7, tendo-se o cuidado de fletir os membros para abrir os espaos intervertebrais. Bovinos/ovinos Nestas espcies usa-se tambm as duas formas de colheita, mas preferencialmente, utilizase colheita lombar. Colheita na Cisterna magna Como nos ces os animais so colocados em decbito lateral, podendo-se tambm fazer a colheita com o animal em estao, sendo esta forma mais difcil. Pode-se colher um total de 100 ml de cada vez, porm dois a trs ml so suficientes para todos os exames. Colheita Lombar

Pode ser realizado com animal em estao, sendo a agulha introduzida no espao entre a ultima vrtebra lombar e primeira sacra (L6 S1). O local a ser puncionado anestesiado; os animais indceis devem ser sedados. A colheita ser facilitada com o animal posicionado em decbito esternal, com os membros anteriores flexionados e os membros plvicos estendidos no sentido do abdmen. Eqinos Nestes animais importantssimo a anestesia geral e intubao. O mtodo de escolha a cisterna magna, sendo o animal colocado em decbito lateral como nos pequenos animais. Pode-se tentar a colheita lombar no mesmo local dos bovinos.

Anlise laboratorial
Consiste nos exames fsico, citolgico e bioqumico. O exame citolgico deve ser efetuado at 30 minutos aps a colheita ou resfriado imediatamente para evitar degenerao celular. Exame fsico Cor O lquor de qualquer espcie tem cor semelhante gua, qualquer turvao indica alterao, como aumento celular e/ou de protenas. A cor deve ser verificada antes e aps centrifugao. O lquor hemorrgico que apresenta cor clara aps centrifugao indica que as hemcias esto intactas sugerindo sangramento recente; o lquor amarelado pscentrifugao sugere hemorragias antigas, com degradao de eritrcitos. A xantocromia, um amarelo mais denso, sugere formao de bilirrubina derivada da degradao do eritrcito, como nos casos de hidrocefalia, neoplasias do SNC, hemorragias subaracnideas, inflamaes agudas e ictercias sistmicas. Densidade No parmetro muito usado, mas seu aumento acima de 1.000 indica aumento de protenas, aceitando-se como normais, os valores entre 1004-1006 para ces e gatos e ruminantes e eqinos valores abaixo de 1010. avaliada pelo uso do refratmetro. Coagulao O lquor normalmente no se coagula, podendo ocorrer por causa de sangramento iatrognico ou aumento de fibrinognio. Geralmente ocorre nos processos supurativos. Exame Citolgico Citometria a contagem global das clulas do lquor, podendo ser utilizada a cmara de Neubauer ou a de Fuchs-Rosenthal. Normalmente o lquor acelular, podendo apresentar variaes normais de 0 - 8 clulas nucleadas /mm3, no se encontrando hemcias. O aumento do nmero de clulas denomina-se pleocitose. As clulas do lquor se degeneram rapidamente, por isso a contagem e avaliao celular devem ser realizada at uma hora aps a colheita. Existem poucas variaes do nmero celular em relao aos locais de colheita, mas espera-se no LCR colhido na cisterna magna cerca de cinco clulas/mm3 enquanto a puno lombar contm

menos de um clula /mm3. A pleocitose nas meningoencefalites bacterianas geralmente apresenta nmeros altos (500-1000/mm3). As doenas virticas, Ricketisias, intoxicaes e micoses apresentam pleocitose moderada. Citologia a parte mais importante do exame do lquor, podendo-se encontrar anomalias celulares mesmo no apresentando aumento do nmero total de clulas. Usa-se a mesma colorao para os exames hematolgicos. A maior parte das clulas encontradas so linfcitos que se deterioram facilmente devendo a colorao e o exame ser realizados rapidamente. Ainda podem ser encontrados poucos moncitos e raros neutrfilos. Como o lquor tem poucas clulas, usa-se centrifugao em baixa rotao para evitar danos celulares. A presena de linfcitos reativos sugerem estmulo antignico local, doenas infecciosas, processos neoplsicos e doenas imunomediadas. A neutrofilia sugere doenas inflamatrias e bacterianas, traumas, meningites asspticas e spticas e neoplasias; sendo que a presena de neutrfilos degenerados diagnostica infeces. Infeco por toxoplasmose e fungos apresenta uma relao igual de mono e polimorfonucleares, nas meningoencefalites granulomatosas, h predominncia de mononucleares. Pode-se encontrar ainda clulas das meninges, plexo coride e clulas ependimais que podem ser freqentes em amostras colhidas pela aspirao com seringa. A presena de eosinfilos apesar de ser aparentemente inespecfica, pode sugerir a presena de parasitas, hipersensibilidade, ou processos neoplsicos envolvendo o SNC. A presena de macrfagos fagocitando eritrcitos indica que a presena de sangue no LCR de cerca de mais de um dia. A presena de clulas neoplsicas pode indicar neoplasias no SNC, desde que este processo esteja em comunicao com os espaos subaracnideos. A presena de bactrias e fungos pode ser confirmada respectivamente pela colorao de Gram e tinta da China. Exame Bioqumico Dosagem de protenas A quantificao das protenas do lquor usada para detectar um aumento na permeabilidade da barreira hematoceflica, aumento na sntese protica no SNC e traumas. A alterao de valores pode indicar processo iatrognico, inflamaes, obstruo do fluxo do LCR, aumento na sntese de imunoglobulinas e leses destrutivas locais, levando ao aumento protico. J que o lquor um ultrafiltrado do plasma a protena predominante a albumina. A permeabilidade da barreira hematoceflica bastante aumentada nas meningites bacterianas e em menor grau alterada por meningites virais ou encefalites, sendo que a presena de protenas no lquor pode ser resultado tambm de aumento da presso intracraniana devido a tumores cerebrais e hemorragias intracranianas. Como a quantidade de protenas no lquor muito pequena, mtodos especiais so necessrios para sua determinao, inclusive com a diferenciao entre albumina e globulinas, sendo que o lquor normalmente livre de globulinas. A quantidade de protenas no lquor dos animais domsticos varia de 12 - 40 mg/dl com exceo dos eqinos que podem variar de 20120mg/dl e pode ser avaliada por mtodos qualitativos como a fita reagente para urinlise e por mtodos quantitativos como o mtodo do cido tricloractico ou o mtodo do azul cromassie. A presena de globulinas avaliada tambm por mtodos especficos como a reao de Pandy e Nonne Appelt. O exame de eletroforese tambm boa ajuda na diferenciao das protenas podendo caracterizar alteraes na barreira hematoceflica, sntese de IgG local e/ou uma combinao de sntese local de IgG e alterao da barreira hematoceflica. Elevaes acentuadas so observadas nas meningoencefalites bacterianas podendo exceder 1,0/dl. As outras afeces oferecem elevaes moderadas. Em todas as espcies animais, a produo de imunoglobulinas intratecal resultado de infeces virais crnicas do SNC, mas, em ruminantes, as encefalites virais so poucos comuns. Glicose

A glicose no LCR dependente da concentrao no soro, pois os nveis so atingidos atravs do mecanismo de transporte atravs da barreira hematoceflica. Os valores de glicose para o lquor nos animais domsticos so menores que os valores sangneos, isto , cerca de 60 70% dos valores sangneos, sendo os valores mdios em torno de 40 - 80 mg/dl. O mtodo de avaliao o mesmo de avaliao sangnea. A hipoglicorrafia, isto , a diminuio dos valores da glicose no lquor, geralmente encontrada em casos de hipoglicemia, impedimento do transporte atravs da membrana hematoceflica, aumento do metabolismo do parnquima cerebral ou infeco por organismos glicolticos, isto , a utilizao da glicose por microorganismos, leuccitos ou clulas do SNC. Em geral nas meningites bacterianas ocorre diminuio dos valores de glicose. A hiperglicorrafia est relacionada com o diabetes melitus. Cloretos Em geral os nveis de cloretos so mais altos no lquor que no sangue, podendo os valores variar entre 650 - 850 mEq/ml. Os mtodos de avaliao so os mesmos sangneos, e em caso de inflamao das meninges estes valores estaro diminudos, tendo pouca importncia diagnstica. Outros exames Enzimas A atividade de vrias enzimas tem sido medidas para avaliar se o SNC ou suas barreiras foi lesadas. Enzimas como AST, CPK, LDH podem ser medidas, mas no so especficas para se fechar um diagnstico.

Bibliografia e literatura recomendada

Braund, K.G. Diagnostic Techinics IN Clinical Syndromes in Veterinary Neurology ed.London Williams & Wilikins, 19990, v.1, pag. 207-244. Coles.E.H. Fluido cerebroespinhal IN: Coles. E.H. Patologia Clnica Veterinria. 3 ed. So Paulo, Manole, 1984, pag.367-381. Feldman, B.F. IN: Kaneko J.J. Clinical Biochemistry of Domestic Animals, 4 ed., San Diego, Academic Press, 1989, p.835-865. Cook, J.R. & DeNicola, D.B. Cerebrospinal fluid, Veterinary Clinics of North America: Small Animal Practice, v. 18, n. 3, p.475-499, 1988. Scott, P.R. The collection and analysis of cerobrospinal fluid and aid to diagnosis in ruminant neurological disease. British Vetrinary Journal, v.151, n.6, p.603-614, 1995.

Aspectos laboratoriais das afeces de pele

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Introduo Colheita Artrpodes Helmintos Fungos

Introduo
Doenas de pele so um desafio para o clnico, pois a pele responde de maneira similar as diversas afeces: prurido, alopecia, ndulos. Assim como os outros sistemas, exige histrico e exame clnico detalhado. O raspado de pele importante auxiliar no diagnstico de algumas dermatoses, servindo para o diagnstico definitivo e avaliao do prognstico e da evoluo de outras.

Colheita
Geralmente, so utilizadas lminas de bisturi ou cureta, coloca-se o produto do raspado em um vidro de relgio, placa de Petri ou entre duas lminas. O raspado pode ser profundo ou superficial, deve-se recolher sangue ou secrees, dependendo da suspeita clnica. Para fixar o material lmina de vidro, pincelar o local com leo mineral e/ou embeber o bisturi. Este procedimento tambm feito na dependncia da suspeita clnica.

Artrpodes
Demodicose Quando adequadamente efetuados e interpretados, os raspados de pele possuem valor diagnstico definitivo, pois os caros so facilmente encontrados. A parte da pele afetada deve ser comprimida vigorosamente entre os dedos para facilitar a extruso dos caros do interior dos folculos. Os raspados devem ser profundos at que se observe sangramento capilar e realizados em diversos locais. Colocar o material entre lmina e lamnula e examinar no aumento 40 X. Podem ser observado quatro estgios do ciclo de vida do Demodex:

ovos em forma de fuso; larvas com seis pernas; ninfas com oito pernas; adultos com oito pernas.

Importante: Um grande nmero de adultos vivos ou a presena de formas jovens so necessrios para confirmar o diagnstico, j que um caro ocasional pode fazer parte da flora normal da pele e tambm pode ser visto em outras patologias cutneas. Aps o tratamento, fazer reavaliao dos casos atravs dos raspados. bom prognstico quando observada a diminuio no nmero de adultos ou os raspados ficam negativos, sendo este ltimo tambm o critrio para a cura da doena. Escabiose Em ces esta dermatite causada pelo Sarcoptes scabiei var. canis e em gatos pelo Notoedres cati. O raspado de pele o melhor mtodo de diagnstico em ambos os casos. Os raspados devem ser superficiais, j que o caro cava um tnel no estrato crneo da epiderme e devem cobrir reas extensas, pois pode ser difcil encontrar o caro. Deve-se ainda o raspado em reas com ppulas, crostas amarelas, na regio axilar e borda da orelha. Colocar o produto do raspado entre lmina e lamnula e examinar no aumento 40X. Caso seja necessrio a clarificao do material, acrescentar KOH 10% e aquecer por alguns minutos. Importante: O encontro de um nico caro tem valor diagnstico, bem como o encontro de peletes fecais castanho-escuros, redondos ou ovais ou ainda ovos do caro. Raspados negativos no significam a no existncia da doena. Infeco por Otodectes cynotes Esta infeo, causada pelo caro da orelha, ocorre em ces e gatos. As infestaes por este caro esto associadas a freqente agitao da cabea. Alm da otite externa pode-se algumas vezes observar a infestao generalizada. No caso da otite, o exame otoscpico revelar os caros, porm raspados profundos e o exame microscpico subsequente so necessrios, caso haja envolvimento cutneo extenso.

Helmintos
Em condies sanitrias deficientes, larvas de Ancylostoma brazileiense e A. caninum causam em ces e gatos leses semelhantes aquelas que causam no homem ("larva migrans cutnea). As larvas de terceiro estgio penetram pela pele do animal em reas do corpo que entram em freqente contato com o solo, principalmente as patas. So vistas pequenas ppulas e eritema generalizado e quando realizado o raspado nestas reas observam-se as larvas. A dermatite por Pelodera strongyloides localizada, eritematosa e muito pruriginosa. As larvas tambm penetram na pele do animal em reas de maior contato com o solo: patas, pele sobre a regio do esterno, parte ventral do abdome, cauda, superfcie pbicas e prepuciais, aspectos laterais e posterior das patas. Ocorre sob condies de higiene deletrias, quando as larvas deste nematdeo de vida livre invadem a pele de ces, gatos, cavalos e bovinos. As larvas medem cerca de 600mm de comprimento e apresentam motilidade.

Fungos
Dermatofitose

So infeces fngicas dos plos, unhas, garras e extrato crneo da pele. causado pelas espcies de Microsporum (M. canis, M. gypseum), Tricophyton (T. mentagrophytes) e Epidermophyton. Deve-se colher material raspando a pele limpa, aps cortar o plo, especialmente se o material for enviado para a cultura. As leses variam desde a forma clssica arredondada, eritematosa e de bordas elevadas at ndulos ulcerados e granulomatosos, alopecia generalizada e foliculite. Exame direto: colocar o material obtido no raspado (plos, descamao) juntamente com KOH 10% (Hidrxido de Potssio, 10%) e deixar por 30 minutos em temperatura ambiente ou aquecer rapidamente. Este procedimento visa a clarificao (diafanizao) da queratina. Como a maioria das infeces fngicas dos animais so ectotrcicas, a clarificao no necessita ser to intensa como nas infeces humanas. Mesmo para profissionais experimentes esta tcnica diagnstica em poucos casos, pois muito demorada e pode levar a falsa interpretao quando fungos saprfitas esto presentes na amostra. Importante: As espcies de dermatfitos nunca formam macrosporos nos tecidos; os elementos encontrados so hifas e artrosporos. Cultura fngica: O material raspado pode ser utilizado tambm para a cultura e esta a forma mais segura de se fornecer diagnstico definitivo de dermatofitose na maioria dos casos, bem como a bipsia. Obteno das amostras: visando a reduo no crescimento dos contaminantes, as reas devem ter plos cortados bem rentes ou at depiladas e limpar (no esfregar) com lcool 70%. Incluir plos partidos associados a leses, plos ntegros retirados de dentro dos folculos com pina hemosttica e descamao, mas deve-se evitar os exudatos. Meios de cultura: O meio de cultura mais apropriado para o crescimento e identificao dos dermatfitos o DTM (Dermatophyte Test Medium). O DTM o gar glicosado de Saboraud adicionado com ciclo-hexemida, gentamicina e clortetraciclina como agentes antibacterianos e antifngicos e vermelho fenol como indicador. Os dermatfitos utilizam inicialmente a protena do meio e os metablitos alcalinos "viram" a cor do meio para vermelho. Quando as protenas se exaurem, ocorre a utilizao dos carboidratos. Outros fungos tambm usam protenas, promovem tambm a mudana de cor do meio, mas s apenas aps longo perodo de incubao (10-15 dias) pois h utilizao dos carboidratos antes. observada a mudana de cor para vermelho simultaneamente ao crescimento de miclios cotonosos. necessria a observao diria aps a inoculao, , pois a mudana de cor pode ocorrer em 5 dias, antes at do crescimento fngico. Examinar o crescimento ao microscpio; em 7-10 dias as colnias produzem macrosporos que permitem a identificao especfica. A cor das colnias fornece alguma informao, os dermatfitos zooflicos so brancos a amarelados, contaminantes so azuis, verdes, marrom escuro e pretos. Dermatomicoses A Malassezia pachidermatides (Pityosporum pachidermatides, P. canis) uma levedura lipoflica, no formadora de miclios, com formao oval alongada, parede grossa de brotamento unipolar. Comumente encontrada na pele normal e conduto auditivo de ces. So encontrados de forma numerosa em casos de otite e dermatite. Para o diagnstico necessria a realizao da citologia esta a prova de mais fcil execuo e que fornece resultados mais seguros. Deve-se usar uma pina com a ponta envolta em algodo para retirada da secreo do ouvido, recolher o material e rolar sobre a lmina. Para os casos de dermatite, raspar a rea afetada com uma lmina de vidro ou esptula, fazer o esfregao ou ainda, usar a tcnica da fita de acetato. Fixar pelo calor e corar por tcnicas de citologia convencionais. Examinar em imerso.

Avaliao laboratorial do sistema renal

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Sistema renal Formao da urina Concentrao e diluio da urina Rim, rgo endcrino Avaliao e interpretao do exame de urina Caractersticas da qumica urinria (Elementos anormais) Bibliografia Literatura recomendada

Sistema renal
o responsvel pela manuteno da homeostasia pela eliminao de metablitos corporais, assim como a produo e degradao de vrios hormnios. Rim O rim composto de crtex e medula sendo a ultima totalmente circundada pelo primeiro. Nefron O nefron a unidade funcional do rim, sendo composto de glomrulo, capsula de Bowman, tbulo contornado proximal, tbulo contornado distal, tbulo coletor, ala de Henle, interstcio e vasos. Glomrulo o responsvel pela produo de grande quantidade de ultra filtrado do plasma sendo que somente pequena quantidade do mesmo eliminada pela urina. Contm clulas dos capilares endoteliais, clulas epiteliais parietais e viscerais, clulas mesangiais, membranas capilares basais. Todos os glomrulos so corticais. Cpsula de Bowman A cpsula de Bowman tem a funo de armazenar o filtrado glomerular para encaminh-lo aos tbulos contornados proximais. Tbulo contornado proximal (TCP) Tem a funo de coletar o filtrado glomerular do espao de Bowman. Nos TCP ocorre reabsoro passiva e ativa de 75% do filtrado glomerular. A parte luminal coberta por numerosas microvilosidades que aumentam a capacidade absortiva. Existe uma parte enovelada de localizao cortical e uma parte reta que segue em direo medular.

Ala de Henle (AH) Em continuao ao tbulo TCP, segue AH que possui uma parte descendente e uma ascendente que mergulham profundamente na medula renal, representando maior papel na gerao do gradiente de concentrao do soluto no interstcio medular e no plasma. O soluto na parte descendente da ala de Henle concentrado por movimento passivo de gua para o interstcio hiperosmolar, j a parte ascendente impermevel a gua, mas o NaCl se move para o interstcio medular de forma passiva e ativa na parte externa medular, criando urina diluda. O cloreto absorvido de forma ativa, sendo o sdio absorvido a seguir por absoro passiva. Tbulo contornado distal (TCD) a continuao da parte ascendente da AH, situando-se prximo ao glomrulo e arterolas aferentes. As clulas da camada imediatamente inferior do epitlio da AH e TCD secretam a mucoprotena de Tamn Hosfall que serve de base para a formao dos cilindros. Tbulo coletor (TC) a continuao dos TCD conduzindo a urina formada aos ureteres. A sada de uria nos TC ajuda na manuteno da hiperosmolaridade intersticial. Tecido intersticial (TI) o tecido que rodeia os glomrulos, tbulos, vasos e nervos. composto por fibroblastos, colgeno e clulas mononucleares. Acredita-se que neste local ocorra a sntese de prostraglandinas E2 e F2a. Rede vascular Compreende seqencialmente: artria renalque divide-se em dois ramossubdivide-se em artrias interlobaresartrias arcuadasarterolas aferentes que se dividem em numerosos capilares para formar o glomrulo. O sangue que perfunde os capilares peri tubulares passam primeiro atravs do glomrulo; ento, qualquer processo que altere o fluxo sangneo pelo glomrulo pode alterar a sua funo alterando a perfuso tubular, resultando em doenas tubulares/intersticiais secundrias. A circulao glomerular especializada para a filtrao, sendo o primeiro passo para a formao da urina; os capilares peri tubulares so especializados na reabsoro de fluido e soluto dos tbulos e a circulao medular especializada na concentrao e a diluio da urina. A vasa recta so capilares formados pelas arterolas eferentes vindas de glomrulos localizados adjacentes medula e fornece nutrio mesma, remove solutos e solventes que so necessrios para manter a concentrao e osmolaridade intersticial normal, possuindo ainda a funo vital na remoo de gua do interstcio medular dentro do mecanismo de contra corrente.

Formao da urina
Entende-se a urina como um subproduto das atividades reguladoras corporais, o produto final de um processo fisiolgico complicado e equilibrado, podendo ter sua constituio alterada por mecanismos normais e/ou patolgicos. Sua formao pelos nefrons resulta de trs processos bsicos: filtrao glomerular, reabsoro tubular e secreo tubular. Estes processos geralmente se interagem, havendo substncias que so processadas por um meio,

ou por situaes conjugadas que terminam por remove-las do plasma ou reabsorv-la ao organismo. O processo de remoo chamado de clareamento. Filtrao glomerular a fase inicial de formao da urina e consiste na produo de grande quantidade de ultrafiltrado do plasma que tem pequena quantidade de protena e acelular. As clulas endoteliais dos capilares glomerulares contm vrios poros que funcionam como uma peneira permitindo a filtrao de molculas de at 68.000 daltons. Esta filtrao depende de fatores como tamanho, tipo e carga da molcula, seu alinhamento em relao aos poros e tambm seu aumento devido a associao com outras molculas, alm da configurao da parede dos capilares glomerulares. A presso hidrosttica arterial a maior fora favorecendo a filtrao glomerular, isto , a energia requerida para a filtrao glomerular derivada da presso sangnea gerada pela contrao do ventrculo esquerdo e a elasticidade das paredes vasculares. A velocidade que os rins formam o filtrado glomerular chamado de taxa de filtrao glomerular (TFG). A qualidade e quantidade do filtrado glomerular influenciado por vrios fatores tais como: a presso sangnea, o volume de sangue nos capilares glomerulares, a presso onctica nos mesmos, o nmero e permeabilidade destes capilares, a presso intersticial e a presso intra tubular. Apesar da filtrao glomerular ter a funo de reter substncias vitais como clulas e protenas e eliminar catablitos, as vezes torna-se difcil essa diferenciao pela semelhana de tamanho e cargas, podendo algumas substncias vitais serem eliminadas. Fatores que influenciam a permeabilidade dos capilares glomerulares s molculas proticas 1. 2. 3. 4. 5. Tamanho da molcula, Frico da molcula entre os poros, Atrao s molculas de carga positiva e repulso s molculas de carga negativa, Diferena de alinhamento da molcula com os poros, Aumento do tamanho da molcula com a associao entre elas.

Reabsoro e secreo tubular o mecanismo que permite selecionar substncias que so aproveitveis ou no pelo corpo. Por exemplo, a creatinina e a alantoina no so utilizadas por isso no so reabsorvidas, j as vitaminas, os aminocidos, a glicose so necessrias por isso so reabsorvidas. Algumas substncias possuem capacidade limitada de reabsoro como a glicose; quando este limiar ultrapassado detectada na urina. 1. TCP: Reabsoro ativa de glicose, protenas, aminocidos, vitaminas, cido hidrxido butrico, cido rico, sdio, potssio, clcio (paratormnio "aumenta"), fosfato (paratormnio "diminui"), bicarbonato (80-85% do bicarbonato reabsorvido no TCP, e o restante na ala de Henle e TCD). Reabsoro passiva de cloretos, gua e uria e secreo de H+ que troca com o sdio. AH parte descendente- Reabsoro passiva de gua e secreo de sdio e uria. AH parte ascendente(fina) Reabsoro passiva de sdio e uria. AH ascendente (espessa) Reabsoro ativa de cloro, clcio e passiva de sdio e potssio. TCD Reabsoro ativa de sdio (aldosterona), clcio e bicarbonato, pequenas quantidades de glicose. Reabsoro passiva de cloro e gua (ADH). Secreo ativa de H+, amnia e cido rico. Secreo passiva de potssio. TC: Reabsoro ativa de sdio (aldosterona). Reabsoro passiva de cloro, gua (ADH). Secreo ativa de H+ e secreo passiva de potssio.

2. 3. 4. 5.

6.

Concentrao e diluio da urina

Os rins tem a funo vital na regulao da excreo de gua pelo organismo podendo conservar gua por concentrao da urina, quando o organismo necessitar ou eliminar (diluir) a urina quando houver excesso de gua. Concentrao Sabe-se que cerca de 60 litros de filtrado glomerular formado por dia em um co de 10 kg, mas somente 0,5 litro normalmente eliminado pela urina. Cerca de 75% reabsorvida passivamente no TCP seguindo reabsoro ativa de Na, Cl, glicose, Ca, PO4 e outros. Aps a reabsoro de eletrlitos pela parte ascendente da AH o fluido que chega ao TCD em ces hipo-osmtico (1005) e iso-osmtico nos gatos(1008). A ao de concentrao de urina tem ao do hormnio antidiurtico (ADH) produzida no hipotlamo e estocado na hipfise. Este hormnio influencia a permeabilidade dos tbulos distais e coletores a gua. Aps a concentrao e diluio respectivamente pela parte descendente e ascendente da AH, o fluido glomerular chega aos TCD. Ocorre dai a ao do ADH, que aumenta a permeabilidade do TCD e TC gua, concentrando o fluido que ter mais soluto que gua em comparao com o filtrado glomerular, elevando os valores da densidade urinria. Diluio Na ausncia de ADH, pouca gua ser removida do lmen tubular distal e coletor. Como o transporte ativo de soluto (sdio) no ser afetado mais soluto ser removido do lmen tubular que gua, tornando a urina mais diluda em relao ao filtrado glomerular. Nesses casos, a densidade urinria estar menor que do filtrado glomerular (<1008) ou a densidade plasmtica o que denomina-se hipostenria. Tambm no processo de diluio e concentrao da urina importante citar o Mecanismo Contra Corrente (MCC). A funo do MCC gerar e manter alta concentrao de soluto no interstcio medular (primariamente sdio, cloreto e uria) no sentido de atrair gua de uma regio de baixa concentrao de soluto (tbulos distais e coletores). Nestes casos, quaisquer doenas que impeam ou dificultem esta concentrao pode gerar poliria. Como exemplo, temos os casos de insuficincia heptica na qual observa-se baixa produo de uria; perda de NaCl e perda de sdio em casos de hipoadrenocorticismo ou doenas glomerulares que podem tambm interferir com essa concentrao medular.

Rim, rgo endcrino

Nos ces o rim o nico rgo produtor de eritropoietina, hormnio que regula a produo e liberao de eritrcitos pela medula ssea, sendo que nos outros animais o fgado tambm tem essa funo. responsvel pelo metabolismo da vitamina D (25-hidroxicolecalciferol) heptica para sua forma ativa (1-25-dihidroxicolecalferol) que responsvel pela absoro de clcio intestinal e mobilizao de clcio e fsforo dos ossos. Degradao hormonal O rim possui a funo de degradao e excreo de vrios hormnios como o paratormnio, o hormnio do crescimento, a secretina, a colecistoquinina, o glucagon, a gastrina, a prolactina, a insulina, a tireotrofina e o ADH. Esta funo torna-se importante pois em casos de insuficincia renal a reteno hormonal pode ocasionar ou exacerbar crise urmica. As funes do nefron so modificadas por vrios hormnios e agentes bioativos como a renina, a angiotensina, as catecolaminas, o ADH, a aldosterona, o paratormnio, o glucagon, o hormnio do crescimento, a calcitonina, a vitamina D e a tiroxina.

Aparelho justaglomerular Consiste das arterolas aferentes e eferentes, macula densa, os tbulos distais, as clulas granulares. Tem papel importante na hemodinmica renal. Quando se reduz a perfuso renal, diminui a presso nas arterolas aferentes ocorrendo ativao do sistema renina-angiotensina com liberao de renina, enzima proteoltica presente nas arterolas aferentes e em menor quantidade das arterolas eferentes, dando origem a todo o esquema anterior.

Avaliao e interpretao do exame de urina

O exame de urina o processo mais importante na avaliao da funo renal. Um exame completo de urina consiste da avaliao fsica, propriedades qumicas, e sedimento. Um exame de urina completo se interage e como existem fatores renais e extra renais que podem modific-lo, o mtodo de colheita, o processo de conservao e rapidez na realizao do exame muito importante. Colheita Uma boa colheita um dos fatores principais para uma correta interpretao do exame de urina. O mtodo de colheita deve ser levado em conta quando da interpretao do exame. A urina colhida pela manh, de animais confinados mais eficiente para avaliar a capacidade de concentrao tubular alm de conter maior quantidade de sedimento. Mtodos A mico normal: tem a vantagem de poder ser colhido pelo proprietrio, sendo boa conduta para animais arredios, mas pode apresentar maior nmero de contaminantes. Procurar colher o jato mdio lavando bem a genitlia externa (vulva e prepcio), diminuindo assim a contaminao pelo contedo uretral. Cateterizao: existem sondas de nmero 4 a 10 flexveis para machos e sondas metlicas para fmeas. No caso dos machos procurar usar sonda de calibre menor para evitar irritao. Em relao s fmeas, as sondas sempre oferecem riscos de irritao, devendo os animais arredios serem sedados para a colheita Colher o jato mdio, realizar a limpeza prvia da genitlia externa e, sempre usar luvas. Cistocentese: o melhor mtodo para a colheita de urina em ces e gatos, avaliando a amostra sem interferncia de fatores externos pois a urina colhida diretamente do contedo vesical, sendo o mtodo indicado para a colheita de amostras para urocultura. Utiliza-se seringas e agulhas normais e necessita de certa prtica. A bexiga cheia facilita a colheita, devendo ser esvaziada se estiver repleta para evitar extravasamento para a cavidade abdominal. Para todos os mtodos pede-se material limpo se possvel estril, colhendo-se em torno de 10 ml de urina. Massagem prepucial e vaginal: um mtodo utilizado para grandes animais em geral. Caninos Nesta espcie so utilizados a colheita natural, o cateterismo e a cistocentese. Felinos

Mtodo ideal para colheita nesta espcie a cistocentese, porm existem sondas uretrais prprias de material flexvel, porm nunca so atraumticas. Esses animais devem ser sempre sedados e bem contidos. Nesses animais sedados existe ainda a possibilidade de compresso manual da bexiga que deve ser realizada com muito cuidado para evitar rompimento da bexiga. Eqinos Para machos usa-se sonda nasogstrica humana, seguindo os mesmos processos de assepsia em relao ao prepcio e a sonda. Nas fmeas pode-se usar tambm a mesma sonda ou sonda rgida metlica. Bovinos Nestes animais usa-se a massagem prepucial para os machos e massagem sobre vaginal para as fmeas. Colheita de urina por 24 horas Necessitando-se de urina colhida por 24 horas, pode se usar caixas de colheita para os pequenos animais e bolsas amarradas no corpo dos grandes animais. Em geral, os ces produzem de 12-24ml de urina/Kg/24 horas e os gatos, 8-9ml/Kg/24 horas. Conservao Independente da forma de colheita a urina deve ser refrigerada at trinta minutos aps a colheita e pode permanecer em geladeira at seis horas, porm a mesma dever estar na temperatura ambiente antes do exame, pois os aparelhos so calibrados para esta temperatura e a fita reagente com a baixa temperatura demora a responder a colorao. A urina muito tempo na temperatura ambiente ter seu pH alterado pela proliferao bacteriana que, transformando a uria em amnia, tornar o mesmo alcalino. Esta alcalinidade pode provocar resultados falsos positivo na observao dos elementos anormais, isto , a glicose ser utilizada pelas bactrias, bem como a destruio de cristais e cilindros, leuccitos e hemcias. O melhor conservante a baixa temperatura, mas usa-se ainda o tolueno, em quantidade suficiente para cobrir a amostra; formalina a 40%, uma gota para cada 20 ml de urina. Estes conservantes qumicos podem alterar a qumica urinria. Propriedades fsicas Volume Normalmente de pouca utilidade, salvo quando se quer avaliar a quantidade diria de urina eliminada, pois 10 ml de urina so necessrios para o exame. Colorao Normalmente amarela devido a presena de urocromos. A presena de outros pigmentos e constituintes podem alterar a cor, assim como a concentrao da amostra. A urina dos equdeos normalmente amarela ao ser excretada, mas pode se tornar escura devido a oxidao da pirocatequina. Em casos de excesso de mioglobina (azotria) pode apresentar colorao negra. A presena de medicamentos diversos podem tambm alterar a colorao da urina como o azul de metileno que a torna de colorao verde ou azulada; fenotiaznicos

apresentando colorao avermelhada. A turbidez depender das substncias presentes , j que a urina dos animais em geral lmpida, excetuando-se a dos equdeos que tem aparncia turva devido a presena de carbonato de clcio e muco. A turbidez pode ser devido tambm a presena de fosfatos, uratos, cristais, espermatozides, bactrias piria, hematria, cristalria, cilindrria, descamao epitelial e outros. Odor Oferece pouca ajuda clnica, podendo sugerir crises urmicas (odor amoniacal) ou odor ptrido em infeces. Densidade urinria utilizada para verificar a habilidade dos tbulos renais de concentrar ou diluir o filtrado glomerular. Animais com dieta alta em protena tendem a apresentar maior capacidade de concentrao devido a maior concentrao de uria no plasma e interstcio intramedular renal. A habilidade dos pacientes de concentrar a urina (densidade acima de 1015) dependente do sistema de produo e liberao perfeito do ADH, suficiente populao de nefrons funcionais para gerar e manter alta concentrao de solutos na medula renal e suficiente populao de tbulos funcionais para responder ao ADH. A urina tem a densidade maior que a da gua pois possui gua e vrios solutos de diferentes densidades. Como a presena de solutos altera a temperatura de resfriamento e aquecimento a densidade alterada pela temperatura. A densidade nos animais domsticos pode variar de 1001-1087, mas a variao normal de 1015 a 1035, tendo certo cuidado com a avaliao dos animais recm nascidos que podem apresentar menores valores. Para o rim perder sua capacidade de concentrar a urina deve ter perdido cerca de 66% de sua capacidade funcional no se detectando antes disso alterao na concentrao pois estas afeces se instalam gradualmente. A densidade urinria reflete no s o funcionamento renal, mas a ingesto de gua, disfunes hormonais, intoxicaes, uso de medicamentos, infeces. Em caso de haver necessidade, para se calcular a osmolaridade urinria s multiplicar os ltimos dgitos da densidade por 36. Exemplo: Densidade 1012 12x36=432 432 mosmol/kg Mtodos de avaliao

Refratmetro Fita reagente Urodensmetro

Caractersticas da qumica urinria (Elementos anormais)

pH A concentrao dos ons de hidrognio na urina dependente do tipo de dieta do animal. As espcies que se alimentam basicamente de vegetais tem a tendncia de produzir urina alcalina enquanto que a urina cida normal em animais que consomem dietas em cereais com alto contedo protico ou raes derivadas principalmente de protena animal. Em geral, o pH oferece pouca informao devido suas variaes diurnas e alimentares. A elevao do pH nos animais carnvoros pode significar reteno urinria vesical, alcalose metablica como tambm demora na confeco do exame, isto , a permanncia da urina muito tempo na temperatura ambiente permite a multiplicao bacteriana e transformao da uria tornando a urina alcalina. A urina alcalina se tornar acida est relacionada com inanio, febre, acidose metablica ou respiratria e atividade muscular prolongada. O conhecimento do pH se torna importante desde que alguns clculos ocorrem em urina alcalina e outros em urina cida. Alguns tratamentos para urolitase so baseados na

mudana do pH e sabe-se que as hemcias, os leuccitos, os cilindros tendem a se deteriorar com o pH muito alcalino. O pH dos caninos poder variar at 5,0-7,0. Mtodos de anlise:

Fita de pH: so de uso simples e rpido, oferecendo mdia de valores entre 5,0 e 9,0. Medidores de PH (Peagmetro): oferece resultados mais precisos e mais amplos.

Protenas (Proteinria) A urina eliminada pelo organismo no contm protena detectvel; algumas delas, como as protenas de baixo peso molecular que conseguem ultrapassar o filtro glomerular so reabsorvidas pelos tbulos. Em geral a proteinria deve ser avaliada junto com a densidade; densidade diminuda com presena de protena significa valores mais altos para a mesma. A avaliao tambm se relaciona com o exame do sedimento, proteinria sem presena de hemcias, leuccitos, espermatozides geralmente significa leso renal, podendo ser glomerular por aumento da permeabilidade tendendo essa proteinria ser mais elevada; pode ser tambm de origem tubular pela diminuio da capacidade de absoro, apresentando geralmente valores menos elevados. A proteinria classificada como persistente ou transitria. Em animais com urina concentrada aceita-se at traos na fita.

Proteinria transitria: Tambm denominada proteinria fisiolgica, est geralmente relacionada com estados febris, exerccio acentuados, alta ingesto protica, contaminao com secrees vaginais e prepuciais, convulses. Em bezerros lactentes, pela ingesto de colostro e presena de imunoglobulinas que tem peso baixo molecular e so facilmente filtrados no glomrulo, desaparecendo em poucos dias. Este tipo de proteinria geralmente no apresenta valores acentuados. Proteinria persistente: Tambm chamada de proteinria patolgica. A avaliao da proteinria requer boa observao clnica para se definir causas renais e extra renais. Proteinria persistente extra renal: Doenas que podem afetar secundariamente os glomrulos e os tbulos renais. (proteinria pr renal) o Congesto renal passiva crnica: ocorre aumento da presso hidrosttica venosa e alterao da permeabilidade glomerular secundria a hipxia nas leses cardacas congestivas (ICC), podendo esta causar insuficincia renal aguda (IRA). o Hemlise intravascular: ocorre aumento de liberao de hemoglobina ultrapassando a capacidade de reabsoro tubular como nas doenas hemolticas, doenas angiopticas, intoxicaes (cebola, chumbo, paracetamol, hemoparasitas). o Aumento da excreo de mioglobina em doenas musculares (traumas, polimiosites, exerccios musculares acentuados). o Excreo da protena de Bence Jones nas neoplasias: a proteinria de Bence Jones a presena de imunoglobulinas na urina geralmente ocasionado pela presena de neoplasias (mieloma, leucemia). Proteinria ps renal: o Doenas de vias urinrias baixas o Contaminao por secrees inflamatrias do trato genital como nas cistites, uretrites metrites, pielites, prostatites. Proteinria persistente renal: o Leso glomerular com aumento da permeabilidade:nestes casos a albumina a principal protena encontrada na urina. Observa-se nas glomerulonefrites, amiloidose, lpus eritematoso sistmico, brucelose, erlichiose, piometras, leucemia felina a vrus, neoplasias. Geralmente nessas afeces podem ser encontrados cilindros, clulas inflamatrias como leuccitos, hemcias, clulas epiteliais no sedimento urinrio.

Leses tubulares: resultam na diminuio da reabsoro tubular e catabolismo de protenas de baixo peso molecular normalmente filtradas pelo glomrulo. Ocorre em doenas tubulares, nefrose, nefrites. Nestes casos ha predominncia de globulinas, podendo vir tambm associados de sedimentos como picitos, hemcias, cilindros, epitlios. Pseudo proteinria: o Urina altamente alcalina, causando reao de cor na fita. o Imerso prolongada da fita, pode lavar a soluo tampo oferecendo resultados falso positivo. o Contaminao por compostos quaternrios de amnia.

Mtodos de dosagem Fita reagente (contm azul de tetrabromofenol tamponado): este mtodo mede a presena de albumina, a fita imersa na amostra de urina e a cor comparada com cores padro, que por sua vez fornecem a resposta em escalas (cruzes). Esquema de cores (em cruzes) e a concentrao relativa Fita reagente Valores semi quantitativos de protena Traos + ++ +++ ++++ 5 - 20 mg/dl 30 mg/dl 100 mg/dl 300 mg/dl >2000 mg/dl

cido sulfossaliclico: mtodo semi quantitativo pois nem todas as protenas formam o mesmo tipo de precipitado; apesar de ser mais sensvel para albuminas, tambm detecta proteinria de Bence Jones, glicoprotenas e globulinas. o Espectrofotometria o Azul brilhante cromassie o Acido tricloractico o So testes quantitativos, mais sensveis. o Eletroforese de protenas o Boa ajuda na determinao do tipo de protena presente.

Glicose (Glicosria) Normalmente no se detecta glicose na urina; toda glicose filtrada reabsorvida nos tbulos e a pequena quantidade excedida desses processos indetectvel. Ocorre glicosria quando a concentrao de glicose plasmtica supera 170 mg/dl. Pode ser dividida em fisiolgica farmacolgica e patolgica. Como a fita reagente enzima dependente, a urina refrigerada deve voltar a temperatura ambiente para ser analisada.

Glicosria Fisiolgica: geralmente transitria, ocorrendo aps alguma situao de estresse, na qual ocorre liberao de adrenalina e corticosterides que mobilizam os estoques de glicognio do fgado. Glicosria Farmacolgica: pode ocorrer aps administrao de solues ricas em glicose, aps administrao de corticosterides, ACTH, glucagon, adrenalina, morfina. Glicosria Patolgica Glicosria hiperglicmica: nesse caso se verifica aumento da glicose sangnea, podendo ocorrer nos casos de: o Diabetes Mellitus, o Pancreatite,

Hiperadrenocorticismo, Leses do SNC, Freocromocitoma. Glicosria normoglicmica: nesses casos no h aumento da glicose sangnea, podendo ocorrer nas seguintes afeces: o Glicosria primria renal: leso nos TCP dificultando a reabsoro, o Sndrome de Fanconi: incapacidade de reabsoro de glicose pelos TCP, o Desordens congnitas que impeam a reabsoro do filtrado glomerular, o Insuficincia renal aguda associadas com leso tubular, o Leses renais causadas por medicamentos (aminoglicosdeos) ou toxinas. o A glicosria nos grandes animais apresenta pouca importncia diagnstica, salvo em casos raros de diabetes.

o o o

Mtodos de avaliao

Fita reagente: glicose oxidase converte a glicose em acido glutmico na presena de gua oxigenada e peroxidase incorporada fita. Clinitest: glicose redutase. mede substncias como frutose, pentoses, formalina, vitamina C, lactose, galactose.

Cetonas (Cetonria) Os corpos cetnicos so o acido actico, a acetona, o cido b hidroxibutrico. Durante o metabolismo normal , as gorduras so convertidas em dixido de carbono, gua e energia no fgado. Nesses processos so formados os corpos cetnicos em pequenas quantidades que so filtrados no glomrulo e reabsorvidos pelos tbulos. Nos carnvoros, o consumo inadequado de carbohidratos e ou a diminuio da sua utilizao aumenta a utilizao de lipdeos como fonte de energia originando esses corpos cetnicos. Outro fator o catabolismo de aminonocidos como leucina, tirosina e fenilalanina. Pode ocorrer em casos de inanio, jejum prolongado, baixa ingesto de carbohidratos e diabetes. Nas vacas, por motivos diversos, ocorre quando o metabolismo dos carbohidratos no atende as necessidades orgnicas. Ocorre comumente em vacas leiteiras em alta produo que so alimentadas inadequadamente, ou apresentam anorexia. Mtodos de exame

Fita reagente: somente so detectados o acido acetoactico e acetona. Aceteste e Teste de Rothera Estes testes so melhor empregados para carnvoros, j que os herbvoros eliminam normalmente pequena quantidade na urina que pode ser detectada pela fita reagente. No caso de cetonria nas vacas faz-se exame do leite que mais simples.

Bilirrubina (Bilirrubinria) A bilirrubina derivada primariamente do metabolismo do heme, componente da hemoglobina nas clulas do sistema fagocitrio monuclear (SFM). Essa bilirrubina formada liga-se a albumina, chamada de bilirrubina no conjugada ou indireta, transportada ao fgado onde conjugada pelo acido glicurnico, tornando-se bilirrubina conjugada, bilirrubina direta. A bilirrubina indireta pela sua ligao albumina no filtrada nos glomrulos, o que no ocorre com a bilirrubina direta. Dentre os animais, os ces possuem ainda a capacidade de formar a bilirrubina nos tbulos renais utilizando a reabsoro do filtrado de hemoglobina. Como o epitlio tubular renal desses animais contm a enzima glicoronil transferase, a conjugao tambm provvel. Causas de bilirrubinria

Aumento da produo de bilirrubina conjugada devido a hemlise, doena heptica ou obstruo biliar, Associao dessas afeces com disfuno renal, Pequenas quantidades so observadas em ces, com densidade urinria elevada, o limiar para bilirrubinas em ces baixo. A deteco da bilirrubinria precede a observao da ictercia.

Mtodos de diagnstico

Fita reagente Ictotest: Como a exposio luz quebra a bilirrubina em biliverdina, e este pigmento no medido por mtodos normais, deve-se proceder o exame rpido ou manter a urina no escuro

Urobilinognio (Urobilinogenria) Alguns laboratrios no usam por ter pouco significado, pois oxidado facilmente com pouca quantidade de luz e em urina cida tambm oxidado rapidamente para urobilina ainda na bexiga. O uribilinognio pertence a um grupo de substncias, resultantes da reduo da bilirrubina conjugada, pelas bactrias intestinais Hemoglobina (Hemoglobinria, Mioglobinria, Hematria)

Hematria o A presena de poucas hemcias na urina de pode ser encontrado dependendo do mtodo de colheita. Associar sempre com a avaliao da densidade. As causas de hematria sero discutidas quando do estudo do sedimento urinrio. Hemoglobinria o A presena de hemoglobina na fita reagente deve ser interpretada junto com a avaliao do sedimento urinrio. o Hemoglobina positiva na fita e falta de hemcias no sedimento urinrio. o Hemoglobinria ou mioglobinria, o Lise das hemcias causada por urina muito diluda ou pH alcalino, o Falta da identificao da hemcia no sedimento. o Hemoglobina negativa na fita mas presena de hemcias no sedimento urinrio. Fita reagente vencida, Centrifugao prvia da amostra, Erro na identificao das hemcias. o A hemoglobinria pode ter origem renal ou extra renal Origem extra renal Reaes transfusionais, Anemia hemoltica, Babesiose, Piroplasmose, Leptospirose, Envenenamento por picada de cobras, Plantas que causam hemlise, Drogas, Fotosensibilizao, Agentes hemolticos, cobre, mercrio Origem urinria Destruio dos eritrcitos por urina muito diluda e/ou alcalina. Mioglobinria o Leses musculares e exerccios prolongados, o Choque de calor, o Intoxicao por veneno de cobra, o Choques eltricos.

Mtodos de exame

Fita reagente: gua oxigenada + cromgeno cromgeno oxidado Hemateste: tabletes apresentando a mesma reao. Como a fita reagente no possui capacidade de diferenciao entre hemoglobina e mioglobina o seguinte teste deve ser feito em caso de dvida: misturar 5 ml de urina em 2,8 g de Sulfato de Amnio e centrifugar. A mudana de cor indica a presena de mioglobina.

Nitritos (Nitritria) A reduo do nitrato presente na urina para nitrito pelas bactrias patognicas pode dar uma idia da presena bacteriana na urina. pouco sugestivo nos animais em geral pois precisaria haver crescimento bacteriano por no mnimo quatro dias para haver positividade. Sua positividade em urina recente indicativo de pedido de urocultura.

Bibliografia
1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p. 2) NAVARRO, C.E.K.G., PACHALY, J.R. Manual de Hematologia Veterinria. Livraria Varela, So Paulo, 1994, 163p.

Literatura recomendada
1) JAIN, H.C. Schalm's Veterinary Hematology, Lea & Febiger, 4 ed, Philadelphia, 1986, 1221p.

Avaliao laboratorial das doenas hepticas

ndice
Introduo Anatomia Circulao heptica Sistema biliar e produo de bile Funes hepticas Causas de doenas hepticas Sinais clnicos Mecanismo da leso Avaliao Mecanismo da leso Testes indicativos de leses hepatocelulares Testes relacionados com captao, conjugao, e secreo Testes relacionados com clareamento portal Testes relacionados com a sntese heptica

Introduo
O fgado um rgo essencial para a manuteno da vida, sendo o maior e um dos rgos secretrios/excretrios mais importantes do corpo. um rgo que apresenta alta capacidade de estoque, muita reserva funcional alm de alta capacidade de regenerao. Por ser um rgo primrio de metabolismo e detoxificao est sujeito a leses causadas por afeces e secrees vindas de outros rgos como doenas inflamatrias intestinais, pancreatites, doenas endcrinas e septicemia.

Anatomia
A unidade estrutural bsica do fgado o lbulo heptico que consiste de cordes de hepatcitos irradiando concentricamente em torno da veia heptica central. Os limites desse lbulo so demarcados por vnulas, arterolas, canalculos biliares e nervos (trade portal). A unidade funcional o cino heptico, que composto de parnquima heptico e est situado em torno do eixo vascular do cino, centrado na trade portal. A perfuso do hepatcito inicia-se na trade portal, percorre sinusides hepticos e termina nas vnulas hepticas terminais, ou veias centrais. Os sinusides hepticos compreendem a rede vascular que converge para a vnula heptica terminal e so compostos de clulas endoteliais, clulas de

Kupffer e clulas de ito. Estas clulas revestem o canal vascular do sinuside, separando-o dos hepatcitos adjacentes pelo espao de Disse, ou espao perisinusoidal. A formao da linfa heptica o resultado da ultrafiltrao do sangue pelas fenestraes endoteliais e perfuraes do espao perisinusoidal. Os hepatcitos so distribudos em cordes celulares que so interconectados por um canalculo biliar central. Os canalculos biliares circundam os hepatcitos e so os condutores iniciais atravs dos quais a bile flui em direo a trade portal, no sentido oposto ao fluxo sangneo. Os hepatcitos so ricos em organelas como retculo endoplasmtico liso e rugoso, mitocndrias, aparelho de Golgi, lisossomas, vesculas citoplasmticas, microtbulos e microfilamentos.

Circulao heptica
A irrigao do fgado feita pelas artria heptica e veia porta. A veia porta, vindo dos rgos abdominais, drena sangue de todos estes rgos encaminhando-o ao fgado antes de ir para o resto do corpo. A veia porta, responsvel por 80% do fluxo sangneo heptico, no fgado se une a artria heptica, rica em oxignio, que responsvel pelos outros 20% do fluxo sangneo do rgo, compondo finalmente a veia central que se perfunde pelos capilares sinusides, do seqncia a veia heptica e continua como veia cava caudal. Desse modo verifica-se que o fgado trabalha em baixa oxigenao, com cerca de somente 20% de sangue arterial. Essa anastomose dos vasos permite apenas 50% de saturao de oxignio ao mesmo. Por outro lado, no sangue portal esto presentes nutrientes do intestino, hormnios pancreticos como insulina e glucagon, que atuam como fatores hepatotropicos responsveis por nutrio e determinam as dimenses dos hepatcitos; a amnia, toxinas bacterianas e microorganismos derivadas do intestino para serem metabolizadas no fgado antes de chegar a circulao, verificando-se nesse caso a importncia do rgo na detoxificao.

Sistema biliar e produo de bile

O sistema biliar se compe de canalculos biliares, ductos biliares, ducto cstico, vescula biliar e ducto biliar comun. A bile inicialmente secretada pelos hepatcitos indo at os canalculos biliares, seguindo pelos ductos biliares e armazenada na vescula biliar. Composio da bile. composto aquoso de substncias orgnicas e inorgnicas. Compe-se primariamente de pigmentos biliares (principalmente bilirrubina conjugada), cidos e sais biliares, IgA, colesterol, fosfolpides e Fosfatase Alcalina. Funo Alcalinizar o suco intestinal, ajudar na emulsificao e absoro de dietas gordurosas, prevenir putrefao intestinal. Aps as refeies, a presena de pH duodenal cido, ou de protenas, ou gorduras no mesmo, sinaliza a liberao intestinal de colecistoquinina e pancreozimina que induzem a contrao da vescula biliar e a expulso da bile para o interior do canal biliar.

Funes hepticas

Formao e eliminao da bile: sntese de protenas e metabolismo de aminocidos. A unidade estrutural bsica do fgado o lbulo heptico que consiste de cordes de hepatcitos irradiando concentricamente em torno da veia heptica central. Os limites desse lbulo so demarcados por vnulas, arterolas, canalculos biliares e nervos (trade portal). A unidade funcional o cino heptico, que composto de parnquima heptico e est situado em torno do eixo vascular do cino, centrado na trade portal. A perfuso do hepatcito inicia-se na trade portal, percorre sinusides hepticos e termina nas vnulas hepticas terminais, ou veias centrais. Os sinusides hepticos compreendem a rede vascular que converge para a vnula heptica terminal e so compostos de clulas endoteliais, clulas de Kupffer e clulas de ito. Estas clulas revestem o canal vascular do sinuside, separando-o dos hepatcitos adjacentes pelo espao de Disse, ou espao perisinusoidal. A formao da linfa heptica o resultado da ultrafiltrao do sangue pelas fenestraes endoteliais e perfuraes do espao perisinusoidal. Os hepatcitos so distribudos em cordes celulares que so interconectados por um canalculo biliar central. Os canalculos biliares circundam os hepatcitos e so os condutores iniciais atravs dos quais a bile flui em direo a trade portal, no sentido oposto ao fluxo sangneo. Os hepatcitos so ricos em organelas como retculo endoplasmtico liso e rugoso, mitocndrias, aparelho de Golgi, lisossomas, vesculas citoplasmticas, microtbulos e microfilamentos. Metabolismo de carboidratos: a unidade estrutural bsica do fgado o lbulo heptico que consiste de cordes de hepatcitos irradiando concentricamente em torno da veia heptica central. Os limites desse lbulo so demarcados por vnulas, arterolas, canalculos biliares e nervos (trade portal). A unidade funcional o cino heptico, que composto de parnquima heptico e est situado em torno do eixo vascular do cino, centrado na trade portal. A perfuso do hepatcito inicia-se na trade portal, percorre sinusides hepticos e termina nas vnulas hepticas terminais, ou veias centrais. Os sinusides hepticos compreendem a rede vascular que converge para a vnula heptica terminal e so compostos de clulas endoteliais, clulas de Kupffer e clulas de ito. Estas clulas revestem o canal vascular do sinuside, separando-o dos hepatcitos adjacentes pelo espao de Disse, ou espao perisinusoidal. A formao da linfa heptica o resultado da ultrafiltrao do sangue pelas fenestraes endoteliais e perfuraes do espao perisinusoidal. Os hepatcitos so distribudos em cordes celulares que so interconectados por um canalculo biliar central. Os canalculos biliares circundam os hepatcitos e so os condutores iniciais atravs dos quais a bile flui em direo a trade portal, no sentido oposto ao fluxo sangneo. Os hepatcitos so ricos em organelas como retculo endoplasmtico liso e rugoso, mitocndrias, aparelho de Golgi, lisossomas, vesculas citoplasmticas, microtbulos e microfilamentos. Metabolismo de lipdeos Hematolgicas Metabolismo de hormnios Detoxificao e excreo Defesas (SFM)

Causas de doenas hepticas

Infeces Inflamaes Toxinas Endotoxinas Imunolgicas Nutricionais Anormalidades vasculares Neoplasias

Sinais clnicos
Os sinais de afeces hepticas so muito subjetivos, j que o rgo, por sua alta capacidade de reserva e regenerao s apresentar sintomas clnicos com 80% de comprometimento. A capacidade de recuperao do rgo to acentuada que capaz de regenerar de sua massas funcional em poucas semanas. Em geral os sinais clnicos so: ictercia, hemorragias, letargia, inapetncia, anemia, sintomas neurolgicos, mudanas de comportamento, sintomas gastrointestinais, poliria, polidipsia, ictercia e ascite.

Mecanismo da leso
Leso celular direta Por toxinas - originadas no intestino pelo crescimento bacteriano nas enterites e carreadas atravs da veia porta. Drogas - podem ocasionar falncia do sistema imunolgico heptico, perda de funo das clulas de Kupffer, alm de irritao e aumento de permeabilidade dos hepatcitos. Leses vasculares Diminuio do fluxo sangneo

Esteatose Trombose Choque, diminuindo a circulao intersticial

Avaliao

Clnica Radiogrfica Ultra-sonografia Avaliao laboratorial Bipsias

Mecanismo da leso
Pela alta capacidade regenerativa heptica, as leses precisam ser graves, ocorrer em localizaes anatmicas estratgicas como os hepatcitos ou devem estar associadas a colestase antes que os testes laboratoriais revelem a presena de leso hepatobiliar. Deve-se avaliar em conjunto a avaliao clnica e histrico do paciente. Em geral, procura-se desenvolver um diagnstico e prognstico de doena heptica primria e secundria, diferenciar ictercias, diagnosticar anemias de origem desconhecida, avaliar a regenerao, considerar riscos anestsicos, avaliar intoxicaes e migraes parasitrias. A seleo

criteriosa dos testes leva em considerao seu custo, a desejada abrangncia do estudo e sua eficcia diagnstica. Os testes bioqumicos para esta avaliao pode ser dividido em quatro grupos: 1. Testes indicativos de leses hepatocelulares e induo a corticides ou drogas. So avaliaes das seguintes enzimas: o ALT (alaninaminotranferase), AST (aspartatoaminotransferase), SDH (desidrogenase do sorbitol), GLDH (glutamato desidrogenase), Arginase, OCT (ornitina carbamil transferase) o FA (fosfatase alcalina) GGT (gama glutamil transpeptidase) Testes relacionados com captao, conjugao, e secreo: o Bilirrubinas e cidos biliares o Bromosulfalena (BSP) Testes relacionados com clareamento portal: o cidos biliares e amnia Testes relacionados com a sntese heptica: o Albumina o Glicose o Uria o Colesterol o Fatores de coagulao

2.

3. 4.

Testes indicativos de leses hepatocelulares

Enzimologia So substncias intracitoplasmticas que neste local no podem ser medidas ou avaliadas, mas o so quando liberadas para o meio exterior. Podem aumentar sua concentrao plasmtica devido ao aumento da permeabilidade, por destruio e necrose celular. O grau de elevao dos valores de uma enzima depende do grau da leso, da concentrao enzimtica no tecido, da localizao intracelular e da meia vida enzimtica. A grande maioria das enzimas no so hepatoespecficas, sendo encontradas em outros tecidos, precisando por isso diferenciao. As enzimas de localizao heptica podem ser centro lobulares, periferiolobulares e distribudas uniformemente pela membrana celular. A localizao celular citoplasmtica, em organelas, ncleo e membrana celular. Enzimas hepatocelulares ALT (alaninaminotransferase) exclusivamente heptica nos pequenos animais, apresentando alta concentrao citoplasmtica, aumentando rapidamente em qualquer leso que destrua ou apenas aumente a permeabilidade celular. A intensidade desse aumento relaciona-se com o nmero de clulas envolvidas. Em casos de necrose hepatocelular aguda, acentuada, a sua elevao imediata (24 - 48 horas), e nas leses obstrutivas seu aumento menor e gradual. Esta leso, que acontece nos processos colestaticos, deve-se a ao irritativa da bilirrubina e sais biliares sobre os hepatcitos e rede biliar. A induo a medicamentos como anticonvulsivantes, elevam-nas em menor grau em doses teraputicas e em grau acentuado em doses elevadas. Possui meia vida de 2,5 dias nos ces e em torno de 5 dias nos gatos. Nos ruminantes e eqinos, apesar da localizao ser a mesma, apresenta-se em pequenas quantidades. A presena de hemlise ou leses musculares podem provocar elevaes discretas.

AST (aspartatoaminotransferase) Est presente em grandes quantidades nos msculos esquelticos, rins, crebro, eritrcitos e corao. Nos caninos e felinos tem baixa concentrao citoplasmtica (cerca de 20%), mas est presente dentro de organelas (mitocondrias) aumentando em leses mais acentuadas, com necrose celular. Sua meia vida em torno de 5 a 12 horas no co e cerca de 2 horas no gato, sendo bom ndice para se avaliar processos em resoluo nas leses hepatocelulares, pois retornam ao normal mais rapidamente. Nos bovinos e eqinos, existe grande quantidade de AST citoplasmtica, alm da localizao mitocondrial, sendo uma das enzimas de escolha para a avaliao heptica nessas espcies, mostrando-se bem sensvel, mas pouco especfica, pois qualquer leso em hepatcitos ou fibras musculares suficiente para permitir a sada de enzimas celulares. Uma boa conduta quando se tem dvida da origem enzimtica, processar no mesmo material a enzima CPK (creatina fosfoquinase), que especfica para leses musculares, usando-se os resultados para diferenciao. Em caso de aumento de ambas, avaliar nesse caso alguma leso de msculo esqueltico. A elevao por drogas discreta ou ausente. SDH (sorbitol desidrogenase) especfico para leses hepticas de todas as espcies, apresentando atividade mnima em outros tecidos. Apresenta aumento imediato menor nas leses txicas devido a sua localizao centro lobular, e aumento acentuado nas leses hepatocelulares agudas. Seu uso reduzido devido a sua instabilidade em vitro. utilizada mais freqentemente em bovinos e eqinos por apresentar maior estabilidade nesses animais. Nos eqinos bastante estvel at 48 horas na temperatura ambiente. Arginase Considerada como hepatoespecfica por estar presente em concentraes mais elevadas nos hepatcitos mas ainda no includa normalmente nos testes rotineiros de anlise. Mensuraes simultneas com as aminotransferases podem oferecer informaes prognostica importante em relao a leso hepatocelular. Nas leses hepticas agudas, imediatamente liberada pelos hepatcitos, persistindo por cerca de dois a trs dias, mas em casos de regenerao, seus valores retornam ao normal rapidamente, indicando recuperao mesmo com valores elevados de ALT e AST. Estas so as enzimas mais comuns que so avaliadas pelos laboratrios, havendo outras como a GLDH (glutamato desidrogenase), que est presente no tecido heptico de todos os animais, mas tem localizao centrolobular e mitocondrial, aumentando em leses extensas e agudas. mais utilizada para avaliar grau de necrose hepatocelular em cabras, ovelhas e bovinos. Por possuir eliminao plasmtica rpida pouco utilizada. A OCT (ornitina carbamil transferase) tambm enzima hepatoespecfica, tem localizao uniforme, tanto citoplasmtica, como mitocondrial. No utilizada rotineiramente pelo alto custo de exame e por haver enzimas mais fceis de dosar. O aumento dos valores das enzimas em geral est relacionado com a gravidade da leso, isto , com o nmero de hepatcitos envolvidos; leses difusas tem a tendncia de apresentar valores elevados. Na doenas terminais, quando se diminui a massa total de hepatcitos, os valores enzimticos podem se apresentar menos elevados. Enzimas indicadoras de colestase So enzimas que apresentam alterao quando ocorre colestase, isto , pela estagnao da bile intra ou extra celular. FA (fosfatase alcalina)

A FA possui vrias isoenzimas que esto presentes fgado, ossos, intestinos, rins, placenta e leuccitos. A diferenciao no pode ser feita por mtodos convencionais. Em ces e gatos a elevao detectvel tem sempre origem heptica, ssea ou induzida por corticosterides e anticonvulsivantes, apresentando meia vida de cerca de 3 dias. As outras izoenzimas tem meia vida curta, cerca de seis minutos. Est presente na membrana epitelial hepatocelular ou membrana epitelial dos canalculos biliares, apresentando elevao rpida em caso de colestase. bastante sensvel no co, porm pouco especfica, principalmente em ces jovens, pois apresentam alta atividade osteoblstica, possuindo meia vida curta em torno de 6 horas. Nos gatos pouco sensvel, mas bastante especfica, tendo meia vida de cerca de trs dias e apresentando pouca atividade osteoblstica, possuem menor quantidade de FA na membrana do hepatcito, alm de ser rapidamente excretada pelos rins. Geralmente est elevadas na lipidose heptica, colangiohepatite, hipertiroidismo e Diabetes. Nestes animais no apresenta alterao por induo por corticosterides como nos ces. A FA nos grandes animais no tem significado clnico pois est presente em quantidades diminutas. GGT (gama glutamil transpeptidase) Est presente na membrana dos hepatcitos e canalculos biliares, apresentando elevaes tambm em situaes de colestase. Esta presente tambm nos rins e pncreas, mas sua alterao esta sempre relacionada com leses hepatobiliares ou induo por corticosterides e anticonvulsivantes. importante nos pequenos animais, sendo mais sensvel nos gatos. A grande vantagem sobre a FA no sofrer elevao com o aumento da atividade osteoblstica. Tem alta especificidade mas baixa sensibilidade. Nos grandes animais bem sensvel e aumenta rapidamente nas afeces hepatobiliares com colestase, sendo encontrada ainda nestes animais no epitlio mamario, renal, ductos biliares e intestinos. Nos equdeos melhor indicador de colestase que a FA.

Testes relacionados com captao, conjugao, e secreo

Bilirrubinas Formao A bilirrubina produzida pelo sistema fagocitrio mononuclear (SFM) localizado no bao, medula ssea, fgado, nos rins (co) e tecido linfide. A bilirrubina deriva-se da hemoglobina resultante da destruio de hemcias velhas (60 - 70%) e da destruio do resultante de eritropoiese ineficaz (cerca de 30%). Sob condies normais, a bilirrubina no tem funo fisiolgica, sendo apenas um produto de excreo do metabolismo do heme. uma substncia txica para o organismo, prejudica aes enzimticas, membranas celulares, mitocondrias, fosforilao oxidativa, clulas do SNC, hepatcitos e clulas renais. Circulao A bilirrubina formada, tambm chamada de bilirrubina livre, lipossolvel, ligando-se a albumina para ser hidrossolvel, j que o plasma aquoso. A capacidade de ligao albumina alta, evitando leses por excesso de bilirrubina. Neste estado no filtrada pelos glomrulos. Metabolismo O fgado promove captao, conjugao e excreo da bilirrubina. A dissociao da bilirrubina no conjugada e da albumina ocorre na superfcie do hepatcito, no qual um

mecanismo mediado por transportadores carreia a bilirrubina para o interior da clula. Com o ingresso da bilirrubina no conjugada para o interior do hepatcito, ela absorvida e transportada por protena ligante aninica, a ligandina ou protena Y, que est associada a enzima glutation S transferase. A transformao da bilirrubina no conjugada em sua forma conjugada ocorre atravs da ligao da bilirrubina em glucorondeo, formando conjugados mono e diglucorondeos, processo este catalisado pela enzima glicoroniltransferase no retculo endoplasmtico do hepatcito associado as membranas canaliculares. Estes processos so necessrios porque s assim ela poder ser excretada. Eliminao Aps seu ingresso na bile, a bilirrubina excretada para os intestinos. A bilirrubina conjugada no absorvida pela mucosa intestinal devido a sua baixa liposolubidade. Nos intestinos formado o urobilinognio atravs da reduo pelas bactrias intestinais, que reabsorvido, recirculado e o excesso eliminado na urina e fezes. A bilirrubina conjugada, filtrada no glomrulo, o que no acontece com a bilirrubina no conjugada que est ligada a albumina. Os ces em especial so a nica espcie onde as clulas do epitlio tubular renal so capazes de sintetizar bilirrubina atravs da hemoglobina no sentido de captar ferro e/ou tambm conjugar a bilirrubina livre. Esses animais tem baixo limiar renal para a bilirrubina por isso comum encontrar bilirrubinria em urina com densidade alta; os outros animais possuem limiar renal alto, sendo qualquer quantidade de bilirrubina urinria considerada significativa. Ictercia Caracteriza-se pela presena de colorao amarelada da pele, esclera e mucosas causada pela presena de hiperbilirrubinemia, quando a velocidade de produo excede a eliminao. Os termos ictercia e colestase no podem ser empregados indistintamente, visto que nem todas as causas de ictercia esto associadas a uma insuficincia secretria de bile. A deposio de pigmentos biliares deve ser diferenciada da colorao amarelada da pele e urina por certos agentes teraputicos, como o cloridrato de quinacrina ou o consumo de quantidade exagerada de substncias contendo caroteno, principalmente cenouras. Em tais circunstncia a pele e a urina esto coradas, mas a esclertica geralmente permanece sem esta colorao. A observao da ictercia de pele e mucosas torna-se aparente quando as concentraes de bilirrubina plasmtica est acima de 3 a 4 mg/dl. A colorao plasmtica observa-se com valores em torno de 2 mg/dl. Verifica-se bilirrubinria quando a concentrao plasmtica de bilirrubina est acima de 0,5 mg/dl. Tipos de ictercia Pr heptica ou hemoltica Com a destruio acentuada de clulas sangneas, ocorre elevao acentuada da bilirrubina livre no soro, aumentando o aporte heptico, aumentando as bilirrubinas total e conjugada, o urobilinognio e o estercobilinognio. Nesses casos geralmente ocorre maior elevao da bilirrubina livre ou no conjugada. Heptica Ocorre aumento da bilirrubina conjugada no soro ou plasma, assim como do urobilinognio e estercobilinognio devido a leses hepatobiliares. A elevao da bilirrubina conjugada explica-se, j que 90% das leses hepticas diminuem a eliminao, no afetando nem a captao e nem a conjugao. Em caso de ocorrer deficincia de captao e conjugao, poder ocorrer elevao da bilirrubina livre. Obstrutiva

Tambm denominada ps heptica, ou colesttica extra heptica. A bilirrubina conjugada reflui para o plasma, sofrendo nesses casos filtrao glomerular. No ocorrer produo de urobilinognio e estercobilinognio. Caracteristicamente os eqinos oferecem resultados diferentes dos outros animais; mesmo nas leses hepatobiliares o aumento da bilirrubina livre acentuadamente maior que a conjugada. Anorexia por 24 horas causa hiperbilirrubinemia devido a produo de cidos graxos que competem com a bilirrubina na captao pelo hepatcito, aumentando a bilirrubina indireta ou no conjugada no plasma. cidos biliares So indicadores especficos de leses hepatobiliares. So produzidos e conjugados no fgado a partir do colesterol, secretados nos ductos biliares e armazenados na vescula biliar. Os cidos biliares primrios so o cido clico e quenadeoxiclico. Estes cidos podem ser modificados pela flora intestinal at cidos biliares secundrios (colato at desoxilato e quenodeoxilato at litocolato). Por ocasio das refeies, numerosos fatores hormonais e neuro hormonais induzem a secreo e contrao da vescula biliar, resultando no trnsito dos cidos biliares para os intestinos. Nos intestinos, a ao detergente dos cidos biliares facilita a digesto e absoro de lipdeos. Os cidos biliares combinados com lecitina estimulam a funo das lipases digestivas e a formao de miscelas que melhoram a miscibilidade dos lipdeos, aumentando a rea da superfcie dos constituintes lipdicos para a digesto e absoro. A maior parte dos cidos biliares primrios conjugados so eficientemente reabsorvidos por processo de transporte ativo no leo, ligando-se a albumina e s lipoprotenas, recirculando para o fgado para captao. Pode haver recirculao entre duas a cinco vezes durante cada refeio. Verifica-se que aps jejum de doze horas, apenas pequenas quantidades de cidos biliares esto presentes na circulao sistmica. Duas a trs horas aps as refeies, ocorre aumento dos nveis plasmticos. Os testes em jejum e ps prandial aps duas horas parecem ser teis e confiveis na determinao de anormalidades hepatobiliares funcionais ou circulatrias. Em ces e gatos os cidos biliares aumentados no soro so indicadores de doenas hepatobiliares, normalmente as concentraes sricas so pequenas nos animais em jejum (5mmol/L) e aps duas horas no perodo ps prandial a concentrao pode chegar at 20 mmol/L . Caso no houver aumento ps prandial, deve-se eliminar antes outras causas como diarrias extensas, alimentao antes da alimentao efetuada durante o teste, pouca quantidade de alimentao oferecida e regurgitao ou vmito do alimento. A hipomotilidade intestinal, resseco ou doenas do leo podem mascarar os resultados. Em bovinos os cidos biliares podem ser potenciais indicadores de problemas hepticos, entretanto, no foram verificadas variaes nos nveis sricos aps alimentao, como acorre nos monogstricos. Os valores podem variar muito entre os bovinos e tambm num mesmo animal, mas novilhas sempre apresentam menores nveis que vacas lactantes. Nessas ocorre uma elevao dos cidos biliares no ps parto e uma reduo gradual a medida que a lactao progride, at nveis mnimos no perodo seco. Esta variabilidade na concentrao srica de cidos biliares reduz o seu uso diagnstico para doena heptica em ruminantes. Patologia A reteno de cido hidrofbico e membranoacetoactico, que so hepatotxicos, no soro, bile e fgado em pacientes com doena hepatobiliar pode perpetuar o processo. Por outro lado, altas concentraes de cidos biliares circulantes podem aumentar a permeabilidade da barreira hematoceflica promovendo encefalopatia heptica; o refluxo biliar no duodeno, estmago e esfago pode contribuir para formao e perpetuao de ulceras. A passagem de cidos biliares no conjugados na parte distal do intestino pode resultar em leso nos entercitos e vilosidades, causando diarria. Na presena de colestase, estes cidos biliares inibem a resposta linfocitria (imunossupresso), podendo reduzir agregao plaquetria pela exposio de ADP.

Teste de Bromosulfalena (BSP) A bromosulfalena uma substncia que se liga as protenas da circulao e excretada pelo fgado atravs da bile e utilizada na avaliao da funo heptica. Uma disfuno de 60 a 70 % da massa heptica ou uma colestase resulta em retardo na eliminao do corante. A excreo da BSP pode ser influenciada por outras variveis como hipoalbuminemia, decrscimo de fluxo sangneo heptico, insuficincia cardaca congestiva, anastomose venosa portosistmica. Ictercia, etc. Geralmente uma prova mais utilizada em ruminantes. So injetados de 2 a 5 mg/kg de peso vivo de BSP e aps quatro horas medido em plasma heparinizado. O resultado esperado menos de 5% de reteno.

Testes relacionados com clareamento portal

cidos biliares Amnia A amnia, resultante da quebra de aminocidos nas dietas proticas, absorvida no intestino, levada ao fgado pela circulao portal, captada pelos hepatcitos e transformada em uria, que eliminada primariamente atravs dos rins. Alteraes na circulao portal com shunt portosistmico intra e extra heptico ou diminuio da massa heptica pode resultar na reduo do clareamento da amnia e aumento conseqente de sua concentrao. O exame pouco prtico porque o plasma colhido em heparina deve ser separado rapidamente das clulas sangneas, resfriado e medido em 15 - 30 minutos.

Testes relacionados com a sntese heptica

O fgado fonte primria de vrios componentes sorolgicos incluindo uria, albumina, glicose e a maioria dos fatores de coagulao. Com a diminuio da massa heptica funcional, a produo desses elementos so diminudos, refletindo no perfil bioqumico. Protenas A albumina somente sintetizada no fgado, dependendo de aporte nutricional de aminocidos e da presso onctica perisinusoidal. Hipoproteinemia associada a doenas hepticas est associada com a diminuio da produo de albumina, podendo ser mecanismo primrio de muitas doenas hepticas crnicas. Na avaliao das protenas plasmticas totais, sempre muito importante avaliar a concentrao de albumina e globulinas pois, em doenas inflamatrias crnicas, o valor das protenas podem permanecer inalterados, mesmo com baixa produo albumina; este valor compensado pela produo de globulinas. As globulinas geralmente aumentam nas neoplasias hepticas (b1 ), ictercia (b2), insuficincia heptica crnica (g policlonal), cirrose heptica (ponte b - g ), sendo esta classificao obtida pela eletroforese. Glicose Nos mamferos, a concentrao estvel de glicose no sangue, representa um equilbrio entre os passos bioqumicos envolvendo gliconeognese, glicogenlise, glicolise, interaes hormonais e ingesto de carboidratos. O fgado est envolvido na glicogenlise, gliconeognese e o metabolismo de retirada da insulina. preciso perda de 75% da massa heptica funcional para que ocorra hipoglicemia. Est relacionada com diminuio da massa heptica funcional, diminuio da gliconeognese e da glicognese.

Colesterol O colesterol produzido no fgado, ocorrendo elevao de seus valores nas doenas hepatobiliares como hepatites agudas e crnicas, obstrues biliares. A concentrao srica de colesterol muito varivel nas hepatopatias e a excreo biliar a primeira rota do metabolismo de retirada do colesterol corpreo. A hipocolesterolemia acontece somente nas doenas heptica crnica e severa, devido produo reduzida ou absoro no intestino e aumento na converso para cidos biliares. Ocorre diminuio tambm nos casos de shunt portosistmico e nas insuficincias hepticas. Uria A concentrao de uria resultante do metabolismo heptico e pode ser afetada significativamente por alteraes na funo heptica e ingesto de protena. A uria sintetizada no fgado a partir de precursores, amonaco e aminocidos, vindos da circulao portal e resultantes da protena ingerida pelo animal. Valores reduzidos de uria so conseqentes de menor produo heptica (insuficincia heptica crnica, e dietas muita baixas em protena) ou de maior excreo em caos de poliria e polidipsia. Fatores de coagulao O fgado sintetiza todos os fatores de coagulao com exceo do fator VIII e o clcio, sintetiza ainda protenas inibitrias da coagulao como plasminognio, o fibrinognio, a antitrombina III, antiplasminas. Remove fatores de coagulao ativados, enzimas fibrinolticas e fatores de degradao da fibrina. As provas de coagulao no so testes diagnsticos para a doena heptica, mas os testes de tempo de tromboplastina parcial ativada , de protrombina, e de fibrina so muitas vezes usados para prognstico ou avaliao da progresso da doena heptica, devido a sntese rpida destes componentes (48 horas) evidenciar regenerao heptica. Assim, o fgado representa um papel central na hemostasia e a doena heptica associada com aumento nas tendncias hemorrgicas. Em hepatopatias graves e crnicas a massa de hepatcitos pode estar reduzida o suficiente para resultar em aumento do tempo de coagulao, devido a menor sntese dos fatores de coagulao e, pacientes com estas enfermidades podem apresentar hemorragias.

Exame de fezes
ndice
Introduo Colheita Conservao Exame fsico Elementos anormais Exame qumico Exame microscpico Mtodos de pesquisa de parasitas Tabelas

Introduo
O exame de fezes nos fornece dados importantes, tanto pela observao macroscpica como microscpica. As informaes sobre trato gastrointestinal em relao a parasitas, corpos estranhos, dieta, hemorragias ocultas ou no e bacteriologia so importantes na obteno do diagnstico. Na observao das fezes deve-se ter em mente todo o processo de formao, o percurso do bolo fecal, avaliar os resduos alimentares adicionados a material glandular, descamao e ainda presena de bactrias. Devemos lembrar tambm que todo animal, mesmo em inanio forma fezes, pois alm de resduos alimentares, elas possuem outros constituintes como material glandular, material secretado pelas paredes intestinais e descamao.

Colheita
A forma de colheita do material depender do exame laboratorial a ser executado. essencial que a amostra seja recente, colhida preferencialmente pela manh e no esteja contaminada por substratos ou fezes de outro animal; as fezes no ambiente ficam ressecadas rapidamente e particularmente no caso de fezes de caninos, os proglotes de Dipylidium caninum ressecam-se rapidamente, dificultando o seu reconhecimento, sendo tambm atrativos para insetos e pssaros pela sua motilidade. O melhor meio para se colher fezes a colheita direta na fonte, isto , direto no reto do animal, seja atravs de sonda plstica flexvel nos pequenos animais como por massagem direta no nus, com ajuda de uma luva, nos grandes animais. claro que alguns animais no so cooperativos, podendo, nestes casos serem colhidas fezes recm emitidas, desde que se use como amostra a parte que no est em contato com o solo, pois os nematdeos de vida livres tm grande poder de invaso, penetrando facilmente na camada fecal em contato com o solo. As fezes para a contagem de fezes (OPG) devem ser colhidas no mximo 2-4 horas antes da realizao do exame, pois os ovos embrionados, principalmente os Strongyloides liberam rapidamente suas larvas em condies favorveis de temperatura e umidade. A quantidade a ser colhida est relacionada com os mtodos a serem desenvolvidos. O mtodo de Barman e similares,

para pesquisa de Dictyocaulus, necessitam fezes frescas no sentido de se obter larvas de 1 estgio de vermes pulmonares. A quantidade a ser colhida depender do mtodo em questo e da finalidade; por exemplo, em uma propriedade de 15 animais colhe-se amostras de 10 animais. Se a suspeita a presena de oxiros, usa-se fita adesiva presa em lmina de vidro; a fita colada em volta do nus do animal, retirada logo a seguir e colada sobre a lmina de vidro que servir de lamnula. A identificao da amostra muito importante e nos casos de identificao por rebanho pode-se lanar mo do "pool" de fezes.

Conservao
O ideal que todos os exames fossem feitos logo aps a colheita, mas como nem sempre isso ser possvel, so utilizados conservadores e preservativos. Estes mtodos visam prevenir alteraes morfolgicas, destruio e ecloso dos ovos do parasita em incubao, dificultando a identificao pelo tcnico menos experiente. Frio o melhor conservante, permitindo um perodo de 24-48 horas entre a colheita e o exame. Por no alterar a capacidade evolutiva dos ovos, permite a realizao de culturas. As fezes devem ser conservadas em refrigerador ou em caixas de isopor com gelo. Formol 10% Pode ocasionar distoro de alguns trofozotos e cistos de protozorios e ainda matar larvas mveis de parasitas. M.I.F. (Mertiolate-iodo-formol) Tem a caracterstica de preservar ovos de helmintos e cistos de protozorios por muito tempo; em casos de pesquisa e procura sistemtica por parasitas, o procedimento adequado colher fezes por trs a cinco dias seguidos, colocando-as na soluo, formando um "pool".

Exame fsico
A visualizao das fezes muito importante para o clnico, devendo tambm ser conferido pelo tcnico antes da realizao do exame. Em casos dos ces, no comum a visualizao dos ovos de D. caninum no exame microscpico das fezes, mas os proglotes podem ser visualizados na amostra enviada. Consistncia e forma importante conhecer a forma e consistncia das fezes de todos os animais. Nos equdeos, as fezes apresentam forma arredondada e consistncia firme; nos bovinos, tem forma cilndrica ao sair do reto, mas formam massa pastosa amorfa ao cair; nos ovinos e caprinos, tem a forma ovide semelhante ao caroo de azeitona, com consistncia endurecida. Nos carnvoros e onvoros, a forma cilndrica e de consistncia firme e/ou semipastosa. A mudana nessa consistncia estar relacionada com maior ou menor presena de gua e/ou tempo de permanncia no intestino. Volume

Est relacionado com a quantidade de alimento ingerido. Fezes em menor quantidade pode sugerir inanio, sendo que em bovinos, a ausncia de fezes durante a explorao retal sugestiva de obstruo intestinal. Defecao muito constante sugere patologia de intestino grosso ou reto. Cor Relaciona-se com o alimento ingerido; em geral as fezes dos herbvoros tem colorao esverdeada devido presena de clorofila e nos carnvoros e onvoros a colorao amarronzada devido presena de estercobilina. Em bezerros lactentes as fezes normalmente variam de castanho-amareladas a acinzentadas. Fezes de colorao avermelhada sugerem a presena de sangue (hematoquezia) originado de camadas mais caudais do sistema digestivo como o reto e intestino grosso; fezes negras, escuras (melena), sugerem sangramento mais cranial, em bovinos muitas vezes originados no abomaso; em ces pode indicar ancilostomase. Fezes claras, aclicas, sugerem obstruo do ducto biliar ou insuficincia pancretica. Odor Nos herbvoros o cheiro fecal no repugnante, sendo que a presena de odores ftidos pode significar putrefao ou fermentao anormal. Diarrias de bezerros com colibacilose geralmente tem cheiro ptrido. Em carnvoros e onvoros depender muito da dieta; aqueles animais que ingerem rao comercial no apresentam odor ruim, mas os animais que ingerem protena crua e restos de comida caseira, a putrefao gerada causa odor ruim.Odor ptrido e repugnante tambm observado em ces com gastro-enterite-hemorrgica.

Elementos anormais
Muco Muco nunca normal, significa sempre algum processo mrbido, seja inflamatrio ou irritativo. Em geral representa patologias do intestino grosso, aparecendo como substncia clara, pegajosa cobrindo as fezes. Nas patologias do intestino delgado aparece intimamente ligado s fezes, formando pequenos filamentos. Sangue A presena de sangramento no trato intestinal pode indicar processos infecciosos, irritativos ou traumticos. A presena de sangue vivo indica afeces do intestino grosso e reto; as fezes negras podem indicar sangramento em pores mais craniais ou sugerir apenas a ingesto de sangue, seja por lambedura ou por pequenos traumatismos na cavidade oral. Quando houver dvidas ou a cor sugerir, existem testes que indicam a presena de sangue oculto. Corpos estranhos So materiais no fecais encontrados nas fezes, podendo indicar perverses alimentares, que por sua vez, sugerem verminoses e ou distrbios nutricionais. Presena de bolhas de gs, principalmente em bezerros, podem indicar doenas especficas como acidose lctica e paratuberculose. Alimentos no digeridos

Indicam m digesto ou absoro deficiente, assim como aumento do peristaltismo. A presena de fibras vegetais mal digeridas nas fezes de bovinos relaciona-se freqentemente com a durao da ruminao, com a presena de microorganismos proventriculares e com a digesto intestinal. A passagem rpida do alimento pelo trato gastrointestinal pode sugerir algum processo irritativo como a retculo peritonite traumtica. A presena de gorduras est relacionada com a insuficincia pancretica (deficincia de lipase) ou obstrues do ducto biliar. A quantificao da gordura fecal fornece subsdios para definio digesto deficiente ou dificuldade de absoro. A presena de fibras musculares sugere insuficincia pancretica excrina (deficincia de tripsina) ou aumento do peristaltismo intestinal.

Exame qumico
pH O pH das fezes bastante influenciado pela alimentao e, principalmente, pelo tempo de colheita das fezes, sendo modificado rapidamente pela ao bacteriana. Na avaliao usa-se papel reagente. Sangue oculto O teste de sangue oculto sujeito a erros, sua praticidade em carnvoros discutida pela ingesto de elementos das raes comerciais que contm sangue na alimentao. Para o exame nesses animais recomenda-se trs dias de dieta livre de carne. A ingesto de beterraba e tomates pode ocasionar reaes falso positivo. Nos grandes animais so necessrios um a dois litros de perda de sangue no trato gastro-intestinal para se encontrar sangue oculto positivo. Os laboratrios contam com Kits prprios para os exames, como o Hematest e Hematix. Pigmentos biliares No muito usado na rotina, pois existem exames sangneos que oferecem resultados mais precisos. Pesquisa de gorduras O corante de SUDAM III o indicado, os glbulos de gordura apresentam colorao arroxeada.

Exame microscpico
Elementos anormais (no parasitas) Alm do exame parasitolgico, observa-se durante o exame microscpico a presena de hemcias, leuccitos, fibras musculares, fibras vegetais. A presena desses elementos sugere processos ulcerativos, inflamatrios, neoplsicos, traumticos e infecciosos. O exame microscpico requer experincia; realizado inicialmente com o menor aumento (10X) no sentido de percorrer toda a lmina e certificar a presena dos ovos e parasitas. Com maior aumento (40X) procedemos identificao dos mesmos. A adio de lugol permite colorao do parasita facilitando sua identificao. Deve-se ficar atento para a presena de artefatos, pseudoparasitas, restos de plantas, ovos de caros de rao ou da

pele. Como s vezes as fezes sero colhidas do solo deve-se tomar cuidado com parasitas de vida livre que podem penetra-las. Geralmente esses parasitas so maiores, mas importante a experincia em microscopia para identificao.

Mtodos de pesquisa de parasitas

Mtodo direto um mtodo simples e rpido para visualizao direta do material sem concentrao. Apesar do mtodo no ser muito preciso, todo processamento de material dever comear por ele, pois possibilita a visualizao de outros resduos no parasitas alm de verificar a motilidade de protozorios. realizado com fezes, gua e lugol. O uso do soro fisiolgico pode prevenir algumas distores de ovos por hipotonicidade. Nos herbvoros, pela quantidade acentuada de fibras nas fezes no um bom mtodo. Concentrao So mtodos de enriquecimento, nos quais se concentra grande quantidade de material a ser examinado. Mtodo de Willis (flutuao) O fundamento do teste baseia-se no fato de que larvas, ovos, oocistos geralmente so menos densos que as solues supersaturadas usadas no mtodo (cloreto de sdio, acar, sulfato de magnsio e sulfato de zinco), por isso flutuam e so recolhidos pela lmina ou lamnula. Os detritos por serem mais densos e mais pesados se sedimentam. um bom mtodo para protozorios e ovos de helmintos, mas deve-se lembrar que grande nmero de parasitas destrudo ou lesado pela hipertonicidade das solues. um bom mtodo para carnvoros e herbvoros. Mtodo da sedimentao usado em menor escala por ser menos eficiente e mais demorado que o anterior. O resultado ser mais confivel quanto mais demorar a sedimentao. melhor mtodo para pesquisa de ovos de helmintos. Tem a vantagem de exigir o mnimo de equipamento e recuperar ovos e larvas das fezes, sobretudo ovos de trematdeos que tem oprculo, e de alguns citdios que se sedimentam mesmo quando utilizada a tcnica de flutuao. Mtodo de Faust de certa forma uma associao do mtodo de sedimentao e flutuao. um bom mtodo para ovos, larvas e cistos de protozorios. Usa-se o sulfato de zinco a 33% que diminui os efeitos da hipertonicidade. Mtodo de Baermann baseado na motilidade e no termotropismo das larvas. especfico para a verificao da presena de larvas de Dictyocaulus viviparus, que so vermes pulmonares dos ruminantes. As larvas tm a tendncia de se dirigir para uma temperatura maior que o seu ambiente e por seu movimento elas deixam as fezes e so recolhidas em um tubo por efeito da gravidade. Nesse mtodo importante a utilizao de fezes recentes e recolhidas diretamente no reto do animal para evitar tropismo das larvas de vida livre em direo as fezes e das larvas fecais em direo a terra.

Contagem de ovos (OPG) So exames quantitativos para se verificar a infestao dos rebanhos. Usa-se o mtodo da cmara de Macmaster na qual so contados os ovos de uma amostra de fezes de um certo rebanho. Relacionar o significado do OPG e a contagem de nematdeos tarefa que deve ser feita com cuidado. A correlao entre patogenicidade e OPG ou o nmero de helmintos nas tabelas apresentadas servem apenas para orientao, pois:

A contagem de ovos no reflete o nmero de helmintos adultos existentes nos animais, em virtude da relao do hospedeiro e as caractersticas prprias de cada espcie. O significado da contagem de ovos ou o nmero de helmintos existentes depende, principalmente, da patogenicidade das espcies existentes. As espcies de Haemonchus, Bunostomun, e Gaigeria sugam vigorosamente o sangue do hospedeiro, portanto a patogenicidade desses vermes muito alta. Por exemplo, se um animal parasitado por 5.000 Haemonchus, neste animal haver uma perda diria de 250 ml de sangue, o que provocaria uma forte anemia em um curto perodo. Em compensao, o mesmo nmero de espcimen de Trichostrongylus causa muito pouca patogenicidade em comparao com os de Haemonchus; nas mesmas circunstancias, os espcimen de Strongyloides no produzem quase nenhuma patogenicidade. Os nematdeos que parasitam animais adultos, portadores de certo grau de resistncia, pem relativamente poucos ovos em comparao com os que parasitam animais jovens, j que esses ltimos so mais sensveis ao parasitismo. As formas imaturas dos helmintos no produzem ovos, por isso no se pode evidenciar os mesmos atravs dos mtodos coprolgicos. Para interpretar a relao que existe entre a contagem de ovos e os helmintos adultos deve-se levar em conta as experincias locais; alm disso, h de considerarse a nutrio, o manejo e as condies clnicas dos animais. Os animais bem nutridos, ainda que sendo portadores de helmintos em nmero relativamente grande, geralmente no apresentam sintomas clnicos. Entretanto, em animais mal nutridos e com o mesmo grau de infeco, constata-se a exaltao de sintomas clnicos. Um nmero reduzido de helmintos nem sempre indicativo de efeitos deletrios discretos no animal. Por exemplo, em ostertagiose, o grau de patogenicidade supera o nmero de seus agentes causais. Em oesofagostomose, a patogenicidade to grave que chega a ponto de conduzir o animal morte antes mesmo que os helmintos possam alcanar sua completa maturao.

Coprocultura para obteno de larvas de nematdeos gastrointestinais Alguns parasitas possuem ovos que so de difcil identificao, por isso lana-se mo do cultivo de larvas, baseando a identificao nas caractersticas das larvas infectantes, que so tpicas para cada um dos gneros componentes do grupo.

Tabelas
Nas tabelas seguintes esto dados para interpretao do grau de infeco, levando em considerao o numero de ovos encontrados na contagem de OPG.

Avaliao laboratorial das efuses corporais

ndice
Introduo Diagnstico das efuses Exame laboratorial dos fludos corporais

Introduo
As cavidades corporais so normalmente banhadas por ultrafiltrado do plasma, que responsvel pela lubrificao entre as paredes e os rgos contidos nestas cavidades. A manuteno da quantidade deste filtrado depende de um perfeito equilbrio entre os fatores que governam sua produo e absoro, sejam eles as presses onctica e hidrosttica e a permeabilidade dos vasos sangneos. Quando h descontrole de um destes fatores ocorre o acmulo de lquido e as manifestaes clnicas que advm deste fato. As causas so as mais variadas e vo desde trauma at hipoproteinemia, alteraes mrbidas em algum rgo vital, tais como corao ou fgado, por ruptura de vsceras (bexiga), infeco ou at mesmo alteraes neoplsicas. O conhecimento do tipo de fluido acumulado, juntamente com uma anamnese e exame clnico bem feitos levaro na maioria das vezes ao diagnstico definitivo. A anlise laboratorial completa da efuso de grande valia na identificao geral ou especfica do processo que causou seu acmulo.

Diagnstico das efuses

A presena de efuso acumulada no abdome de um pequeno animal facilmente diagnosticada, principalmente se h acmulo rpido, pois h notvel abaulamento do abdome e a prova do balotamento positiva. Por outro lado, o acmulo abdominal em grandes animais, de forma insidiosa nos pequenos e em outras cavidades muitas vezes de diagnstico mais difcil. Nestas ocasies suspeita-se da presena do fluido pelos sintomas apresentados pelo animal tais como dispnia, letargia e adnamia, bem como por sinais clnicos, isto , auscultao ruidosa, diminuio dos sons cardacos, alteraes nos diagnsticos por imagem e alterao nos sons de percusso. Colheita de material Em qualquer dos casos a colheita cerca de 10 ml de material por centese indicada para a realizao de exames laboratoriais, que difere muito da indicao teraputica onde grandes quantidades podem ser retiradas visando alvio e conforto para o animal. O equipamento necessrio para este procedimento simples e de fcil obteno, o que facilita sua realizao. Uma quantidade suficiente de fluido para fins diagnsticos pode ser obtida na maioria dos animais com agulhas de 21 ou 22 gauges acoplada a uma seringa de 10 ml. O material obtido deve ser recolhido em dois frascos; um com EDTA para evitar a coagulao se o fluido for um exudato e um outro estril, para que seja possvel a realizao de cultura de microrganismos, por exemplo, Micobacterium tuberculosis. Anestesia local pode ser feita, mas o animal deve estar muito bem contido, pois sua movimentao pode causar lacerao e/ou ruptura de rgos. A preparao do local a ser puncionado deve ser cirrgica. A escolha do local para abdominocentese varia com o tamanho do animal. Aps a conteno por mtodos qumicos ou fsicos, os ces e gatos devem ser colocados em decbito lateral, com o abdome voltado para a pessoa que far a colheita. Depilar uma ampla rea em torno da

cicatriz umbilical, fazer a preparao cirrgica do campo e escolher o local para puno dois cm acima ou abaixo da cicatriz umbilical, evitando assim danos ao fgado ou bao ou a bexiga. Penetrar com trocter ou agulha e recolher o material. Caso no venha qualquer material, ou seja, obtido sangue deve-se repetir o procedimento. Se ainda nada for obtido repetir novamente dois cm acima ou abaixo do local anterior. Se ainda houver presena de sangue bastante provvel que seja esta a efuso. Os eqdeos apresentam uma caracterstica que os diferem das outras espcies domsticas; somente neles pode-se obter fludo abdominal nos animais sadios. O local de escolha sobre a linha alba, no ponto mais baixo do assoalho abdominal. Nestes animais, se for utilizado agulha acoplada a seringa aplicar presso assim que penetrar a pele; este procedimento evita a perfurao dos intestinos. Em bovinos comum o uso de cnula de teta para abdominocentese, aps inciso da pele com uma lmina de bisturi. Localizar o local em que a veia mamria ascende para dentro do abdome; o local de puno fica a quatro cm cranial e 4 cm medialmente. A toracocentese semelhante em todas as espcies; aps a sedao localizar 7 ou 8 espao intercostal do lado direito e fazer a puno sobre a juno costocondral, em frente costela, pois os vasos e nervos se localizam na parte caudal delas. Tracionar a pele que est sobre o local escolhido, penetrar com a agulha j firmemente acoplada a seringa e deixar o lquido fluir para dentro desta. Interromper e repetir o procedimento se vier sangue ou se o animal se debater. Tambm a pericardiocentese feita de forma similar em todas as espcies, ou seja, no 5 ou 6 espao intercostal, do lado esquerdo, no ponto mdio entre a juno costocondral e a costela. Tracionar a pele da mesma maneira, aplicar presso negativa na seringa e fazer a puno, direcionado ao corao. A atividade do msculo cardaco evita que se puncione alguma cmara deste rgo.

Exame laboratorial dos fludos corporais

Macroscopia A avaliao macroscpica, isto , determinao da cor, turbidez e viscosidade do fludo de muita utilidade tanto na classificao dos fludos como na determinao de quais outros exames sero feitos. Concentrao total de protenas (CTP) Algumas doenas podem causar efuses corporais com grandes concentraes de protenas totais, enquanto em outras esta concentrao pode ser pequena. A CTP pode ser estimada atravs do uso do refratmetro ou pelo uso de mtodos bioqumicos. Como rotina, o uso do refratmetro indicado. Deve-se usar um lquido transparente, pois as partculas causam difrao da luz, levando a obteno de uma CTP falsamente aumentada. Fluidos turvos devem ser centrifugados e o sobrenadante transparente ento utilizado. Fluidos que se mostram turvos mesmo aps a centrifugao devem ter sua concentrao de protenas determinada por mtodos bioqumicos. Uso do refratmetro: uma pequena gota colocada na parte anterior do aparelho, que ento observado contra a luz e a leitura feita na escala prpria. Contagem total de clulas nucleadas (CTCN) A CTNC, em associao com a CTP utilizada para classificar as efuses corporais. As clulas nucleadas que a serem observadas so leuccitos, principalmente neutrfilos e linfcitos,

clulas mesoteliais, macrfagos e clulas neoplsicas. O sistema utilizado para a CTNC deve ser o mesmo para a contagem de clulas no sangue. Como rotina, o mtodo do hemocitmetro recomendado. Os fludos devem ser examinados o mais rpido possvel, seno deve ser mantido sob refrigerao at o momento do exame, mas este tempo no deve ser superior a 24-36 horas. Manipular com muito cuidado, pois em algumas ocasies os fluidos podem conter material infeccioso. Como j dito a avaliao laboratorial das efuses corporais compreende o exame fsico, no qual so avaliadas a aparncia e quantidade de protenas e no exame citolgico que por sua vez envolve citometria nucleada e de eritrcitos e exame do esfregao corado. Classificao A partir destas avaliaes as efuses so classificadas em transudatos, transudatos modificados e exudatos. As efuses podem ainda incluir hemorragias, urina, quilotrax e efuses neoplsicas. O transudato normalmente um fluido claro ou discretamente turvo, contendo pequena quantidade de protenas (menor que 2,5 g/dl) e clulas (contagem total de clulas nucleadas menor que 1500/m l). A densidade sempre menor que 1,018. Microscopicamente observase populao celular heterognea, composta de alguns eritrcitos, linfcitos, macrfagos e clulas mesoteliais, que podem se apresentar sozinhas ou em lenis. A causa mais comuns de formao de transudatos a hipoalbuminemia (concentrao plasmtica < 1g/dl), pois h diminuio considervel da presso onctica intravascular. As principais causas de hipoalbuminemia nos animais domsticos so ingesto insuficiente de protenas, proteinria, gastroenteropatias com perda protica, insuficincia heptica e parasitismo intestinal intenso. Os transudatos modificados so de aparncia clara ou discretamente turvos ou sanguinolentos ou ainda podem ter cor mbar e sua densidade est entre 1,018-1,025. A contagem total de clulas nucleadas est entre 1000-7000/ml e a concentrao de protenas entre 2,5 e 7,5 g/dl. No esfregao pode ser encontrada populao mista de clulas com muitos eritrcitos, neutrfilos ntegros, linfcitos, macrfagos e clulas mesoteliais reativas ou no. As clulas mesoteliais reativas so aquelas transformadas como resultado de irritao da camada serosa; sendo ento basoflicas, multinucleadas, com grande variao de tamanho e forma, mas com borda franjada, o que auxilia na sua diferenciao com clulas neoplsicas. A causa mais comum de acmulo de um transudato modificado a obstruo circulatria, isto , insuficincia cardaca congestiva, cirrose heptica, crescimento neoplsico ou hrnia diagragmtica. Estas afeces promovem aumento da permeabilidade vascular e aumento da presso hidrosttica do sangue ou linfa, permitindo assim a sada de protenas intravasculares. O transudato modificado pode ainda ser uma fase intermediria entre o transudato e o exudato. J os exudatos so normalmente turvos e/ou sanguinolentos. O contedo de protenas maior que 3g/dl e a contagem total de clulas nucleadas superior a 7000/ml. Apesar de possurem uma populao mista de clulas, o tipo celular mais freqentemente encontrado so os neutrfilos; mas podem ser encontrados muitos macrfagos, eritrcitos, plasmcitos, clulas mesoteliais, eosinfilos e mastcitos. So causados por inflamao e necrose, portanto ocorrem em uma grande quantidade de condies patolgicas. Os exudatos no spticos so provocados por corpos estranhos estreis, traumas, ruptura de rgos. Ao exame do esfregao observam-se neutrfilos ntegros e clulas nucleadas diferentes daquelas da camada interna das cavidades. Por outro lado, um grande nmero de microrganismos podem levar a formao de exudatos spticos; estes microrganismos advm dos tratos urinrio, respiratrio, de corpos estranhos ou por via hematgena. Podem ser vrus, bactrias aerbias ou anaerbicas, fungos e protozorios, que por vezes podem ser

vistos no esfregao corado. Portanto o exudato sptico pode ter aparncia purulenta e consistir em sua quase totalidade de neutrfilos segmentados. As hemorragias podem ser causadas por trauma ou toro de um rgo ou vscera; por alteraes de coagulao ou eroso de vasos por neoplasias. Dependendo da durao da hemorragia as contagens de clulas nucleadas e dosagem de protenas podem ser as mesmas que do sangue, podendo ser diferenciada deste apenas pela relativa ausncia de plaquetas. Pode-se suspeitar de ruptura de bexiga se o paciente apresenta anria, ascite, apatia ou uremia. Nestes casos o material colhido na abdominocentese pode ter aparncia sanguinolenta e caractersticas de exudato por irritao do peritneo. As concentraes de uria e creatinina so maiores que no sangue. Ocorre o quilotrax quando h ruptura do ducto linftico torcico e entre as espcies domsticas o gato aquela de maior predisposio. Este fluido branco, opaco e apresenta sobrenadante cremoso quando centrifugado ou refrigerado. A clula mais predominantemente encontrada o linfcito. As efuses neoplsicas ocorrem tanto porque os tumores podem esfoliar clulas quanto causar hemorragias podendo, portanto, aparecer como transudatos modificados ou exudatos, com inmeras clulas neoplsicas ao esfregao corado. Existem tumores que alm de esfoliar clulas causam irritao na camada serosa. Assim sendo, muitas efuses neoplsicas contm elevados valores de protenas totais e clulas nucleadas. Deve-se ter o cuidado de no fornecer resultado falso positivo de malignidade por confundir clulas mesoteliais transformadas com clulas neoplsicas.